Diazinon es uno de los pesticidas organofosforados de mayor uso alrededor del mundo. Al igual que otros organofosforados, ejerce su acción tóxica a través de la inhibición de la enzima acetilcolinesterasa lo cual ocasiona que la acetilcolina se acumule en los espacios presinápticos y sobre-estimule diversos tejidos y órganos -entre ellos, los músculos respiratorios- llegando a producir muerte por asfixia en casos de sobredosis. A nivel reproductivo, en mamíferos, puede afectar las gónadas masculinas, disminuyendo así la calidad espermática. Se desconocen sus efectos a nivel de gónadas femeninas y sobre la progenie. El objetivo de la presente tesis fue evaluar la toxicidad producida por el pesticida organofosforado Diazinon mediante la observación y análisis de los embriones preimplantacionales de ratón obtenidos a partir de hembras y machos tratados independientemente. Para ello, se trataron intraperitonealmente por 5 días consecutivos, cuatro grupos de diez individuos, tanto para el tratamiento paterno como materno. Tres de los grupos recibieron las dosis de 5,25, 10,5 y 21 mg/kg de peso corporal de Diazinon diluido en aceite de maíz, respectivamente; el cuarto grupo, usado como control negativo, fue tratado sólo con el vehículo. Luego de terminado el tratamiento, cada macho fue apareado semanalmente con una hembra no tratada durante 6 semanas, mientras que las hembras fueron apareadas por una sola vez con un macho no tratado. Al cuarto día de preñez todas las ratonas fueron sacrificadas para evaluar la cantidad, calidad, morfología, desarrollo y proliferación celular de los embriones preimplantacionales obtenidos. Durante el tratamiento paterno, los parámetros embrionarios resultaron afectados de forma variable a lo largo de las seis semanas de evaluación. El efecto tóxico de Diazinon fue más evidente durante las semanas 1 y 5, poniendo así en evidencia que los espermatozoides, espermátides tardías, espermatocitos tempranos y espermatogonias tipo B son los tipos celulares más sensibles al tratamiento. Durante el tratamiento materno sólo se incrementó el número de embriones retrasados y con morfología de grado 3 y 4. En ambos tratamientos se encontraron embriones con defecto en la formación del blastocele, lo que demostraría el potencial estrogénico de Diazinon sobre los embriones. Diazinon actúa de forma diferente en machos y hembras debido a las características biológicas de cada sexo y ello se ve reflejado en los resultados. En conclusión, Diazinon afecta la calidad gamética masculina y femenina, siendo este efecto heredable y evidente durante el desarrollo embrionario preimplantacional del ratón. / Diazinon is one of the most widely used organophosphate pesticides worldwide. Similar to other organophosphorates, it exerts its toxic action through the inhibition of the enzyme acetylcholinesterase, which induces acetylcholine accumulation in presynaptic spaces and thus overstimulating several tissues and organs -amongst them, the respiratory musculature- leading to death by asphyxia in case of an overdose. At the reproductive level, in mammals, Diazinon may affect the male gonads, hence decreasing sperm quality. Its effects over the female gonads and over the progeny of affected individuals are currently unknown The objective of the present thesis was to evaluate the toxicity produced by the organophosphate pesticide Diazinon thru the observation and analysis of mouse preimplantation embryos recovered from independently exposed male and female mice. In order to do that, four groups of mice each composed of ten individuals were intraperitonealy treated during 5 consecutive days, both for paternal and maternal treatments. Three of those groups received doses of 5.25, 10.5, and 21 mg/kg of body weight of Diazinon, respectively, diluted on corn oil; the fourth group, regarded as the negative control, only received the vehicle. After finishing the treatment, each treated male mouse was caged and breaded with an untreated female mouse on a weekly basis during 6 weeks, while treated female mice were breaded with untreated males only once. On the fourth day of pregnancy, all pregnant female mice were sacrificed to assess the number, quality, morphology, stage of development and cell proliferation status in recovered preimplantation embryos. During paternal treatment, the embryo parameters were affected on a variable basis along the six-week evaluation period. The toxic effect of Diazinon showed to be more evident on weeks 1 and 5, thus resulting that spermatozoa, late spermatids, early spermatocytes and type B spermatogonia are the most sensitive-to-treatment cell types. On the other hand, during maternal treatment, only the number of developmentally delayed and morphological grade 3 and 4 embryos augmented. In both treatments, embryos with defective blastocoele formation, a feature that demonstrates the estrogenic potential of Diazinon on preimplantation embryos. Diazinon acts differentially on males and females due to the biological characteristics of each gender, a fact that became reflected in our results. In conclusion, Diazinon affects the male and female gamete quality, being this effect heritable and evident during preimplantation embryo development in the mouse.

En la Universidad Nacional Mayor de San Marcos, ciudad de Lima, se procedió al realización de un estudio sobre los efectos en mucosa bucal de ratones albinos luego de una exposición intensa a los rayos x. Se tomó la mucosa bucal puesto que este tejido siempre es blanco directo de las irradiaciones, las dosis fueron la máxima permitida (0.5 rem) y la máxima recomendada (0.25 rem) para pacientes. Se procedió a realizar un estudio experimental, comparativo, prospectivo y longitudinal en una población 36 ratones alvinos divididos en 3 grupos (de 12 ratones cada grupo). El primer grupo fue el de control, el segundo fue expuesto a una radiación de 0,25 rem y el tercero a una radiación de 0,50 rem. Durante la exposición se observó un cambio en la conducta de los ratones (adormecimiento) este cambio se obtuvo luego de someterlos a 10 exposiciones periapicales a todo el cuerpo. Luego de concluidas las exposiciones los ratones fueron nuevamente divididos en otros 3 grupos de 12 individuos. Cada uno de estos grupos contaba de 4 ratones de control, 4 expuestos a una radiación de 0,25 y 4 ratones expuestos a 0,50 rem, el primer grupo fue sacrificado una hora de concluidas las exposiciones, el segundo un día después y el tercero una semana más tarde. En los cortes histológicos se observó cambios tales como atrofia del epitelio de la mucosa palatina, acantolisis, disminución de la capa de queratina; con lo cual se concluye que a pesar de haberse usado una dosis pequeña de radiación se pudieron obtener cambios clínicos y a nivel histológico. Los cambios a nivel histológico fueron desapareciendo una semana luego de concluidas las exposiciones. Por lo tanto se debe recalcar la importancia de las medidas de bioseguridad al utilizar los equipos de rayos x en la consulta odontológica.

El propósito primario de cualquier organismo superior con reproducción sexual es pasar sus genes a la siguiente generación vía sus células germinales primordiales (PGCs), células troncales del sistema reproductor. Al transplantar intraespecíficamente las células germinales, éstas colonizan la membrana basal de los túbulos seminíferos del animal receptor en busca del nicho donde se desarrollan las células madre. Es así que la técnica de transplante de PGCs permite que las células madres de origen fetal sean conservadas y divididas en su estado multipotente por largos periodos de tiempo en el animal receptor, preservando el material genético. Así, el presente trabajo de tesis tiene por objetivo evaluar la colonización intraluminal de una suspensión cruda de PGCs de fetos de ratón de la cepa Balb C en los túbulos seminíferos de ratones adultos. Para ello se aislaron las PGCs desde las crestas genitales de fetos machos con dos pasos de digestiones enzimáticas (Tripsina 0.25% y colagenasa tipo IV, 1 mg/ml), transplantándose en los túbulos seminíferos del animal receptor vía rete testis, a los ratones receptores previamente se les disminuyó drásticamente su línea germinal con tratamiento químico con Busulfán (40 mg/kg). Los animales receptores fueron mantenidos por 54 días en un bioterio con 14 horas luz y 10 horas oscuridad. Luego de este periodo los animales fueron sacrificados por dislocación cervical, se les extrajo los testículos y se realizó cortes histológicos seriados de 10 _m de espesor, coloreados con hematoxilina y eosina Y. La evaluación evidenció una colonización intraluminal en 1 de cada 100 túbulos seminíferos evaluados. Lo que demostraría que las PGCs de fetos de 14.5 días post coitum (dpc) si tienen la capacidad de colonizar los túbulos seminíferos de individuos adultos de la misma especie. / The aim function of a organism with sexual reproduction is to transmit their genes to the next generation throught their primordial germ cell (PGCs), stem cells of the reproductor system, they colonized basal membrane of seminiferous tubule in the receptor animal, search their nich where they can differentiate to sperms. In the Transplant PGCs Technique, we could preserved and multiplicated cells for long time in their multipotent state in the receptor animal, conserved in their multipotent state. The present Thesis objective is to evaluate the intraluminal colonization of a suspension of PGCs of fetus mice Balb C in semiferous tubule of adult mice. In my research, PGCs were isolated from fetus male mice with two enzimatic digestion steps (Tripsin 0.25% and Colagenase Type IV 1 mg/ml), PGCs were transplanted into the rete testis of the receptor animal that previously were injected with Busulfán (40 mg/kg) to decrease their own spermatogenesis. Mice receptor were maintained in bioterio conditions with 14 hours light and 10 hours dark for fifty four days, they were sacrificed by cervical dislocation, their testis were extracted for and histology procedures of 10 _m, colored with hematoxilin and Y eosin. In this research the intraluminal colonization was identified in 1 of 100 seminiferous tubule. In conclusion, transplantation of PGCs of foetus from 14.5 dpc can colonized the seminiferous tubule.

Toxoplasma gondii es un parásito zoonótico de amplia distribución geográfica, y es causante de cuadros clínicos severos en humanos. Es importante conocer la patología cerebral en la toxoplasmosis, en particular la inflamación producida debido a las graves secuelas observadas en personas inmunosuprimidas y a los potenciales efectos neurológicos en personas con infección aguda o crónica. El objetivo del presente trabajo fue evaluar las diferencias de los procesos inflamatorios de la toxoplasmosis aguda, crónica y reactivada utilizando un modelo murino con toxoplasmosis cerebral. Se infectaron ratones Swiss-Webster con la cepa Me49 de T. gondii por vía oral, por un tiempo de 18 días (fase aguda), 120 días (fase crónica) y 165 días con un tratamiento inmunosupresor utilizando ciclofosfamida para inducir la reactivación de la infección. Para evaluar la eficacia del esquema de inmunosupresión, se evaluó su efecto en la competencia inmunológica, donde se evidenció una disminución significativa del número total de leucocitos (p=0.043) y un descenso en la producción de anticuerpos anti-T. gondii en los ratones inmunosuprimidos. Por otro lado, el análisis histológico reveló que tanto los ratones en fase aguda como los de fase crónica presentaron una mayor frecuencia de lesiones inflamatorias y un mayor ratio de microglia activada, a diferencia de los ratones inmunosuprimidos que mostraron resultados opuestos. Los resultados sugieren que la carga parasitaria varía de acuerdo al tiempo de infección y estado inmune del hospedero, siendo este último un factor importante para el desarrollo de una fuerte respuesta inflamatoria con una alta participación microglial. / Tesis

Determina el efecto antidiarreico del extracto etanólico de hojas de Solanum radicans L.F “ñuchco hembra” en ratones machos albinos por vía oral, donde se utilizó el modelo de inducción de diarrea con aceite ricino (10 mL/Kg) divididos en los siguientes grupos: suero fisiológico 10 mL/Kg, fármaco estándar Loperamida 2 mg/kg y extracto etanólico de hojas de Solanum radicans L.F a las concentraciones de 400, 600 y 900 mg/kg. Se administró a cada animal 0,2 mL de suspensión de carbón activado (10%) en goma tragacanto (1%) como marcador del desplazamiento en el intestino; y finalmente fueron eutanizados por dislocamiento cervical. La cavidad abdominal fue abierta para determinar la longitud total del intestino delgado de cada animal (píloro hasta la válvula ileocecal), así como el desplazamiento del carbón activado, donde se calculó el porcentaje de disminución del movimiento peristáltico de la Loperamida y Solanum radicans L.F. Los resultados muestran un mayor efecto antidiarreico a dosis de 400 mg/Kg (p<0,05) con 69,66% de disminución del movimiento peristáltico, comparado con el fármaco estándar que presentó 63,42%. Se realizó tamizaje fitoquímico preliminar del extracto etanólico de hojas de Solanum radicans L.F detectándose en mayor cantidad la presencia de alcaloides, flavonoides, azúcares, esteroides; además se realizó la cromatografía en capa fina (CCF) del extracto etanólico de hojas de Solanum radicans L.F comparándolos con estándares de atropina, rutina y quercetina. Se evaluó la citotoxicidad frente a Artemia salina, del extracto etanólico de hojas de Solanum radicans L.F para lo cual se preparó solución madre de 1000 ug/mL (10 mg del extracto seco en 10 mL de agua de mar artificial) y a partir de ahí se emplearon concentraciones de 5, 10, 15, 20, 25 y 30 ug/mL, donde se obtuvo el valor de la concentración letal media de 12,83 ug/mL. Se concluye que el extracto etanólico de hojas de Solanum radicans L.F tiene efecto antidiarreico y una actividad citotóxica en los modelos experimentales trabajados. / Tesis

Determina el efecto analgésico del extracto hidroalcohólico seco atomizado de Crotón lechleri comparado con el ketoprofeno sobre el dolor inducido en ratones. Utilizó tres modelos experimentales: el método “tail flick”, el método de torsiones abdominales y el procedimiento para determinar DL50. La muestra está compuesta por 36 ratones albinos divididos en 6 grupos homogéneos: G1 con suero fisiológico 10 mL/kg, G2-G3-G4 sangre de dragón 100, 150 y 200 mg/kg respectivamente; G5 ketoprofeno 5mg/kg y G6 Morfina 2-5mg/kg. Para el último modelo experimental se empleó dos etapas, con diferentes dosis tóxicas. Finalmente se evaluó los efectos tóxicos a nivel gastrointestinal, hepático y renal. Tratamiento Estadístico. Las diferencias entre los grupos fueron fijadas mediante ANOVA, Test de Fisher, Kluskal-Wallis y pair-wise. Para determinar la DL50 se empleó la fórmula propuesta en el modelo experimental. Encuentra que el extracto hidroalcohólico seco atomizado de Croton lechleri fue significativamente superior al ketoprofeno en efecto analgésico visceral y somático, sin superar a la morfina con un porcentaje de eficacia analgésica mayor al 50%. La DL50 se determinó en 800mg/kg con leves cambios histopatológicos en sistema gastrointestinal y renal. Concluye que el extracto hidroalcohólico seco atomizado de Croton lechleri es analgésico en dolor somático y visceral, supera al ketoprofeno y puede ser conparado con la morfina. / Tesis

Describe fagos específicos para Pseudomonas aeruginosa resistentes a antibióticos y productoras de biopelícula. Se aisló P. aeruginosa a partir de muestras de pacientes hospitalizados de dos centros de salud. Se determinó, su nivel de resistencia antibiótica, producción de biopelícula y presencia de profagos. Posteriormente se aislaron fagos nativos a partir de efluentes hospitalarios y se determinó su rango de hospedero (capacidad de infectar a cepas MDR y productoras de biopelícula). Debido a sus características morfológicas en la formación de placa y su amplio rango de hospedero, se seleccionó el fago ФMARC-GA para una caracterización microbiológica. Éste presentó un periodo de latencia de 40 minutos y un tamaño de explosión aproximado de 100 fagos, con morfotipo C1 perteneciente a la Familia Podoviridae del Orden Caudovirales. Las características del bacteriófago lo presentan como un candidato con gran potencial para fagoterapia en infecciones recalcitrantes ocasionadas por P. aeruginosa MDR y productora de biopelícul. / Tesis

Investiga el efecto del silenciamiento de los receptores B1 y B2 sobre la proliferación de los astrocitos, microglías y neuronas en el hipocampo de ratones machos adultos C57BL/6. Muestran alteraciones en la expresión génica de los marcadores moleculares de los astrocitos maduros e inmaduros en los ratones knockouts (KO) B2 (-/-) y B1B2 (-/-) sugiriendo un papel del sistema de las cininas durante las diferentes etapas de maduración de estas células gliales. Por otro lado, solamente los ratones KO B1B2 (-/-) presentan una reducción de la expresión génica de su marcador molecular para la proliferación de las microglías. Este resultado podría ser explicado a través de la hiperactivación de la proteína GSK-3 que lidera la activación de vías apoptoticas cuando el sistema de las cininas es bloqueado. Finalmente, ningún grupo de animales KO presenta alteraciones en la expresión génicas del marcador de proliferación neuronal. Por lo tanto, se concluye que el silenciamiento génico de los receptores B1 y B2 altera la proliferación de las células gliales, pero no la proliferación neuronal. / Tesis

Publicación a texto completo no autorizada por el autor / Determina el efecto de un suplemento sobre los marcadores bioquímicos musculares y el rendimiento físico en ratones sometidos a nado forzado. Desarrolla un estudio analítico, experimental, transversal y prospectivo. Utilza 35 ratones Mus musculus machos adultos de 8 semanas de edad, con un peso promedio de 35,43 g, los cuales fueron distribuidos de manera aleatoria en 5 grupos (n=7) para recibir el siguiente tratamiento vía peroral: grupo I y II: suero fisiológico 10 mL/kg; y los grupos III, IV y V recibieron el suplemento deportivo a dosis de 150, 300 y 800 mg/kg de peso. Posteriormente se sometió a los grupos II, III, IV y V al test de nado forzado hasta el agotamiento. Para determinar el rendimiento físico se tomó el tiempo (minutos) de nado forzado hasta el agotamiento, con respecto a los marcadores bioquímicos se tomó la actividad enzimática del Lactato deshidrogenasa (LDH) y lipoperoxidación a nivel muscular. Encuentra que el suplemento presenta un efecto de incremento en la resistencia física de los grupos IV y V en comparación del grupo II, también se observó una reducción en la actividad la lactato deshidrogenasa (LDH) en los grupos III y IV en comparación del grupo número II, además con respecto a la lipoperoxidación se encontró una reducción en los grupos III, IV y V en comparación del grupo II. Concluye que el suplemento presenta un efecto favorable en la resistencia física y sobre los marcadores bioquímicos musculares. / Tesis

Evalúa el daño histopatológico producido por la cepa Me49 de T. gondii, bajo condiciones de inmunosupresión. Para ello se utilizaron 20 ratones hembras de la cepa Swiss Rockefeller de dos meses de edad los cuales fueron infectados oralmente con 20 quistes de la cepa Me49 de T. gondii. Fueron clasificados dos grupos: 1: ratones infectados e inmunosuprimidos ((A), (B), (C)); 2: (D) ratones infectados no inmunosuprimidos, (E) ratones no infectados e inmunosuprimidos y (F) ratones no infectados, no inmunosuprimidos. La inmunosupresión se realizó con dexamentasona (2 mg/ml) para los subgrupos A, B, C, E. Los ratones del grupo 1 (A, B, C), fueron sacrificados a los 15, 30 y 45 días post inmunosupresión respectivamente. Se obtuvieron diferentes tejidos: cerebro, corazón, hígado, pulmón, músculo diafragma, bazo y riñón, los cuales fueron colocados en PBS-formol al 10%, para luego ser procesados aplicando técnicas histológicas de inclusión en parafina, obteniéndose cortes de 3 micras mediante un micrótomo rotativo y coloreados con hematoxilina y eosina. Los resultados muestran que en los ratones del grupo 1 de acuerdo con el tiempo de inmunosupresión se evidenció un aumento del número de quistes en el tejido cerebral siendo las zonas de infección la corteza (sustancia gris). Los quistes tisulares presentaron un tamaño promedio de 10-23 micras, y la reacción inflamatoria se evidenció con la presencia de vasos periféricos con neutrófilos y linfocitos. En los cerebros de los ratones del grupo 2 D se observó quistes en la sustancia gris y vacuolización, con respecto a los cerebros de los ratones del grupo 2 E se evidenció calcificación en la sustancia gris. En los 12 cerebros del grupo 2F se observó tejido normal sin ningún tipo de alteración. Con respecto a órganos como pulmón e hígado se observó inflamación producto de la inmunosupresión. En conclusión los datos son importantes y comparativos para comprender mejor el daño histopatológico ocurrido por T. gondii bajo condiciones de inmunosupresión donde el modelo murino reproduciría la patología que pudiera suceder en el humano. / Tesis