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Repercussões morfofuncionais de uma restrição dietética em ácidos graxos essenciais sobre neurônios GABAérgicos e astrócitos no sistema nigroestriatal de ratosSantana, David Filipe de 31 January 2013 (has links)
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Previous issue date: 2013 / Fundação de Amparo a Ciências e Tecnologia do Estado de Pernambuco (FACEPE) / Os ácidos graxos essenciais exercem um papel crucial para o desenvolvimento e manutenção
do sistema nervoso. Estudos recentes do nosso laboratório têm demonstrado que a restrição
dietética crônica destes macronutrientes é capaz de induzir sinais de degeneração e perda de
neurônios dopaminérgicos na substantia nigra (SN) de ratos. O presente estudo visa testar a
hipótese de que esta restrição dietética é capaz de alterar a distribuição de neurônios
GABAérgicos nigrais bem como aumentar a funcionalidade e reatividade de astrócitos na SN
e corpo estriado (CE). Ratos Wistar foram divididos em dois grupos de acordo com a dieta
materna, a qual foi fornecida a partir do acasalamento e mantida por duas gerações. O grupo
controle recebeu dieta balanceada contendo óleo de soja como fonte lipídica; grupo deficiente
em ácidos graxos essenciais (DAGEs) recebeu dieta semelhante, mas tendo o óleo de coco
como fonte lipídica. A capacidade funcional da glia foi analisada em homogenados do CE e
SN a partir da atividade da enzima Glutamina Sintetase (GS). A distribuição dos astrócitos e
neurônios GABAérgicos foi analisada a partir de imunohistoquímica utilizando-se anticorpos
monoclonais para a Proteína Ácida Fibrilar Glial (GFAP) e parvalbumina, respectivamente.
Os níveis protéicos de GFAP foram analisados por Western blot. O perfil de ácidos graxos
essenciais em fosfolipídios da SN ou CE foi analisado por cromatografia gasosa. Análise do
padrão de complexidade morfológica dos astrócitos foi realizada avaliando-se índices como
dimensão fractal, área de arborização e lacunaridade. Os resultados obtidos evidenciaram um
aumento significativo (p < 0.01) na atividade da GS no CE de animais jovens (30-40 dias) e
adultos (90-110 dias) do grupo DAGES, comparado ao controle. Na SN, um aumento na
atividade da GS do grupo DAGES (p<0.001) só foi observado aos 90 dias. Um aumento na
dimensão fractal dos astrócitos (p=0.009) foi observado apenas nos animais jovens do grupo
DAGES, comparado ao controle. No entanto um aumento da área de arborização dos
astrócitos foi detectado no grupo DAGES tanto em animais jovens (p=0.004) como nos
adultos (p=0.005). Não houve diferença na lacunaridade tanto nos animais jovens quanto nos
animais adultos. Modificações na expressão das isoformas da proteína GFAP foram também
induzidas pela dieta experimental nos animais jovens, observando-se um aumento na isoforma
de 42 KDa no CE, SN assim como no córtex cerebral. Análise dos astrócitos marcados para
GFAP sugere ausência de astrogliose na SN do grupo DAGEs tanto em animais jovens como
adultos. Quantificação preliminar realizada em 4 animais adultos do grupo DAGES e 3
animais do grupo controle sugere que o número de neurônios imunorreativos a parvalbumina
da SN não difere entre os grupos. Os resultados obtidos sugerem que a restrição dietética em
ácidos graxos essenciais por duas gerações induz efeitos adversos sobre a diferenciação e
atividade funcional dos astrócitos, evidenciando também uma reatividade diferenciada entre
as células da glia da SN e CE. Contudo, a restrição dietética por duas gerações não é capaz de
causar astrogliose na SN dos animais jovens e adultos.
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