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Repercussões morfofuncionais de uma restrição dietética em ácidos graxos essenciais sobre neurônios GABAérgicos e astrócitos no sistema nigroestriatal de ratos

Santana, David Filipe de 31 January 2013 (has links)
Submitted by Ramon Santana (ramon.souza@ufpe.br) on 2015-03-13T14:42:13Z No. of bitstreams: 2 Dissertação completa(David).pdf: 16509548 bytes, checksum: 44c6bbf3d82089ebc82817764572ff34 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-03-13T14:42:13Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação completa(David).pdf: 16509548 bytes, checksum: 44c6bbf3d82089ebc82817764572ff34 (MD5) license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) Previous issue date: 2013 / Fundação de Amparo a Ciências e Tecnologia do Estado de Pernambuco (FACEPE) / Os ácidos graxos essenciais exercem um papel crucial para o desenvolvimento e manutenção do sistema nervoso. Estudos recentes do nosso laboratório têm demonstrado que a restrição dietética crônica destes macronutrientes é capaz de induzir sinais de degeneração e perda de neurônios dopaminérgicos na substantia nigra (SN) de ratos. O presente estudo visa testar a hipótese de que esta restrição dietética é capaz de alterar a distribuição de neurônios GABAérgicos nigrais bem como aumentar a funcionalidade e reatividade de astrócitos na SN e corpo estriado (CE). Ratos Wistar foram divididos em dois grupos de acordo com a dieta materna, a qual foi fornecida a partir do acasalamento e mantida por duas gerações. O grupo controle recebeu dieta balanceada contendo óleo de soja como fonte lipídica; grupo deficiente em ácidos graxos essenciais (DAGEs) recebeu dieta semelhante, mas tendo o óleo de coco como fonte lipídica. A capacidade funcional da glia foi analisada em homogenados do CE e SN a partir da atividade da enzima Glutamina Sintetase (GS). A distribuição dos astrócitos e neurônios GABAérgicos foi analisada a partir de imunohistoquímica utilizando-se anticorpos monoclonais para a Proteína Ácida Fibrilar Glial (GFAP) e parvalbumina, respectivamente. Os níveis protéicos de GFAP foram analisados por Western blot. O perfil de ácidos graxos essenciais em fosfolipídios da SN ou CE foi analisado por cromatografia gasosa. Análise do padrão de complexidade morfológica dos astrócitos foi realizada avaliando-se índices como dimensão fractal, área de arborização e lacunaridade. Os resultados obtidos evidenciaram um aumento significativo (p < 0.01) na atividade da GS no CE de animais jovens (30-40 dias) e adultos (90-110 dias) do grupo DAGES, comparado ao controle. Na SN, um aumento na atividade da GS do grupo DAGES (p<0.001) só foi observado aos 90 dias. Um aumento na dimensão fractal dos astrócitos (p=0.009) foi observado apenas nos animais jovens do grupo DAGES, comparado ao controle. No entanto um aumento da área de arborização dos astrócitos foi detectado no grupo DAGES tanto em animais jovens (p=0.004) como nos adultos (p=0.005). Não houve diferença na lacunaridade tanto nos animais jovens quanto nos animais adultos. Modificações na expressão das isoformas da proteína GFAP foram também induzidas pela dieta experimental nos animais jovens, observando-se um aumento na isoforma de 42 KDa no CE, SN assim como no córtex cerebral. Análise dos astrócitos marcados para GFAP sugere ausência de astrogliose na SN do grupo DAGEs tanto em animais jovens como adultos. Quantificação preliminar realizada em 4 animais adultos do grupo DAGES e 3 animais do grupo controle sugere que o número de neurônios imunorreativos a parvalbumina da SN não difere entre os grupos. Os resultados obtidos sugerem que a restrição dietética em ácidos graxos essenciais por duas gerações induz efeitos adversos sobre a diferenciação e atividade funcional dos astrócitos, evidenciando também uma reatividade diferenciada entre as células da glia da SN e CE. Contudo, a restrição dietética por duas gerações não é capaz de causar astrogliose na SN dos animais jovens e adultos.
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Lipídios e ácidos graxos nos desempenhos reprodutivo e zootécnico de lambaris (Astyanax altiparanae). / Lipids and fatty acids in growth and reproductive performance of lambari (Astyanax altiparanae).

Gonçalves, Ligia Uribe 26 November 2010 (has links)
Três experimentos foram conduzidos para determinar o efeito de fontes lipídicas nos desempenhos reprodutivo e zootécnico de lambaris e a comparação no perfil de ácidos graxos nos tecidos de lambaris selvagens e de cativeiro. Para o experimento de reprodução e de crescimento foram fornecidas, desde a fase larval até o período reprodutivo (11 meses), três dietas elaboradas com diferentes fontes de óleo: soja (SO); óleo de resíduos de tilápia (TI); óleo de resíduo de salmão (SA). No período reprodutivo, os peixes (36 fêmeas e 72 machos) foram induzidos à desova artificialmente e foram avaliados os parâmetros reprodutivos (volume e número total de ovos, taxas de fertilização e eclosão, diâmetro do ovo e comprimento da larva), bem como, o acompanhamento da regeneração ovocitária pós-desova. Observaram-se ovos e larvas maiores e taxas de fertilização superiores na progênie dos peixes alimentados com dietas contendo óleo de peixe, o que pode estar relacionado aos maiores valores da relação n-3/n-6 encontrados nos ovos. Para o experimento de desempenho zootécnico foram utilizados 192 lambaris sexados (espículas na nadadeira anal do macho), sendo 120 machos (peso médio 2,58 ± 0,13g) e 72 fêmeas (peso médio 4,00 ± 0,09g). O Delineamento utilizado foi o Inteiramente Casualizado em Esquema Fatorial 3 x 2, composto por três dietas (SO, TI, SA) e dois sexos. Verificou-se que as fêmeas apresentaram maior ganho em peso, taxas de conversão alimentar e taxa de eficiência protéica mais satisfatórias quando comparados com os machos, os quais apresentaram maior sobrevivência no final do experimento, independente da dieta fornecida. Para o terceiro experimento foram coletados 30 lambaris fêmeas selvagens e 30 fêmeas provenientes do cultivo. Extraíram-se os lipídios dos tecidos (músculo, ovários e fígado) de cada grupo, os quais foram separados (fases apolar e polar) e determinados os perfis de ácidos graxos. Os resultados foram submetidos a ANOVA e diferenciados pelo teste F. Os lambaris de ambos os grupos apresentaram em média 3,5g.100g-1 de teor de gordura no músculo. Os ovários dos peixes selvagens apresentaram a maior concentração de lipídios (14,447g.100g-1) quando comparados com os de cativeiro (13,181g.100g-1). A dieta não conseguiu suprir a quantidade mínima de importantes ácidos graxos no lipídio total e frações dos tecidos das fêmeas provenientes do cultivo em relação às selvagens. O ácido linolênico, considerado essencial para peixes de água doce, esteve presente em menores quantidades no lipídio total e nas frações polar e apolar nos tecidos dos lambaris cultivados, o que pode estar relacionado com deficiência em dietas comerciais para peixes onívoros. Com base nos resultados observados nos experimentos de reprodução e desempenho, sugere-se a inclusão de óleo de resíduos de tilápia e salmão na ração de peixes de lambaris. Ainda foi observado que os lambaris são capazes de elongar e dessaturar os ácidos graxos com 18 carbonos na cadeia, para a produção de Ácidos Araquidônico (AA), Eicosapentaenóico (EPA) e Docosahexaenóico (DHA), devido às baixas quantidades desses ácidos graxos na dieta e posterior aumento nos tecidos. / Three trials were conducted to determine the effect of lipid sources on lambari reproductive and growth performances as well as to make the comparison in the fatty acid profiles in tissues of lambari wild and captive. For the reproduction and growth performances were provided since the larval stage until the reproductive period (11 months), three diets containing different sources of oil: soybean oil (SO); tilapia waste oil (IT); salmon waste oil ( SA). During the reproductive period, fish (36 females and 72 males) were artificially induced to spawn and the reproduction parameters (volume and total number of eggs, fertilization and hatching rates, egg diameter and larval length) were evaluated, as well as monitoring of oocyte regeneration post-spawning. It were observed larger eggs and larvae and higher fertilization rate in the progeny of fish fed diets containing fish oil, which may be related to higher n-3/n-6 ratio values found in the eggs. For the trial of growth performance were used 192 sexed lambaris (male anal fin spines) with 120 males (mean weight 2.58 ± 0.13g) and 72 females (mean weight 4.00 ± 0.09g). The fish were separated on a random method in a factorial scheme 3 x 2, composed by three diets (SO, TI e SA) and two sexes. It was verified that females had higher weight gain, improved feed conversion and protein efficiency rates than males, which showed higher survival at the end of the trial, regardless of diet. In the third trial were collected 30 wild and 30 captive females. The lipids of tissues (muscle, liver and ovary) were extracted from each group and were separated (polar and non polar) and thus determined the fatty acids profiles. The results were analyzed by ANOVA and F test. The lambaris of both groups had mean of 3.5g.100g-1 in the muscle and the wild fish ovaries showed the highest concentration of lipids (14.447g.100g-1) than farming fish (13.181 g.100g-1). The diet failed to supply the minimum amount of important fatty acids in fractions and total lipids of cultivate females and these evidences were higher in the ovaries. Linolenic acid which is considered essential for freshwater fish, was present in smaller amounts in total lipids and polar and nonpolar fractions in all tissues of the cultivated lambari, which may be related to default in commercial diets for omnivores fish. In view of parameters observed in reproduction and growth trials, it can be suggest the inclusion of waste tilapia and salmon oil in lambari broodstock diet. Also it was observed that lambaris have the capacity elongation and desaturation of fatty acids with 18 carbons in the chain for the Arachidonic Acid (AA), Eicosapentaenoic Acid (EPA) and Docosahexaenoic Acid (DHA) production due to low amount of these fatty acids in the diet and the increase in the tissues.
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Suplementação de ácidos graxos ômega 3 e estado nutricional de pacientes com câncer gastrointestinal / Ômega 3 fatty acids supplementation and nutritional status of gastrointestinal câncer patients

MARQUES, Débora Caldas 30 June 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2014-07-29T15:23:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 DEBORA CALDAS MARQUES.pdf: 1050150 bytes, checksum: fcd394299d813475550612fa84f0fda8 (MD5) Previous issue date: 2011-06-30 / Introduction: Cancer cachexia is characterized by weight loss, immunosuppression, and is associated with a worse prognosis and quality of life. Objectives: The aim of this study was to evaluate the effects of &#969;-3 supplementation on nutritional and functional status and quality of life of patients with gastrointestinal cancer. Methodology: The placebo group (n = 10) received 7 caps containing 1000 mg soya oil, and the supplement group (n = 11) received 7 caps of 1000 mg fish and flaxseed oil, containing 214.3 mg of EPA and 113.5 mg of DHA, daily, for 14 days. Were assessed weight, body composition, inflammatory and immunological markers, functional status and quality of life. Results: The average weight variation of P group before and after treatment was -0.44 ± 2.7 kg and for S group was 0.07 ± 1.4 kg, with no significant differences. The average BMI of the sample was 20.5 ± 3.4 kg/m2. Significant reduction of serum total protein (p=0.005) and albumin (p=0.011) for the P group, increased levels of CRP (p=0.005), and reduction of TLC (p=0.037). An increase of serum transferrin of S group (p=0.010) and reduced levels of CRP (p=0.033) and cortisolemia (p=0.006). It was found to increase KPS (p=0.020) in group S. No differences were found for functional status, symptoms and global health. Conclusions: This study found results that support the supplementation of &#969;-3 in oncology. However, further investigations are necessary involvement &#969;-3 associated to other therapeutic strategies. / Introdução: A caquexia do câncer é caracterizada pela perda ponderal, imunossupressão, e está associada a um pior prognóstico e qualidade de vida. Objetivos: O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito da suplementação de &#969;-3 sobre o estado nutricional, capacidade funcional e qualidade de vida de pacientes com câncer gastrointestinal. Metodologia: O grupo placebo (grupo P) (n=10) recebeu 7 cápsulas de 1000 mg de óleo de soja, e o grupo suplemento (grupo S) (n=11) 7 cápsulas de 1000 mg de óleo de peixe e linhaça, contendo 214,3 mg de ácido eicosapentaenóico e 113,5 mg de ácido docosahexaenóico, diariamente, por 14 dias. Foram avaliados o peso, composição corporal, marcadores inflamatórios e imunológicos, capacidade funcional e qualidade de vida. Resultados: A média de variação de peso do grupo P antes e depois do tratamento foi de -0,44 ± 2,7 kg e do grupo S foi de 0,07 ± 1,4 kg, sem diferença estatística. A média de IMC da amostra foi de 20,5 ± 3,4 kg/m2. Houve redução significativa dos níveis séricos de proteínas totais (p=0,005) e albumina (p=0,011) para o grupo P; aumento dos níveis de proteína C reativa (p=0,005), e redução da Contagem Total de Linfócitos (p=0,037). Verificou-se aumento dos níveis séricos da transferrina do grupo S (p=0,010), bem como redução dos níveis de PCR (p=0,033) e na cortisolemia (p=0,006). Encontrou-se aumento para KPS (p=0,020) no grupo S. Não foram encontradas diferenças para Status funcional, Sintomas e Saúde global. Conclusões: O presente estudo encontrou resultados que dão suporte à suplementação de &#969;-3 em oncologia. No entanto, são necessárias maiores investigações associando os &#969;-3 a outras estratégias terapêuticas.
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Efeitos da suplementação de Omega-3 no processo inflamatório e dano muscular induzidos por estresse físico e restrição alimentar em militares

Santos., Eduardo Porto dos 29 March 2010 (has links)
Made available in DSpace on 2015-04-17T15:03:05Z (GMT). No. of bitstreams: 1 arquivototal.pdf: 503890 bytes, checksum: 99e21ac9bda74afe0bcd03f4094569ee (MD5) Previous issue date: 2010-03-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / The literature has several studies showing the anti-inflammatory and protective against cardiovascular disease, the polyunsaturated fatty acids are omega-3 intake of fatty acids has been recommended as a way to prevent heart disease and improve heart function. There are few studies involving the anti-inflammatory effect of fatty acids omega-3, with the inflammatory process triggered by physical stress of great magnitude. The effect of supplementation of polyunsaturated fatty acids (PUFA) omega-3 (n-3) in the immune response and occurrence of muscle damage in soldiers were investigated. Twenty males were divided in two groups and they received capsules contends PUFA n-3 (SUP) (n=10) or placebo (PLA) (n=10) during four weeks. in elapsing of the fourth week of supplementation, the military were submitted to a military camp with caloric ingestion and restricted rest, and elevated physical and psychological stress. The concentration of C-reactive protein (CRP-hs) was used as inflammatory marker and the occurrence of muscle damage by creatine kinase s (CK) activity. Sanguine samples were taken in four moments: 1) before supplementation; 2) before camp; 3) during camp; 4) after camp. During the three weeks of supplementation that preceded the camp s routine, was observed a significant reduction in serum CRP-hs s concentration only in group SUP. A significant increase of CK activity in the after camp, confirmed the character strenuous of this procedure. In spite of not impeding the PCR-us s increase, SUP presented a concentration of PCR-hs significantly smaller than PLA at the end of camp. These results suggest that PUFA n-3 supplementation exercises a protecting effect against the inflammatory process induced by intense physical training and alimentary restriction / A literatura dispõe de vários estudos que comprovam o efeito antiinflamatório e protetor contra doenças cardiovasculares, que os ácidos graxos poliinsaturados Ômega-3 possuem A ingestão destes ácidos graxos tem sido recomendada, como forma de prevenir doenças cardíacas e melhorar a função cardíaca. Existem poucas pesquisas associando o efeito antiinflamatório dos ácidos graxos Ômega-3, com o processo inflamatório desencadeado pelo estresse físico de grande magnitude. O efeito da suplementação de ácidos graxos poliinsaturados (AGPI) omega-3 (n-3) na resposta imunológica e ocorrência de dano muscular em militares foi investigado. Vinte sujeitos foram divididos em dois grupos e receberam cápsulas contendo AGPI n-3 (SUP) (n=10) ou placebo (PLA) (n=10) durante quatro semanas. No decorrer da quarta semana de suplementação, os militares foram submetidos a um acampamento militar com ingestão calórica e repouso restrito e elevado estresse físico e psicológico. A concentração de proteína C-reativa ultra-sensível (PCR-us) foi utilizada como marcador inflamatório e a ocorrência de dano muscular pela atividade da enzima creatinoquinase (CK). Amostras sanguineas foram coletadas em quatro momentos: 1) présuplementação; 2) pré-acampamento; 3) durante o acampamento; 4) pós-acampamento. Durante as três semanas de suplementação e que antecederam o regime de acampamento foi observada uma redução significativa na concentração sérica de PCR-us apenas no grupo SUP. Um aumento significativo da atividade da CK no pós-acampamento confirmou o caráter extenuante deste procedimento. Apesar de não impedir a elevação da PCR-us, o grupo SUP apresentou uma concentração de PCR-us significativamente menor em comparação com o grupo PLA ao final do acampamento. Estes resultados sugerem que a suplementação de AGPI n-3 exercem um efeito protetor contra o processo inflamatório induzido por um regime de treinamento físico intenso e restrição alimentar.
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Lipídios e ácidos graxos nos desempenhos reprodutivo e zootécnico de lambaris (Astyanax altiparanae). / Lipids and fatty acids in growth and reproductive performance of lambari (Astyanax altiparanae).

Ligia Uribe Gonçalves 26 November 2010 (has links)
Três experimentos foram conduzidos para determinar o efeito de fontes lipídicas nos desempenhos reprodutivo e zootécnico de lambaris e a comparação no perfil de ácidos graxos nos tecidos de lambaris selvagens e de cativeiro. Para o experimento de reprodução e de crescimento foram fornecidas, desde a fase larval até o período reprodutivo (11 meses), três dietas elaboradas com diferentes fontes de óleo: soja (SO); óleo de resíduos de tilápia (TI); óleo de resíduo de salmão (SA). No período reprodutivo, os peixes (36 fêmeas e 72 machos) foram induzidos à desova artificialmente e foram avaliados os parâmetros reprodutivos (volume e número total de ovos, taxas de fertilização e eclosão, diâmetro do ovo e comprimento da larva), bem como, o acompanhamento da regeneração ovocitária pós-desova. Observaram-se ovos e larvas maiores e taxas de fertilização superiores na progênie dos peixes alimentados com dietas contendo óleo de peixe, o que pode estar relacionado aos maiores valores da relação n-3/n-6 encontrados nos ovos. Para o experimento de desempenho zootécnico foram utilizados 192 lambaris sexados (espículas na nadadeira anal do macho), sendo 120 machos (peso médio 2,58 ± 0,13g) e 72 fêmeas (peso médio 4,00 ± 0,09g). O Delineamento utilizado foi o Inteiramente Casualizado em Esquema Fatorial 3 x 2, composto por três dietas (SO, TI, SA) e dois sexos. Verificou-se que as fêmeas apresentaram maior ganho em peso, taxas de conversão alimentar e taxa de eficiência protéica mais satisfatórias quando comparados com os machos, os quais apresentaram maior sobrevivência no final do experimento, independente da dieta fornecida. Para o terceiro experimento foram coletados 30 lambaris fêmeas selvagens e 30 fêmeas provenientes do cultivo. Extraíram-se os lipídios dos tecidos (músculo, ovários e fígado) de cada grupo, os quais foram separados (fases apolar e polar) e determinados os perfis de ácidos graxos. Os resultados foram submetidos a ANOVA e diferenciados pelo teste F. Os lambaris de ambos os grupos apresentaram em média 3,5g.100g-1 de teor de gordura no músculo. Os ovários dos peixes selvagens apresentaram a maior concentração de lipídios (14,447g.100g-1) quando comparados com os de cativeiro (13,181g.100g-1). A dieta não conseguiu suprir a quantidade mínima de importantes ácidos graxos no lipídio total e frações dos tecidos das fêmeas provenientes do cultivo em relação às selvagens. O ácido linolênico, considerado essencial para peixes de água doce, esteve presente em menores quantidades no lipídio total e nas frações polar e apolar nos tecidos dos lambaris cultivados, o que pode estar relacionado com deficiência em dietas comerciais para peixes onívoros. Com base nos resultados observados nos experimentos de reprodução e desempenho, sugere-se a inclusão de óleo de resíduos de tilápia e salmão na ração de peixes de lambaris. Ainda foi observado que os lambaris são capazes de elongar e dessaturar os ácidos graxos com 18 carbonos na cadeia, para a produção de Ácidos Araquidônico (AA), Eicosapentaenóico (EPA) e Docosahexaenóico (DHA), devido às baixas quantidades desses ácidos graxos na dieta e posterior aumento nos tecidos. / Three trials were conducted to determine the effect of lipid sources on lambari reproductive and growth performances as well as to make the comparison in the fatty acid profiles in tissues of lambari wild and captive. For the reproduction and growth performances were provided since the larval stage until the reproductive period (11 months), three diets containing different sources of oil: soybean oil (SO); tilapia waste oil (IT); salmon waste oil ( SA). During the reproductive period, fish (36 females and 72 males) were artificially induced to spawn and the reproduction parameters (volume and total number of eggs, fertilization and hatching rates, egg diameter and larval length) were evaluated, as well as monitoring of oocyte regeneration post-spawning. It were observed larger eggs and larvae and higher fertilization rate in the progeny of fish fed diets containing fish oil, which may be related to higher n-3/n-6 ratio values found in the eggs. For the trial of growth performance were used 192 sexed lambaris (male anal fin spines) with 120 males (mean weight 2.58 ± 0.13g) and 72 females (mean weight 4.00 ± 0.09g). The fish were separated on a random method in a factorial scheme 3 x 2, composed by three diets (SO, TI e SA) and two sexes. It was verified that females had higher weight gain, improved feed conversion and protein efficiency rates than males, which showed higher survival at the end of the trial, regardless of diet. In the third trial were collected 30 wild and 30 captive females. The lipids of tissues (muscle, liver and ovary) were extracted from each group and were separated (polar and non polar) and thus determined the fatty acids profiles. The results were analyzed by ANOVA and F test. The lambaris of both groups had mean of 3.5g.100g-1 in the muscle and the wild fish ovaries showed the highest concentration of lipids (14.447g.100g-1) than farming fish (13.181 g.100g-1). The diet failed to supply the minimum amount of important fatty acids in fractions and total lipids of cultivate females and these evidences were higher in the ovaries. Linolenic acid which is considered essential for freshwater fish, was present in smaller amounts in total lipids and polar and nonpolar fractions in all tissues of the cultivated lambari, which may be related to default in commercial diets for omnivores fish. In view of parameters observed in reproduction and growth trials, it can be suggest the inclusion of waste tilapia and salmon oil in lambari broodstock diet. Also it was observed that lambaris have the capacity elongation and desaturation of fatty acids with 18 carbons in the chain for the Arachidonic Acid (AA), Eicosapentaenoic Acid (EPA) and Docosahexaenoic Acid (DHA) production due to low amount of these fatty acids in the diet and the increase in the tissues.
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L-carnitina e ácidos graxos ômega-3 previnem danos meióticos em oócitos bovinos maturados in vitro com fluido folicular de mulheres inférteis com endometriose / L-carnitine and omega-3 fatty acids prevent meiotic damages in bovine oocytes matured in vitro with follicular fluid from infertile women with endometriosis

Giorgi, Vanessa Silvestre Innocenti 30 November 2018 (has links)
No presente estudo avaliamos o impacto da adição de fluido folicular (FF) de mulheres inférteis sem e com endometriose em estágios iniciais (I/II) e avançados [(III/IV) sem e com endometrioma] ao meio de maturação in vitro (MIV) sobre as taxas de normalidade meiótica de oócitos bovinos. Avaliamos se a L-carnitina (LC) e os ácidos graxos ômega-3 [n3, ácidos docosahexaenóico (DHA) e eicosapentaenoico (EPA)] são capazes de prevenir os danos meióticos em oócitos bovinos induzidos por FF de mulheres inférteis com endometriose I/II e III/IV durante a MIV. Para isso, realizamos um estudo experimental utilizando modelo bovino. Trinta e duas amostras de FF foram colhidas de 24 mulheres inférteis com endometriose (8 com I/II, 8 com III/IV sem endometrioma e 8 III/IV com endometrioma no ciclo) e 8 sem endometriose (controle) que foram submetidas à estimulação ovariana controlada para realização de injeção intracitoplasmática de espermatozoide. Complexos cumulus-oócitos (CCOs) imaturos de bovinos foram submetidos à MIV divididos em 9 grupos: sem FF (sem-FF), com 1% de FF de mulheres inférteis sem endometriose (FFControle) e com endometriose (FFEI/II, FFEIII/IV e FFEendometrioma) suplementados ou não com LC (0,6mg/mL) e ácidos graxos ômega-3 (0,4 nM de DHA e 0,6 nM de EPA) (FFControle+LC+n3, FFEI/II+LC+n3, FFEIII/IV+LC+n3 e FFEendometrioma+LC+n3). Após 22-24h de MIV, os oócitos foram denudados, fixados e armazenados para realização de imunofluorescência para visualização do fuso meiótico e cromossomos por microscopia confocal. As taxas de metáfase II (MII) e de MII normais foram comparadas entre os 9 grupos utilizando o teste do qui-quadrado (p<0,05). Um total de 1686 CCOs imaturos foram submetidos à MIV, e 1401 oócitos foram visualizados por microscopia confocal. A adição de FF de mulheres com endometriose ao meio de MIV reduziu a taxa de MII normais (FFEI/II: 62,2%, FFEIII/IV: 70,2% e FFEendometrioma: 72,7%) comparado aos grupos sem-FF (87,2%) e FFControle (87,2%). O grupo FFEendometrioma (69,3%) apresentou a menor taxa de MII comparado a todos os demais grupos (sem-FF: 91,9%, FFControle: 89,2%, FFControle+LC+n3: 89,2%, FFEI/II: 85,4%, FFEI/II+LC+n3: 85,3%, FFEIII/IV: 80,7%, FFEIII/IV+LC+n3: 90,8%, FFEndometrioma+LC+n3: 86,4%). O grupo FFEIII/IV apresentou menor taxa de MII comparado ao grupo sem-FF. No grupo com FFControle, a adição de LC+n3 não alterou as taxas de MII (89,2% vs 89,2) e de MII normais (87,2% vs 82,5%). No grupo FFEI/II, a adição de LC+n3 aumentou a taxa de MII normais (84,5% vs. 62,2%). No grupo FFEIII/IV a adição de LC+n3 aumentou a taxa de MII normais (70,2% vs 84,1%) e de MII (90,8%), que passou a ser semelhante a dos grupos sem-FF e FFControle. No grupo FFEendometrioma a adição de LC+n3 aumentou a taxa de MII normais (86,4%), comparado ao grupo FFEendometrioma (69,3%), a qual foi similar a dos grupos sem-FF e FFControle. Portanto, o FF de mulheres com endometriose prejudica o fuso meiótico e o alinhamento cromossômico de oócitos bovinos, independentemente, do estágio da doença. Entretanto, o avanço da endometriose e a presença de endometrioma parecem ter um impacto ainda mais negativo na qualidade oocitária, prejudicando também a maturação nuclear. A adição de LC+n3 previne os danos meióticos oocitários provocados pelo FF de mulheres com endometriose em estágios iniciais e avançados. Dessa forma, sugerimos que inflamação, o estresse oxidativo e a desregulação da ?-oxidação são fatores envolvidos na alteração da qualidade oocitária e, consequente, piora da fertilidade natural de mulheres com endometriose. / In the present study, we evaluated the impact of the addition of follicular fluid (FF) from infertile women without and with endometriosis in the early (I/II) and advanced stages [(III/IV) with and without endometrioma] to the in vitro maturation (IVM) medium on the meiotic normality rates of bovine oocytes. We evaluated whether L-carnitine (LC) and omega-3 fatty acids [n3, docosahexaenoic (DHA) and eicosapentaenoic acid (EPA)] were able to prevent bovine meiotic oocyte damage induced by FF from infertile women with endometriosis in stages I/II and III/IV during IVM. For this, we performed an experimental study using bovine model. Thirty-two FF samples were collected from 24 infertile women with endometriosis (8 with I/II, 8 with III/IV without endometrioma and 8 III/IV with endometrioma in the cycle) and 8 without endometriosis (control) who underwent to controlled ovarian stimulation for intracytoplasmic sperm injection. Immature cumulus oocytes complexes(COCs) of bovines were submitted to IVM divided into 9 groups: without FF (No-FF), with 1% FF of infertile women without endometriosis (FFControl) and with endometriosis (FFEI/II, FFEIII/IV and FFEendometrioma) supplemented or not with LC (0.6 mg/mL) and omega-3 fatty acids (0.4 nM DHA and 0.6 nM EPA) (FFControl+LC+n3, FFEI/II+LC+n3, FFEIII/IV+LC+n3 and FFEendometrioma+LC+n3). After 22-24h of IVM, the oocytes were denuded, fixed and stored for subsequent immunofluorescence to visualize the meiotic spindle and chromosomes by confocal microscopy. The metaphase II (MII) and normal MII rates were compared between the 9 groups using the chi-square test (p <0.05). A total of 1686 immature COCs were submitted to IVM, and 1401 oocytes were visualized by confocal microscopy. Addition of FF from women with endometriosis to the IVM medium decreased the rate of normal MII (FFEI/II: 62.2%, FFEIII/IV: 70.2% and FFEendometrioma: 72.7%) compared to the No-FF (87.2%) and FFControl (87.2%) groups. The FFEendometrioma group (69.3%) presented the lowest rate of MII compared to all other groups (No-FF: 91.9%, FFControl: 89.2%, FFControl+LC+n3: 89.2%, FFEI/II: 85.4%, FFEI/II+LC+n3: 85.3%, FFEIII/IV: 80.7%, FFEIII/IV+LC+n3: 90.8%, FFEndometrioma+LC+n3: 86.4%). The FFEIII/IV group had a lower MII rate compared to the No-FF group. In the group with FFControl, the addition of LC+n3 did not change the rates of MII (89.2% vs 89.2%) and normal MII (87.2% vs 82.5%). In the FFEI/II group, the addition of LC+n3 increased the normal MII rate (84.5% vs 62.2%). In the FFEIII/IV group, the addition of LC+n3 increased the normal MII rate (70.2% vs 84.1%) and MII (90.8%), which was similar to that of the No-FF and FFControl. In the FFEendometrioma group, the addition of LC+n3 increased the normal MII rate (69.3% vs 86.4%) which was similar to No-FF and FFControl groups. Therefore, the FF of women with endometriosis impairs the meiotic spindle and the chromosomal alignment of bovine oocytes, regardless of the stage of the disease. However, the progression of endometriosis and the presence of endometrioma appear to have an even more negative impact on oocyte quality, and also impairs nuclear maturation. The addition of LC+n3 prevents meiotic oocyte damages induced by FF from women with endometriosis in the early and advanced stages. Thus, we suggest that inflammation, oxidative stress and deregulation of ?-oxidation are factors involved in the alteration of oocyte quality and, consequently, worsening of the natural fertility of women with endometriosis.

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