Submitted by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-10-13T12:34:40Z No. of bitstreams: 1 Ana Isabel Reis Nascimento. Participação...2015.pdf: 1631129 bytes, checksum: d14aa063c882bb96ee29f85751abf2e6 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Maria Fiscina Sampaio (fiscina@bahia.fiocruz.br) on 2015-10-13T12:34:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 Ana Isabel Reis Nascimento. Participação...2015.pdf: 1631129 bytes, checksum: d14aa063c882bb96ee29f85751abf2e6 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-10-13T12:34:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ana Isabel Reis Nascimento. Participação...2015.pdf: 1631129 bytes, checksum: d14aa063c882bb96ee29f85751abf2e6 (MD5) Previous issue date: 2015 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Gonçalo Moniz. Salvador, BA, Brasil / Alguns estudos sugerem que as vias opioidérgicas centrais parecem desempenhar um papel regulatório no controle da ingestão de água e sal em mamíferos. As ações dos opioides centrais sobre a regulação do controle hidroeletrolítico são mediadas por vários dos subtipos de receptores opioides. O papel dos receptores delta e kappa-opioides centrais neste processo não está adequadamente elucidado sendo necessário mais estudos que o esclareçam. Objetivo: Este estudo investigou o envolvimento dos receptores delta e kappa-opioides centrais no apetite por sódio em ratos depletados deste íon e em rato ativados centralmente com angiotensina. Material e Métodos: Foram utilizados ratos Wistar (270 ± 20 g), submetidos à cirurgia estereotáxica para implante de cânula guia no ventrículo lateral esquerdo (VL), no órgão subfornical (OSF), no núcleo preóptico mediano (MnPO) e no núcleo basolateral da amígdala (BLA). No protocolo de depleção de sódio os animais foram submetidos à injeção subcutânea de furosemida combinada com dieta hipossódica quatro dias após a cirurgia. Neste modelo de estudo os animais receberam injeção intracerebroventricular (i.c.v.) do antagonista delta-opioide naltrindole no quinto dia pós-cirúrgico, nas doses de 5, 10 e 20 nmol/2 μL e do antagonista kappa-opioide, norbinaltorfimina, injetado no OSF, MnPO e BLA, nas doses de 0,5, 1,0 e 2,0 nmol/0,2 μL.. O agonista específico para os receptores delta-opioides, deltorfina II (2,5, 5,0, 10 e 20 nmol/2 μL), foi injetado i.c.v. em animais depletados de sódio pré-tratados com naltrindole na dose de 20 nmol/2 μL e em animais repletos de sódio na dose de 20 nmol/2 μL. O agonista kappa-opioide, ICI199,441 (2,0 nmol/0,2 μL) foi injetado no OSF, MnPO e BLA em animais depletados de sódio pré-tratados com norbinaltorfimina 2,0 nmol/0,2 μL e em animais repletos de sódio na dose de 2,0 nmol/0,2 μL. Bebedouros de água destilada (H2Od) e de salina foram introduzidos nas caixas15 minutos após a injeção central e tiveram seus volumes monitorados nos tempos 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90 e 120 minutos, após a colocação dos bebedouros. No protocolo de ativação angiotensinérgica central, quarto dia após a cirurgia os animais sofreram administração i.c.v. de naltrindole (5, 10 e 20 nmol/2 μL) 15 minutos antes de receberem injeções de angiotensina II na dose de 10 ng/2 μL. Os bebedouros de H2Od e de solução salina foram introduzidos nas caixas logo após a segunda injeção e tiveram seus volumes monitorados nos tempos 5, 10, 15, 30, 45, 60, 90 e 120 minutos, após a colocação dos bebedouros. Para verificar a especificidade de ação dos antagonistas opioides os animais foram submetidos aos testes de sobremesa, campo aberto e medida da pressão arterial. A análise estatística utilizada foi ANOVA modelo misto para medidas repetidas seguida do pós-teste de Bonferroni para múltiplas comparações dos volumes ingeridos e teste “t” de Student não pareado para análise dos testes de comportamento, através do programa GraphPad Prism 6.0. Resultados: Os grupos de ratos que receberam injeções i.c.v. de naltrindole após depleção de sódio e ativação angiotensinérgica central, apresentaram redução estatisticamente significante na ingestão de salina quando comparados ao grupo de animais controles. Os ratos que receberam injeção de norbinaltorfimina no OSF, MnPO e BLA após depleção de sódio apresentaram redução estatisticamente significante na ingestão de salina quando comparados ao grupo de animais controles. A estimulação dos receptores delta-opioides em animais repletos de sódio aumentou a ingestão de salina hipertônica. Conclusões: Os dados presentes sugerem que os receptores delta-opioides centrais e os receptores kappa-opioides localizados no OSF, MnPO e BLA parecem desempenhar papel fundamental na expressão do comportamento de aquisição de sal em ratos que sofreram depleção de sódio e ativação central do apetite por sódio induzido pela via angiotensinérgica. / Central opioid pathways seem to have an important role on the control of water and salt intake in mammals, and brain opioid peptides may influence hydroelectrolyte balance through a myriad of actions mediated by distinct opioid receptors. The specific role of central delta and kappa-opioid receptors (DOR and KOR) in this process is far from being fully understood. In the present work, we investigated the role of those receptors in the control of water and salt intake, in sodium-depleted rats and rats with activation central angiotensinergic. Method: Wistar male rats (250 ± 20 g) were used in the experiment after stereotaxic cannulation of the VL left, SFO, MnPO and BLA. To study the effect of the blockade of central DOR and KOR on water and salt intake in rats were sodium depleted by the concomitant use of s.c. injections of furosemide and were kept in hypossodic diet, five days after surgery. In the sixth day, they received i.c.v. injections of a selective delta-opioid receptor antagonist (naltrindole) at the doses of 5, 10 and 20 nmol/2 μL and injections in the SFO, MnPO and BLA of a selective kappa-opioid receptor antagonist (norbinaltorphimine) at the doses of 0.5, 1.0 and 2.0 nmol/0.2 μL. The specific agonist for delta-opioid receptor deltorphin II (2.5, 5.0, 10 and 20 nmol / 2 !L) was injected i.c.v. in animals depleted pretreated with sodium naltrindole at the dose 20 nmol /2 !L . The kappa-opioid agonist, ICI199,441 (2 nmol /0.2 !L) was injected into the SFO, MnPO and BLA in animals depleted pretreated with sodium norbinaltorphimine 2.0 nmol / 0.2 !L. Bottles containing water or hypertonic saline solution were introduced into the cages 15 min after the central administration. To study the effect of the blockade of central DOR and KOR on water and salt intake in animals after central angiotensinergic stimulation, the animals received intracerebroventricular injections of naltrindole at the doses of 5, 10 and 20 nmol/2 μL 30 min before receiving central injections of angiotensin II at the dose of 10 ng/2 μL. In this case, bottles containing water or hypertonic saline solution were introduced into the cages immediately after the central administration of angiotensin II. Water and salt intake were recorded for the next 2 hours after the introduction of the bottles into the cages. To verify the specificity of action of opioid antagonists animals were submitted to the dessert test, open field and measurement of blood pressure. Data were analyzed by Two-Way ANOVA mixed model followed by Bonferroni as post-hoc test. Results: The groups of rats that received i.c.v. injections naltrindole after sodium depletion and central angiotensinergic activation, showed a statistically significant reduction in salt intake when compared to control animals group. Rats receiving norbialtorphimine injection in the SFO, MnPO and BLA after sodium depletion showed a statistically significant reduction in salt intake when compared to control animals group. The stimulation of delta-opioid receptors in animals full of sodium increased intake of hypertonic saline. Conclusions: The present data suggest that the delta-opioid receptors central, and the kappa-opioid receptors located in the SFO, MnPO and BLA appear to play a key role in the expression of the salt acquisition behavior in rats with sodium appetite.