Le lymphome de Hodgkin est un cancer des ganglions lymphatiques caractérisé par la présence de cellules multinucléées Reed-Sternberg et de leur précurseur, les cellules mononucléées de Hodgkin. Ces cellules sont les cellules diagnostiques de ce cancer. Elles sont responsables de certains symptômes ressentis par les patients et aussi des cas de résistances aux agents thérapeutiques lors des traitements. Dans 10 à 20 % des cas de lymphome de Hodgkin, les patients ne répondent pas aux traitements et décèdent ou encore souffrnt de rechutes ou de complications qui se développent suite à l'exposition aux agents chimio- et radiothérapeutiques. Ces problèmes amènent un besoin de cibler de nouvelles avenues pour développer des traitements plus spécifiques permettant de diminuer les doses et d'augmenter le taux de réussite des traitements pour ce cancer. L'approche utilisée dans ce travail est l'étude du phénomène qui amène la multinucléation des cellules. En effet, les cellules mononucléées de Hodgkin subissent divers dommages qui amènent ces dernières à l'endomitose et puis à la multinucléation. II est connu que le virus Epstein-Barr joue un rôle dans le developpement de divers cancer, incluant le lymphome de Hodgkin, toutefois, le mécanisme par lequel ce virus provoque le développement du cancer est inconnu. L'oncoprotéine LMP1, exprimée par le virus Epstein-Barr, est le princical oncogène du virus, cette protéine, lorsqu'exprimée dans certaines lignées cellulaires hodgkiniennes amène la multinucléation des cellules. Ce phénomène est accompagné par la diminution de l'expression des protéines du complexe des shelterins TRF1, TRF2 et POT! dans la lignée cellulaire BJAB tTA LMP1. Ces protéines ont pour rôle de protéger l'intégrité des télomères et en présence de LMP1, ces dernières sont inhibées. Les problèmes pouvant résulter de la déprotection des télomères sont nombreux, notamment, il peut y avoir des jonctions d'extrémités non homologues qui amènent la fusion de chromosomes voisins ce qui provoque des complications au niveau de la mitose. Dans cet ouvrage, l'impact de la déprotection des télomères sur la multinucléation des cellules B est étudié avec un modèle d'induction de la protéine LMP1 et avec un système d'inhibition des protéines TRF2 et POT1.

No / It is known that cells within the inflammatory background in classical Hodgkin lymphoma (cHL) provide signals essential for the continual survival of the neoplastic Hodgkin and Reed-Sternberg (HRS) cells. However, the mechanisms underlying the recruitment of this inflammatory infiltrate into the involved lymph nodes are less well understood. In this study, we show in vitro that HRS cells secrete lymphotoxin-α (LTα) which acts on endothelial cells to upregulate the expression of adhesion molecules that are important for T cell recruitment. LTα also enhances the expression of hyaluronan which preferentially contributes to the recruitment of CD4+ CD45RA+ naïve T cells under in vitro defined flow conditions. Enhanced expression of LTα in HRS cells and tissue stroma; and hyaluronan on endothelial cells are readily detected in involved lymph nodes from cHL patients. Our study also shows that although NF-κB and AP-1 are involved, the cyclooxygenase (COX) pathway is the dominant regulator of LTα production in HRS cells. Using pharmacological inhibitors, our data suggest that activity of COX1, but not of COX2, directly regulates the expression of nuclear c-Fos in HRS cells. Our findings suggest that HRS cell-derived LTα is an important mediator that contributes to T cell recruitment into lesional lymph nodes in cHL.

Hodgkin und Reed-Sternberg (H/RS) Zellen sind die Tumorzellen des klassischen Hodgkin-Lymphoms (cHL) und stammen in den meisten Fällen von Keimzentrums B-Zellen, sehr selten von T-Zellen ab. Als einen zentralen Mechanismus für die zelluläre maligne Transformation und Apoptoseresistenz von H/RS Zellen konnte eine deregulierte, konstitutive Aktivität des Transkriptionsfaktors NF-kappaB (NF-kB) in H/RS Zellkernen nachgewiesen werden. Die transkriptionelle Aktivität von NF-kB wird durch spezifische Inhibitoren, IkB-alpha, IkB-beta, IkB-gamma und IkB-epsilon, reguliert. Jüngst konnte ein Defekt des IkB-alpha Gens im Primärmaterial eines Patienten mit cHL und in zwei Hodgkin Zellinien nachgewiesen werden. IkB-epsilon als ein weiterer wichtiger Regulator der NF-kB Aktivität hat in murinen Zellen eine hohe Affinität zur NF-kB Untereinheit p65, welche in H/RS Zellen insbesondere als Heterodimer p50/p65 vorkommt. In dieser Arbeit wurde das humane IkB-epsilon Gen kloniert und auf Mutationen in primären Tumorzellen untersucht. Das Primärmaterial stammte aus denselben sechs Patientenfällen, die schon zuvor auf Mutationen des IkB-alpha Gens untersucht worden waren. Das IkB-epsilon Gen liegt auf dem kurzen Arm des Chromosom 6 (6p21.1) und ist strukturell eng mit den anderen IkB Molekülen verwandt. In primären H/RS Zellen eines Patienten wurde eine homozygote Mutation an der 5´- Splicesite des Intron 1 gefunden. Diese Mutation war spezifisch für H/RS Zellen dieses Falls, und normale reaktive Lymphozyten wiesen ausschließlich den Wildtyp auf. In Zusammenschau mit den bisher identifizierten Defekten des IkB/ NF-kB Systems zeigen diese Ergebnisse, dass dysfunktionelle NF-kB Inhibitoren bei einem Teil der cHL Fälle zu einer Fehlregulation von NF-kB führen können und damit für die zelluläre Pathophysiologie von Bedeutung sind. / The pathogenesis of Hodgkin-Lymphoma (HL) is still unclear. Previous investigations have demonstrated constitutive nuclear activity of the transcription factor NF kappa B (NF-kB) in Hodgkin/Reed-Sternberg (HRS) cells as an important prerequisite in protecting these cells from apoptosis. As a molecular mechanism leading to constitutive NF-kB activity in HRS cells, mutations of the NF-kB inhibitor I kappaB-alpha have recently been identified in classical (c) HL-derived cell lines in a patient with cHL. In this work, the NF-kB inhibitor I kappaB-epsilon has been analysed for somatic mutations in the same group of six patients already studied for I kappaB-alpha mutations, as well as in cHL-derived cell lines. In the HRS cells of one patient, a hemizygous mutation affecting the 5-splicing site of intron 1 of the I kappaB-epsilon gene was found, most likely leading to misspliced mRNA products. Other work of our group showed a hemizygous frame-shift mutation of the I kappaB-epsilon gene in one cHL-derived cell line (L428), generating a pre-terminal stop codon resulting in a severely truncated protein. These results, in combination with recently described I kappaB-alpha mutations, indicate that defective NF-kB inhibitors appear more frequent than previously thought and might explain the constitutive nuclear activity of NF-kB in a significant proportion of cHL cases.