Heart transplantation is often the only therapeutic option for patients with end stage heart disease. Allograft organs are in short supply. Thus, preserving the life of a grafted organ is extremely important. Cardiac allograft vasculopathy (CAV) is an expression of chronic rejection that accounts for the greatest loss of graft function in transplanted hearts. Peri-transplant ischemia/reperfusion (I/R)-injury occurs during transplantation when blood flow is stopped to remove the heart from the donor and then is reinstated upon implantation of the donor heart into the recipient. This oxidative injury contributes to vascular dysfunction and CAV. In this dissertation, I hypothesize that prevention and/or reduction of I/R during transplantation reduces post-transplant vascular dysfunction and CAV. In this regard, myself and my colleagues examined the roles of apoptosis repressor with caspase recruitment domain (ARC) and cytochrome p450 (CYP) 2C enzymes in UR-induced vascular dysfunction and CAV. ARC expression was detected in endothelial cells (ECs) and smooth muscle cells (SMCs); however, increased levels of ARC do not protect against oxidant injury. ARC overexpression did protect against oxidant-induced cell death in H9c2 rat embryonic myoblasts. We observed that ARC-overexpression prevented H9c2 differentiation into muscle cells. With our focus on vascular injury, we turned our attention to the CYP 2C enzymes. Both endothelium-dependent and independent vascular function was impaired following I/R. Pre-treatment with the CYP 2C inhibitor sulfaphenazole (SP) restored endothelial sensitivity to acetylcholine, but did not restore sensitivity to endothelium-independent vasodilators. Rat heterotopic heart transplants were performed with rats being treated with SP or vector control prior to surgery. Rats treated with SP showed significantly reduced luminal narrowing and had decreased SMC proliferation, oxidant and interferon-y levels. No differences were detected in immune infiltration or apoptosis. Complementary studies in cultured vascular cells revealed that CYP 2C9 expression decreased viability and increased ROS production following hypoxia and re-oxygenation in ECs but not in SMCs. In summary, we did not detect protection of vascular cells by ARC, but did discover a novel role for ARC in differentiation. CYP 2C contributes to post-ischemic vascular dysfunction and CAV through increased oxidative stress and endothelial dysfunction.

L’ischémie reperfusion pulmonaire et sa traduction clinique la dysfonction primaire du greffon sont responsables d’une morbi-mortalité importante en transplantation pulmonaire aussi bien à court terme qu’à long terme. Nous avons voulu faire la démonstration de la pertinence des microparticules comme marqueur de l’ischémie reperfusion pulmonaire. Nous avons reproduit et validé la stabilité d’un modèle de perfusion ventilation ex vivo de poumon de rat aussi bien en conditions normales (pas d’ischémie pulmonaire avant reperfusion) qu’en conditions extrêmes (1 h d’ischémie chaude avant reperfusion pulmonaire). Nous avons étudié la génération de microparticules par des poumons soumis à des conditions variables d’ischémie froide et d’ischémie chaude. Les poumons soumis à de fortes conditions d’ischémie froide (20h) produisent un pic précoce de microparticules d’origine épithéliale alvéolaire, leucocytaire et endothéliale. Nous en concluons que le modèle de perfusion ventilation ex vivo de poumons de rats est un modèle pertinent pour l’étude des réactions d’ischémie reperfusion. Les microparticules apparaissent comme un marqueur précoce des lésions d’ischémie reperfusion pulmonaires dans ce modèle. / Lung ischemia reperfusion and its clinical expression as primary graft dysfunction are provider of immediate and long term morbidity and mortality for patients. We aimed at demonstrating the usefulness and relevance of microparticles as biomarkers for lung ischemia reperfusion injury. We first reproduced an ex vivo rat lung perfusion and ventilation experimental model. Stability of the model was validated for normal conditions (no ischemia before reperfusion) as well as for extreme conditions (1 hour warm ischemia before reperfusion). The generation of microparticles was studied in that model for variable conditions of cold ischemia and for warm ischemia. Lung submitted to strong ischemic injury (20hours cold ischemia) generate an early pike of microparticles originated from leukocyes, endothelial cells, and epithelial alveolar cells. We may conclude the ex vivo model of rat lung perfusion and ventilation is relevant for the study of lung ischemia reperfusion injury. Microparticles are relevant markers of rat lung ischemia reperfusion injury in our model.

Heart transplantation is often the only therapeutic option for patients with end stage heart disease. Allograft organs are in short supply. Thus, preserving the life of a grafted organ is extremely important. Cardiac allograft vasculopathy (CAV) is an expression of chronic rejection that accounts for the greatest loss of graft function in transplanted hearts. Peri-transplant ischemia/reperfusion (I/R)-injury occurs during transplantation when blood flow is stopped to remove the heart from the donor and then is reinstated upon implantation of the donor heart into the recipient. This oxidative injury contributes to vascular dysfunction and CAV. In this dissertation, I hypothesize that prevention and/or reduction of I/R during transplantation reduces post-transplant vascular dysfunction and CAV. In this regard, myself and my colleagues examined the roles of apoptosis repressor with caspase recruitment domain (ARC) and cytochrome p450 (CYP) 2C enzymes in UR-induced vascular dysfunction and CAV. ARC expression was detected in endothelial cells (ECs) and smooth muscle cells (SMCs); however, increased levels of ARC do not protect against oxidant injury. ARC overexpression did protect against oxidant-induced cell death in H9c2 rat embryonic myoblasts. We observed that ARC-overexpression prevented H9c2 differentiation into muscle cells. With our focus on vascular injury, we turned our attention to the CYP 2C enzymes. Both endothelium-dependent and independent vascular function was impaired following I/R. Pre-treatment with the CYP 2C inhibitor sulfaphenazole (SP) restored endothelial sensitivity to acetylcholine, but did not restore sensitivity to endothelium-independent vasodilators. Rat heterotopic heart transplants were performed with rats being treated with SP or vector control prior to surgery. Rats treated with SP showed significantly reduced luminal narrowing and had decreased SMC proliferation, oxidant and interferon-y levels. No differences were detected in immune infiltration or apoptosis. Complementary studies in cultured vascular cells revealed that CYP 2C9 expression decreased viability and increased ROS production following hypoxia and re-oxygenation in ECs but not in SMCs. In summary, we did not detect protection of vascular cells by ARC, but did discover a novel role for ARC in differentiation. CYP 2C contributes to post-ischemic vascular dysfunction and CAV through increased oxidative stress and endothelial dysfunction. / Medicine, Faculty of / Pathology and Laboratory Medicine, Department of / Graduate

This study was aimed at characterizing the apoptotic response equine small intestine subjected to experimental ischemia-reperfusion injury and determining if use of an angiotensin converting enzyme inhibitor (enalaprilat) would ameliorate the apoptotic response. It was designed to determine if mucosal epithelial cells undergo apoptosis during the ischemia phase and also examined if apoptosis is significantly exacerbated by reperfusion. It also investigated whether administration of enalaprilat decreased reperfusion injury secondary to reduced enterocyte apoptosis. Injury was induced using a low flow model of I-R. During celiotomy a single loop of jejunum was isolated and arterial flow decreased to 20% of baseline for one hour and complete occlusion for a second hour. Reperfusion was monitored for 3 hours. A control group (n=6) were not treated while the treatment group (n=6) received 0.5 mg/kg enalaprilat in 0.9% NaCl immediately following ischemia. Jejunal samples were taken prior to the induction of ischemia, immediately post-ischemia and at 1, 2 and 3 hours of reperfusion. Samples were evaluated for gross tissue pathology with standard hematoxylin and eosin staining, the presence of apoptotic cells via TUNEL staining, and gene expression of three apoptosis related genes (bax, bcl-2, p53) using qPCR. Serum enalaprilat and ACE concentrations were determined from blood samples drawn concurrent with jejunal sampling using HPLC/MS and standard HPLC. Plasma enalaprilat concentrations were comparable to previous reports in awake horses. Enalaprilat appeared to have no effect on serum ACE concentrations, however a significant spike in ACE concentration occurred in the treatment group at 1 hour of reperfusion (P=0.0001). Grade of mucosal damage was not significantly different between control and treatment groups at any time point. Subjectively apoptotic index appeared to be higher in the treatment group at end ischemia and during reperfusion. There were no changes in expression of p53 or bcl-2 in either group. Bax expression was significantly decreased (P= 0.02) in the control group at 2 hours of reperfusion. Based on our data administration of an ACE inhibitor during anesthesia in horses with an ischemic segment of intestine confers no protective benefit and may be associated with increased intestinal injury and apoptosis. Lack of expression of p53, bax and bcl-2 suggests another apoptotic mechanism in equine ischemic intestine. / Master of Science

L'infarctus du myocarde est la première cause de mortalité cardiovasculaire dans les pays occidentaux. La reperfusion la plus précoce possible est actuellement le seul traitement validé pour réduire la taille d'infarctus, facteur pronostique fondamental de morbi-mortalité. Cependant, la reperfusion engendre des lésions d'ischémie-reperfusion (IR) irréversibles qui précipitent la mort par apoptose des cardiomyocytes. Une approche transcriptomique nous a permis d'identifier les gènes spécifiques du postconditionnement ischémique (PostC) dans le cœur de souris. Parmi ceux-ci, l'expression du gène codant pour le récepteur métabotrope de type 1 du glutamate (mGluR1) est augmentée par le PostC. L'objectif de mon travail de thèse a été d'étudier le rôle de mGluR1 au cours de l'IR myocardique. Notre stratégie, basée sur l'utilisation de souris knock-out, a permis de confirmer l'implication de mGluR1 dans la cardioprotection. L'injection de glutamate au moment de la reperfusion myocardique permet de diminuer significativement la taille de l'infarctus par inhibition de l'apoptose. Cet effet cardioprotecteur est diminué en présence de l'antagoniste spécifique YM 298198 ou en présence de wortmannin, inhibiteur de la PI3-kinase, activée dans la cascade de signalisation du récepteur. La réduction de la taille d'infarctus par le glutamate semble associée à une amélioration de la fonction contractile du ventricule gauche en échocardiographie (par speckle tracking, méthode de quantification de la déformation myocardique) dans un modèle murin d'IR myocardique. Ces résultats, bien que préliminaires, semblent prometteurs et nous permettent d'envisager une application clinique chez le patient coronarien. / Myocardial infarction is the major cause of cardiovascular mortality in western countries. Reperfusion as early as possible is the only treatment recognized to reduce infarct size, crucial prognostic factor of morbidity and mortality. However, reperfusion leads to ischemia-reperfusion (IR) injury leading to irreversible apoptotic death of cardiomyocytes. A transcriptomic approach has allowed us to identify genes specifically regulated upon ischemic postconditioning (PostC) in the mouse heart. Among them, the expression of the metabotropic glutamate receptor type 1 (mGluR1) gene is up-regulated by PostC. The aim of my thesis work was to study the role of mGluR1 during myocardial IR. Our strategy, based on the use of knockout mice, confirmed the involvement of mGluR1 in cardioprotection. Injection of glutamate at the time of reperfusion significantly reduced infarct size via apoptosis inhibition. This cardioprotective effect was reduced in presence of the specific antagonist YM 298198 or in presence of wortmannin, an inhibitor of PI3-kinase, which is activated downstream mGluR1. In our mouse model of myocardial IR injury, decrease in infarct size after glutamate treatment seems to be associated to an improved left ventricular contractile function assessed by echocardiography (speckle tracking method quantifying myocardial strain). These preliminary results are promising and allow us to consider a clinical trial for coronary patients.

Dans ce travail, nous avons montré qu'un nouveau ligand du TSPO, le TRO40303, possède des propriétés cardioprotectrices, confirmant que le TSPO joue un rôle important dans les effets délétères engendrés par l'ischémie-reperfusion myocardique. Des effets similaires ont déjà été observés avec d'autres ligands du TSPO, notamment le 4'-chlorodiazépam, mais le mécanisme d'action par lequel ces molécules exercent leur effet cardioprotecteur reste pour une large part encore mal connu. Nous avons montré chez le rat que la reperfusion d'un myocarde ischémié s'accompagne d'une augmentation du cholestérol mitochondrial, de la formation d'oxystérols et d'un stress oxydant majeur. Le 4'-chlorodiazépam inhibe ces effets et améliore les fonctions mitochondriales post-ischémiques, révélant que le TSPO est responsable du transport du cholestérol dans la mitochondrie cardiaque et que ce dernier, sous des formes oxydées ou non, pourrait participer aux effets délétères de la reperfusion. La limitation de l'entrée du cholestérol dans la mitochondrie lors de la reperfusion d'un myocarde ischémié est un mécanisme original qui pourrait donc contribuer à l'effet cardioprotecteur des ligands du TSPO. Enfin, nous avons montré que chez des rats génétiquement modifiés et associant hypercholestérolémie, obésité et diabète de type II, le cholestérol mitochondrial est d'une part très élevé, avec ou sans ischémie-reperfusion myocardique et d'autre part que le 4'-chlorodiazépam n'a pas d'effet sur le cholestérol mitochondrial après ischémie-reperfusion. Ces résultats suggèrent que les mécanismes d'action des ligands du TSPO sont probablement différents et que les traitements doivent être adaptés en présence de facteurs de co-morbidité. / In the present work we showed that a new TSPO ligand, TRO40303, has cardioprotective properties confirming that TSPO plays a key role in the deleterious effects of myocardial ischemia-reperfusion. Similar effects have been observed with other TSPO ligands, such as 4'-chlorodiazepam, but the mechanism of action of these molecules is not known. We showed that ischemia-reperfusion in rats increased mitochondrial concentration of cholesterol, oxysterol formation and oxidative stress. 4'-Chlorodiazepam inhibited these effects and improved post-ischemic mitochondrial functions, revealing that TSPO is responsible for cholesterol transport in cardiac mitochondria and that cholesterol, in oxidized or non-oxidized forms, could participate in the deleterious effects of reperfusion. The limitation of the increase in cholesterol in mitochondria during ischemia-reperfusion is an original mechanism which could contribute to the cardioprotective effect of TSPO ligands. We then showed, in genetically modified rats with hypercholesterolemia, obesity and type II diabetes, that the concentration of mitochondrial cholesterol is very high with or without ischemia-reperfusion. We further demonstrated that 4'-chlorodiazepam has no effect on mitochondrial cholesterol after ischemia-reperfusion. These results suggest that the mechanisms of action of TSPO ligands probably differ in these conditions and that treatment must be adapted in accordance with the presence of factors of co-morbidity.

Les objectifs de ce travail expérimental étaient : 1. Évaluer la place de la lactatémie capillaire comme dispositif de monitorage de l’ischémie et de la reperfusion tissulaire. 2. Comparer le suivi local du taux de lactate, au niveau du compartiment ischémié, par rapport au taux systémique du lactate lors des l’ischémie de membre, l’ischémie intestinale ainsi que durant le choc hémorragique. La mesure capillaire du taux de lactate pourrait permettre: 1. d’affirmer l’existence d’une ischémie tissulaire régionale. Le taux systémique du lactate ne permet ce diagnostic, 2. de confirmer l’efficacité d’une reperfusion au niveau d’un membre préalablement ischémique tandis que la mesure systémique des lactates ne le permet pas. L’affirmation de l’efficacité de la reperfusion et de sa constance, par une mesure aussi simple que la lactatémie capillaire compartimentale représente une avancée majeure en comparaison avec les autres méthodes existantes. La mesure capillaire du taux de lactate systémique dans une situation d’hypoperfusion par choc hémorragique n’est pas associée à augmentation du taux de lactate intra-musculaire. / Our objectives for this experimental work were: 1. Assessment of capillary lactate for tissue ischemia and reperfusion monitoring. 2. Compare the local and systemic capillary lactate time course during compartmental ischemia insults like limb ischemia, intestinal ischemia or during hemorrhagic shock. The capillary measurement of the lactate in IR could be interesting for: 1. Assessing a limb or intestinal tissue ischemia. On the opposite, the systemic measurement could not assess this diagnosis. 2. Assessing the efficiency of a limb reperfusion. On the opposite, the systemic measurement could not assess this diagnosis. The systemic capillary lactate measurement during haemorrhagic shock related hypo perfusion could not be associated with an increase in intra muscular lactate.

Introduction: La lésion d'ischémie - reperfusion (I/R) intestinale est associée à une mortalité élevée.Le rôle de la transmigration des neutrophiles est probablement essentiel dans le dysfonctionnement de la barrière induit par la lésion I/R et la nécrose subséquente. Le but de notre étude était d'évaluer, au niveau pré-clinique, la valeur thérapeutique potentielle du peptide P8RI (un agoniste de CD31) dans la lésion I/R de l'intestine grêle.Méthodes: I/R intestinale a été induite chez des rats Wistar par clampage de l'artère mésentérique supérieure (AMS) pendant 30 min suivi par 4 h de reperfusion. Trois groupes de rats ont été comparés:P8RI (n = 20, I/R et P8RI 2,5 mg/kg/h de reperfusion), I/R témoins positifs (n = 21, I/R et infusion de sérum physiologique) et témoins (n = 14, dissection de l'AMS sans clampage et infusion de sérum physiologique). La matrix métallopeptidase 9 (MMP-9) dans la plasma, le liquide péritonéal et l'intestin; la MPO intestinale, l'ADN libre plasmatique, les taux d'hémoglobine intraluminale e tl'épaisseur épithéliale ont été évalués comme marqueurs intermédiaires de la lésion intestinale. La détection du matériel génétique d'E.coli par PCR quantitative dans le sang a été également réalisée chez les témoins positifs et chez les rats traités par P8RI pendant la période de reperfusion. Le CD31clivé dans le plasma a été mesuré par une méthode d'ELISA maison. Résultats: La grade histologique de l'intestin grêle chez les animaux traités par P8RI est supérieur àcelui des témoins positifs d'I/R (p < 0,05). P8RI protège l'intestin grêle contre la destruction épithéliale induite par lésion I/R (p < 0,01). Il y a une corrélation négative significative entre l'abrasion épithéliale et le score de Chiu de classement histologique de la lésion I/R mésentérique (r = -0,7245, p < 0.001).P8RI protège l'intestin grêle de la MPO in situ, de la libération de la MMP-9 (p < 0,05) et des complications hémorragiques digestives causées par lésion I/R (p < 0,01). Les taux plasmatiques et péritonéaux accrus de MMP-9, induits par I/R, sont significativement réduits par P8RI (p < 0,05 et p <0,01, respectivement). L'ADN d'E.coli circulant est significativement plus élevé chez les rats de témoins positifs que dans le groupe P8RI (p < 0,05). L'ADN libre plasmatique pendant la reperfusion chez les rats de témoins positifs augmente significativement plus que celle des rats du groupe P8RI (p< 0,05). P8RI n'a aucun effet sur le compte neutrophilaire sanguin, mais induit une diminution significative de CD31 clivé dans le plasma pendant l'I/R mésentérique (p < 0,01). Les corrélations entre l'abrasion épithéliale et l'ADN libre, MMP-9, CD31 clivé plasmatiques, les taux de MMP-9 et MPO intestinale suggèrent que le mécanisme protecteur de P8RI implique l'inhibition de l'activation neutrophilaire, y compris le clivage de CD31. Conclusions: Cette étude suggère que le traitement par le peptide P8RI, un agoniste de CD31, réduit de la façon préventive, la lésion I/R de l'intestin grêle chez les rats. / Background: Intestinal ischemia/reperfusion (I/R) injury is associated with a high mortality. The roleof transmigration of PMNs is probably essential in I/R-induced intestinal barrier dysfunction andsubsequent necrosis. The aim of this study was to evaluate, at a preclinical level, the potentialtherapeutic value of P8RI peptide (a CD31 agonist), in small bowel I/R injury.Methods: Intestinal I/R was induced in Wistar rats by superior mesenteric artery (SMA) clamping for30 min followed by 4 h of reperfusion. Three groups of rats were compared: P8RI (n=20, I/R and P8RI2.5mg/kg/h infusion), I/R positive controls (n=21, I/R and normal saline infusion), and sham operatednegative controls (n=14, SMA dissection with no clamping and normal saline infusion). Plasma,peritoneal fluid and intestinal matrix metallopeptidase 9 (MMP-9), intestinal MPO, plasma cf-DNA,intraluminal hemoglobin levels and epithelial thickness were all evaluated as intermediate markers ofintestinal injury. Detection of E.coli genetic material by quantitative PCR in blood was also performedin I/R controls and P8RI-treated rats during the reperfusion period. Plasma cleaved CD31 wasmeasured by homemade ELISA.Results: The small bowel histologic grade in P8RI-treated animals was higher than in I/R controls (p <0.05). P8RI protected against epithelial destruction induced by I/R injury (p < 0.01). There was asignificant negative correlation between epithelial abrasion and Chiu's score of histologic grading ofmesenteric I/R injury (r = -0.7245, p < 0.001). P8RI protected the small bowel from in situ MPO andMMP-9 release (p < 0.05) and digestive bleeding complications due to I/R injury (p < 0.01). Theincreased plasma and peritoneal MMP-9 levels induced by I/R were significantly reduced by P8RI (p <0.05 and p < 0.01, respectively). Plasma cf-DNA during reperfusion in I/R controls increasedsignificantly more than in the P8RI group (p < 0.05). E.coli DNA was significantly higher in I/Rcontrols than in the P8RI group (p < 0.05). P8RI had no effect on blood neutrophil counts but induceda significant diminution of cleaved CD31 in plasma during mesenteric I/R (p < 0.01). Correlationsbetween epithelial abrasion and plasma cf-DNA, MMP-9, cleaved CD31, intestinal MMP-9 and MPOlevels suggest that the protective mechanism of P8RI might involve the inhibition of neutrophilactivation, including CD31 cleavage.Conclusions: This study suggests that a treatment by P8RI peptide, a CD31 agonist, reduces smallbowel I/R injury in rats

Diss. (sammanfattning) Göteborg : Göteborgs universitet, 2009. / Härtill 4 uppsatser.

La maladie cardiovasculaire la plus courante dans les pays industrialisés est la maladie coronarienne responsable d’une ischémie du tissu cardiaque pouvant conduire à l’infarctus du myocarde. Bien que les améliorations de la prise en charge aient considérablement réduit les délais de la reperfusion (seul remède à l’ischémie), l’ischémie/reperfusion (I/R) entraîne des dommages cellulaires et tissulaires ainsi qu’une diminution des capacités fonctionnelles du coeur. Il existe néanmoins des systèmes de cardioprotection endogènes (comme le préconditionnement (préC) ou le postconditionnement (postC)) que l’on peut activer via l’administration de substances pharmacologiques. L’élastine, une protéine fibreuse de la matrice extracellulaire, est responsable de l’élasticité de certains de nos tissus (poumons, peau, <). Des peptides issus de la dégradation de l’élastine (PE) exercent un effet cardioprotecteur envers l’I/R en activant la voie de survie cellulaire RISK. Dans des fibroblastes dermiques, la transduction du signal induit par les peptides d’élastine est médiée de façon précoce par un second messager : le lactosylcéramide (LacCer). Cette étude constitue une première approche des effets du LacCer dans la cardioprotection envers l’I/R. Nous avons montré que le LacCer est un médiateur précoce du signal cardioprotecteur induit par les PE et qu’il protège le coeur des dommages liés à l’I/R dans un modèle de coeur isolé et perfusé en postC. Lors du vieillissement, de nombreuses modifications physiologiques sont à l’origine d’une perte d’efficacité des mécanismes de cardioprotection. Dans ce travail, nous avons également étudié les effets cardioprotecteurs des PE, du LacCer et de l’inhibition de p38MAPK (une protéine probablement impliquée dans la perte des mécanismes cardioprotecteurs liée au vieillissement) envers les dommages liés à l’I/R chez les rats âgés. Nous avons montré que les PE exercent un effet cardioprotecteur en pré+postC contre l’I/R au niveau de la survie cellulaire et au niveau de la récupération des capacités contractiles cardiaques. Le LacCer n’exerce un effet protecteur qu’au niveau de la survie cellulaire et l’inhibition de p38MAPK entraine une meilleure récupération des capacités contractiles sans améliorer la survie cellulaire. / In developed countries the most common cardiovascular disease is coronary heart disease that is responsible for myocardial ischemia and can lead to myocardial infarction. Reperfusion is the only cure for ischemia. Care improvement has dramatically reduced reperfusion delay but ischemia/reperfusion (I/R) causes a lot of cellular and tissular damages and a reduction of cardiac contractile abilities. Nevertheless cardioprotective pathways (like preconditionning (preC) and postconditionning (postC) can be pharmacologically triggered to reduce I/R injury. Elastin is a fibrous protein from extracellular matrix and is responsible for tissues elasticity in lungs, skin, < Peptides derived from elastin fragmentation (EP) exhibit cardioprotective function against I/R by triggering the RISK pathway, a cell survival pathway. In dermic fibroblasts, elastin peptides pathway is mediated by an early messenger : lactosylcéramide (LacCer). In this work we have studied cardioprotective function of LacCer against I/R injury. We show that LacCer is an early messenger of EP cardioprotective pathway and that it also exhibits a cardioprotective function against I/R in an postconditionning isolated rat heart model. During ageing dramatic physiological modifications are responsible for a loss of efficiency of cardioprotection pathways. In this work we have also studied the potential cardioprotective function of EP, LacCer and p38MAPK inhibition (a protein presumably involved in loss of efficiency of cardioprotection pathways during ageing) against I/R injury in aged rats. We have shown that EP exhibit a cardioprotective function against I/R injury in aged rats as well as young rats in a pre+postconditionning protocol. EP enhance contractile abilities recovering and cell survival. LacCer improves only cell survival and p38MAPK inhibition improves only contractile abilities recovering