Les maladies cardiovasculaires consécutives à des accidents thromboemboliques représentent un véritable problème de santé publique tant par leur fréquence que par leur gravité. Utilisés pour la prévention ou pour le traitement des thromboses, les héparines et les antagonistes de la vitamine K constituent les deux pierres angulaires du traitement anticoagulant médicamenteux. Les travaux rapportés dans ce mémoire décrivent de nouvelles formes d’administration pour chacune de ces molécules. La première partie des travaux concerne la mise au point de deux nouveaux systèmes galéniques permettant l’administration orale de deux héparines de bas poids moléculaire (énoxaparine et bémiparine). Les deux nouveaux systèmes mis au point utilisent des procédés de fabrication très simples et largement répandus dans l’industrie pharmaceutique : la granulation et la pelletisation. L’utilisation de suspensions aqueuses commerciales d’éthylcellulose et de polyméthacrylate a permis l’éviction des solvants organiques des étapes de fabrication des granulés et des pellets d’héparine ce qui constitue un avantage certain en terme de sécurité, tant pour les opérateurs de production que pour les patients. Après administration orale chez le lapin, les granulés et les pellets d’héparines de bas poids moléculaire ont permis l’obtention d’activités anti-Xa supérieures au seuil thérapeutique de 0,2 U anti-Xa/ml. Par sa nature polycationique, l’Eudragit®RS30D, semble jouer un rôle important tant sur la libération des héparines que sur leur absorption par voie entérale. L’activité biologique des héparines fut conservée jusqu’à 4 et 7 mois respectivement pour les granulés et les pellets. Notre dernière étude a permis la fabrication de microparticules de warfarine à base de poly-e-caprolactone par la méthode de simple émulsion avec extraction et évaporation du solvant. L’incorporation de polyvinyl pyrrolidone au sein de la matrice polymérique a permis d’augmenter la quantité libérée de principe actif. L’administration des microparticules de warfarine par voie sous-cutanée à des lapins permit l’obtention de valeurs de rapport international normalisé comprises dans l’intervalle thérapeutique (INR 2-3) durant près de 30 heures. / Cardiovascular diseases resulting from thromboembolic events represent a real public health problem cause to their frequency and their severity. Used for the prevention or treatment of thrombosis, heparins and vitamin K antagonists are the two cornerstones of anticoagulant medication. The studies presented in this work describe new dosage forms for these molecules. The first two studies report the development of two new pharmaceutical systems allowing oral administration of low molecular weight heparins (enoxaparin and bemiparin). These systems were manufactured with very simple and widely used pharmaceutical processes: granulation and pelletization. The use of commercial aqueous suspensions of ethylcellulose and polymethacrylate has led to the elimination of organic solvents from the preparation of heparin granules and pellets, which insures the safety of the workers as well as the patients. After oral administration to rabbits, granules and pellets of low molecular weight heparins allowed obtaining anti-Xa activity above the therapeutic threshold of 0.2 U anti-Xa/ml. Thanks to its polycationic nature, Eudragit®RS30D seems to play an important role on the release of heparin from microparticles and, also on its oral absorption. The biological activity of heparins was maintained till 4 and 7 months for the granules and pellets, respectively. Our last study enabled the production of warfarin microparticles based on poly-e-caprolactone and, using the single o/w emulsion solvent extraction /evaporation method. The inclusion of polyvinyl pyrrolidone in the polymeric matrix allowed modifying the released kinetic of warfarin. The subcutaneous administration of warfarin microparticles to rabbits allowed obtaining therapeutical anticoagulant activity (INR 2-3) during 30 hours.

Les formes multiparticulaires injectables présentent l’inconvénient d’une libération initiale prématurée dont les conséquences sont une toxicité systémique si les concentrations sanguines du principe actif deviennent importantes ainsi qu’une modification de la libération. Pour résoudre ce problème, des microparticules composites ont été mises au point : il s’agit de microparticules encapsulant des nanoparticules. Le concept a d’abord été démontré in vitro en encapsulant des nanoparticules de poly(epsilon-caprolactone) dans un polymère non biodégradable en choisissant comme modèles une molécule de faible masse moléculaire (ibuprofène) et un peptide (acétate de triptoréline). L’originalité du travail réside dans le choix des polymères et des solvants retenus pour la fabrication des microparticules. Le solvant utilisé pour fabriquer les microparticules doit être un non-solvant du polymère des nanoparticules. L’acétate d’éthyle répondait à ces conditions puisqu’il ne dissout pas la poly(epsilon-caprolactone) mais que c’est un excellent solvant de l’éthylcellulose ou du polymère polycationique utilisé dans la première partie du travail. Sur la base d’études de libération in vitro, il a ainsi été démontré que les microparticules composites permettaient effectivement de fortement réduire cette libération précoce tout en continuant d’assurer une libération prolongée. Dans un deuxième temps, la réduction de la libération initiale a été confirmée par une étude in vivo chez le rat avec 2 principes actifs modèles : ibuprofène et insuline. Toutefois, le polymère de la matrice des microparticules a été remplacé par un copolymère biodégradable constitué d’acides lactique et glycolique. Il a été démontré que le nouveau concept de microparticules composites permettait de proposer une forme originale limitant la libération initiale des principes actifs suite à leur administration sous-cutanée ou intramusculaire tout en assurant une libération prolongée / Multiparticular injectable dosage forms present a burst effect known to lead to i) a systemic toxicoligal critical issue if blood concentrations of the drug are too high and ii) a change in the release profile due to a lower loading charge in microparticles. In order to solve this problem, composite microparticles have been developed: they consist in nanoparticles encapsulated in microparticles. Such a concept has been demonstrated in vitro by encapsulating poly(epsiloncaprolactone) nanoparticles in a non-biodegradable polymeric matrix with two model drugs: a small molecular weight drug (ibuprofene) and a peptide (triptorelin acetate). The novelty of the research work lies on the adequate choice of polymers and solvents used for microparticles manufacturing. Indeed, the solvent used to manufacture microparticles has to be a non-solvent of the nanoparticles polymer. Ethyl acetate was a good candidate since it does not dissolve poly(epsilon-caprolactone) nanoparticles but is an excellent solvent for ethylcellulose and the polycationic polymer used in the first part of the work. Based on in vitro release studies, it was demonstrated that composite microparticles allowed the initial release to be strongly reduced together with a prolonged release. In a second part, the burst release reduction has been confirmed in vivo in rats with 2 drug models: ibuprofen and insulin. However, the microparticles polymer matrix was replaced by a biodegradable copolymer made of lactic and glycolic acids. It has been demonstrated that the novel composite microparticles were an innovative dosage form able to control the initial burst release often associated to microparticles after sub-cutaneous or intramuscular administration while still maintaining the prolonged release of the encapsulated drugs. Such a result can be associated with the more difficult diffusion of the drug through the two consecutive polymeric barriers of nanoparticles and microparticles.

Les microparticules à base de copolymères d’acides lactique et glycolique (PLGA) sont biocompatibles et biodégradables tout en permettant de contrôler la libération des principes actifs pendant quelques jours à plusieurs mois. Récemment, des stratégies ont été développées pour améliorer les propriétés de ces polymères en introduisant des groupements fonctionnels le long de la chaîne polymérique dans le but de moduler la libération des principes actifs.L’un des objectifs de ce travail a été d’étudier le potentiel de nouveaux copolymères fonctionnalisés portant des groupements carboxyliques pour la préparation de systèmes à libération contrôlée. L’apomorphine est encapsulée comme principe actif modèle. Son effet thérapeutique reste limité de part son court temps de demi-vie et son puissant effet émétique. Ainsi, des microparticules biodégradables, assurant une libération contrôlée de l’apomorphine, amélioreraient son efficacité thérapeutique et l’observance du traitement en réduisant la fréquence d’administration et les effets secondaires systémiques. Les microparticules chargées en apomorphine ont été préparées par une méthode d’émulsion à partir des nouveaux polymères fonctionnalisés, et de PLGA 50:50 de différentes masses moléculaires, pour comparaison. Les microparticules obtenues ont été caractérisées par différentes techniques. Le contenu résiduel en dichlorométhane (utilisé au cours de la formulation) a été quantifié et la libération de l’apomorphine a été étudiée in vitro. L’utilisation des polymères fonctionnalisés portant des fonctions carboxyliques libres a mené à une efficacité d’encapsulation plus élevée en apomorphine, de plus bas taux résiduels en dichlorométhane et à des cinétiques de libération in vitro de l’apomorphine distinctes de celles obtenues avec les PLGA traditionnels. Ces résultats suggèrent une application prometteuse de ces polymères fonctionnalisés pour la libération contrôlée de principes actifs. Une étape d’optimisation a ensuite consisté à modifier les paramètres de formulation afin d’étudier leur influence sur les caractéristiques des microparticules produites. L’objectif était notamment d’améliorer l’efficacité d’encapsulation tout en limitant la libération initiale d’apomorphine pouvant engendrer des pics de concentration néfastes, à l’origine d’effets indésirables. Ainsi, certains paramètres de formulation ont été modulés au cours de la préparation des microparticules à base de PLGA 50:50 de 10 kDa. La sélection de paramètres optimaux a mené au développement d’une formulation assurant une libération d’ordre zéro de l’apomorphine sur une période de dix jours.En outre, la littérature met en évidence l’importance des études de libération in vitro au cours du développement des microparticules de PLGA. Cependant, aucune méthode n’étant décrite par les autorités réglementaires, des conditions très différentes sont utilisées en pratique et leur influence sur les cinétiques de libération est peu connue. Par conséquent, une partie de ce travail a consisté à évaluer l’impact des conditions expérimentales sur les essais de libération in vitro à partir des microparticules. Différents systèmes couramment utilisés ont été employés pour les études de libération. Différents principes actifs modèles ont été encapsulés à différents taux de chargement et plusieurs techniques ont été utilisées pour caractériser les formulations obtenues. Des modèles mathématiques ont été appliqués pour mieux comprendre les phénomènes observés. Les résultats montrent que les conditions expérimentales peuvent influencer, de manière négligeable ou significative, les cinétiques de libération, en fonction du type de formulation et du système expérimental utilisé. Les différences observées peuvent être partiellement attribuées à des différences de mécanismes impliqués dans le processus de libération. Cet effet doit particulièrement être pris en considération avant de tirer toute conclusion à partir des études de libération in vitro. / Poly(lactic-co-glycolic) acid (PLGA)-based microparticles represent an attractive choice to sustain drug release over periods ranging from a few days up to several months, while ensuring good biocompatibility and complete biodegradability. Recently, tremendous efforts have been devoted to improve the properties of these copolymers by introducing functional groups along the polymeric chain, with the aim of modulating the drug release.On the one hand, the main objective of this work was to investigate the potential application of new functionalized copolymers bearing pendant carboxyl groups (PLA-co-PBED), as controlled drug delivery device. In this study, apomorphine was encapsulated as a model drug. Its therapeutic effect is limited due to its very short half-life and its strong emetic effect. Consequently, biodegradable microparticles would offer the advantage of improving therapeutic efficiency and compliance, by reducing administration frequency and minimizing systemic side effects. Apomorphine-loaded, PLA-co-PBED-based microparticles were prepared using an emulsion method. Microparticles based on PLGA 50:50 of different molecular weights were used as a reference. The obtained microparticles were characterized using various techniques. The residual content of dichloromethane (used as organic phase during microparticle preparation) was quantified and the in vitro release of apomorphine was studied. Interestingly, the functionalized polymers bearing free-carboxylic groups led to higher drug encapsulation efficiencies, lower residual contents of dichloromethane and different drug release patterns. These results suggest a promising application of these functionalized polymers to control drug release. Furthermore, the impact of the formulation parameters on the resulting physico-chemical properties of microparticles was studied. The main objective was to optimize the encapsulation efficiency, while minimizing initial burst release, to avoid toxic concentration peaks, and thus potential side effects. In this matter, some formulation parameters were varied during the preparation of microparticles based on PLGA 50:50 of 10 kDa. Optimal parameters were selected to achieve a zero-order apomorphine release over 10 days.On the other hand, it is well known that the in vitro drug release studies are crucial for the development of PLGA-based microparticles. However, as no standardized method has yet been established by authority agencies, very different methods are used in practice and their consequences on the resulting drug release kinetics are not well understood. Consequently, this work was intended to evaluate the impact of the experimental conditions on the resulting drug release kinetics from PLGA-based microparticles. Frequently applied setups were used. Different model drugs were encapsulated at different initial drug loadings. Various techniques were used to characterize the resulting formulations. Mathematical modeling was applied to better understand the observed phenomena. These results showed that the impact of the experimental conditions can be negligible or significant, depending on the type of formulation and the experimental setup. The observed differences could partially be explained by differences in the underlying drug release mechanisms. It can be concluded that great care must be taken when drawing conclusions from in vitro drug release measurements.

Pas de résumé en français / Pas de résumé en anglais

Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal.

La production de microparticules pendant le processus de cicatrisation par les myofibroblastes provenant de plaies est une nouvelle voie de recherche dans le domaine de la communication intercellulaire. À notre connaissance, l’étude de microparticules produites par les cellules de tissus est une première. Les microparticules sont perçues comme étant des cargos transporteurs de signaux. Afin de déterminer le type d’information que les microparticules produites par les myofibroblastes cicatriciels transportent, leur contenu protéique a été caractérisé. Trois techniques d’extraction des protéines couplées à l’analyse par spectrométrie de masse ont été utilisées : le 2D-DIGE, la méthode du Disc SDS-PAGE améliorée ainsi qu’un lysat total précipité à l’acétone. La liste de protéines obtenue a permis d’identifier l’implication potentielle des microparticules dans plusieurs voies signalétiques. La caractérisation du protéome des microparticules produites par les myofibroblastes cicatriciels permettra une meilleure compréhension de la communication intercellulaire qui se produit pendant le processus de cicatrisation. / Production of microparticles by myofibroblasts during wound healing process is a new finding in the field of cellular communication. To our knowledge, study of microparticles secreted by cell tissue is a premiere. Microparticles are thought to be carriers for signaling. To determine information carried by wound healing myofibroblast microparticles, their protein content has been characterized. Three means of protein extraction followed by mass spectrometry have been used : 2D-DIGE, improved Disc SDS-PAGE and acetone precipitation. The obtained list of proteins allows the identification of potential implication of microparticles in several pathways. Wound healing myofibroblast microparticles proteome characterization will help to better understand intercellular communication during wound healing.

De nos jours, la voie inhalée constitue le mode d’administration optimal dans le traitement de nombreuses affections respiratoires, et suscite beaucoup d’intérêt pour la délivrance systémique de médicaments. Cependant, le poumon est un organe complexe doté de mécanismes de défense efficients qui limitent la déposition des particules inhalées et les éliminent très rapidement. Cette voie d’administration fait donc l’objet de programmes de recherche intensifs visant à améliorer l’efficacité de la délivrance et la compliance du patient. Il faut néanmoins signaler que le nombre d’excipients dont l’innocuité a été démontrée en inhalation (sous forme de poudre sèche) reste extrêmement limité à l’heure actuelle. A cet égard, l’utilisation de microparticules lipidiques solides (mPLS), constituées d’un mélange de cholestérol et de phospholipides biodégradables et caractérisés par une température de transition de phase élevée, a été envisagée. Le procédé retenu pour la préparation de ces mPLS est la technique d’atomisation à température modérée (spray-drying). Dans un premier temps, le travail a consisté à mettre au point les conditions opératoires de fabrication (température et débit de l’air d’entrée et de sortie, débit de pulvérisation, pression et température de l’air de pulvérisation, etc.) ainsi que les paramètres de formulation (proportions de cholestérol / phospholipides / principe actif (PA)) afin d’obtenir de manière reproductible des microparticules présentant les caractéristiques appropriées pour une délivrance pulmonaire. Deux types de formes ont été développés : Une forme à poudre sèche dite conventionnelle (mélange physique PA-excipient). Les particules cohésives de PA sont mélangées au transporteur lipidique en vue d’améliorer leurs propriétés d’écoulement et de favoriser leur redispersion lors de l’inhalation. Une forme matricielle permettant également d’améliorer les propriétés d’écoulement et de dispersion, mais qui à la différence de la forme précédente ne nécessite pas d’étape de mélange. Elle consiste à incorporer le PA dans la masse lipidique. Dans ce cas-ci, l’utilisation de tels excipients a pour effet de modifier les propriétés de dissolution du PA et donc de contrôler sa vitesse de libération. Ensuite, les caractéristiques physico-chimiques des mPLS ont été évaluées. Celles-ci comprenaient aussi bien la taille et la distribution de taille (analyse granulométrique par diffraction laser) que la forme (analyse par microscopie électronique à balayage) et la densité des particules produites (analyse par tassement). Ont suivi les évaluations de l’état physique (polymorphisme) et des propriétés thermiques par calorimétrie à balayage différentiel et par diffraction aux rayons X. Le procédé de micronisation par atomisation a permis d’obtenir des microparticules sphériques de structure homogène dont la surface apparaît comme parfaitement lisse et régulière. Les mPLS, et plus particulièrement les formulations matricielles, se caractérisent par des densités relativement faibles et de bonnes propriétés d'écoulement. Les performances d’aérosolisation ont été étudiées au moyen de l’impacteur en verre et de l’impacteur liquide multi-étages. Les mPLS présentent un comportement aérodynamique remarquable ; les fractions pulmonaires (FP) sont significativement supérieures à celles des produits de référence (Pulmicortâ Turbohalerâ 200 µg et Flixotide® Diskusâ 250 µg) ainsi qu’à celles d’autres formulations conventionnelles délivrées via le même dispositif d’inhalation (Aeroliserâ). Puis, une étude de stabilité a été réalisée sur les formulations dont les propriétés satisfaisaient à nos exigences. Il en ressort que les mPLS conservent leurs caractéristiques initiales pour autant que les conditions de stockage ne dépassent pas les 30°C/65% HR. Dans le cadre de l’optimisation du processus de mélange de poudres à PA cohésif et faiblement dosé (destinées à une inhalation sous forme de poudre sèche), une étude a porté sur l’influence vis à vis de l’homogénéité du mode d’action et des caractéristiques de trois types de mélangeurs fréquemment employés pour effectuer des mélanges solides pulvérulents : un mélangeur à cuve mobile de type Turbula®, un mélangeur planétaire (Colette MP-20®) et un mélangeur-granulateur à haute vitesse (Mi-Pro®). Il a été démontré, par après, que les mélanges physiques PA-excipients lipidiques s’effectuent de façon efficace dans les conditions opératoires fixées. Finalement, une étude pharmaco-scintigraphique a été menée à l’Hôpital Erasme sur six volontaires sains. Les résultats de déposition pulmonaire sont en parfaite corrélation avec les valeurs de FP observées in vitro. En revanche, les résultats de l’analyse pharmacocinétique ne sont pas assez concluants pour mettre en évidence la régulation de la cinétique de libération du PA à partir des formes matricielles.

No description available.

Les microparticules (MP) sont des vésicules qui résultent du bourgeonnement des membranesdes cellules activées ou apoptotiques. Leur capacité à vectoriser des systèmes fonctionnelsexprimés par leurs cellules d’origine nous a conduit à explorer, la génération de plasmine àleur surface. Dans un premier travail, nous montrons que les MP dérivées de cellulesendothéliales (MPE) sont des surfaces catalytiques capables d’activer le plasminogène par lesystème de l’urokinase et de son récepteur (uPA/uPAR). Les MPE agissent comme desvecteurs de plasmine constituant une nouvelle voie dans la régulation des activitésprotéolytiques de l’endothélium. Dans un second travail, nous avons montré que l’uPA portéepar les cellules ou par les MPE est spécifiquement impliquée dans un mécanismereconnaissance du plasminogène lié à une autre surface biologique générant de la plasmine insitu avec une grande efficacité. Dans un troisième travail, nous montrons que cette activitéfibrinolytique est détectable sur les MP extraites de la circulation sanguine, où elle est plusspécifiquement portée par les sous populations endothéliales et leucocytaires. Cette activitéqui est dépendante de l’uPA mais aussi de l’activateur tissulaire du plasminogène, estmodulée dans des pathologies cardiovasculaires et auto-immunes. Dans une seconde partie, lapertinence de la mesure des MP comme biomarqueur en pratique clinique nous a amené ànous focaliser sur leurs méthodes d’analyse. En effet, à l’heure actuelle, l’évaluation dubénéfice apporté par les MP est limitée par un manque de standardisation des méthodologies.Dans ce travail, nous présentons une nouvelle stratégie de standardisation de la cytométrie enflux (CMF) et son évaluation dans le cadre d’une étude multicentrique utilisant des microbillesfluorescentes calibrées en taille. Enfin, nous discutons dans une revue les limitesactuelles de la CMF et les stratégies ou améliorations technologiques permettant de lesdépasser. / Microparticles (MP) are small vesicles resulting from the blebbing of cell membranes in response to activation or apoptosis. Because they express functional molecules from their parent cells, plasmin generation at their surface has been explored. First we have shown that endothelial derived MP (EMP) promote plasminogen activation at their surface in an urokinase and its receptor (uPA/uPAR) dependant manner. Thus, plasmin generation by EMP constitutes a new pathway for the regulation of the endothelium proteolytic activities. Second, we have shown that cellular or MP uPA is specifically involved in the recognition and effective activation of plasminogen bound to another biological surface. Third, we have demonstrated that circulating endothelial and leukocytes MP bear this plasminogenolytic activity which it not only uPA but also tissue-type plasminogen activator dependant and modulate in pathological settings such as cardiovascular and auto-immune diseases. Supported by this work, a patent on a method to measure MP plasmin activity has been filed. In a second part, we focused on analytical methods available to measure MP. Indeed, there is an increasing interest to measure MP as biomarker in clinical practice. However, the evaluation of their input for patients is impeding by methodological concerns and a lack of standardization so far. In this work, we present a new strategy based a size-calibrated fluorescent beads for the standardization of flow cytometry (FCM). This approach was evaluated in a multicentre study. Finally, we reviewed the present limitation of the FCM for MP measurement and the strategies or technological improvements to overcome them.

Des microparticules d’héparine de bas poids moléculaire (HBPM) ont été fabriquées suivant la méthode de la double émulsion à partir d’un polymère non biodégradable polycationique (Eudragit® RS) utilisé seul ou en mélange à différents pourcentages avec un polymère biodégradable (acide poly(lactique-co-glycolique)). Deux HBPM aux rapports anti-Xa/anti-IIa différents ont été testées : la nadroparine (3,6) et la tinzaparine (1,8). Les microparticules d’HBPM favorisent i) l’encapsulation des chaines longues actives (ACL) d’héparine par rapport aux chaines courtes actives (BCL) (diminution du rapport anti-Xa/anti-IIa) ii) la libération in vitro des chaines BCL (augmentation du rapport anti-Xa/anti-IIa), les chaines ACL étant fortement retenues au sein des microparticules. Cependant, la proportion de chaine BCL libérées par rapport à celle d’ACL est dépendante (cas de la nadroparine) ou non (cas de la tinzaparine) de la composition polymérique. Cette différence de comportement s’explique principalement par la capacité de l’Eudragit® RS à retenir les chaines ACL de nadroparine. Suite à l’administration orale de microparticules de nadroparine chez le lapin, une absorption des chaines ACL et BCL a été mise en évidence avec certaines formulations : dans ce cas, des rapports anti-Xa/anti-IIa plasmatique similaires à ceux résultant de l’injection sous-cutanée ont été obtenus, témoignant ainsi du potentiel de ces microparticules à remplacer la forme commerciale injectable. Lors d’études de localisation par microscopie confocale, le site d’absorption intestinal n’a pas été identifié. En revanche, des études de passage sur un épithélium issu de la culture cellulaire (Caco-2) semblent démontrer, contrairement aux résultats in vivo, que seules les chaines BCL de nadroparine seraient absorbées. Cependant, le mécanisme responsable du passage cellulaire reste à identifier. / Microparticles of low molecular weight heparin (LMWH) were prepared according to the double emulsion and extraction method using a non biodegradable polycationic polymer (Eudragit® RS) alone or blended according to different ratios with a biodegradable polymer (poly(lactic-co-glycolic) acid). Two LMWH presenting different anti-Xa/anti-IIa ratios were tested: nadroparin (3.6) and tinzaparin (1.8). LMWH microparticles facilitate i) the encapsulation of heparin active long chains (ACL) compared to active short chains (BCL) (anti-Xa/anti-IIa ratio decreased) ii) the in vitro release of short chains (anti-Xa/anti-IIa ratio increased) whereas long chains are held inside the microparticles. Nevertheless, when compared to ACL chains, the relative amount of BCL chains released is dependent (case of nadroparine) or not (case of tinzaparin) on the polymeric composition. This difference can be mainly due to the properties of Eudragit® RS to hold ACL chains of nadroparin. After an oral administration in rabbits of nadroparin microparticles, some formulations exhibited absorption of ACL and BCL chains: in this case, plasmatic anti-Xa/anti-IIa ratios in the same range than those observed following the subcutaneous injection were obtained. Such a result shows the potential of microparticles to be a good substitute of the commercial injectable dosage form, if the oral absorption is confirmed in human. During gastro-intestinal studies by confocal microscopy, the absorption site was not identified. Nevertheless, contrary to in vivo results, permeation studies on a cell cultured epithelium (Caco-2) demonstrated that BCL heparin chains were absorbed whereas ACL chains were not. However, the mechanism responsible of the cell permeation is still to be identified.