Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antibacteriana das soluções Tetraclean®, MTAD® e modificações desta formulação sobre uma cepa de Enterococcus faecalis pelo teste de contato direto e frente ao biofilme. Na metodologia de contato direto, uma suspensão de E. faecalis foi exposta às soluções irrigadoras, por períodos de 30 s, 1, 3 e 10 min, e um agente neutralizante foi utilizado. As colônias viáveis foram quantificadas após diluições seriadas e cultura em placas de ágar. Para determinação do número inicial de UFC, água esterilizada foi usada como controle. Para o crescimento do biofilme, amostras de biofilme dentário foram suspensas em BHI (Brain Heart Infusion), e incubadas por 14 dias em anaerobiose, tendo como substrato, discos de hidroxiapatita. Após o período de incubação, os biofilmes foram expostos às soluções irrigadoras por períodos de 30 s, 1 e 3 min. Os biofilmes corados com o Live/Dead Baclight stain (Molecular Probes, Europe BV), que diferencia células viáveis (verde) e células não-viáveis (vermelho) foram observados na microscopia confocal. As imagens do biofilme obtidas pelo software EZ-C1 for Nikon foram transferidas para análise quantitativa da proporção de células viáveis sobre o total de células do biofilme para o software Imaris 5.0. No teste de contato direto, o Tetraclean® eliminou completamente o E. faecalis em 30 s, enquanto o MTAD® e o MTAD® + CTR 0,01% eliminaram após 10 min, e o MTAD® + CTR 0,1% resultou em culturas negativas após 3 min de contato com a suspensão bacteriana. Quando removido o Tween 80 do MTAD®, e acrescida a CTR 0,01%, obteve-se culturas negativas após 1 minuto. Os resultados obtidos pelo método de exposição ao biofilme confirmaram os achados do teste de contato direto. / Abstract: The aim of this study was to evaluate the antibacterial effect of MTAD® and Tetraclean®. The tests were performed on Enterococcus faecalis using the direct exposure test and an in vitro biofilm model. Alternative formulations to MTAD® were also included in the experiments: MTAD® + 0.01% cetrimide (CTR); MTAD® + 0.1% CTR; MTAC (the detergent Tween 80 was substituted for cetrimide) with 0.01% CTR and MTAC (0.1% CTR). In the direct exposure test, a bacterial suspension was mixed with the irrigation solutions. After 30 seconds, 1 minute, 3 minutes and 10 minutes, an inactivator agent was used. The number or viable colonies were calculated after serial 10-fold dilutions and culture in agar plates. To calculate the initial number of colonies, sterilized water was used as a control. Dental biofilm samples were suspended in BHI broth and incubated in anaerobic conditions in hidroxiapatite discs. After incubation for 14 days, the biofilms were exposed to the irrigation solutions for 30 seconds, 1 minute and 3 minutes. Live/Dead Baclight stain (Molecular Probes, Europe BV) was used to diferentiate viable cells (Green) and non viable cells (Red). The samples were observed in the Confocal Laser Microscope. The biofilm images in 3D obtained in the EZ-C1 for Nikon software were transfered to quantitative analysis in the Imaris 5.0 software. The software calculated the ratio of green cells. In the direct exposure test, Tetraclean® and MTAC (0.1% CTR) erradicated E. faecalis in 30 s. MTAD® and MTAD® + 0.01% CTR eliminated E. faecalis after 10 min. MTAD® + 0.1% CTR resulted in negative culture after 3 min. Negative cultures were obtained after 1 min when MTAC (0.01% CTR) was used. The findings from the biofilm exposure method confirmed the results from direct exposure test. The Kruskal-Wallis statistical analysis showed a significant difference in time exposure to irrigant (P<0.001). / Orientador: Mario Roberto Leonardo / Coorientador: Markus Haapasalo / Banca: Mario Tanomaru Filho / Banca: Idomeo Bonetti Filho / Banca: Izabel Yoko Ito / Banca: Antonio Carlos Pizzolitto / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:33Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-05-30Bitstream added on 2014-06-13T21:02:44Z : No. of bitstreams: 1 pappen_fg_dr_arafo.pdf: 4993789 bytes, checksum: ca121f0b3da3d2618c6caa7970c772de (MD5) / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / O objetivo deste estudo foi avaliar a atividade antibacteriana das soluções Tetraclean®, MTAD® e modificações desta formulação sobre uma cepa de Enterococcus faecalis pelo teste de contato direto e frente ao biofilme. Na metodologia de contato direto, uma suspensão de E. faecalis foi exposta às soluções irrigadoras, por períodos de 30 s, 1, 3 e 10 min, e um agente neutralizante foi utilizado. As colônias viáveis foram quantificadas após diluições seriadas e cultura em placas de ágar. Para determinação do número inicial de UFC, água esterilizada foi usada como controle. Para o crescimento do biofilme, amostras de biofilme dentário foram suspensas em BHI (Brain Heart Infusion), e incubadas por 14 dias em anaerobiose, tendo como substrato, discos de hidroxiapatita. Após o período de incubação, os biofilmes foram expostos às soluções irrigadoras por períodos de 30 s, 1 e 3 min. Os biofilmes corados com o Live/Dead Baclight stain (Molecular Probes, Europe BV), que diferencia células viáveis (verde) e células não-viáveis (vermelho) foram observados na microscopia confocal. As imagens do biofilme obtidas pelo software EZ-C1 for Nikon foram transferidas para análise quantitativa da proporção de células viáveis sobre o total de células do biofilme para o software Imaris 5.0. No teste de contato direto, o Tetraclean® eliminou completamente o E. faecalis em 30 s, enquanto o MTAD® e o MTAD® + CTR 0,01% eliminaram após 10 min, e o MTAD® + CTR 0,1% resultou em culturas negativas após 3 min de contato com a suspensão bacteriana. Quando removido o Tween 80 do MTAD®, e acrescida a CTR 0,01%, obteve-se culturas negativas após 1 minuto. Os resultados obtidos pelo método de exposição ao biofilme confirmaram os achados do teste de contato direto. / The aim of this study was to evaluate the antibacterial effect of MTAD® and Tetraclean®. The tests were performed on Enterococcus faecalis using the direct exposure test and an in vitro biofilm model. Alternative formulations to MTAD® were also included in the experiments: MTAD® + 0.01% cetrimide (CTR); MTAD® + 0.1% CTR; MTAC (the detergent Tween 80 was substituted for cetrimide) with 0.01% CTR and MTAC (0.1% CTR). In the direct exposure test, a bacterial suspension was mixed with the irrigation solutions. After 30 seconds, 1 minute, 3 minutes and 10 minutes, an inactivator agent was used. The number or viable colonies were calculated after serial 10-fold dilutions and culture in agar plates. To calculate the initial number of colonies, sterilized water was used as a control. Dental biofilm samples were suspended in BHI broth and incubated in anaerobic conditions in hidroxiapatite discs. After incubation for 14 days, the biofilms were exposed to the irrigation solutions for 30 seconds, 1 minute and 3 minutes. Live/Dead Baclight stain (Molecular Probes, Europe BV) was used to diferentiate viable cells (Green) and non viable cells (Red). The samples were observed in the Confocal Laser Microscope. The biofilm images in 3D obtained in the EZ-C1 for Nikon software were transfered to quantitative analysis in the Imaris 5.0 software. The software calculated the ratio of green cells. In the direct exposure test, Tetraclean® and MTAC (0.1% CTR) erradicated E. faecalis in 30 s. MTAD® and MTAD® + 0.01% CTR eliminated E. faecalis after 10 min. MTAD® + 0.1% CTR resulted in negative culture after 3 min. Negative cultures were obtained after 1 min when MTAC (0.01% CTR) was used. The findings from the biofilm exposure method confirmed the results from direct exposure test. The Kruskal-Wallis statistical analysis showed a significant difference in time exposure to irrigant (P<0.001).

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Barreto.pdf: 1034059 bytes, checksum: 5377062c81444ca5492dea0991fb1683 (MD5) Previous issue date: 2016-04-25 / The aim of this study was to evaluate the influence of tree final irrigation systems: PPI (Positive Pressure Irrigation), PUI (Passive Ultrasonic Irrigation) and CUI (Continuous Ultrasonic Irrigation) on the push-out resistence of glass fiber posts, using 5.25% NaOCl (sodium hypochlorite) or 2% CHX (chrorexidine) as irrigation solution. Ninety 17 mm length bovine roots were endodontically treated up to K File #80, to a working length of 16mm, using crown-down technique. During the instrumentation all roots received 1ml of irrigation solution (5.25% NaOCl or 2% CHX) between each instrument using a Navitip® needle. The samples were randomly divided into six groups, according to final irrigation and activation system: PPIN (Control 1): PPI + 5.25% NaOCl; PUIN: PUI + 5.25% NaOCl; CUIN: CUI + 5.25% NaOCl; PPIC (Control 2): PPI + 2% CHX; PUIC: PUI + 2% CHX and CUIC: CUI + 2% CHX. For PPIN/PPIC a Navitip® needle was used to deliver the irrigation solution. For PUIN/PUIC the same Navitip® needle was used and the irrigant solution was activated by a stainless steel file E1 Irrisonic® mounted on a EMS® Ultrassonic unit, for 10-seconds. For CUIN/CUIC the irrigation and activation were performed by continuous agitation and irrigant solution delivery , for 10-seconds, using the same stainless steel file E1 Irrisonic® mounted on EMS® Ultrassonic unit. The final irrigation of all groups was performed using 2ml irrigation solution + 1ml 17% EDTA + 2ml irrigation solution. After canal preparation, the fiber posts Whitepost® DC n.2 were cemented with dual cure resin cement RelyX ARC® and adhesive system Single Bond Universal®. The roots were sectioned into 1mm-thick slices, on cervical, medial and apical thirds. After 7 days, the slices were submitted to push-out test on universal testing machine EMIC (0,5mm/min, 150N). Mean values of bond strength (BS) were compared using two-way ANOVA and Tukey’s test (p≤0.05). BS values (±dp) were: PPIN 4.46 (1.43); PUIN 6.13 (2.35); CUIN 7.41 (1.83); PPIC 3.59 (1.70); PUIC 5.49 (1.41); CUIC 6.0 (1.63). Comparing irrigation solutions, the results were similar with each irrigation systems. CUI showed the best bond strenght values and PPI the worst one, similar to PUI. Analyzing the root thirds, CUIN showed significant diferences at apical third and CUIC showed diferences at middle third. Conclusion: CUI was the best activation system, regardless of the irrigation solution choice, providing better results at fiber post bond strenght, mainly at apical third. / O objetivo neste estudo foi avaliar a influência de três técnicas de irrigação endodôntica: PPI (Irrigação por Pressão Positiva ou Irrigação Manual), PUI (Irrigação Ultrassônica Passiva) e CUI (Irrigação Ultrassônica Contínua), na resistência à extrusão (push-out) de pinos de fibra de vidro utilizando NaOCl 5,25% (hipoclorito de sódio) ou CHX 2% (clorexidina). Foram utilizados 90 dentes bovinos, as coroas cortadas com disco diamantado, obtendo-se raízes com 17 mm de comprimento. As raízes foram tratadas endodonticamente pela técnica coroa-ápice até o instrumento de memória n°80, a uma profundidade de 16 mm e divididas aleatoriamente em 6 grupos de acordo com o protocolo de ativação/substância química final: PPIN: PPI + NaOCl 5,25%; PUIN: PUI + NaOCl 5,25%; CUIN: CUI + NaOCl 5,25%; PPIC: PPI + CHX 2%; PUIC: PUI + CHX 2%; e CUIC: CUI + CHX 2%. A irrigação final de todos os grupos foi realizada com 2ml de substância química + 1ml de EDTA 17% + 1ml de substância química. Nos grupos PPIN e PPIC foram utilizadas pontas endodônticas Navitip® para a irrigação. Nos grupos PUIN e PUIC, foram utilizadas as mesmas pontas endodônticas Navitip® e ativadas passivamente com inserto E1 IRRISONIC® acoplado ao Ultrassom EMS® (10s), frequência de 32.000 Hz, sem renovação da substância química. Nos grupos CUIN e CUIC a substância química foi continuamente ativada e renovada com inserto E1 IRRISONIC® acoplado ao Ultrassom EMS® (10s). Todas as raízes foram lavadas com água destilada para remoção dos resíduos e secas com cones de papel absorvente. As raízes tiveram os ápices selados com gutta percha. Após o preparo dos condutos, foi feita a cimentação do pino de fibra de vidro Whitepost® DC n.2 com cimento resinoso dual RelyX ARC® e sistema adesivo Single Bond Universal®. As raízes foram seccionadas transversalmente em 9 fatias, de aproximadamente 1mm de espessura, divididas entre os terços cervical, médio e apical. Após 7 dias, as fatias foram submetidas ao teste de extrusão push-out em máquina de ensaio universal EMIC (0,5mm/min,150N). Os valores de resistência adesiva (RA) foram submetidos a ANOVA a 2 critérios e teste de Tukey para comparação das médias (p≤0,05). Resultados: Os valores médios em MPa (±dp) foram: PPIN 4,46 (1,43); PUIN 6,13 (2,35); CUIN 7,41 (1,83); PPIC 3,59 (1,70); PUIC 5,49 (1,41); CUIC 6,0 (1,63). Comparando-se as soluções irrigadoras, os resultados foram semelhantes com cada tipo de técnica. CUI foi a técnica que apresentou os melhores valores de adesão e PPI apresentou o menor valor, sendo semelhante à PUI. Analisando os terços radiculares, o grupo CUIN demonstrou diferença estatisticamente significante na região apical e médio respectivamente: 5,48 (2,47) e 5,92 (2,46). Conclusão: CUI foi a melhor técnica de irrigação em relação à adesão dos pinos de fibra de vidro, independentemente da solução irrigadora utilizada, influenciando positivamente na adesão da região apical.