La rosacée est une maladie inflammatoire chronique de la peau qui affecte presque exclusivement la peau faciale centrale. Actuellement, la morbidité de la rosacée en Chine augmente. Chaque signe clinique de la rosacée est lié à la pathogenèse de cette maladie cutanée dont la physiopathologie très complexe, implique différents types cellulaires et molécules de la peau et divers sous-types. Selon ces résultats, nous avons pu évaluer le rôle de la barrière cutanée et des microorganismes dans la rosacée. Le premier objectif de cette thèse était de déterminer si un microbiote cutané altéré est le résultat d'une pathophysiologie sous-jacente. Nous avons également comparé la rosacée chez des patients chinois et français en évaluant la fonction de la barrière cutanée. Ces tests aideront au choix de la thérapie la plus adaptée pour traiter des patients atteints de rosacée. A travers ces 4 années de recherche de thèse, nous avons montré que : • La biopsie standard de la surface de la peau est une bonne méthode pratique en clinique pour mesurer la densité de Demodex Folliculorum chez les patients atteints de rosacée et d'acné. Le RCM peut être un meilleur choix que le SSSB en raison de son exactitude, de son exhaustivité et de sa procédure indolore non invasive in vivo. RCM semble être plus sensible que son prédécesseur. D'après les résultats de l'analyse du nombre de Demodex dans les lésions de patients atteints de PPR, nous avons constaté que ce nombre est beaucoup plus élevé à Besançon qu'à Shanghai. Les caractéristiques physiologiques de la rosacée sont fortement associées aux interactions entre l'hôte et les micro-organismes, et nos données indiquent l'importance de la colonisation bactérienne. Dans la pathogenèse de la rosacée, il est donc souhaitable de prendre en compte l'altération du microbiote cutané et des réponses immunitaires.La MRC peut détecter dans la peau sensible et la rosacée, les structures endommagées par l'épidermolyse du patient, y compris la parakératose, le désordre en nid d'abeille. Elle pourrait être utilisée comme nouvelle méthode auxiliaire de détection et de diagnostic.l est important de prendre en compte l'association des microorganismes, des paramètres biophysiques de la peau, du microenvironnement et de la barrière cutanée, y compris les barrières physiques, chimiques et microbiennes, même dans la peau normale, dans la conception des produits de soins de la peau et des médicaments antimicrobiens / Rosacea is a common chronic inflammatory skin disease that almost exclusively affects the central facial skin. In these years, the morbidity ofrosacea in China has increased significantly. Each clinical signs of rosacea are related by the pathogenesis of this skin disease, and its pathophysiology is very complex, involving various cell types and molecules in the skin, and various subtypes. According these viewpoints, we chose the ERT and PPR patients, and focused on the microorganism and skin barrier to know more about the pathogenesis of rosacea. The first objective of this thesis was to know more about that whether the skin impaired microbiota is a response to changes in the skin microenvironment resulting from rosacea's underlying pathophysiology. And we also interested in the difference between the French rosacea patients and the Chinese patients in the skin barrier function. Another objective was to find the practical non-invasive testing technology to evaluate the rosacea patients'skin barrier damage condition and in the treatment efficacy. Through these testing, we could know more about the skin barrier situation of the patient, which will help us to choose the more suitable therapy approach for the long time treatment period for rosacea patients. Through these 4 years research of this thesis, we have shown that: Standardized Skin Surface Biopsy is a good practical method to measure Demodex Folliculorum density in rosacea and acne patients in clinical experience. RCM may be a better choice than SSSB because of its accuracy, completeness and as an in vivo noninvasive painless procedure. RCM appears to be a more sensitive method which could be used more in research or clinical studies or to follow up treatment or recurrence. According to the results of testing demodex number in les ions of PPR patients, we found that it was much higher in Besancon than Shanghai even ifwe used the same method. The physiological features of rosacea are strongly associated with the interactions between the host and microorganisms, and our data indicate the importance of the bacterial colonization balance on the skin surface. In the pathogenesis ofrosacea, we'd better to care more about the skin dysbiosis with the enhanced immunity responds. RCM can detect in sensitive skin and rosacea patient epidermal damaged structures, including parakeratosis, disarranged honeycomb pattern and reduced honeycomb pattern depth. lt could be used as a new kind of the new auxiliary method in the detection and diagnosis, providing the new mentality for the diagnosis and treatment. It is important that the association of microorganisms, skin biophysical parameters, microenvironment and skin barrier function including physical, chemical and microbial barriers even in normal skin, which is essential for designing skin care products and anti-microbial drugs

Demodex est un genre d’acariens dont deux espèces sont connues pour coloniser la peau de l’homme : Demodex folliculorum et Demodex brevis. Leur implication dans le développement de la rosacée reste controversée. Cette maladie est caractérisée par une inflammation chronique de la peau et est définie en quatre sous-type majeurs : la rosacée érythémato-télangiectasique (ETR), la rosacée papulopustuleuse (PPR), la rosacée phymateuse et la rosacée oculaire. Certains pensent que le rôle des acariens est principalement d’exacerber une inflammation déjà enclenchée. Toutefois, l’isolation par culture d’un Bacillus oleronius à partir du broyat d’un Demodex de patient atteint de rosacée papulopustuleuse ont remis sur le devant de la scène le rôle de l’acarien en tant que vecteur de bactéries pathogènes. Le but de notre étude était de décrire le microbiote associé au Demodex par clonage du gène de l’ARN ribosomal 16S afin d’identifier par la suite d’éventuelles différences en fonction du statut de l’hôte (ETR, PPR ou sain). Le microbiote décrit présentait une diversité jusqu’alors insoupçonnée. Une partie des espèces identifiées n’avaient jamais été rapportées chez l’homme, pouvant donc correspondre au microbiote spécifique de l’acarien. Il serait composé comme d’une majorité de Protéobactéries. De manière intéressante, les proportions des phyla majeurs étaient différentes en fonction du groupe étudié. De plus, il semblerait que certaines espèces soient spécifiques des Demodex collectés chez des patients atteints de rosacée. Par exemple, Bartonella quintana n’a été détectée qu’à partir de Demodex d’une patiente atteinte de rosacée érythémato-télangiectasique. / Demodex is a genus of mites comprising two species known to colonize human skin: Demodex folliculorum and Demodex brevis. Their role in the pathogenesis of rosacea remains controversial. Rosacea is defined by a chronic inflammation of the skin and four main subtypes are defined : erythematotelangiectasic rosacea (ETR), papulopustular rosacea (PPR), phymatous rosacea and ocular rosacea. Mites are thought to be only involved in the exacerbation of a pre-existing inflammation. The growth of Bacillus oleronius from a crushed Demodex mite collected on a PPR patient gave rise to a new hypothesis that the mite is actually the vector of pathogenic bacteria. Present study aimed at describing the microbiote associated with Demodex mites by a 16S rRNA clone library approach. This allowed us to compare the obtained bacterial communities according to the group of patients the mites were collected from (erythematotelangiectasic rosacea, papulopustular rosacea or healthy subjects). The microbiota described here revealed an unexpected diversity. Part of the identified species had never been reported on human beings and could thus represent the microbiota specific to Demodex. As in many arthropods, this microbiota was predominantly composed of Proteobacteria. Interestingly, the proportion of the main phyla Proteobacteria, Firmicutes and Actinobacteria differed according to the host status. Though, some species appeared to be specific to Demodex collected from patients with erythematotelangiectasic rosacea or papulopustular rosacea. Among them, we identified Bartonella quintana only from a mite collected on a patient with erythematotelangiectasic rosacea.