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Listeria monocytogenes : Caractérisation fonctionnelle d'un mutant ferritine. Etude de la biodiversité par une approche protéomique

Dumas, Emilie 04 July 2007 (has links) (PDF)
Listeria monocytogenes est l'agent étiologique de la listériose, une infection d'origine alimentaire peu fréquente mais avec un taux de mortalité de 25% chez l'homme. Nous avons d'abord caractérisé un mutant ferritine et montré l'importance du produit de ce gène dans la virulence, la résistance à des conditions de carence en fer et de stress thermique ou oxydatif. Nous nous sommes ensuite intéressés à la biodiversité de L. monocytogenes, par une approche protéomique, en étudiant 12 souches d'origines, de sérovars et de niveaux de virulence variés. Sur la base des profils des protéines intracellulaires et sécrétées, une classification hiérarchique a montré deux groupes distincts, l'un comprenant les souches de sérovar 1/2a, l'autre les souches de sérovar 4b et 1/2b. Des spots protéiques spécifiques de chaque souche et des différents sérovars ont été identifiés par spectrométrie de masse MALDI-TOF avec pour objectif de mieux hiérarchiser et gérer le risque dû à L. monocytogenes.
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Mise au point d'une épreuve ELISA indirecte pour la détection d'anticorps anti-leptospires chez l'espèce canine

Ribotta, Marcelo Juan 09 1900 (has links)
Mémoire numérisé par la Direction des bibliothèques de l'Université de Montréal. / Une épreuve ELISA indirecte a été développée pour la détection d'anticorps antileptospires dans des sérums d'origine canine. Une préparation antigénique spécifique de genre, stable à la chaleur et produite à partir de Leptospira interrogans sérovar Pomona a été utilisée dans cette technique immuno-enzymatique. D'autre part, une détermination de la prévalence des séroréacteurs envers différents sérovars de leptospires a été effectuée chez l'espèce canine au Québec, à raide du test ELISA et du test d'agglutination microscopique (MAT). La préparation antigénique, élaborée à partir du sérovar Pomona, a réagi avec les sérums de lapin contre les sérovars Bratislava, Pomona, Autumnalis, Grippotyphosa et Icterohaemorrhagiae. Cette technique ELISA a démontré une spécificité relative de 95.6% avec 158 sérums d'origine canine, lesquels étaient négatifs à une dilution de 1:100, par le MAT, envers les sérovars Pomona, Bratislava, Icterohaemorrhagiae, Autumnalis, Grippotyphosa et Hardjo. La sensibilité relative de l'épreuve a été de 100% avec 21 sérums d'origine canine, lesquels démontraient des titres supérieurs ou égaux à 1:100 envers un ou plusieurs sérovars. Parmi les chiens qui présentaient des titres d'anticorps anti-leptospires, le titre prédominant était dirigé contre le sérovar Pomona dans 66.7% des cas (14/21). Des titres prédominants contre le sérovar Bratislava ont été trouvés chez deux chiens, alors qu'un titre prédominant contre Grippotyphosa a été trouvé chez un seul animal. Quatre chiens ont uniquement présenté une réaction 1:100 contre le sérovar Icterohaemorrhagiae. Cette épreuve ELISA s'est avérée facile à standardiser et techniquement plus avantageuse que le MAT, par le fait qu'elle utilise une préparation antigénique qui peut être préparée de routine et en grandes quantités. En conclusion, il apparaît que cette épreuve est sensible et elle serait utilisable comme épreuve de tamisage pour la recherche d'anticorps anti-leptospires chez l'espèce canine, avec une confirmation subséquente des résultats positifs par le MAT.

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