Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2018. / Submitted by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-08-23T19:26:27Z No. of bitstreams: 1 2018_PaulaLorenaGrangeiraSouto.pdf: 2276578 bytes, checksum: 7c790f11bfc3aa7cf2eac6c91bc4d69c (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-08-29T16:49:41Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_PaulaLorenaGrangeiraSouto.pdf: 2276578 bytes, checksum: 7c790f11bfc3aa7cf2eac6c91bc4d69c (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-29T16:49:41Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_PaulaLorenaGrangeiraSouto.pdf: 2276578 bytes, checksum: 7c790f11bfc3aa7cf2eac6c91bc4d69c (MD5) Previous issue date: 2018-08-23 / O objetivo deste estudo foi comparar a qualidade seminal de touros localmente adaptados com touros de raça comercial criados na região do Planalto Sul Catarinense e analisar as relações com a adaptação climática. Características da morfologia externa dos touros, respostas fisiológicas e proteínas do plasma seminal foram investigadas no verão e no inverno. Em cada estação houve três coletas de sêmen por touro e as amostras foram avaliadas para motilidade total e vigor, concentração espermática, viabilidade das membranas e defeitos da célula. O plasma seminal foi obtido por centrifugação e submetido à proteômica por shotgun para identificação das proteínas. Dados ambientais como temperatura e umidade relativa do ar, temperatura do globo negro (BGT), índice de temperatura e umidade (ITU) e os índices de conforto térmico foram obtidos. As condições climáticas diferiram significativamente entre as estações. No Capítulo 2, concluiu-se que touros Crioulo Lageano e Angus apresentaram qualidade seminal similar e satisfatória ao longo do ano. Temperatura do ar, BGT e ITU foram os principais fatores que potencialmente afetariam as características espermáticas. No Capítulo 3, foi possível concluir que os touros experimentaram estresse térmico moderado no verão, o que levou a mudanças fisiológicas significativas, porém a normotermia foi mantida o que mostrou boa adaptação às condições climáticas da região estudada. Características de morfologia externa do animal foram as mais importantes para explicar as respostas fisiológicas, enquanto que no inverno prevaleceram as características climáticas. No Capítulo 4, determinou-se que houve efeito de raça e de estação sobre a abundância de proteínas no plasma seminal. Sugerese que as proteínas diferencialmente abundantes fazem parte dos mecanismos envolvidos com a adaptação climática e manutenção da homeostase dos touros. Este estudo contribui para o conhecimento sobre a fisiologia do trato reprodutivo de touros de raças localmente adaptadas e argumentam em favor da utilização das mesmas na cadeia pecuária. / This study aimed to compare the semen quality of locally adapted bulls with bulls of a commercial breed raised at Southern Highlands of Santa Catarina, as well as, to analyse the relationships with climate adaptation. Characteristics of the external morphology of the animals, physiological responses and proteins in the seminal plasma were investigated in summer and in winter. Semen samples were obtained three times in each season, from all bulls, and analysed for sperm motility, vigor, number of sperm per millilitre, sperm membrane status and sperm defects. Seminal plasma was obtained by centrifugation and the proteins identified by shotgun proteomics. Environmental data, such as air temperature, air humidity, black globe temperature (BGT), temperature humidity index (THI) and thermal comfort indexes were obtained. Climate conditions differed significantly between seasons. Chapter 2 unveiled that the semen quality of Crioulo Lageano and Angus bulls was similar and satisfactory across the year. Air temperature, BGT and THI were considered the most important factors that could affect seminal traits. In Chapter 3, it was possible to conclude that the bulls experienced moderate heat stress in summer, which led to significant physiological responses, but they were able to maintain normothermia, showing good adaptation to the climate conditions at the region studied. External morphological characteristics were highly important to explain physiological responses in summer, whereas in winter the climatic features prevailed. In Chapter 4, it was determined that season and breed influenced on the abundance of the proteins in seminal plasma. We suggest that the differentially abundant proteins are part of a range of mechanisms that participate in climate adaptation and homeostasis maintenance of the sires. This study contributes to the knowledge about the male physiology in locally adapted cattle and argues in favour of the use of them in the livestock breeding systems.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Ciências da Saúde, 2018. / Submitted by Fabiana Santos (fabianacamargo@bce.unb.br) on 2018-08-17T20:50:51Z No. of bitstreams: 1 2018_GilmarPereiraSilva.pdf: 4674606 bytes, checksum: 3147dae3cd49acb692471fe66dd1e0df (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2018-08-20T21:29:17Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2018_GilmarPereiraSilva.pdf: 4674606 bytes, checksum: 3147dae3cd49acb692471fe66dd1e0df (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-20T21:29:17Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2018_GilmarPereiraSilva.pdf: 4674606 bytes, checksum: 3147dae3cd49acb692471fe66dd1e0df (MD5) Previous issue date: 2018-08-17 / Introdução: a disfunção gonadal instala-se no curso de muitas doenças agudas ou crônicas como resultado da ação de toxinas endógenas ou exógenas, processos inflamatórios e oxidativo agudos ou crônicos. A disfunção gonadal promove alterações nos níveis de hormônios sexuais e na qualidade seminal, manifestando-se clinicamente por alterações de fertilidade (sub/infertilidade). Mesmo não se encontrado estudos que avaliem o percentual de portadores de doença renal crônica hemodialítica no sexo masculino com alterações na qualidade seminal, admite-se que não seja desprezível o percentual daqueles com alterações importantes de qualidade seminal manifestada por oligospermia, teratospermia e azoospermia. Os estudos até então existentes atribuem estas alterações neste grupo de doentes predominantemente a fatores urêmicos e oxidativo comumente associados aos mesmos. Considerando que cerca de 40-60% dos doentes renais crônicos em hemodiálise apresentam processo inflamatório sistêmico crônico, resolveu-se verificar se inflamação sistêmica interfere nos níveis de ferritina seminal (Fts) e transferrina seminal (Tfs) e se estas estão associadas aos parâmetros seminais(PS) e índice de fertilidade(IF), considerando a possível propriedade antioxidativa atribuída a estas proteínas. Metodologia: estudo transversal realizado no Setor de Hemodiálise do Hospital Universitário da Universidade de Brasília entre julho de 2016 e dezembro de 2016 em homens com idade entre 18 e 60 anos, sem hepatopatia aguda ou crônica e eugonádicos. Aqueles com diagnóstico de hemocromatose ou doenças do metabolismo do ferro foram excluídos. Amostra composta de 60 casos de doença renal hemodialítica crônica subdividida em três subgrupos de acordo com o nível sérico de proteína C-reativa (PCR) ultra-sensível: grupo 1 ("com inflamação" n = 30, CRP> 5 ng / ml), grupo 2 (sem inflamação, n = 30, PCR ≤ 5ng / ml), grupo 3 (grupo 1 + grupo 2) e grupo 4 (controle saudáveis, n = 30, PCR ≤ 1 ng / ml). Foram utilizadas amostras de sangue e colheita de esperma para analisar os parâmetros bioquímicos e hematológicos (ureia, creatinina, frações de albumina, globulina e hemograma completo), parâmetros hormonais (hormônio folículo estimulante (FSH), hormônio luteinizante (HL), testosterona total (TT), prolactina (PRL), Fts e Tfs, PCR sérica, parâmetro seminal (espermograma - método manual), cálculo de IF e preparação de fluido seminal por centrifugação. Resultados: parâmetros hematológicos e bioquímicos (hemoglobina, ureia, creatinina e albumina); PS; parâmetros hormonais (FSH, LH, TT e PRL); IF e Tfs foram significativamente menores no grupo 3 que no grupo 4. Não houve diferenças significativas para variáveis idade, globulina e Fts. O fator inflamatório analisado isoladamente parece não interferir nos subgrupos casos (grupos 1 e 2), mas houve diferenças significativas (P<0,05) encontrados entre grupos 3 e 4 para as variáveis (parâmetros bioquímicos, seminal, hormonal, IF e Tfs). A Fts não se correlacionou (p>0,05) com IF, PS, FSH, TT e Tfs, independentemente do status inflamatório. A Tfs correlacionou-se positivamente (p≤0,001), independente do status inflamatório, com IF e parâmetros seminais, exceto a morfologia espermática no grupo sem inflamação (r=0,272; p=0,146) e hormônios. A PCR correlacionou-se com Fts e motilidade espermática no grupo sem inflamação. Conclusões: sendo a inflamação sistêmica crônica prevalente nos pacientes renais crônicos, o presente estudo tem sua importância por ser o primeiro a verificar o possível efeito do fator inflamatório, definido pelos níveis de PCR sérica, sobre a qualidade seminal, considerando que estudos prévios atribuem estas alterações predominantemente a fatores uréticos, oxidativos e hormonais. Os resultados aqui obtidos sugerem que a inflamação sistêmica parece não interferir significativamente nos níveis de ferritina/transferrina seminal. Mas a transferrina seminal parece útil na avaliação inicial destes pacientes com suspeita de infertilidade por alteração na qualidade seminal por se mostrar associada a todos os parâmetros seminais e índice de fertilidade. / Introduction: gonadal dysfunction occurs in the course of many acute or chronic diseases as a result of the action of endogenous or exogenous toxins, acute or chronic inflammatory and oxidative processes. The gonadal dysfunction promotes changes in sex hormone levels and seminal quality, manifested clinically by changes in fertility (sub / infertility). Even if we did not find studies that evaluate the percentage of patients with chronic hemodialytic kidney disease in males with changes in seminal quality, it is admitted that the percentage of such as important seminal quality changes manifested by oligospermia, teratospermia and azoospermia is not negligible. Previous studies have attributed these changes in this group of patients, predominantly to uremic and oxidative factors commonly associated with them. Considering that about 40-60% of chronic renal patients undergoing hemodialysis present a chronic systemic inflammatory process, it was decided to verify if systemic inflammation interferes in the levels of seminal ferritin (Fts) and seminal transferrin (Tfs) and whether these are associated with seminal parameters and fertility index (IF), considering the possible antioxidative property attributed to these proteins. Methodology: a cross-sectional study carried out in the Hemodialysis Sector of the University Hospital of the University of Brasília between July 2016 and December 2016 in men aged between 18 and 60 years, without acute or chronic hepatopathy and eugonadic. They were excluded those with a diagnosis of hemochromatosis or diseases of iron metabolism. Sample composed of 60 cases of patients on chronic hemodialysis subdivided into three subgroups according ultrasensitive c-reactive protein (CRP) serum level: group 1 (“with inflammation”, n = 30, CRP> 5 ng / ml), group 2(without inflammation, n = 30, PCR ≤ 5ng / ml), group 3 (group 1 + group 2) and group 4 (healthy controls, n = 30, PCR ≤ 1ng / ml). Blood samples and sperm harvested to indicate biochemical and hematological parameters (urea, creatinine, albumin and globulin fractions and complete blood count), hormonal parameters (follicle stimulating hormone(FSH), luteinizing hormone(LH), total testosterone(TT), prolactin(PRL), SF and ST, serum CRP and SP(spermogram - manual method), calculation of fertility index(FI) and preparation of seminal fluid by centrifugation. Results: hematological and biochemical parameters (hemoglobin, urea, creatinine and albumin); SP; hormonal parameters (FSH, LH, TT and PRL); FI and ST were significantly lower in the group 3 compared to the group 4. There were no significant differences for age, globulin and SF variables (P <0.05). The inflammatory factor analyzed alone does not seem to interfere in the subgroups cases (groups 1 and 2), but there were significant differences (P <0.05) found between groups 3 and 4 for the variables (biochemical, seminal and hormonal parameter, FI and ST. SF did not correlate (p> 0.05) with FI, SP, FSH, TT and ST, independently of the inflammatory status. ST was positively correlated (p≤0.001), independently of inflammatory status, with FI and seminal parameters, except the sperm morphology of the without inflammation group (r = 0.272, p = 0.146) and hormones. CRP correlated with SF and sperm motility in the without inflammation group. Conclusions: since chronic systemic inflammation is prevalent in chronic renal patients, the present study is important because it is the first to verify the possible effect of the inflammatory factor defined by serum CRP levels on seminal quality, whereas that previous studies have attributed these changes predominantly to the uremic and oxidative factors commonly associated with these patients. The results obtained here suggest that systemic inflammation does not appear to significantly interfere with seminal ferritin / transferrin levels. But seminal transferrin seems useful in the initial evaluation of these patients with suspected infertility by alteration in seminal quality because it is associated with all seminal parameters and fertility index.

Submitted by Reginaldo Soares de Freitas (reginaldo.freitas@ufv.br) on 2018-06-28T16:55:35Z No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1148332 bytes, checksum: 74696fa31ad64b873b9c041356bb1c2a (MD5) / Made available in DSpace on 2018-06-28T16:55:35Z (GMT). No. of bitstreams: 1 texto completo.pdf: 1148332 bytes, checksum: 74696fa31ad64b873b9c041356bb1c2a (MD5) Previous issue date: 2018-02-23 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / O reprodutor tem grande importância na cadeia produtiva por possuir maior potencial de difusão do seu material genético dentro do rebanho que as fêmeas que produzem apenas uma cria por ano, em manejo de monta natural. Entretanto, este potencial somente se torna real quando os machos apresentam boa qualidade seminal, resultando em menores taxas de não retorno ao estro. Não há duvidas da importância da morfologia espermática na fertilidade de touros. Entre as anomalias espermáticas identificadas nos ejaculados de bovinos, a aplasia segmentar da bainha mitocondrial (ASBM) é classificada como defeito espermático maior, comprometendo a fertilidade dos reprodutores, pelo fato dos ejaculados apresentarem baixa motilidade e vigor espermático. Este estudo teve como objetivo estudar a fisiopatologia de ejaculados com altos porcentuais da patologia espermática ASBM, utilizando como base o exame andrológico e análise espermática por citometria de fluxo. Portanto, os touros foram divididos em dois grupos: o primeiro foi o grupo controle com morfologia espermática normal (n = 3) e o segundo foi o grupo com morfologia anormal (n = 3) com alta porcentagem de SAMS. Cinco ejaculados foram coletados de cada animal. Ejaculados de touros com ASBM apresentaram baixa motilidade (P<0,05), baixo potencial mitocondrial (P<0,05), maior porcentagem de espermatozoides com fragmentação do DNA (P<0,05), baixa integridade da membrana plasmática e acrossomal (P<0,05) e alta porcentagem de espermatozoides com desorganização da bicamada lipídica ou fluidez da membrana (P<0,05) em comparação aos touros com morfologia espermática normal. Além de possuir baixa porcentagem de viabilidade espermática, sêmen com alta porcentagem de ASBM pode estar sofrendo apoptose, possivelmente devido ao estresse oxidativo. Esses resultados indicam que touros com alta porcentagem desta patologia espermática são inférteis e sugere também que esta anomalia espermática seja de origem genética na raça estudada. / Bulls are of great importance in the productive chain because they have a higher potential for diffusion of genetic material within the herd than females that produce only one calf per year in natural mating management. However, this potential is only possible when males present good seminal quality, resulting in lower rates of non- return to estrus. There is no doubt about the importance of sperm morphology in bull fertility, among the sperm anomalies identified in bovine ejaculates, the segmental aplasia of the mitochondrial sheath (SAMS) is classified as a major sperm defect, compromising the reproductive fertility; ejaculates with presence of this anomaly show low sperm motility and sperm vigor. This study aimed to understand the pathophysiology of ejaculates with high percentage of spermatozoa with SAMS, using Breeding Soundness Evaluation and sperm analysis by flow cytometry. Therefore, the bulls were divided in two groups: The first one was the control group with normal sperm morphology (n=3) and the second was the abnormal one (n=3) with high percentage of SAMS. Five ejaculates were collected from each animal. Bulls with SAMS exhibited poor motility (P<0.05), low mitochondrial membrane potential (P<0.05), a high percentage of sperm with DNA fragmentation (P<0.05), low acrosome and plasma membrane integrity (P<0.05), and high membrane fluidity (P<0.05) in comparison with bulls that have a normal morphology; in addition to have a low percentage of viability, sperm with a high percentage of SAMS may be undergoing apoptosis. These findings indicate that bulls with this sperm pathology are infertile; furthermore, it suggests there is a putative genetic basis for this sperm defect in this breed.