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Estudo laboratorial de agentes infecciosos transmitidos por carrapatos em pacientes com doença de Lyme-símile brasileira (síndrome Baggio-Yoshinari) / Laboratorial study of tick-borne infectious agents in patients with brazilian Lyme-like disease (Baggio-Yoshinari Syndrome)

Virginia Lucia Nazário Bonoldi 27 January 2010 (has links)
Ehrlichiose Monocítica Humana, Anaplasmose Granulocítica Humana, Babesiose, Febre Maculosa das Montanhas Rochosas e Doença de Lyme são doenças transmitidas por carrapatos encontradas no Hemisfério Norte. No Brasil, a DL-símile chamada de Síndrome Baggio-Yoshinari (SBY) é descrita, mas as características epidemiológicas, clínicas e laboratoriais são diferentes da DL original. Nos Brasileiros, as outras doenças transmitidas por carrapatos são pouco estudadas. O objetivo desta pesquisa é estudar a possibilidade de co-infecção entre a SBY e outras doenças transmitidas por carrapatos, através de ensaios laboratoriais para Ehrlichia spp, Babesia spp and Rickettsia spp em um grupo de 70 pacientes com SBY. Dez pacientes estavam na fase inicial da doença e 60 no estágio latente. Eritema Migratório (EM) esteve presente em 27 (38,6%), artrite em 26 (37,1%), febre em 13 (18,5%), cefaléia em 29 (41,4%), artralgia em 36 (51,4%), mialgia em 51 (72,8%), fadiga em 38 (54,3%), meningite em 4 ((5,7%), neurite craniana em 8 (11,4%), radiculopatia periférica em 9 (12,8%), encefalomielite em 4 (5,7%), cardiopatia em 7 (10%), lesão de pele atípica em 10 (14,3%) e anemia em 10 (14,3%). O ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) para Borrelia burgdorferi foi positivo em 21 (30%) pacientes do grupo da SBY e apenas em 3 dos 50 (6%) indivíduos do grupo controle (p = 0.01). Usando o método de Western blotting (WB) modificado para antígenos da B. burgdorferi, trinta e cinco (50%) dos pacientes com SBY foram positivos, e 2 (4%) indivíduos do grupo controle. (p0,001). A Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) (IgG) apresentou resultados significativos para três das cinco espécies de Rickettsia spp analisadas: R. parkeri (8,6%) (p = 0,032), R. amblyommii (22.8%) ( p = 0,031) e para R. bellii (8.6%) ( p = 0,032). O Teste do Qui-quadrado foi usado para análise estatística. . Poucos pacientes apresentaram positividade para antígenos de B. bovis (RIFI e ELISA) e B. equi (RIFI). A RIFI para antígenos da Ehrlichia canis foi positiva apenas para um (1.4%) paciente com SBY. Isto nos leva a concluir que pacientes com SBY apresentaram co-infecção com R. parkeri, R.. amblyommi e R. belli, sugerindo que a SBY possa ser transmitida pelos mesmos carrapatos responsáveis pela transmissão destas Rickettsias. / Human Monocytic Ehrlichiosis, Human Granulocytic Anaplasmosis, Babesiosis, Rocky Mountain Spotted Fever and Lyme Disease (LD) are tick-borne diseases commonly found in the North hemisphere. In Brazil, a LD-like illness called Baggio- Yoshinari Syndrome (BYS) is described, but epidemiological, clinical and laboratorial features are different from the original LD. In Brazilian humans, the other tick-borne diseases are less frequently studied. The aim of this survey was to verify the possibility of co-infections between BYS and other tick-borne diseases, using laboratorial assays to Ehrlichia spp, Babesia spp and Rickettsia spp in a group of 70 patients with BYS. Ten patients were at initial stage of the disease and 60 patients were in a latent stage. Erythema migrans (EM) was present in 27 patients (38.6%), arthritis in 26 (37,1%), fever in 13 (18.5%), headache in 29 (41.4%) arthralgia in 36 (51.4%), myalgia in 51 (72,8%), fatigue in 38 (54,3%), meningitis in 4 (5.7%), cranial neuritis in 8 (11.4%), peripheral radiculopathy in 9 (12.8%), encephalomyelitis in 4 (5.7%), cardiopathy in 7 (10%), atypical skin eruptions in 10 (14.3%) and anemia in 10 patients (14.3%). ELISA (Enzyme Linked Immunossorbent Assay) for Borrelia burgdorferi antigens was positive in 21 patients (30%) of BYS group, while only 3 (6%) from 50 normal individuals had positive reactions (p = 0.01). Using the modified Western Blotting (WB) method for B. burgdorferi antigens, 35 (50%) of the BYS patients were positive, and 2 normal individuals (4%) from the control group (p 0,001). Indirect Immunofluorescence Assay (IFA) (IgG) presented positive results for three of five species of Rickettsia tested: R. parkeri (8, 6%) (p = 0,032), R. amblyommii (22.8%) (p = 0,031) and for R. bellii (8.6%) (p = 0,032). Chi-square test was used for the statistic analysis. A few patients developed a positive reaction to B. bovis (IFA and ELISA) and B. equi antigens (IFA). IFA for Ehrlichia canis antigens was positive in only one patient (1.4%) with BYS. It was possible to conclude that BYS patients presented a coinfection with R. parkeri, R. amblyommi and R. bellii, suggesting that BYS can be vectored by the same ticks responsible for the transmission of Rickettsial agents.
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Estudo laboratorial de agentes infecciosos transmitidos por carrapatos em pacientes com doença de Lyme-símile brasileira (síndrome Baggio-Yoshinari) / Laboratorial study of tick-borne infectious agents in patients with brazilian Lyme-like disease (Baggio-Yoshinari Syndrome)

Bonoldi, Virginia Lucia Nazário 27 January 2010 (has links)
Ehrlichiose Monocítica Humana, Anaplasmose Granulocítica Humana, Babesiose, Febre Maculosa das Montanhas Rochosas e Doença de Lyme são doenças transmitidas por carrapatos encontradas no Hemisfério Norte. No Brasil, a DL-símile chamada de Síndrome Baggio-Yoshinari (SBY) é descrita, mas as características epidemiológicas, clínicas e laboratoriais são diferentes da DL original. Nos Brasileiros, as outras doenças transmitidas por carrapatos são pouco estudadas. O objetivo desta pesquisa é estudar a possibilidade de co-infecção entre a SBY e outras doenças transmitidas por carrapatos, através de ensaios laboratoriais para Ehrlichia spp, Babesia spp and Rickettsia spp em um grupo de 70 pacientes com SBY. Dez pacientes estavam na fase inicial da doença e 60 no estágio latente. Eritema Migratório (EM) esteve presente em 27 (38,6%), artrite em 26 (37,1%), febre em 13 (18,5%), cefaléia em 29 (41,4%), artralgia em 36 (51,4%), mialgia em 51 (72,8%), fadiga em 38 (54,3%), meningite em 4 ((5,7%), neurite craniana em 8 (11,4%), radiculopatia periférica em 9 (12,8%), encefalomielite em 4 (5,7%), cardiopatia em 7 (10%), lesão de pele atípica em 10 (14,3%) e anemia em 10 (14,3%). O ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay) para Borrelia burgdorferi foi positivo em 21 (30%) pacientes do grupo da SBY e apenas em 3 dos 50 (6%) indivíduos do grupo controle (p = 0.01). Usando o método de Western blotting (WB) modificado para antígenos da B. burgdorferi, trinta e cinco (50%) dos pacientes com SBY foram positivos, e 2 (4%) indivíduos do grupo controle. (p0,001). A Reação de Imunofluorescência Indireta (RIFI) (IgG) apresentou resultados significativos para três das cinco espécies de Rickettsia spp analisadas: R. parkeri (8,6%) (p = 0,032), R. amblyommii (22.8%) ( p = 0,031) e para R. bellii (8.6%) ( p = 0,032). O Teste do Qui-quadrado foi usado para análise estatística. . Poucos pacientes apresentaram positividade para antígenos de B. bovis (RIFI e ELISA) e B. equi (RIFI). A RIFI para antígenos da Ehrlichia canis foi positiva apenas para um (1.4%) paciente com SBY. Isto nos leva a concluir que pacientes com SBY apresentaram co-infecção com R. parkeri, R.. amblyommi e R. belli, sugerindo que a SBY possa ser transmitida pelos mesmos carrapatos responsáveis pela transmissão destas Rickettsias. / Human Monocytic Ehrlichiosis, Human Granulocytic Anaplasmosis, Babesiosis, Rocky Mountain Spotted Fever and Lyme Disease (LD) are tick-borne diseases commonly found in the North hemisphere. In Brazil, a LD-like illness called Baggio- Yoshinari Syndrome (BYS) is described, but epidemiological, clinical and laboratorial features are different from the original LD. In Brazilian humans, the other tick-borne diseases are less frequently studied. The aim of this survey was to verify the possibility of co-infections between BYS and other tick-borne diseases, using laboratorial assays to Ehrlichia spp, Babesia spp and Rickettsia spp in a group of 70 patients with BYS. Ten patients were at initial stage of the disease and 60 patients were in a latent stage. Erythema migrans (EM) was present in 27 patients (38.6%), arthritis in 26 (37,1%), fever in 13 (18.5%), headache in 29 (41.4%) arthralgia in 36 (51.4%), myalgia in 51 (72,8%), fatigue in 38 (54,3%), meningitis in 4 (5.7%), cranial neuritis in 8 (11.4%), peripheral radiculopathy in 9 (12.8%), encephalomyelitis in 4 (5.7%), cardiopathy in 7 (10%), atypical skin eruptions in 10 (14.3%) and anemia in 10 patients (14.3%). ELISA (Enzyme Linked Immunossorbent Assay) for Borrelia burgdorferi antigens was positive in 21 patients (30%) of BYS group, while only 3 (6%) from 50 normal individuals had positive reactions (p = 0.01). Using the modified Western Blotting (WB) method for B. burgdorferi antigens, 35 (50%) of the BYS patients were positive, and 2 normal individuals (4%) from the control group (p 0,001). Indirect Immunofluorescence Assay (IFA) (IgG) presented positive results for three of five species of Rickettsia tested: R. parkeri (8, 6%) (p = 0,032), R. amblyommii (22.8%) (p = 0,031) and for R. bellii (8.6%) (p = 0,032). Chi-square test was used for the statistic analysis. A few patients developed a positive reaction to B. bovis (IFA and ELISA) and B. equi antigens (IFA). IFA for Ehrlichia canis antigens was positive in only one patient (1.4%) with BYS. It was possible to conclude that BYS patients presented a coinfection with R. parkeri, R. amblyommi and R. bellii, suggesting that BYS can be vectored by the same ticks responsible for the transmission of Rickettsial agents.
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Identificação do agente etiológico da Doença de Lyme-símile brasileira (Síndrome Baggio-Yoshinari) / Identification of the causative agent of Brazilian Lyme diseaselike illness (Baggio-Yoshinari Syndrome)

Elenice Mantovani 15 September 2010 (has links)
A Doença de Lyme-símile brasileira ou Síndrome Baggio-Yoshinari (SBY) é uma zoonose emergente, transmitida por carrapatos e até o momento, de descrição restrita ao território brasileiro. O agente etiológico da SBY era desconhecido até o presente trabalho. O objetivo principal do estudo foi identificar a etiologia da SBY. Foi selecionado 2 grupos de pacientes: grupo A (n=68) composto por pacientes com suspeita diagnóstica de SBY, a maioria na fase latente da doença; grupo B (n=10), composto por pacientes com diagnóstico de SBY, que apresentaram obrigatoriamente eritema migratório e que encontravam-se sintomáticos no momento da coleta. Foi utilizado também um grupo controle composto por indivíduos saudáveis e com epidemiologia negativa (n=50). Amostras de sangue foram coletadas para a realização de sorologias, culturas, análises microscópicas (óptica e eletrônica) e reação de cadeia da polimerase (PCR) para diferentes micro-organismos (Mycoplasma spp, Chlamydia spp e Borrelia spp). Além disso, foi realizado um estudo preliminar, através da PCR para Borrelia spp em 47 amostras de carrapatos oriundos de áreas de risco do Espírito Santo (sendo 17 Rhipicephalus microplus e 30 Rhipicephalus sanguineus), e amostras de sangue total de 27 bovinos e 26 equinos, animais estes oriundos da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. Os resultados mostraram que a SBY não se trata de uma zoonose causada por um conjunto de micro-organismos como pensado inicialmente e sim pela Borrelia burgdorferi sensu lato. Descoberta essa que foi possível empregando-se novos primers amplificadores do principal gene envolvido na síntese do gancho flagelar da Borrelia, chamado flgE. A positividade para flgE foi confirmada em 6 pacientes do grupo B, 2 carrapatos, 1 bovino e 1 equino, os quais apresentaram homologia de 99% com o gene da proteína do gancho flagelar da Borrelia burgdorferi (flgE) depositado no GenBank (L43849). Esta importante descoberta, associada às pesquisas anteriores, permitiu definir a SBY como zoonose emergente e própria do país, causada pela bactéria B. burgdorferi na apresentação morfológica atípica, transmitida por carrapatos não pertencentes ao complexo Ixodes ricinus, responsável por manifestações clínicas semelhantes à Doença de Lyme, exceto pela grande frequência de sintomas recorrentes / Brazilian Lyme disease-like illness (BLDL) or Baggio-Yoshinari Syndrome (BYS) is an emerging zoonosis, transmitted by ticks and so far, restricted to the description of the Brazilian territory. The causative agent of BYS was unknown until now. The main objective of this study was to identify the etiology of BYS. We have selected two groups of patients: group A (n = 68) consisting of patients suspected of BYS, mostly in the latent stage of disease; group B (n = 10), composed of patients diagnosed with BYS, who had compulsorily erythema migrans and that were symptomatic at the time of blood collection. We also used a control group composed of healthy individuals with negative epidemiology (n = 50). Blood samples were collected, in which we performed serology, cultures, microscopic analysis (optical and electron) and polymerase chain reaction (PCR) for different microorganisms (Mycoplasma spp, Chlamydia spp and Borrelia spp). In addition, a preliminary study was conducted by PCR for Borrelia spp in 47 samples of ticks from risk areas at Espirito Santo State (being 17 Rhipicephalus microplus and 30 Rhipicephalus sanguineus), 27 cattle and 26 horses, being these animals from the Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. The results showed that BYS is not a zoonosis caused by a set of microorganisms as initially thought, but by Borrelia burgdorferi sensu lato. These findings were possible after employing new primers that are able to amplify portions of the main genes involved in the synthesis of the Borrelia flagellar hook protein, called flgE. We confirmed positivity for the flgE in 6 patients from group B, 2 ticks, a cow, and a horse, which showed 99% homology with the gene of Borrelia burgdorferi flagellar hook protein (flgE) deposited in GenBank (L43849). This important discovery, coupled with previous research, helped to define BYS as an emerging zoonosis particular from Brazil, caused by B. burgdorferi of atypical morphologic presentation, transmitted by ticks outside the Ixodes ricinus complex, responsible for clinical signs similar to Lyme disease, except for the high frequency of relapsing symptoms
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Identificação do agente etiológico da Doença de Lyme-símile brasileira (Síndrome Baggio-Yoshinari) / Identification of the causative agent of Brazilian Lyme diseaselike illness (Baggio-Yoshinari Syndrome)

Mantovani, Elenice 15 September 2010 (has links)
A Doença de Lyme-símile brasileira ou Síndrome Baggio-Yoshinari (SBY) é uma zoonose emergente, transmitida por carrapatos e até o momento, de descrição restrita ao território brasileiro. O agente etiológico da SBY era desconhecido até o presente trabalho. O objetivo principal do estudo foi identificar a etiologia da SBY. Foi selecionado 2 grupos de pacientes: grupo A (n=68) composto por pacientes com suspeita diagnóstica de SBY, a maioria na fase latente da doença; grupo B (n=10), composto por pacientes com diagnóstico de SBY, que apresentaram obrigatoriamente eritema migratório e que encontravam-se sintomáticos no momento da coleta. Foi utilizado também um grupo controle composto por indivíduos saudáveis e com epidemiologia negativa (n=50). Amostras de sangue foram coletadas para a realização de sorologias, culturas, análises microscópicas (óptica e eletrônica) e reação de cadeia da polimerase (PCR) para diferentes micro-organismos (Mycoplasma spp, Chlamydia spp e Borrelia spp). Além disso, foi realizado um estudo preliminar, através da PCR para Borrelia spp em 47 amostras de carrapatos oriundos de áreas de risco do Espírito Santo (sendo 17 Rhipicephalus microplus e 30 Rhipicephalus sanguineus), e amostras de sangue total de 27 bovinos e 26 equinos, animais estes oriundos da Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. Os resultados mostraram que a SBY não se trata de uma zoonose causada por um conjunto de micro-organismos como pensado inicialmente e sim pela Borrelia burgdorferi sensu lato. Descoberta essa que foi possível empregando-se novos primers amplificadores do principal gene envolvido na síntese do gancho flagelar da Borrelia, chamado flgE. A positividade para flgE foi confirmada em 6 pacientes do grupo B, 2 carrapatos, 1 bovino e 1 equino, os quais apresentaram homologia de 99% com o gene da proteína do gancho flagelar da Borrelia burgdorferi (flgE) depositado no GenBank (L43849). Esta importante descoberta, associada às pesquisas anteriores, permitiu definir a SBY como zoonose emergente e própria do país, causada pela bactéria B. burgdorferi na apresentação morfológica atípica, transmitida por carrapatos não pertencentes ao complexo Ixodes ricinus, responsável por manifestações clínicas semelhantes à Doença de Lyme, exceto pela grande frequência de sintomas recorrentes / Brazilian Lyme disease-like illness (BLDL) or Baggio-Yoshinari Syndrome (BYS) is an emerging zoonosis, transmitted by ticks and so far, restricted to the description of the Brazilian territory. The causative agent of BYS was unknown until now. The main objective of this study was to identify the etiology of BYS. We have selected two groups of patients: group A (n = 68) consisting of patients suspected of BYS, mostly in the latent stage of disease; group B (n = 10), composed of patients diagnosed with BYS, who had compulsorily erythema migrans and that were symptomatic at the time of blood collection. We also used a control group composed of healthy individuals with negative epidemiology (n = 50). Blood samples were collected, in which we performed serology, cultures, microscopic analysis (optical and electron) and polymerase chain reaction (PCR) for different microorganisms (Mycoplasma spp, Chlamydia spp and Borrelia spp). In addition, a preliminary study was conducted by PCR for Borrelia spp in 47 samples of ticks from risk areas at Espirito Santo State (being 17 Rhipicephalus microplus and 30 Rhipicephalus sanguineus), 27 cattle and 26 horses, being these animals from the Universidade Federal Rural do Rio de Janeiro. The results showed that BYS is not a zoonosis caused by a set of microorganisms as initially thought, but by Borrelia burgdorferi sensu lato. These findings were possible after employing new primers that are able to amplify portions of the main genes involved in the synthesis of the Borrelia flagellar hook protein, called flgE. We confirmed positivity for the flgE in 6 patients from group B, 2 ticks, a cow, and a horse, which showed 99% homology with the gene of Borrelia burgdorferi flagellar hook protein (flgE) deposited in GenBank (L43849). This important discovery, coupled with previous research, helped to define BYS as an emerging zoonosis particular from Brazil, caused by B. burgdorferi of atypical morphologic presentation, transmitted by ticks outside the Ixodes ricinus complex, responsible for clinical signs similar to Lyme disease, except for the high frequency of relapsing symptoms

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