Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, 2011. / Submitted by Elna Araújo (elna@bce.unb.br) on 2012-09-12T23:15:32Z No. of bitstreams: 1 2011_LuanaCarolinaWeber.pdf: 2007291 bytes, checksum: f54a21319881d6fd36aeabf535ab38f1 (MD5) / Approved for entry into archive by Luanna Maia(luanna@bce.unb.br) on 2012-09-13T14:38:00Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2011_LuanaCarolinaWeber.pdf: 2007291 bytes, checksum: f54a21319881d6fd36aeabf535ab38f1 (MD5) / Made available in DSpace on 2012-09-13T14:38:00Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2011_LuanaCarolinaWeber.pdf: 2007291 bytes, checksum: f54a21319881d6fd36aeabf535ab38f1 (MD5) / A berinjela reproduz-se preferencialmente por autofecundação, sendo a tecnologia de produção de sementes híbridas produzidas por meio de emasculação e polinização manual. O presente trabalho teve por objetivo avaliar a produção e a qualidade de sementes híbridas de berinjela oriundas de plantas com diferentes números de frutos. O experimento foi realizado nas instalações do campo experimental e laboratório de sementes da Embrapa Hortaliças. Em um campo de produção de sementes híbridas de berinjela ‘Ciça’, foram selecionadas ao acaso seis plantas para cada tratamento, nas quais foram realizados cruzamentos. Os tratamentos constaram de número de frutos por planta: 6, 9, 12, 15 e 18. Os botões florais foram emasculados manualmente. Sessenta dias após o cruzamento, os frutos foram colhidos e colocados em repouso por 10 dias em um ambiente protegido. Em seguida, as sementes foram extraídas manualmente. Os seguintes testes e determinações foram realizados: número de sementes por fruto, número de sementes por planta, peso de sementes por planta, massa de 100 sementes, germinação, primeira contagem, classificação do vigor, envelhecimento acelerado, teste de frio e emergência de plântulas. O maior número de sementes por fruto foi obtida em plantas com seis frutos, e a menor média em plantas com 15 e 18 frutos. A produção de sementes e o peso de sementes por planta apresentaram resultados semelhantes. Em relação ao número e massa de sementes por planta, as plantas com 12, 15 e 18 frutos apresentaram maior número e massa de sementes por planta. As plantas com seis frutos apresentaram a menor produção de sementes. Os tratamentos não diferiram quanto à massa de 100 sementes, testes de primeira contagem, germinação e plântulas normais. No teste de envelhecimento acelerado os resultados obtidos, indicaram que o período de 72 horas, a 41°C, mostrou-se mais relacionado com os testes de germinação. As plântulas foram todas classificadas em normais fortes, estas todas vigorosas. Baixas temperaturas retardam a germinação de sementes de berinjela, no entanto, o tratamento 12 frutos por planta conseguiu atingir uma porcentagem de germinação de plântulas normais de 62%. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / Eggplant reproduces mainly by selfing, and the technology of production of hybrid seeds produced by emasculation and hand pollination. This study aimed to evaluate the yield and quality of hybrid seeds of eggplant from plants with different numbers of fruits. The experiment was performed in the laboratory and field experimental seeds of crop systems. In a field of production of hybrid seeds of eggplant ‘Ciça’, were randomly selected six plants for each treatment, in which crosses were performed. The treatments consisted of fruit number per plant: 6, 9, 12, 15 and 18. The flower buds were emasculated by hand. Sixty days after mating, the fruits were collected and placed in home for 10 days in a greenhouse. Then the seeds were extracted manually. The following tests and determinations were performed: number of seeds per fruit, number of seeds per plant, seed weight per plant, weight of 100 seeds, germination, first count and classification of force, accelerated aging, cold test and seedling emergence. The greatest number of seeds per fruit was obtained in six plants with fruit, and the lowest average in plants with 15 and 18 fruits. Seed production and seed weight per plant showed similar results. Regarding the number and mass of seeds per plant, plants with 12, 15 and 18 showed higher fruit weight and number of seeds per plant. Plants with six fruits showed the lowest seed production. The treatments did not differ in weight of 100 seeds, seed first count, germination and seedlings. In the accelerated aging test results indicated that the period of 72 hours at 41°C, was more related to the germination tests. Seedlings were classified as normal all strong, all these vigorous. Low temperatures delay germination of seeds of eggplant, however, treatment 12 fruits per plant was able to reach a germination percentage of normal seedlings was 62%.

Dissertação (mestrado)-Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, 2010. / Submitted by Luiza Moreira Camargo (luizaamc@gmail.com) on 2011-06-21T19:54:27Z No. of bitstreams: 1 2010_LeandroCarvalhoRibeiro.pdf: 548466 bytes, checksum: 6bc3890ceef8f14ed846003826c70e87 (MD5) / Approved for entry into archive by Guilherme Lourenço Machado(gui.admin@gmail.com) on 2011-06-22T14:40:28Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2010_LeandroCarvalhoRibeiro.pdf: 548466 bytes, checksum: 6bc3890ceef8f14ed846003826c70e87 (MD5) / Made available in DSpace on 2011-06-22T14:40:28Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2010_LeandroCarvalhoRibeiro.pdf: 548466 bytes, checksum: 6bc3890ceef8f14ed846003826c70e87 (MD5) / No presente trabalho foram avaliados aspectos ecofisiológicos da germinação de espécies arbóreas de cerrado sensu stricto e da mata de galeria. Considerando que espécies de cerrado e de mata comportem-se como grupos funcionais distintos e que possuem características ecofisiológicas distintas em termos de utilização dos recursos ambientais disponíveis, bem como diferentes estratégias adaptativas para sobreviver às adversidades impostas pelo ambiente, o objetivo deste estudo foi analisar o comportamento germinativo, em condições de laboratório, de espécies de cerrado sensu stricto e de mata de galeria frente a determinadas condições de estresse, observando padrões de semelhança e diferenças entre tais grupos funcionais. Para tanto, foram avaliados o grau de tolerância à dessecação, a capacidade germinativa em temperaturas supra-ótimas (30, 35, 40 e 45ºC) e o efeito de choques térmicos (80, 140 e 200ºC por 2,5 e 5 minutos) sobre germinação de sementes de espécies do cerrado e de mata. De modo geral, as sementes das espécies de cerrado sensu stricto apresentaram maior tolerância à dessecação, maior capacidade de germinação em temperaturas supra-ótimas e menor sensibilidade aos efeitos do calor provocados pelos choques térmicos, em relação às sementes de espécies de mata de galeria. Em função da maior capacidade germinativa apresentada pelas sementes de espécies de cerrado em comparação com as espécies de mata, quando submetidas a determinadas condições de estresse, parece ficar claro que espécies de savana possuem um maior potencial de expansão em direção a ambientes florestais, do que espécies de floresta em direção à savana. _________________________________________________________________________________ ABSTRACT / In this present study I evaluated ecophysiological aspects of seed germination of cerrado sensu stricto and gallery forest woody species. I postulated that savanna and forest species behave as distinct functional groups and have different ecophysiological characteristics in the use of environmental resources available as well as different adaptive strategies to survive the adversities imposed by the environment. The aim of this study was to analyze, in laboratory conditions, seed germination of savanna and forest species, exposed to certain stress conditions, verifying similarity patterns and differences between these two functional groups. For this, I evaluated the degree of desiccation tolerance, seed germination at aboveoptimal temperatures (30, 35, 40 and 45 º C) and the effects of heat treatments (80, 140 and 200 ° C for 2.5 to 5 minutes) on seed germination of cerrado sensu stricto and gallery forest species. Generally speaking, seeds of savanna species showed greater desiccation tolerance and germination at above-optimal temperatures and less sensitivity to the effects of heat treatments, in relation to gallery forest species. Due to higher seed germination produced by savanna species when exposed to stress conditions, in relation to forest species, it seems certain that savanna species have a greater potential for expansion into forests environments than forest species into savanna.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2016. / Submitted by Priscilla Sousa (priscillasousa@bce.unb.br) on 2017-10-05T13:03:05Z No. of bitstreams: 1 2016_PatriciaCarladeOliveira.pdf: 2944183 bytes, checksum: 16f9f48246823a20e4faa22584ae635c (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-10-05T16:08:52Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_PatriciaCarladeOliveira.pdf: 2944183 bytes, checksum: 16f9f48246823a20e4faa22584ae635c (MD5) / Made available in DSpace on 2017-10-05T16:08:52Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_PatriciaCarladeOliveira.pdf: 2944183 bytes, checksum: 16f9f48246823a20e4faa22584ae635c (MD5) Previous issue date: 2017-10-05 / Investigar a germinação das sementes de espécies arbóreas é importante para compreender o processo de ocupação e manutenção das populações e comunidades nos mais diversos ambientes. A transição semente – plântula representa o primeiro e mais determinante gargalo no ciclo de vida, estabelecendo o primeiro recorte no nicho ecológico e na amplitude da ocupação geográfica. É no nicho de regeneração, especialmente na germinação, onde se manifestam as primeiras tolerâncias ou sensibilidades aos principais filtros ambientais. A relação entre a germinação e nicho ecológico tem sido investigada por estudos que associam comportamentos de germinação às características ambientais. Neste trabalho o mesmo é feito em dois contextos. No primeiro foi investigada a relação entre a germinação e a ocorrência de árvores em uma área úmida (Pantanal), cuja origem é presumida para a savana vizinha não alagável (Cerrado), esperando encontrar tolerância à inundação pelas sementes das espécies testadas. Pergunta-se se as sementes de espécies arbóreas do Pantanal, com co-ocorrência em savana não alagável, estão adaptadas à inundação; e se a tolerância ao alagamento pelas sementes pode explicar a distribuição local das espécies arbóreas, ao longo do gradiente de inundação. Foram coletadas sementes de Copaifera langsdorffii, Curatella americana, Dipteryx alata, Guazuma ulmifolia, Hymenaeastigonocarpa, Magonia pubescens, Plathymeniareticulata, Qualea grandiflora e Tabebuia aurea, distribuídas em setores com diferentes intensidades de inundação, e seus padrões de germinação foram investigados sob e após inundação simulada. Os resultados mostram que a maioria apresentou sementes tolerantes à inundação, o que ajuda a explicar a presença de espécies arbóreassavânicas em uma área úmida. No entanto, foi detectada semelhança nas funções de sobrevivência baseadas na germinação entre espécies com ampla distribuição no Pantanal (ocupando áreas com inundação de pequena a grande intensidade) e aquelas com distribuição restrita (presentes apenas nas áreas menos sujeitas à inundação). Tal semelhança não permite explicar a distribuição destas espécies ao longo do gradiente. Sendo assim, a germinação, um dos componentes do nicho de regeneração, foi encontrada como determinante do nicho ecológico em escala regional, de savana para área úmida, mas não em escala local, dentro do gradiente de inundação. No segundo contexto comparamos a germinação entre assembleias de espécies arbóreas coocorrentes no Cerrado e no Pantanal diante de cenários que envolvem seus principais filtros ambientais. As espécies escolhidas estão entre aquelas tratadas no primeiro contexto: Copaifera langsdorffii, Dipteryx alata, Hymenaeastigonocarpa, Magonia pubescens, Qualea grandiflora e Tabebuia aurea. Com base na caracterização climática e ecológica dos dois ambientes, foram determinados como principais filtros a dessecação, o fogo (avaliado por choques térmicos) e a inundação. Avaliou-se também incremento de temperatura em consideração às mudanças climáticas em curso, com previsões de aumento nas temperaturas média e máxima para os dois ambientes, o que pode vir a ser um novo filtro ambiental. Incremento de temperatura e dessecação foram considerados cenários semelhantes entre os dois ambientes; fogo como principal filtro para o Cerrado e inundação como o principal para o Pantanal. Assim, esperava-se: performances de germinação semelhantes sob dessecação e incrementos de temperatura; e diferenciais para fogo e inundação, com melhor desempenho por sementes do Cerrado no primeiro e do Pantanal no segundo. Simulações para esses cenários foram feitas em laboratório para verificar a germinação de pares conespecíficos sob tais condições. O estimador não paramétrico de Kaplan-Meier e a modelagem por regressão de Cox foram as análises de sobrevivência empregadas na comparação. As sementes do Pantanal são aparentemente mais tolerantes aos filtros ambientais, apresentando germinação em situações mais extremas quando comparadas às do Cerrado. A assembleia do Cerrado teve maior germinabilidade, refletindo ambiente mais favorável que o Pantanal. Isto também é confirmado pelo maior tempo de germinação para as sementes do Pantanal sob inundação. Tempos delongados de germinação são compreendidos como indicativos de adaptação a ambientes menos favoráveis. Os comportamentos de germinação observados mostram um ajuste das sementes ao ambiente de maior severidade no conjunto de seus filtros ambientais (Pantanal), o que pode ser compreendido como uma contribuição de um aspecto do nicho de regeneração para o nicho ecológico. / The study of germination characteristics of seeds contributes for understanding the occupancy and maintenance of tree populations in different ecosystems. The seed - seedling transition represents the first and most determinant bottleneck in the plant life span, establishing both the ecological niche and the geographical occupation amplitude. Tolerance and sensitivity to environmental filters arise first in the regeneration niche, mostly in the germination process. Relationship between germination and ecological niche has been assessed by matching germination characteristics and environmental features. We do the same in two contexts. In the first one the relationship between germination and tree occurrence in the Pantanal wetland was investigated. We hypothesize that Pantanal seeds are tolerant to inundation, despite their origin is presumed from the neighbor Cerrado. We also ask whether the level of tolerance of the seeds to inundation explains the trees distribution along an inundation gradient in the Pantanal. Seeds from species occurring in areas subjected to different inundation intensities were collected:Copaiferalangsdorffii, Curatellaamericana, Dipteryxalata, Guazumaulmifolia, Hymenaeastigonocarpa, Magoniapubescens, Plathymeniareticulata, Qualeagrandiflora, and Tabebuiaaurea. The germination characteristics of these seeds, subjected to different levels of inundation simulated in laboratory, were evaluated. Our results show that seeds of most species tolerated inundation, which helps to explain the presence and large distribution of these savanna species in a wetland. Nevertheless, survival functions based on germination parameters show similarity between species with wide and restricted distribution. Wide distribution comprises species which occur in areas subjected to low as well to high inundation intensity. Restrict distribution comprises species which occur only in areas subjected to low level of inundation. Given the similarity found, the distribution of tree species along the inundation gradient cannot be explained only by their germination characteristics. We conclude that seed tolerance to inundation as one of the regeneration niche compounds was determinant of tree occurrence and distribution at regional scale, from savanna to wetland, but not for local scale, along an inundation gradient. In the second context we compared germination characteristics of tree species assemblies occurring in both Cerrado and Pantanal subjected to major environmental filters scenarios. The selected species were Copaiferalangsdorffii, Dipteryxalata, Hymenaeastigonocarpa, Magoniapubescens, Qualeagrandiflora, and Tabebuiaaurea. Desiccation, fire (represented by heat shocks), and inundation were considered major environmental filters based on climatic and ecological characterization of these environments. The effects of increasing temperatures on the seeds were also evaluated considering the expected scenario of higher temperatures predicted for both biomes due to the climatic changes. Higher temperatures and desiccation were considered as similar scenarios for both the Pantanal and the Cerrado biomes; fire was considered the main filter for Cerrado species; and inundation as the main filter for Pantanal species. Thus, we expected similar germination performances among seeds from Pantanal and Cerrado under desiccation and increasing temperatures; and different performances under fire and inundation with better performances for Cerrado at the first one and for Pantanal at the second one. The germination treatments were simulated in laboratory, and the germination characteristics of seeds from both Pantanal and Cerrado were tested and compared. The Kaplan-Meier non parametric estimator and the Cox regression modeling were adopted for comparisons. Seeds from the Pantanal were apparently more tolerant to the environmental filters tested, showing higher tolerance to the more extreme simulated conditions in comparison to seeds from the Cerrado. The higher germination percentages of the Cerrado seeds reflect more suitable environment in comparison to the Pantanal. This is also shown by a larger germination time in the Pantanal seeds under inundation. Delayed germination has been related to a germination characteristicstypical of species occurring in apparently less suitable environments, as the Pantanal seems to be. The germination characteristics here reported show an adjustment of the seeds to their environment of origin, with more severe conditions being experimented in the Pantanal, which can be understood as a regeneration niche contribution to the ecological niche. Keywords: environmental filters, seed tolerance, regeneration niche, survival analysis, germination time.

Orientador : Profª Dra. Katia Christina Zuffellato-Ribas / Co-orientadores : Prof. Dr. Henrique Soares Koehler, Prof. Dr. Antonio Carlos Nogueira, Drª. Juliana Degenhardt Goldbach / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências Agrárias, Programa de Pós-Graduação em Agronomia. Defesa: Curitiba, 14/03/2016 / Inclui referências ao final de cada capítulo / Área de concentração: Produção vegetal / Resumo: Campomanesia xanthocarpa é uma espécie arbórea nativa do Brasil, que tem sua distribuição de Minas Gerais até o Rio Grande do Sul, ocorrendo também na Argentina, Paraguai e Bolívia. É usada em paisagismo, pomares domésticos ou para repovoar áreas de proteção ambiental. Seu fruto é bastante apreciado in natura ou para a produção de sucos, geléias, sorvetes, licores. Devido ao pouco conhecimento sobre a propagação de Campomanesia xanthocarpa, a presente dissertação teve como objetivos verificar a viabilidade da propagação vegetativa para a espécie, por meio de estaquia de brotações do ano, nas quatro estações com a aplicação de ácido indolbutírico (IBA), o enraizamento de estacas de brotações epicórmicas obtidas por anelamento, decepa de tronco, brotações de poda, envergamento e manutenção de fragmentos de tronco em casa-de-vegetação, a técnica de alporquia e a aplicação de IBA no enraizamento adventício de alporques, bem como verificar as condições ideais para a germinação de sementes. Para o experimento com estaquia foram confeccionadas estacas a partir das brotações do ano utilizando diferentes concentrações de IBA (0; 500; 1000 e 2000 mg L-1) nas quatro estações, e estacas obtidas a partir de brotações epicórmicas, resultantes das técnicas de revigoramento, as quais, posteriormente, foram mantidas em casa de vegetação por 120 dias. A alporquia foi realizada em dez matrizes de guabiroba, nas quais, para confecção dos alporques foram utilizados ramos jovens, dos quais foi retirado um anel de casca de aproximadamente 2,0 cm de largura com o auxílio de um estilete. Em cada ferimento foram adicionadas diferentes concentrações de IBA (0, 500, 1000 e 2000 mg Kg-1) veiculadas em pasta de vaselina, onde cada concentração compôs um tratamento. Em seguida, a região foi envolvida com substrato vermiculita e plástico transparente. Para o teste de germinação, as sementes foram mantidas em germinadores sob luz constante, avaliando-se três temperaturas (20°C, 25°C e 30°C) e três substratos (papel mata-borrão, areia e vermiculita). No experimento com estaquia a partir de brotações do ano e uso de IBA, observou-se mortalidade de 100% do material em todos os tratamentos e nas quatro estações do ano. O melhor enraizamento para estacas a partir de material juvenil foi observado nos tratamentos decepa (25,5%) e fragmentos de tronco/inverno (44,4%). Para o tratamento brotações de poda, o enraizamento e a formação de calos foram nulos. Após um ano da confecção dos alporques, observou-se que a técnica de alporquia em C. xanthocarpa, utilizando o regulador vegetal IBA não foi eficiente, pois não promoveu o enraizamento dos ramos. Para o teste de germinação, a média de todos os tratamentos foi boa (81,4%) , e os substratos areia e vermiculita foram os mais eficientes para o índice de velocidade e tempo médio de germinação. A temperatura de 30°C foi mais eficiente, sendo a recomendada para germinação de sementes de C. xanthocarpa. Palavras-chave: Myrtaceae, guabiroba, estaquia, revigoramento, alporquia. / Abstract: Campomanesia xanthocarpa is an arboreal specie native from Brazil, and can be found from the state of Minas Gerais until Rio Grande do Sul. Also presents in Argentina, Paraguay and Bolivia.It can be used in paisagism, orchards, farms, afforestation and environmental recovery. The fruit is very appreciated in natura, for production of juice, jelly, ice cream and liqueur. There is insufficient knowledge about Campomanesia xanthocarpa propagation, so this dissertation aimed to find ideal conditions for seed germination, rooting techniques with cuttings of sprouts of the year collected in four seasons, with the application of indole butyric acid (IBA). Also was evaluated the rooting of the cuttings by epicormic sprouts promoted by ringing peridermal cuts in the base of stem, stump, shoot pruning, pruning the branches and maintenance of stems in greenhouse. Also was evaluated the layering technique and IBA application in the adventitious rooting of the branches as well as to verify the ideal conditions for seed germination.For the rooting experiment, were made cuttings by sprouts of year using different IBA concentrations (0; 500; 1000 and 2000 mg.L-1) in four seasons, and cuttings obtained by epicormic sprouts, taken from reinvigoration techniques, and they kept in greenhouse for 120 days.The layering technique was tested in ten stock plants, using young branches, removing a small ring with 2.0 cm width of periderm with a knife. In each injury were added different concentrations of IBA (0, 500, 1000 e 2000 mg.Kg-1) diluted in vaseline paste, and each concentration was considered one treatment. Then the branches were involved with vermiculite and transparent plastic.For the germination test, the seeds kept in a germination test box, under constant light and was evaluated three temperatures (20°C, 25°C and 30°C) and three substrates (blotting paper, river sand and vermiculite).In the experiment with cuttings of annual sprouts and use of IBA, it was observed the 100% of mortality for the all treatments and seasons. The best rooting of the juvenile material was observed in the stump treatment (25.5%) and stem fragments taken in the winter (44.4%).For the pruning test, the rooting and calluses formation was null. After one year, was observed that IBA wasn't effective to promote the rooting of branches with the layering, so it is not a recommended technique for this specie. For the germination test, the average of all treatments was good (81.4%), however, the river sand and vermiculite were the most efficient for the rate of germination speed and average time of germination. The temperature of 30°C was more efficient, and it is recommended for seed germination of C. xanthocarpa. Key words: Myrtaceae, guabiroba, cuttings reinvigoration, air layering.

Made available in DSpace on 2015-05-14T16:53:07Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-12-12Bitstream added on 2015-05-14T16:59:24Z : No. of bitstreams: 1 000819494.pdf: 730304 bytes, checksum: c24a03c0d2e555a0ddbac4bad206675a (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Durante o processo de germinação da semente várias enzimas estão presentes em reações metabólicas importantes durante a respiração, como por exemplo, malato desidrogenase e álcool desidrogenase. Além disso, para que a germinação aconteça, são necessárias a expansão e a posterior divisão das células do embrião, nesses processos estão envolvidos os genes actina e ciclina, respectivamente. São importantes ainda, os mecanismos de proteção das sementes contra estresses abióticos durante a germinação, dentre eles podem ser citadas a presença de proteínas de choque térmico, relacionadas com a tolerância à dessecação e de enzimas como a glutationa-S-transferase, consideradas antioxidantes. Objetivou-se com este estudo avaliar o perfil de expressão de genes associados com a respiração, citoesqueleto, ciclo celular e estresse no embrião de sementes de Solanum lycocarpum durante a germinação. As sementes de lobeira foram avaliadas com relação a sua qualidade fisiológica, determinando-se: porcentagem de germinação, índice de velocidade de germinação, tempo médio de germinação, frequência de germinação. Além disso, determinou-se uma curva de embebição. O RNA do embrião das sementes foi extraído aos 1, 5, 10 e 15 dias de embebição em água seguido da síntese de cDNA. A expressão gênica foi realizada usando-se a técnica de PCR em tempo real. Os genes estudados no embrião foram malato desidrogenase (MDH), álcool desidrogenase (ADH2), actina (ACT7), ciclina (CDC2), proteína de choque térmico (HSPS17.6), glutationa-S-transferase (GST). A partir dos resultados obtidos conclui-se que, durante o processo de germinação de sementes de lobeira, existe variação no perfil de expressão de ... / During the process of seed germination various enzymes are present in important metabolic reactions during respiration, such as malate dehydrogenase and alcohol dehydrogenase. In addition, for germination to take place, is necessary expansion and subsequent division of the cells of the embryo, which requires the involved of the genes cyclin and actin, respectively. Mechanisms associated with seed protection against abiotic stresses during germination, among which may be mentioned is the presence of heat shock proteins related to desiccation tolerance and enzymes such as glutathione-S-transferase, considered as antioxidant. The aim of this study was to evaluate the expression profile of genes associated with respiration, cytoskeleton, cell cycle and stress in the embryo of seeds of Solanum lycocarpum during germination. Lobeira seeds were evaluated with respect to their physiological quality, determining: germination percentage, speed of germination, means germination time, frequency of germination and was also given a curve of soaking. The RNA from the embryo of the seeds was extracted at 1, 5, 10 and 15 days of imbibitions in water, followed by cDNAS synthesis The gene expression was carried out using the technique of real time PCR. The genes studied in the embryo were malate dehydrogenase (MDH), alcohol dehydrogenase (ADH2) and actin (ACT7), cyclin (CDK2), heat shock protein (HSPS17.6), glutathione-S-transferase (GST). From the results obtained we concluded that, during the process of germination of lobeira, there is variation in the expression of genes associated with respiratory, stress protection and expansion and cell division

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2017-03-16T15:38:31Z No. of bitstreams: 1 2016_RenataMirandaLopes.pdf: 2839086 bytes, checksum: 2175827a4562b0b0cf668ffad6447cfb (MD5) / Approved for entry into archive by Ruthléa Nascimento(ruthleanascimento@bce.unb.br) on 2017-03-31T16:47:38Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_RenataMirandaLopes.pdf: 2839086 bytes, checksum: 2175827a4562b0b0cf668ffad6447cfb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-03-31T16:47:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_RenataMirandaLopes.pdf: 2839086 bytes, checksum: 2175827a4562b0b0cf668ffad6447cfb (MD5) / O teste de germinação tem sido utilizado rotineiramente na verificação do poder germinativo de sementes em bancos de germoplasma. Entretanto, essa metodologia não é muito eficaz em detectar diferentes estágios de deterioração, muitas vezes indicando apenas a morte da semente. Antes da perda visível da viabilidade das sementes em conservação ocorrem diferentes processos, entre eles estão aqueles que levam a danos às estruturas dos ácidos nucleicos. O objetivo desse trabalho foi avaliar metodologias moleculares e citogenéticas como ferramentas auxiliares ao teste de germinação na avaliação da integridade de sementes. Foram utilizadas sementes de soja e cevada como modelo. Utilizando o envelhecimento acelerado, foram obtidos lotes de sementes em diferentes estágios de deterioração, os quais foram caracterizados utilizando-se testes fisiológicos (teste de germinação, índice de velocidade de germinação e teste de condutividade elétrica). A integridade do DNA e seu reparo foram avaliados em gel de agarose 1% corado com brometo de etídio, RAPD e qPCR. A integridade do RNA extraído das sementes foi estimada avaliando-se a intensidades das bandas 18 e 28s em gel de agarose. Foram comparados também o índice mitótico (IM) e a frequência de anormalidades cromossômicas (ACs) entre diferentes lotes de sementes obtidos por envelhecimento acelerado. No geral, os testes fisiológicos diferenciaram os lotes de sementes em diferentes estágios de deterioração. A avaliação das integridades do DNA e RNA em gel de agarose teve pouca repetibilidade e não permitiram a distinção entre os lotes ou necessitaram de uma grande quantidade de material (1-3μg). Os resultados do RAPD mostraram diferenças na integridade e na capacidade de reparo do DNA entre os diferentes lotes de sementes. Já o qPCR permitiu a diferenciação dos lotes das amostras e necessitou de pouco DNA (6 ng por repetição). O IM e as ACs, diferenciaram os lotes de sementes com diferentes estágios de deterioração. Entretanto o IM os diferenciou melhor, pois formou mais grupos diferentes entre os tempos de envelhecimento avaliados do que as ACs. Assim, as técnicas de RAPD, qPCR, análise do IM e das ACs podem ser ferramentas auxiliares na avaliação da viabilidade de sementes, pois foram capazes de distinguir diferentes estágios de deterioração das sementes, além de necessitarem de poucas sementes e a citogenética e o RAPD serem metodologias baratas. / The germination test is the most commonly used technique for monitoring seed quality in gene banks. However, this methodology does not allow the detection of different stages of deterioration and sometimes indicates merely the final step, i.e., seed death. Different processes, such as damage to nucleic acids, occur before visible loss of the seed viability. The objective of this study was to evaluate molecular and cytogenetic methods as auxiliary tools to the germination test, to evaluate seed integrity. Soybean and barley seeds were used as models. Artificial aging was used to obtain seeds representing many different deterioration stages. These seed lots were characterized using physiological tests (germination test, germination speed index test, and electrical conductivity test). The DNA integrity and repair system were evaluated using agarose gel, random amplified polymorphic DNA (RAPD), and quantitative PCR (qPCR). The RNA integrity was estimated based on the intensity of ribosomal RNA bands 18s and 28s as detected on agarose gel stained with ethidium bromide. The mitotic index (MI) and frequency of chromosomal abnormalities (CAs) were evaluated in different seed lots of barley and soybean. In general, the results of the physiological tests differed among seed lots that had different deterioration stages. Generally, the evaluation of DNA and ribosomal RNA on agarose gel does not allow the characterization of the different sample lots, did not show reproducibility among biological replicates, and large quantities of samples were required (1–3 μg). RAPD allowed the evaluation of integrity and DNA repair system capacity. The qPCR identified sample lots requiring a small amount of DNA (6 ng). Seed lots could be differentiated by MI and CAs. However, differentiation by MI showed an improved performance because it formed a larger number of different groups between the evaluated aging times than the CAs. Therefore, the RAPD, qPCR, MI, and CAs analyses can be auxiliary tools in the evaluation of seed viability because they were able to distinguish between different stages of seed deterioration. Additionally, these methods require few seeds and cytogenetics and RAPD are inexpensive methods.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Faculdade de Agronomia e Medicina Veterinária, Programa de Pós-Graduação em Agronomia, 2017. / Submitted by Albânia Cézar de Melo (albania@bce.unb.br) on 2017-07-26T15:57:51Z No. of bitstreams: 1 2017_DaianeGuerreiro.pdf: 1337120 bytes, checksum: 80128db4071b2947fdb77401b9396696 (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana (raquelviana@bce.unb.br) on 2017-08-24T18:21:34Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_DaianeGuerreiro.pdf: 1337120 bytes, checksum: 80128db4071b2947fdb77401b9396696 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-08-24T18:21:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_DaianeGuerreiro.pdf: 1337120 bytes, checksum: 80128db4071b2947fdb77401b9396696 (MD5) / Objetivou-se com o presente trabalho avaliar o efeito de diferentes materiais de revestimento como o composto contendo fósforo, gesso agrícola, calcário dolomítico e o fertilizante FTE BR 12 na qualidade das sementes e no desenvolvimento inicial de plantas de Brachiaria brizantha cv. BRS Piatã. Os experimentos foram conduzidos no Laboratório de Sementes e na Área Experimental da Agronomia da FASB, ambos pertencentes à Faculdade São Francisco de Barreiras – Bahia. As sementes foram revestidas em uma mini betoneira caseira. O delineamento adotado foi em blocos ao acaso para as avaliações de laboratório e de campo, em esquema fatorial 9x3, sendo nove tratamentos com doses (50 e 100 gramas) de composto de fósforo, calcário dolomítico, gesso agrícola, termofosfato magnesiano, testemunha e três doses (0, 25 e 50 gramas) do fertilizante FTE BR 12, totalizando 27 tratamentos, com 4 repetições. Após o revestimento, as sementes foram avaliadas quanto às características fisiológicas no laboratório por meio do teste padrão de germinação (G%) em papel e índice de velocidade de germinação (IVG), e no campo experimental através da emergência em campo (EC), índice de velocidade de emergência (IVE), massa seca da parte área (MS) aos 150 dias após a semeadura, em 0,50 m2 por parcela. O revestimento de sementes de Brachiaria brizantha com termofosfato magnesiano e gesso agrícola, na dose de até 100 g do produto para 100 g de sementes influencia positivamente a qualidade fisiológica das sementes e o desenvolvimento inicial das plantas. O revestimento de sementes de Brachiaria brizantha com calcário dolomítico, na dose de até 100 g do produto para 100 g de sementes, não afeta a qualidade e o desenvolvimento inicial das plantas. No revestimento de sementes de Brachiaria brizantha com composto de fósforo e o FTE BR 12, nas doses de (50 e 100 g) e (25 e 50 g), respectivamente, influencia negativamente a qualidade fisiológica das sementes e o desenvolvimento inicial das plantas, mas não afeta a massa seca da parte aérea das plantas em campo. O revestimento de sementes de Brachiaria brizantha com termofosfato magnesiano, gesso agrícola, calcário dolomítico, composto de fósforo e o fertilizante FTE BR 12 não influenciou o desempenho e a produção de matéria seca da forrageira. / It was aimed with this work to evaluate the effect of different coating materials as the compound containing phosphorus, agricultural plaster, dolomitic limestone and FTE BR 12 fertilizer on seed quality and initial development of plants of Brachiaria brizantha cv. BRS Piatã. The experiments were leaded in the Seeds Laboratory and in the Experimental Area of Agronomy of FASB, both belonging to the São Francisco de Barreiras School - Bahia. The seeds were coated in a homemade mini concrete mixer. The adopted delimitation was in randomized blocks for laboratory and field evaluations, using a 9x3 factorial scheme, being nine treatments with doses (50 and 100 grams) of compound the phosphorus, dolomitic limestone, agricultural gypsum, magnesium termophosphate, witness and three doses (0, 25 and 50 grams) of FTE BR 12 fertilizer, totaling 27 treatments, with 4 replicates. After the coating, the seeds were evaluated for physiological characteristics in the laboratory by standard germination test (G%) in paper and germination speed index (GSI), and in the experimental field through field emergence (FE), emergency speed index (ESI), dry mass of area part (DM) at the 150 days after sowing, at 0.50 m2 per portion. The seed coat of Brachiaria brizantha with magnesium thermophosphate and agricultural plaster, at a dose of up to 100 g of the product to 100 g of seeds influences positively the physiological quality of the seeds and the initial development of the plants. The seed coat of Brachiaria brizantha with dolomitic limestone, at a dose of up to 100 g of the product to 100 g of seeds, does not affect the quality and the initial development of the plants. The seed coat of Brachiaria brizantha with phosphorus compound and FTE BR 12, at the doses of (50 and 100 g) and (25 and 50 g), respectively, influences negatively the physiological quality of the seeds and the initial development of the plants, but it does not affect the dry mass of the aerial part of the plants in the field. The seed coat of Brachiaria brizantha with magnesium thermophosphate, agricultural plaster, dolomitic limestone, phosphorus compound and FTE BR 12 fertilizer did not influence on the performance and on the production of the forage dry matter.

Dissertação (mestrado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Ecologia, Programa de Pós-Graduação em Ecologia, 2016. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-07-25T12:52:07Z No. of bitstreams: 1 2016_MarcusViniciusFalcãoParedes.pdf: 491022 bytes, checksum: 14c7760d7dc287c16c4189cad41d4bdd (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-07-29T13:02:43Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_MarcusViniciusFalcãoParedes.pdf: 491022 bytes, checksum: 14c7760d7dc287c16c4189cad41d4bdd (MD5) / Made available in DSpace on 2016-07-29T13:02:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_MarcusViniciusFalcãoParedes.pdf: 491022 bytes, checksum: 14c7760d7dc287c16c4189cad41d4bdd (MD5) / O Cerrado é considerado uma savana tropical, onde o fogo geralmente é rápido e de superfície. De forma geral, estudos mostram que o fogo poderia beneficiar a germinação das sementes que apresentam dormência física, pois o calor pode danificar a proteção imposta pelos diversos envoltórios das sementes. Este trabalho teve como objetivo investigar a capacidade de germinação de nove espécies de gramíneas nativas e invasoras do Cerrado (Echinolaena inflexa (Poir.) Chase, Paspalum gardnerianum Nees, Paspalum reduncum Nees ex Steud., Paspalum stellatum Humb. & Bonpl. ex Flüggé, Paspalum trachycoleon Steud., Schizachyrium sanguineum (Retz.) Alston, Andropogon gayanus Kunth, Melinis minutiflora P. Beauv. e Urochloa decumbens (Stapf) R.D.Webster.). Uma vez que (i) o fogo não estimula a germinação das sementes sem dormência física, como é o caso de muitas gramíneas do Cerrado, (ii) em ambientes onde o fogo é recorrente as espécies mais tolerantes ao calor tendem a eliminar as mais sensíveis e (iii) as gramíneas invasoras do Cerrado parecem ser beneficiadas com a queima recorrente, este trabalho se propôs responder a seguinte pergunta: No Cerrado, as sementes de gramíneas invasoras presentes no solo são mais tolerantes do que as de espécies nativas a temperaturas similares àquelas experimentadas durante a passagem do fogo? Para isso, as sementes foram expostas, em laboratório, às mesmas condições térmicas as quais o banco de sementes do solo é exposto durante uma queimada no Cerrado. As combinações de tempos e temperaturas utilizadas visaram simular a posição vertical das sementes no banco do solo durante a passagem do fogo. O desenho experimental consistiu no aquecimento das sementes em fluxo de ar seco a temperatura de 50, 70, 90, 110, 130 ou 150°C por dois ou cinco min. A exposição das sementes ao fluxo de ar quente não estimulou a germinação, provavelmente porque as sementes estudadas não possuem dormência física e o fluxo de calor não resultou na quebra de dormência. Todas as espécies apresentaram relação negativa entre os pulsos de calor e a germinação, entretanto, as espécies apresentaram reduções desiguais na germinação após as exposições aos mesmos tratamentos. Embora M. minutiflora tenha sido a única espécie classificada como resistente a pulso de calor de 150ºC, não se pode afirmar que todas as espécies invasoras são mais tolerantes a altas temperaturas do que as nativas. Isto por que U. decumbens apresenta redução significativa na germinação após pulsos de 90ºC e A. gayanus apresenta redução na germinação após exposição a 130ºC. Por outro lado, há espécies nativas que germinam após exposição a 130ºC, como é o caso de P. trachycoleon e S. sanguineum. Dessa forma, o uso do fogo como forma de manejo em áreas de Cerrado irá reduzir a germinação do banco de sementes do solo de todas as espécies estudadas. Entretanto, P. trachycoleon e S. sanguineum podem ser utilizadas em planos de recuperação de áreas degradadas por apresentarem alta produção de semente, alta germinação e germinarem após exposição 130ºC, temperatura similar àquelas experimentadas pelas sementes do banco do solo durante queimadas de Cerrado. _______________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / The Cerrado is considered a tropical savannah, where there’s usually a rapid surface fire. In general, studies have shown that fire could benefit the germination of the seeds which have physical dormancy since the heat can damage the protection imposed by the various seed coats of the seeds. This study aimed to investigate the germination of nine species of native and invasive grasses of Cerrado (Echinolaena inflexa (Poir.) Chase, Paspalum gardnerianum Nees, Paspalum reduncum Nees ex Steud., Paspalum stellatum Humb. & Bonpl. Ex Flügge, Paspalum trachycoleon Steud., Schizachyrium sanguineum (Retz.) Alston, Andropogon gayanus Kunth, Melinis minutiflora P. Beauv. and Urochloa decumbens (Stapf) RDWebster.). Since (i) fire does not stimulate the germination of seeds without physical dormancy as in many grasses from Cerrado, (ii) in environments where fire is frequent, the most heat tolerant species tend to eliminate the most sensitive ones and (iii) Cerrado invasive grasses seem to benefit from the frequent fires, this study aimed to answer the following question: regarding the Cerrado soil seed bank, are the invasive grass seeds more tolerant to temperatures similiar to those experienced during a fire event than the native grass seeds are? Because of that, the seeds were exposed in the laboratory to the same thermal conditions which the soil seed bank is exposed during a fire in the Cerrado. The combinations of exposure time and temperature used intended to simulate the vertical position of the seed in the soil seed bank during the fire passage. The experimental design consisted of heating the seeds with a dry air flow in the temperatures of 50, 70, 90, 110, 130 or 150 °C for five or two minutes. Seed exposure to the hot air flow did not stimulate germination, probably because the seed of the studied species do not have physical dormancy and the heat flow did not result in dormancy break. All species showed a negative relationship between heat and germination, however, the species showed uneven reductions in germination after exposure to the same treatments. Although, M. minutiflora has been the only species classified as resistant to 150 ° C heat pulse, one can not say that all invasive species are more tolerant of high temperatures than native. This why U. decumbens shows significant reduction in germination after pulses of 90 ° C and A. gayanus has reduced germination after exposure to 130°C. On the other hand, native species can germinate after exposure to 130 ° C, as is the case of P. trachycoleon and S. sanguineum. Thus, the use of fire as a form of management in the Cerrado areas will reduce the germination of soil seed bank for all species. However, P. trachycoleon and S. sanguineum can be used in degraded areas recovery work by presenting high seed production, high germination and germinate after exposure to 130°C, temperature similar to those experienced by soil seed bank during fires of Cerrado.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2016. / Texto liberado parcialmente pelo autor. Conteúdo restrito: Capítulos 1, 2 e 3. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-07-26T15:43:33Z No. of bitstreams: 1 2016_JaquelineMartinsVasconcelos_Parcial.pdf: 745494 bytes, checksum: b3e0c6289918a1d03a8fe366ff6ff98d (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2016-09-08T18:50:21Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_JaquelineMartinsVasconcelos_Parcial.pdf: 745494 bytes, checksum: b3e0c6289918a1d03a8fe366ff6ff98d (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-08T18:50:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_JaquelineMartinsVasconcelos_Parcial.pdf: 745494 bytes, checksum: b3e0c6289918a1d03a8fe366ff6ff98d (MD5) / O presente trabalho teve por objetivo caracterizar bioquímica e histoquimicamente a germinação, desenvolver estratégias para a conservação de germoplasma, bem como induzir e caracterizar a calogênese in vitro de pinhão-manso visando o desenvolvimento de protocolos para a embriogênese somática. Para os estudos de germinação, as sementes foram desinfestadas, inoculadas in vitro e mantidas na presença de luz. As avaliações de desenvolvimento e as coletas para as análises morfoanatomicas, histoquímicas e bioquímicas da germinação foram realizadas ao longo do período de cultivo de 30 dias. A caracterização anatômica foi realizada com o auxílio do corante Azul de Toluidina e para as análises histoquímicas foram utilizados Sudan IV, para compostos lipídicos, Xylidine Ponceau, para proteínas totais e Reagente de Schiff/ ácido periódico – PAS, para polissacarídeos neutros. Para as análises bioquímicas, os materiais oriundos dos diferentes períodos de germinação foram avaliados quanto a percentagem de açucares solúveis totais (AST) e amido via método colorimétrico, de proteínas em aparelho CNS, além da quantificação de lipídios via técnica de derivatização in situ em GC-MS. Anatomicamente, as sementes apresentaram endosperma com células isodiamétricas, paredes delgadas e conteúdo celular visível em formas de gotas de lipídeos e corpos proteicos; os cotilédones e folhas com epiderme simples e mesofilo composto por parênquima paliçádico e lacunoso e o hipocótilo com cilindro vascular do tipo eustelo. Histoquimicamente, evidenciou-se que os lipídeos e as proteínas aparecem como o principal material de reserva no endosperma. As análises bioquímicas confirmaram a maior presença de ácidos graxos em relação aos demais compostos de reserva no endosperma, principalmente os ácidos oleicos e linoleicos. Já com a formação da plantula, o amido apareceu como a principal composto de reserva. Para os estudos de conservação, verificou-se a umidade inicial das sementes e, em seguida, se realizou o processo de dessecação em sílica-gel por 0, 24, 48, 96 e 192 horas. Após cada tempo de dessecação, a umidade foi novamente avaliada e as sementes armazenadas em diferentes condições de temperatura (25ºC, 6ºC, -20ºC e -196°C) por 0, 180, 360 e 720 dias. Transcorrido o tempo de conservação, as sementes foram germinadas in vitro e a germinação avaliada após 30 dias de cultivo. Análises de condutividade elétrica foram realizadas nas sementes armazenadas em todos os tratamentos. Para a criopreservação de eixos embrionários, inicialmente realizou-se a extração dos eixos em condições assépticas e a hidratação dos mesmos por 1 hora em placa de petri contendo papel filtro umedecido com água destilada estéril. Posteriormente, aplicou-se os tempos de dessecação pela exposição dos eixos ao fluxo de ar da câmara de fluxo laminar por 0, 2, 4, 6, 8 e 10 horas. Logo após os tempos de dessecação, a umidade dos eixos embrionários foi aferida e estes foram imersos em nitrogênio líquido por 0, 2, 30, 90, 180 e 360 dias. Após o período de conservação, foi realizado o teste de germinação in vitro, com avaliação após 30 dias de cultivo. As sementes de pinhão-manso toleraram a dessecação e se mantiveram viáveis com até 4,3% de umidade. Porém, não toleraram o armazenamento por período de até 720 dias em todas as temperaturas avaliadas, o que sugere um comportamento intermediário das sementes. O teste de condutividade elétrica foi eficaz na avaliação da qualidade das sementes, apresentando alta correlação entre a quantidade de íons observados e a percentagem de germinação. Com relação a criopreservação dos eixos embrionários, verificou-se uma taxa média de 90% de germinação, após 360 dias de armazenamento, quando estes apresentavam umidade em torno de 8%, e foi considerado a melhor técnica de conservação a longo prazo desta espécie. Por fim, explantes de hipocótilo e folhas cotiledonares de plantas cultivadas in vitro foram induzidos a calogênese em meio de MS suplementado com 2,4-D e picloram (0, 50, 100, 200 e 400 μM) em combinação ou não com 50 μM de cinetina, sendo mantidos em condição de luz ou escuro por 30 e 60 dias. Após os tempos foi avaliado a percentagem de formação de calos, textura dos calos (friável, semicompacto e compacto), além da coloração predominante. Amostras de calos com 60 dias de cultivo foram incluídas em metacrilato e caracterizados anatomicamente. Explantes de pinhãomanso, constituídos por hipocótilo e folhas cotiledonares foram responsivos a indução de calos, apresentando 100% de explantes com calos em vários tratamentos, principalmente na presença de picloram. O tratamento contento apenas cinetina promoveu a formação de calos friáveis em folhas cotiledonares e calos friáveis e semi-compactos em explantes de hipocótilo. O 2,4-D foi mais eficiente na formação de calos compactos com aspecto globular, enquanto o picloram induziu de calos semi-compactos e friáveis e de grande volume. Calos embriogênicos foram observados em hipocótilos e folhas cotiledonares cultivados com 200 e 400 μM de picloram e 2,4-D, preferencialmente, no escuro. O presente trabalho contribuiu com informações relevantes sobre a caracterização da germinação de sementes de pinhão-manso. Esclareceu e determinou a melhor técnica de conservação ex situ para a espécie, sugerindo a mudança da classificação das sementes de ortodoxas para intermediarias. E no estudo de calos, propiciou várias informações a respeito da calogênese em pinhão-manso que servirão de subsídios para futuros trabalhos de embriogênese somática para a espécie. _________________________________________________________________________________________________ ABSTRACT / This study aimed to characterize biochemical and histochemically germination, develop strategies for the conservation of germplasm, as well as induce and characterize the callus formation in vitro Jatropha for the development of protocols for somatic embryogenesis. For germination studies, the seeds were sterilized, inoculated in vitro and maintained in the presence of light. Development assessments and collections for morphoanatomic analysis, histochemical and biochemical germination were carried out during the 30-day culture period. The anatomical characterization was performed with the aid Blue stain and Toluidine for histochemical analyzes was used Sudan IV to lipid compounds, Xylidine ponceau to total protein and Schiff reagent / periodic acid - SAP for neutral polysaccharides. For the biochemical analyzes, the materials from the different periods of germination was evaluated as the percentage of total soluble sugars (AST) and starch via colorimetric method for proteins in the CNS device, and quantifying lipids via derivatization in situ GC MS. Anatomically, the seeds presented endosperm with isodiametrical cells, thin walls and visible mobile content forms droplets of lipid and protein bodies; cotyledons and leaves with simple epidermis and mesophyll consisting of palisade and spongy parenchyma and hypocotyl with vascular eustele type cylinder. Histochemically, it was shown that lipids and proteins appear as the main reserve material in the endosperm. Biochemical analyzes confirmed the increased presence of fatty acids in relation to other reserve compounds in the endosperm, especially oleic and linoleic acids. Since the formation of seedling, starch appeared as the primary reserve compound. For conservation studies, it was the initial seed moisture, and then held the desiccation process silica gel for 0, 24, 48, 96 and 192 hours. After each time of drying, the humidity was again evaluated and the seeds stored at different temperature conditions (25 ° C, 6 ° C, -20 ° C and - 196 ° C) for 0, 180, 360 and 720 days. Elapsed time of conservation, the seeds were germinated in vitro and germination evaluated after 30 days of cultivation. electrical conductivity analyzes were performed on seeds stored in all treatments. For cryopreservation embryonic axes initially held extracting the axles under aseptic conditions and hydration thereof for 1 hour in petri dishes containing filter paper moistened with sterile distilled water. Subsequently, he applied to the drying times for exposing the axes of airflow of the laminar flow chamber for 0, 2, 4, 6, 8 and 10 hours. Soon after the drying time, moisture from the embryonic axis was measured and these were immersed in liquid nitrogen for 0, 2, 30, 90, 180 and 360 days. After the retention period, in vitro germination test was performed, with evaluation after 30 days of cultivation. The Jatropha seeds tolerate desiccation and remained viable up to 4.3% moisture. However, they not tolerate storage for a period up to 720 days all temperatures measured, which suggests an intermediate behavior seeds. The electrical conductivity test was effective in assessing the quality of seeds, with high correlation between the amount of ions observed and the percentage of germination. Regarding the cryopreservation of embryonic axes, there was an average 90% germination, after 360 days of storage when they had moisture around 8%, and was considered the best long-term preservation technique of this kind. Finally, hypocotyl and cotyledon explants of leaves from plants grown in vitro were induced to callus induction on MS medium supplemented with 2,4-D and Picloram (0, 50, 100, 200 and 400 mM) in combination with or without 50 uM kinetin, being kept in light or dark condition for 30 and 60 days. After time was evaluated the percentage of callus formation, callus texture (crumbly, semi-compact and compact), and the predominant color. Samples of corns with 60 days of culture were included in methacrylate and characterized anatomically. Jatropha explant consisting of hypocotyl and cotyledons were responsive to callus induction, with 100% of explants with calluses on various treatments, especially in the presence of picloram. Treatment satisfaction only kinetin promoted the formation of friable callus in cotyledons and friable calluses and semi-compact in hypocotyl explants. The 2,4-D was more efficient in the formation of compact callus with a globular appearance as picloram induced semi-compact callus and friable and large volume. embryogenic calli were observed in hypocotyls and cotyledons cultured with 200 to 400 mM of picloram and 2,4-D, preferably in the dark. This work contributed with relevant information on the characterization of Jatropha seed germination. He clarified and determined the best ex situ conservation technique for the species, suggesting the change of the classification of orthodox seeds to intermediate. And the study of calluses, led various information about the callogenesis in Jatropha which will serve as subsidies for future work on somatic embryogenesis for the species.

Tese (doutorado)—Universidade de Brasília, Instituto de Ciências Biológicas, Departamento de Botânica, Programa de Pós-Graduação em Botânica, 2016. / Texto parcialmente liberado pelo autor. Foram disponibilizados Resumo e Abstract. / Submitted by Fernanda Percia França (fernandafranca@bce.unb.br) on 2016-12-21T16:03:38Z No. of bitstreams: 1 2016_EmíliaOrdonesLemosSaleh_Parcial.pdf: 241871 bytes, checksum: 28e92640504fcbc715e489cd0228e2bb (MD5) / Approved for entry into archive by Raquel Viana(raquelviana@bce.unb.br) on 2017-04-12T19:32:12Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2016_EmíliaOrdonesLemosSaleh_Parcial.pdf: 241871 bytes, checksum: 28e92640504fcbc715e489cd0228e2bb (MD5) / Made available in DSpace on 2017-04-12T19:32:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2016_EmíliaOrdonesLemosSaleh_Parcial.pdf: 241871 bytes, checksum: 28e92640504fcbc715e489cd0228e2bb (MD5) / O babaçu (Attalea speciosa Mart ex Spreng) é uma palmeira oleaginosa nativa do Brasil, fonte de diversas matérias-primas para as indústrias cosmética e alimentícia, de cujas amêndoas se extrai um óleo com amplas aplicações, inclusive para a produção de biodiesel, além de ser importante para as populações das regiões Norte e Nordeste. Os estudos básicos relativos à germinação, à regeneração e à conservação desta palmeira são essenciais para ajudar a compreender aspectos reprodutivos deste importante recurso genético. Este trabalho teve por objetivo estudar a germinação in vitro de Attalea speciosa, considerando os aspectos fisiológicos, morfo-anatômicos e bioquímicos, determinar um protocolo de embriogênese somática a partir de embriões zigóticos e determinar o comportamento de armazenamento das sementes, bem como as melhores condições de conservação ex situ. A biologia reprodutiva de babaçu foi investigada quanto aos aspectos fisiológicos, morfológicos, bioquímicos e metabólicos da germinação in vitro. O crescimento e desenvolvimento do cotilédone e da plântula foram avaliados durante 0, 7, 14, 21, 30, 45, 90 e 120 dias de cultivo in vitro. As massas fresca e seca e o comprimento das estruturas da plântula foram determinados ao longo do período de germinação. Verificou-se que a germinação ocorreu lentamente, com o crescimento contínuo do cotilédone até os 45 dias, período a partir do qual surgiram os catafilos e o eófilo, seguidos da raiz primária. A análise do perfil metabólico e dos ácidos graxos permitiu confirmar que proteínas e lipídios são as principais reservas utilizadas pelo cotilédone no início da germinação, quando são degradados, liberando aminoácidos, glicerol e ácidos graxos livres. Visando reproduzir vegetativamente a espécie, o primeiro protocolo para embriogênese somática foi desenvolvido, a partir de embriões zigóticos. O meio de cultivo de MS com sais e vitaminas foi utilizado como meio básico, acrescido de L-glutamina (0,5 g.L-1), L-cisteína (0,1 g.L-1) e sacarose (30 g.L-1) e de auxinas para indução de calos primários e embriogênicos. A concentração de 2,5 mg.L-1 de 2,4-D, em meio básico, sem adição de carvão ativado, permitiu a formação de embriões somáticos em 80% dos calos embriogênicos e levou à obtenção o maior número de embriões formados por calo, após seis meses de indução. Em meio sem auxina, os embriões somáticos obtidos foram diferenciados, maturados e convertidos em plantas completas ao final de 12 meses. A conservação de sementes de Attalea speciosa com 5% de umidade foi testada em quatro temperaturas (-196 °C, -20 °C, 6 °C e 25 °C) e quatro períodos de armazenamento (0, 90, 180 e 360 dias). Os testes de germinação pós-conservação foram realizados a partir do resgate e cultivo dos embriões zigóticos in vitro. Verificou-se uma queda significativa nas taxas de germinação nos materiais mantidos na temperatura de 25 °C após 360 dias. Os resultados obtidos com esse trabalho sugerem que, por tolerar dessecação abaixo de 5% e conservação a baixas temperaturas (-196 °C, - 20 °C), situações nas quais não houve redução nas taxas de germinação, as sementes de Attalea speciosa apresentem um comportamento de armazenamento ortodoxo. Os resultados aqui apresentados são os primeiros dados de perfil metabólico relatados para o embrião durante a germinação de uma palmeira, além de ser o primeiro protocolo desenvolvido para embriogênese somática e determinação do comportamento de armazenamento e condições de conservação para Attalea speciosa. / The babassu (Attalea speciosa Mart ex Spreng) is a native oleaginous palm from Brazil, source of many raw materials to food and cosmetic industries, from whose seeds can be extracted an oil with many applications, including the production of biofuel and that, besides, is important for the people who live in North and Northeast regions of the country. Basic studies concerning the germination, regeneration and conservation of this palm tree are essential to the comprehension of reproductive aspects of this important genetic resource. The reproductive biology of the babassu was investigated in studies approaching physiological, morphological, biochemical and metabolic aspects of the in vitro germination. Growth and development of cotyledon and of seedling structures were evaluated during 0, 7, 14, 21, 30, 45, 90 and 120 days of in vitro culturing. Fresh and dry masses and the length of seedling structures were stablished along the germination time. It was found that the germination occurred slowly, with the continuous growth of the cotyledon until 45 days, moment from which the cataphylls and the eophyll emerged, followed by the primary root. The metabolite profile and fatty acids analysis allowed the confirmation that proteins and lipids are the main reserve used by the cotyledon in the beginning of the germination, when they are degraded, releasing amino acids, glycerol and free fatty acids. Attempting to the vegetative reproduction of the specie resulted in the development of the first protocol for the somatic embryogenesis, from zygotic embryos. The MS culture medium with salts and vitamins was used as basic medium, complemented with L-glutamine (0.5 g.L-1), L-cysteine (0.1 g.L-1), sucrose (30 g.L-1) and auxins for the primary and embryogenic callus induction. The 2,4-D concentration of 2.5 mg.L-1, on basic medium, without activate charcoal, allowed the formation of somatic embryos on 80% of the embryogenic calli and the achievement of the greatest number of somatic embryos per callus, after six months of induction. The somatic embryos obtained were differentiated, maturated and converted to full plants on a medium without auxins, after 12 months. The seed conservation of Attalea speciosa, with 5% of water content was tested under four temperatures (-196 °C, -20 °C, 6 °C e 25 °C) and four periods of conservation time (0, 90, 180 e 360 days). The germination tests post-conservation were made from the zygotic embryo rescue and culturing in vitro. There was a significate reduction on the germination rates from the materials that were kept on the temperature of 25 °C after 360 days. The results achieved from this work imply that, tolerating desiccation below 5% of humidity and conservation under low temperatures (-196 °C, -20 °C), situations where there was no reduction on the germination rates, the Attalea speciosa seeds show a storage behavior orthodox. The results presented here are the first data of metabolite profile for a palm embryo during germination, besides, this is the first somatic embryogenesis protocol and a reliable determination of the storage behavior and of conservation conditions for Attalea speciosa.