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Investigação do fenótipo das células presentes nos líquidos cavitários para o diagnóstico diferencial entre as efusões malignas e as benignasReis, Manoela Lira January 2015 (has links)
Dissertação (mestrado) - Universidade Federal de Santa Catarina, Centro de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Farmácia, Florianópolis, 2015. / Made available in DSpace on 2015-11-17T03:12:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1
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Previous issue date: 2015 / As membranas serosas pleurais, peritoneais e pericárdicas são aquelas que envolvem, respectivamente, as superfícies do pulmão, da cavidade abdominal e do coração. Em condições patológicas, uma quantidade maior de líquido se acumula nessas cavidades formando um processo denominado efusão cavitária. Efusões cavitárias malignas são definidas como a presença de células malignas nas cavidades serosas. Recentes estudos mostram que a análise multiparamétrica por citometria de fluxo é uma metodologia sensível e rápida que permite avaliar um grande número de células com diferentes marcadores. Dessa forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o fenótipo das células presentes nos líquidos cavitários e analisar a sua importância como marcadores fenotípicos para o diagnóstico diferencial entre as efusões malignas e as benignas. A primeira etapa deste trabalho consistiu em padronizar a marcação e a análise das amostras de efusões serosas por citometria de fluxo. Após a padronização, a celularidade de 65 amostras de líquidos cavitários foi avaliada por citometria de fluxo e comparada com a avaliação da morfologia por microscopia de luz, a qual é metodologia considerada padrão ouro para análise desses líquidos. A etapa seguinte consistiu em avaliar a eficiência dos marcadores Ber-EP4, TTF-1, Vimentina, GCFPD-15, CK7 e CK20 utilizados na imunocitoquímica para diferenciar as células reacionais das neoplásicas por citometria de fluxo em líquidos pleurais. Apesar do pequeno número de amostras analisadas (n=18), foi possível concluir que o painel de anticorpos padronizado neste estudo é útil para distinguir as células neoplásicas das normais e, com isso, fazer o diagnóstico diferencial entre as efusões malignas e as benignas. No entanto, mais estudos com um número maior de amostras serão necessários para o estabelecimento da metodologia na rotina laboratorial de investigação de células neoplásicas.<br> / Abstract : The pleural, pericardial and peritoneal membranes are respectively engaging the lung, abdominal cavity and the heart surfaces. Under pathological conditions, a greate quantity of fluid accumulates in these cavities forming a process known as cavity effusions. Malignant effusions are defined as the that the multi-parameter flow cytometric analysis is a sensitive method, which allows quick evaluation of a large number of cells with different markers. Thus, the aim of this study was to assess the phenotype of these cells in the cavity fluids, besides analyzing their importance as phenotypic markers for the differential diagnosis of malignant and benign effusions. The first stage of this work was to standardize the measurement and the analysis of samples of serous effusions by flow cytometry. After standardization, the cellularity from 65 samples of serous fluid was evaluated by flow cytometry and compared with the assessment of morphology by light microscopy, which is considered the gold standard methodology for analysis of liquids. The next step was to evaluate the efficiency of the Ber-EP4, TTF-1, Vimentina, GCFPD-15, CK7 and CK20 markers used in immunocytochemistry to differentiate reactions from neoplastic cells by flow cytometry in pleural fluids. Despite the small number of samples (n = 18), the results showed that the standard antibody panel in this study is useful to distinguish cancer from normal cells and, as a result, it is possible to make the differential diagnosis of malignant and benign effusions. However, further studies with a larger number of samples are needed to establish the methodology in laboratory investigation of cancer cells routine.
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Comportamento de matrizes de colágeno utilizadas no tratamento de feridas planas induzidas em pele de rato / Collagen matrices behavior in treatment of skin rat woundsGirardi, Raquel Cecília Goy 08 August 2005 (has links)
A potencialidade do uso de uma matriz de colágeno e de um creme preparado pela mistura de um creme hidratante comercial com um gel de colágeno (90:10 m/m) foi avaliada no processo de cicatrização de feridas planas produzidas em pele de ratos. A matriz acelular de colágeno e o gel de colágeno foram obtidos a partir de serosa porcina por meio de um tratamento alcalino que não altera a estrutura do colágeno nativo e remove componentes celulares. Este estudo fez um comparativo macroscópico e histológico do processo cicatricial das feridas planas tratadas com soro fisiológico ou creme comercial (controles) e as tratadas com a sutura de uma membrana de colágeno (matriz) ou creme com colágeno. As feridas foram produzidas pela retirada de um flap de pele de 20 'MM POT.2' e receberam curativos diários. O material para histologia foi coletado nos 3º, 5º, 7º e 9º dias pós-cirurgia. Apesar de não ter havido uma acentuada diferença na cicatrização das feridas planas dos dois grupos de controle e no grupo que recebeu tratamento do creme contendo colágeno, a presença deste no creme indicou uma pequena diferença no grau de colageinização, o que demonstra serem válidas mais investigações nesta direção, buscando uma melhor proporção creme:gel e/ou diferentes concentrações para o gel de colágeno. A membrana demonstrou ser uma ótima opção para o reparo de lesões por ser de fácil obtenção e armazenamento, ter baixo custo e ser excelente para manuseio (maleável e resistente), além de atender às principais exigências mencionadas na literatura para qualquer curativo biológico oclusivo / The potentiality of the use of a collagen based matrix and of a cream prepared by the mixture of a commercial cream plus collagen (90:10 w/w) were evaluated in the healing process of rats skin. The acellular collagen matrix and the collagen gel were obtained by an alkaline treatment of porcine serosa which does not damage the native collagen structure and removes cellular components. This study compared by macroscopy analysis and histology the skin healing repair of wounds treated with physiological solution or commercial cream (control groups) and those treated with collagen based matrix suture or commercial cream plus collagen mix. The wounds were made by removing a skin flap with 20 'MM POT.2' and have received treatment every day. The material for histology was retired on the 3rd, 5th, 7th and 9th days after surgery. Even without an accentuated difference in the healing process of both control groups and the wounds treated with the commercial cream plus collagen, its presence in the cream showed a small difference of the collagen level in the new skin what validate more investigations on this way, searching better cream:gel proportion and/or different gel concentration. The matrix demonstrated to be a very good option to help wound healing because it is easily shelf able and obtainable, it has cheap cost and it is extremely nice to handle (resistant and manipulation able), besides to follow the main requirements present in the literature citation for any biologic occlusive dressing
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Comportamento de matrizes de colágeno utilizadas no tratamento de feridas planas induzidas em pele de rato / Collagen matrices behavior in treatment of skin rat woundsRaquel Cecília Goy Girardi 08 August 2005 (has links)
A potencialidade do uso de uma matriz de colágeno e de um creme preparado pela mistura de um creme hidratante comercial com um gel de colágeno (90:10 m/m) foi avaliada no processo de cicatrização de feridas planas produzidas em pele de ratos. A matriz acelular de colágeno e o gel de colágeno foram obtidos a partir de serosa porcina por meio de um tratamento alcalino que não altera a estrutura do colágeno nativo e remove componentes celulares. Este estudo fez um comparativo macroscópico e histológico do processo cicatricial das feridas planas tratadas com soro fisiológico ou creme comercial (controles) e as tratadas com a sutura de uma membrana de colágeno (matriz) ou creme com colágeno. As feridas foram produzidas pela retirada de um flap de pele de 20 'MM POT.2' e receberam curativos diários. O material para histologia foi coletado nos 3º, 5º, 7º e 9º dias pós-cirurgia. Apesar de não ter havido uma acentuada diferença na cicatrização das feridas planas dos dois grupos de controle e no grupo que recebeu tratamento do creme contendo colágeno, a presença deste no creme indicou uma pequena diferença no grau de colageinização, o que demonstra serem válidas mais investigações nesta direção, buscando uma melhor proporção creme:gel e/ou diferentes concentrações para o gel de colágeno. A membrana demonstrou ser uma ótima opção para o reparo de lesões por ser de fácil obtenção e armazenamento, ter baixo custo e ser excelente para manuseio (maleável e resistente), além de atender às principais exigências mencionadas na literatura para qualquer curativo biológico oclusivo / The potentiality of the use of a collagen based matrix and of a cream prepared by the mixture of a commercial cream plus collagen (90:10 w/w) were evaluated in the healing process of rats skin. The acellular collagen matrix and the collagen gel were obtained by an alkaline treatment of porcine serosa which does not damage the native collagen structure and removes cellular components. This study compared by macroscopy analysis and histology the skin healing repair of wounds treated with physiological solution or commercial cream (control groups) and those treated with collagen based matrix suture or commercial cream plus collagen mix. The wounds were made by removing a skin flap with 20 'MM POT.2' and have received treatment every day. The material for histology was retired on the 3rd, 5th, 7th and 9th days after surgery. Even without an accentuated difference in the healing process of both control groups and the wounds treated with the commercial cream plus collagen, its presence in the cream showed a small difference of the collagen level in the new skin what validate more investigations on this way, searching better cream:gel proportion and/or different gel concentration. The matrix demonstrated to be a very good option to help wound healing because it is easily shelf able and obtainable, it has cheap cost and it is extremely nice to handle (resistant and manipulation able), besides to follow the main requirements present in the literature citation for any biologic occlusive dressing
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Avaliação cirúrgica e laboratorial da utilização de pericárdio homólogo em lesões por abrasão em serosa de cólon maior (flexura pélvica) de equinos / Surgical and laboratorial evaluation of the use of homologous pericardium in abrasion lesions on large colon serosal surface in horsesPaulo Ari Tietböhl Leiria 16 December 2010 (has links)
As aderências intra-abdominais são complicações relativamente comuns das cirurgias abdominais dos equinos após uma intervenção cirúrgica, podendo resultar em processos obstrutivos, dor abdominal recorrente e vôlvulos. Os avanços técnicos e farmacológicos são direcionados a minimizar o trauma e a inflamação peritoneal, aumentar o processo de fibrinólise, promover movimentação intestinal e separar tecidos potencialmente adesiogênicos durante a fase inicial de cicatrização. No presente trabalho foram utilizados 10 equinos, machos, SRD, entre 4 e 15 anos e peso entre 300 e 400kg. Incluíram-se no experimento os animais que não apresentaram alterações no exame físico e laboratorial, prévios. A membrana biológica utilizada era proveniente do banco de membranas biológicas do HOVET da FMVZ-USP. O protocolo anestésico consistiu de sedação com associação de xilazina 10% (0,7mg/kg) e tartarato de butorfanol (0,04mg/kg). A laparotomia foi realizada pelo flanco esquerdo com os animais em posição quadrupedal. No ponto médio de sua exteriorização (flexura pélvica) foi induzida lesão por abrasão em superfície serosa, com dimensão de 7x7 cm. Após a indução das lesões, nos animais do grupo 1 (cinco animais), a área lesionada foi recoberta com membrana biológica. Nos animais do grupo 2 (cinco animais), o segmento intestinal exteriorizado, após a criação das lesões, foi lavado com solução fisiológica e reposicionado na cavidade abdominal. Em ambos os grupos foi realizada a sutura de um ponto simples no centro da lesão utilizando-se fio de nylon 2-0, com o objetivo de referendar a lesão criada. As suturas dos planos musculares e subcutâneo foram realizadas com sutura contínua com fio absorvível Poliglactina 910 n0 2 e n0 00 respectivamente, e a pele foi suturada de maneira contínua utilizando-se nylon n0 0. A avaliação pós-operatória consistiu de avaliação física diária e coleta de material para análise laboratorial (sangue, soro e líquido peritoneal) semanalmente, durante quatro semanas. Decorridos 30 dias após o procedimento cirúrgico, os animais foram submetidos à nova laparotomia a fim de verificar a presença de aderências intra-abdominais, aspecto macroscópico das lesões e do implante, e realização de biópsia intestinal. A coleta do material para a realização dos exames laboratoriais foi realizada nos momentos: M0- período pré-operatório imediato, M7- 7 dias de pós-operatório, M14- 14 dias de pós-operatório, M21- 21 dias de pós-operatório, M28- 28 dias de pós-operatório. A laparotomia realizada em posição mais ventral e seguindo a técnica de grade possibilitou menor trauma cirúrgico, mas esta abordagem ofereceu ao cirurgião menor campo operatório, determinando alguma dificuldade de exteriorização do segmento intestinal. A evolução clínica dos animais foi satisfatória apresentando vantagem quando comparada a citação da literatura. Durante a reavaliação cirúrgica verificou-se presença de tecido cicatricial fibroso entre os planos musculares que determinou pequena dificuldade para o acesso da cavidade abdominal. Não foram observadas aderências intra-abdominais em ambos os grupos. O aspecto macroscópico das lesões no grupo experimental caracterizou-se por extensa área de hiperemia com cobertura de tecido seroso; e no grupo controle, verificou-se pequeno tecido cicatricial recobrindo o material de sutura. A realização das biópsias intestinais foi executada com facilidade bem como sua sutura. A avaliação histológica demonstrou em ambos os grupos intensa infiltração eosinofílica, presença de colágeno em fase de maturação além de evidências de intensa neovascularização. A partir da análise dos valores laboratoriais observaram-se diferenças estatísticas significativas nos valores sanguíneos de bilirrubinas, hematócrito, monócito, uréia; e no líquido peritoneal estas diferenças foram manifestadas em proteína, densidade e número de leucócitos segmentados. Conclui-se que a abrasão focal de serosa de cólon maior como único fator promotor de aderências intra-abdominais fibrosas foi insuficiente. Além disso, a utilização de pericárdio equino como proteção de áreas de lesão intestinal, mesmo não tendo sido comprovada sua eficácia na minimização das aderências intra-abdominais, apresenta-se viável e possível, pois não foram observadas diferenças estatisticamente significativas (hematológicas, bioquímicas ou do líquido peritoneal) na comparação entre os grupos, ou alterações que determinasse efeitos deletérios aos animais. / The intra-abdominal adhesions are relatively common complications of abdominal surgery in horses and they can result in obstructive processes, abdominal pain and recurrent volvulus. The technical and pharmacological advances are aimed to minimize trauma and peritoneal inflammation, increase the fibrinolysis process, promote intestinal peristalsis and separate potentially adhesiogenic tissues during the initial phase of healing. In this study were used 10 horses, male, mixed breed, between 4 and 15 years old and weighing between 300 and 400kg. The experiment included animals that showed no changes in physical and laboratorial examination. The biological membrane was from the bank of biological membranes of the HOVET-FMVZ-USP. The anesthetic protocol consisted of sedation with a combination of ketamine 10% (0.7 mg / kg) and butorphanol (0.04 mg / kg). The laparotomy was performed by the left flank and the animal was kept in standing position. At the midpoint of the pelvic flexure was induced the injury by abrasion in serous surface, with a size of 7x7 cm. After the lesion induction, the group 1 (five animals) had the injured area covered with a biological membrane. The group 2 (five animals) had the intestinal segment exteriorized, and after the lesion creation it was washed with saline and repositioned in the abdominal cavity. In both groups was performed suturing a single point in the center of the lesion using 2-0 nylon, in order to endorse the lesion created. The sutures of the muscle layers and subcutaneous tissue were performed with continuous suture with Polyglactin 910 n0 2 and n0 00 respectively, and the skin was sutured continuously using nylon n0 0. The postoperative evaluation consisted of daily physical assessment and collection of material for laboratory analysis (blood, serum and peritoneal fluid) weekly for four weeks. After 30 days, the animals underwent another laparotomy to verify the presence of intra-abdominal adhesions, macroscopic aspect of the lesions and implant, and intestinal biopsy. The collection of material for the completion of laboratory tests was performed at moments M0- pre-operative, M7- 7 days post-operatively, M14- 14 days post-operatively, M21- 21 days post-operatively, M28- 28 days post-operatively. The laparotomy was performed in ventral position following the technique of grid that´s promoted less surgical trauma, but this approach offered to surgeon less surgical field, causing some difficulty for exteriorization of the intestinal segment. The clinical outcome was satisfactory showing advantage when compared literature. During the surgical reassessment verified the presence of fibrous scar tissue between the muscle layers that determined some trouble to access the abdominal cavity. There were no intra-abdominal adhesions in both groups. The macroscopic aspect of lesions in the experimental group was characterized by extensive area of redness covered serous tissue, and the control group there was little scar tissue overlying the suture material. The intestinal biopsies and suture were performed easily. The histological evaluation showed in both groups intense eosinophilic infiltration, presence of collagen in the maturation stage in addition to evidence of intense neovascularization. The laboratory results showed statistically significant differences in blood levels of bilirubin, hematocrit, monocyte, urea, and into peritoneal fluid, these differences were manifested in protein density and leukocytes. Concluded that the focal serosal abrasion of the large colon as the single factor promoting intra-abdominal fibrous adhesions was insufficient. Furthermore, the use of equine pericardium as protecting areas of intestinal injury, even without prove their effectiveness in minimizing intra-abdominal adhesions, it appears feasible and possible, because there were no statistically difference (hematological, biochemical or peritoneal fluid) between the groups, or changes that would determine deleterious effects to the animals.
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Avaliação cirúrgica e laboratorial da utilização de pericárdio homólogo em lesões por abrasão em serosa de cólon maior (flexura pélvica) de equinos / Surgical and laboratorial evaluation of the use of homologous pericardium in abrasion lesions on large colon serosal surface in horsesLeiria, Paulo Ari Tietböhl 16 December 2010 (has links)
As aderências intra-abdominais são complicações relativamente comuns das cirurgias abdominais dos equinos após uma intervenção cirúrgica, podendo resultar em processos obstrutivos, dor abdominal recorrente e vôlvulos. Os avanços técnicos e farmacológicos são direcionados a minimizar o trauma e a inflamação peritoneal, aumentar o processo de fibrinólise, promover movimentação intestinal e separar tecidos potencialmente adesiogênicos durante a fase inicial de cicatrização. No presente trabalho foram utilizados 10 equinos, machos, SRD, entre 4 e 15 anos e peso entre 300 e 400kg. Incluíram-se no experimento os animais que não apresentaram alterações no exame físico e laboratorial, prévios. A membrana biológica utilizada era proveniente do banco de membranas biológicas do HOVET da FMVZ-USP. O protocolo anestésico consistiu de sedação com associação de xilazina 10% (0,7mg/kg) e tartarato de butorfanol (0,04mg/kg). A laparotomia foi realizada pelo flanco esquerdo com os animais em posição quadrupedal. No ponto médio de sua exteriorização (flexura pélvica) foi induzida lesão por abrasão em superfície serosa, com dimensão de 7x7 cm. Após a indução das lesões, nos animais do grupo 1 (cinco animais), a área lesionada foi recoberta com membrana biológica. Nos animais do grupo 2 (cinco animais), o segmento intestinal exteriorizado, após a criação das lesões, foi lavado com solução fisiológica e reposicionado na cavidade abdominal. Em ambos os grupos foi realizada a sutura de um ponto simples no centro da lesão utilizando-se fio de nylon 2-0, com o objetivo de referendar a lesão criada. As suturas dos planos musculares e subcutâneo foram realizadas com sutura contínua com fio absorvível Poliglactina 910 n0 2 e n0 00 respectivamente, e a pele foi suturada de maneira contínua utilizando-se nylon n0 0. A avaliação pós-operatória consistiu de avaliação física diária e coleta de material para análise laboratorial (sangue, soro e líquido peritoneal) semanalmente, durante quatro semanas. Decorridos 30 dias após o procedimento cirúrgico, os animais foram submetidos à nova laparotomia a fim de verificar a presença de aderências intra-abdominais, aspecto macroscópico das lesões e do implante, e realização de biópsia intestinal. A coleta do material para a realização dos exames laboratoriais foi realizada nos momentos: M0- período pré-operatório imediato, M7- 7 dias de pós-operatório, M14- 14 dias de pós-operatório, M21- 21 dias de pós-operatório, M28- 28 dias de pós-operatório. A laparotomia realizada em posição mais ventral e seguindo a técnica de grade possibilitou menor trauma cirúrgico, mas esta abordagem ofereceu ao cirurgião menor campo operatório, determinando alguma dificuldade de exteriorização do segmento intestinal. A evolução clínica dos animais foi satisfatória apresentando vantagem quando comparada a citação da literatura. Durante a reavaliação cirúrgica verificou-se presença de tecido cicatricial fibroso entre os planos musculares que determinou pequena dificuldade para o acesso da cavidade abdominal. Não foram observadas aderências intra-abdominais em ambos os grupos. O aspecto macroscópico das lesões no grupo experimental caracterizou-se por extensa área de hiperemia com cobertura de tecido seroso; e no grupo controle, verificou-se pequeno tecido cicatricial recobrindo o material de sutura. A realização das biópsias intestinais foi executada com facilidade bem como sua sutura. A avaliação histológica demonstrou em ambos os grupos intensa infiltração eosinofílica, presença de colágeno em fase de maturação além de evidências de intensa neovascularização. A partir da análise dos valores laboratoriais observaram-se diferenças estatísticas significativas nos valores sanguíneos de bilirrubinas, hematócrito, monócito, uréia; e no líquido peritoneal estas diferenças foram manifestadas em proteína, densidade e número de leucócitos segmentados. Conclui-se que a abrasão focal de serosa de cólon maior como único fator promotor de aderências intra-abdominais fibrosas foi insuficiente. Além disso, a utilização de pericárdio equino como proteção de áreas de lesão intestinal, mesmo não tendo sido comprovada sua eficácia na minimização das aderências intra-abdominais, apresenta-se viável e possível, pois não foram observadas diferenças estatisticamente significativas (hematológicas, bioquímicas ou do líquido peritoneal) na comparação entre os grupos, ou alterações que determinasse efeitos deletérios aos animais. / The intra-abdominal adhesions are relatively common complications of abdominal surgery in horses and they can result in obstructive processes, abdominal pain and recurrent volvulus. The technical and pharmacological advances are aimed to minimize trauma and peritoneal inflammation, increase the fibrinolysis process, promote intestinal peristalsis and separate potentially adhesiogenic tissues during the initial phase of healing. In this study were used 10 horses, male, mixed breed, between 4 and 15 years old and weighing between 300 and 400kg. The experiment included animals that showed no changes in physical and laboratorial examination. The biological membrane was from the bank of biological membranes of the HOVET-FMVZ-USP. The anesthetic protocol consisted of sedation with a combination of ketamine 10% (0.7 mg / kg) and butorphanol (0.04 mg / kg). The laparotomy was performed by the left flank and the animal was kept in standing position. At the midpoint of the pelvic flexure was induced the injury by abrasion in serous surface, with a size of 7x7 cm. After the lesion induction, the group 1 (five animals) had the injured area covered with a biological membrane. The group 2 (five animals) had the intestinal segment exteriorized, and after the lesion creation it was washed with saline and repositioned in the abdominal cavity. In both groups was performed suturing a single point in the center of the lesion using 2-0 nylon, in order to endorse the lesion created. The sutures of the muscle layers and subcutaneous tissue were performed with continuous suture with Polyglactin 910 n0 2 and n0 00 respectively, and the skin was sutured continuously using nylon n0 0. The postoperative evaluation consisted of daily physical assessment and collection of material for laboratory analysis (blood, serum and peritoneal fluid) weekly for four weeks. After 30 days, the animals underwent another laparotomy to verify the presence of intra-abdominal adhesions, macroscopic aspect of the lesions and implant, and intestinal biopsy. The collection of material for the completion of laboratory tests was performed at moments M0- pre-operative, M7- 7 days post-operatively, M14- 14 days post-operatively, M21- 21 days post-operatively, M28- 28 days post-operatively. The laparotomy was performed in ventral position following the technique of grid that´s promoted less surgical trauma, but this approach offered to surgeon less surgical field, causing some difficulty for exteriorization of the intestinal segment. The clinical outcome was satisfactory showing advantage when compared literature. During the surgical reassessment verified the presence of fibrous scar tissue between the muscle layers that determined some trouble to access the abdominal cavity. There were no intra-abdominal adhesions in both groups. The macroscopic aspect of lesions in the experimental group was characterized by extensive area of redness covered serous tissue, and the control group there was little scar tissue overlying the suture material. The intestinal biopsies and suture were performed easily. The histological evaluation showed in both groups intense eosinophilic infiltration, presence of collagen in the maturation stage in addition to evidence of intense neovascularization. The laboratory results showed statistically significant differences in blood levels of bilirubin, hematocrit, monocyte, urea, and into peritoneal fluid, these differences were manifested in protein density and leukocytes. Concluded that the focal serosal abrasion of the large colon as the single factor promoting intra-abdominal fibrous adhesions was insufficient. Furthermore, the use of equine pericardium as protecting areas of intestinal injury, even without prove their effectiveness in minimizing intra-abdominal adhesions, it appears feasible and possible, because there were no statistically difference (hematological, biochemical or peritoneal fluid) between the groups, or changes that would determine deleterious effects to the animals.
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Contribution of the canonical Wnt pathway in Tribolium anterior-posterior axis patterningFu, Jinping January 1900 (has links)
Doctor of Philosophy / Department of Biology / Susan J. Brown / How animals polarize and establish the main axis during embryogenesis has been one
of the most attractive questions in Biology. Increasing body of work in various model
organisms implicates that most metazoans utilize the canonical Wnt signaling pathway to
pattern the anterior-posterior (AP) axis, despite the limited evidence from arthropods. In
Drosophila, a highly derived insect, canonical Wnt activity is not required for global AP
patterning, but in typical insects including Tribolium castaneum, loss of canonical Wnt
activity results in posterior truncation. To determine the eff ects of increased canonical Wnt
levels, I analyzed the function of axin, encoding a highly conserved negative regulator of the pathway. Tc-axin transcripts are maternally localized to the anterior pole in freshly laid
eggs. Parental RNAi for Tc-axin produced progeny phenotypes that ranged from mildly
a ffected embryos with cuticles displaying a graded loss of anterior structures, to severely
a ffected embryos lacking cuticles and condensing to the posterior pole of the egg without any de finable structures. Altered expression patterns of several blastodermal markers indicated anterior expansion of posterior fates. Epistasis analysis of other canonical Wnt pathway components and the expansion of Tc-caudal expression, a Wnt target, suggest that the eff ects of Tc-axin depletion are mediated through this pathway and that canonical Wnt activity must be repressed for proper anterior development in Tribolium. These studies provide unique evidence that canonical Wnt activity must be carefully regulated along the AP axis in an arthropod, and support an ancestral role for Wnt signaling in de fining AP polarity and patterning in metazoan development.
Additionally, as an anterior structure, the extraembryonic serosa is reduced in Tc-axin
RNAi progeny. However, in Tc-pangolin (Tc-pan, a homolog of Wnt downstream component) RNAi progeny, an interesting phenotype was produced that serosa was not only reduced but also separated into distinct anterior and dorsal domains. I carefully recorded this phenomenon with live imaging using a Tribolium transgenic line that expresses GFP in each nucleus. Through careful examination with embryonic fate-map markers, I found that the tissue between separated serosa domains is dorsally extended head lobe. And I also found that in severe phenotype, dorsal serosa was completely gone while anterior serosa not, suggesting independent regulation mechanisms for anterior and dorsal serosa formation. This descriptive data will complement future study in the genetic mechanism underlying serosa formation by providing more details in morphogenesis.
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Habilidades auditivas verbais e temporais em crianças de 6 a 10 anos com e sem episódios comprovados de perda auditiva condutiva flutuante recorrente, nos primeiros anos de vida / Verbal and temporal auditory skills in children 6 to 10 years with and without episodes of proven floating recurrent conductive hearing loss, in the first years of lifeVilla, Priscila Cruvinel 21 January 2014 (has links)
A otite média, afecção comum na infância, acarreta uma perda auditiva condutiva flutuante, pois uma vez tratada os limiares auditivos voltam aos valores normais. Preocupação ocorre quando estes episódios tornam-se recorrentes levando a criança a receber uma estimulação sonora inconsistente do sistema nervoso auditivo central, dificultando a percepção dos sons da fala. O objetivo do presente estudo foi investigar se crianças com episódios recorrentes e comprovados de otite média com efusão apresentam alterações das habilidades auditivas que compõe o processamento auditivo. Foram avaliadas 59 crianças com idade entre 6 e 10 anos, divididas em dois grupos: grupo experimental composto por 29 crianças de ambos os gêneros com histórico documentado de otite media com efusão, perda auditiva condutiva nos primeiros anos de vida e com e sem história de cirurgia para colocação de tubo de ventilação na idade pré-escolar e escolar; e grupo controle, composto por 30 crianças, pareadas em idade e gênero com o grupo experimental, mas sem história da afecção. Na avaliação das habilidades auditivas que compõe o processamento auditivo foram utilizados o teste fala com ruído (TFR), teste dicótico de dígitos (TDD) e teste Gaps-in-noise (GIN). Todas as crianças no momento da avaliação estavam livres de perda auditiva condutiva. Os resultados mostraram que: os dois grupos não apresentavam diferenças dos limiares tonais, no momento da avaliação; o grupo experimental apresentou resultados inferiores no TFR e GIN, tanto na análise quantitativa quanto na qualitativa; o TDD apenas na análise qualitativa diferenciou os dois grupos. Pode-se concluir, no presente estudo, , que crianças com história de otite média com efusão recorrente e persistente, nas fases pré-escolar e escolar, apresentaram transtorno do processamento auditivo. / Otitis media, a common affection in childhood, causes a fluctuating conductive hearing loss, because once treated the hearing thresholds back to normal values. Concern occurs when these episodes become recurring leading the child to receive an inconsistent sound stimulation auditory central nervous system, it difficult for the perception of speech sounds. The aim of this study was to investigate whether children with recurrent episodes of proven otitis media with effusion present alterations of auditory skills that composes the auditory processing. We evaluated 59 children with ages between 6 and 10 years, divided into two groups: the experimental group comprised of 29 children of both genders with documented history of otitis media with effusion, conductive hearing loss in the early years of life and with and without history of surgery for ventilation tube placement in preschool and school age; and the control group, consisting of 30 children, paired in age and gender with the experimental group, but no history of the disease. In the assessment of auditory skills that make up the auditory processing was used Speech in Noise Test (SNT), Dichotic Digits Test (DDT) and Gaps in Noise test (GIN). All children had at the time of assessment were free of conductive hearing loss. The results showed that: the two groups showed no differences in tonal thresholds, at the time of the assessment; the experimental group showed results below the SNT and GIN, both in qualitative and in quantitative analysis; DDT only in qualitative analysis differentiated the two groups. It can be concluded, with the results of the work, that children with a history of otitis media with effusion recurrent and persistent, pre-school and school phases, may have auditory processing disorder.
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Habilidades auditivas verbais e temporais em crianças de 6 a 10 anos com e sem episódios comprovados de perda auditiva condutiva flutuante recorrente, nos primeiros anos de vida / Verbal and temporal auditory skills in children 6 to 10 years with and without episodes of proven floating recurrent conductive hearing loss, in the first years of lifePriscila Cruvinel Villa 21 January 2014 (has links)
A otite média, afecção comum na infância, acarreta uma perda auditiva condutiva flutuante, pois uma vez tratada os limiares auditivos voltam aos valores normais. Preocupação ocorre quando estes episódios tornam-se recorrentes levando a criança a receber uma estimulação sonora inconsistente do sistema nervoso auditivo central, dificultando a percepção dos sons da fala. O objetivo do presente estudo foi investigar se crianças com episódios recorrentes e comprovados de otite média com efusão apresentam alterações das habilidades auditivas que compõe o processamento auditivo. Foram avaliadas 59 crianças com idade entre 6 e 10 anos, divididas em dois grupos: grupo experimental composto por 29 crianças de ambos os gêneros com histórico documentado de otite media com efusão, perda auditiva condutiva nos primeiros anos de vida e com e sem história de cirurgia para colocação de tubo de ventilação na idade pré-escolar e escolar; e grupo controle, composto por 30 crianças, pareadas em idade e gênero com o grupo experimental, mas sem história da afecção. Na avaliação das habilidades auditivas que compõe o processamento auditivo foram utilizados o teste fala com ruído (TFR), teste dicótico de dígitos (TDD) e teste Gaps-in-noise (GIN). Todas as crianças no momento da avaliação estavam livres de perda auditiva condutiva. Os resultados mostraram que: os dois grupos não apresentavam diferenças dos limiares tonais, no momento da avaliação; o grupo experimental apresentou resultados inferiores no TFR e GIN, tanto na análise quantitativa quanto na qualitativa; o TDD apenas na análise qualitativa diferenciou os dois grupos. Pode-se concluir, no presente estudo, , que crianças com história de otite média com efusão recorrente e persistente, nas fases pré-escolar e escolar, apresentaram transtorno do processamento auditivo. / Otitis media, a common affection in childhood, causes a fluctuating conductive hearing loss, because once treated the hearing thresholds back to normal values. Concern occurs when these episodes become recurring leading the child to receive an inconsistent sound stimulation auditory central nervous system, it difficult for the perception of speech sounds. The aim of this study was to investigate whether children with recurrent episodes of proven otitis media with effusion present alterations of auditory skills that composes the auditory processing. We evaluated 59 children with ages between 6 and 10 years, divided into two groups: the experimental group comprised of 29 children of both genders with documented history of otitis media with effusion, conductive hearing loss in the early years of life and with and without history of surgery for ventilation tube placement in preschool and school age; and the control group, consisting of 30 children, paired in age and gender with the experimental group, but no history of the disease. In the assessment of auditory skills that make up the auditory processing was used Speech in Noise Test (SNT), Dichotic Digits Test (DDT) and Gaps in Noise test (GIN). All children had at the time of assessment were free of conductive hearing loss. The results showed that: the two groups showed no differences in tonal thresholds, at the time of the assessment; the experimental group showed results below the SNT and GIN, both in qualitative and in quantitative analysis; DDT only in qualitative analysis differentiated the two groups. It can be concluded, with the results of the work, that children with a history of otitis media with effusion recurrent and persistent, pre-school and school phases, may have auditory processing disorder.
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