Šiame darbe buvo palygintas skirtingo dydžio fluoresceino izo- tio- cianin- (FITC) dekstranų molekulių pernašos efektyvumas naudojant elektroporaciją (vienas 800 V/cm arba 1500 V/cm amplitudės stačiakampis impulsas, impulso trukmė 100 μs ir 0.5 ms) ir sonoporaciją (3 MHz, 100% veikimo ciklas, 500 kPa neigiamu akustiniu slėgis, poveikio trukmė 1-10s. Darbo tikslas – nustatyti optimalias mažų molekulių pernašos į ląsteles elektroporacijos ir sonoporacijos sąlygas, siekiant tolimesniuose tyrimuose apjungti šias dvi pagal metodiką kardinaliai besiskiriančias permeabilizacijos kryptis taip, kad būtų pasiektas sinerginis arba suminis permeabilizacijos efektas. Eksperimentai atlikti naudojant Kiniško žiurkėno kiaušidžių (CHO) ląstelės. Naudojant fluorescencinės mikroskopijos metodiką, pernašos efektyvumas įvertintas pagal fluoresceinu nudažytų ląstelių skaičiaus procentinę išraišką. Į ląsteles įvestos 4, 10, ir 70 kDa (atitinkamai 1.4, 2.3 ir 6 nm hidrodinaminio spindulio) FITC dekstranų molekulės, pagal kurių patekimą į ląstelių vidų buvo interpretuojamas susidariusių porų dydis. Sonoporuotų ląstelių skaičius mažėjo didėjant įvedamų fluorescuojančių molekulių matmenims. Didžiausias sonoporuotų ląstelių pralaidumas nustatytas iki 2.3 nm hidrodinaminio spindulio (4 ir 10 kDa FITC dekstranų) molekulėms, jos į ląsteles galėjo difunduoti praėjus 5 min po sonoporacijos. Naudojant elektroporaciją, ar sonoporaciją magnetiniame lauke, visų dydžių FITC dekstranų pernaša į ląsteles buvo... [toliau žr. visą tekstą] / The aim of the study was to evaluate efficiency of intracellular transfer of FITC dextrans using sonoporation and electroporation in dependence of FITC dextran hydrodynamic radius. The results have shown that in comparison to electroporation (one square-wave pulse, of 1500 V/cm pulse strength, 100 - 500 µs pulse duration), sonoporation (3 MHz, 100% DC, at 500 kPa peak negative pressure) was more efficient for transfer of all sizes FITC dextrans. The results also demonstrated that after cell sonoporation large pores, allowing to pass 70 kDa FITC dextran, completely resealed short after sonoporation (< 1 s). The pores allowing to pass 10 and 4 kDa FITC dextrans completely resealed during 5 and 10 min. respectively. In addition, we applied static magnetic field to examine the US iduced delivery of FITC dextrans into cells, however observed no significant effect.

Apie vėžį yra žinoma jau daug ir įvairios informacijos, taip pat netrūksta žinių ir kokiais būdais bei vaistais galima kovoti su šia liga. Farmacijoje yra atrasta ir sukurta nemažai aktyvių antivėžinių chemoterapinių preparatų vėžiui gydyti ar skirtų bent šios ligos slopinimui ir gyvenimo trukmės prailginimui. Todėl kita svarbi ir aktuali problema yra vaistų patekimas į reikiamą vietą – taikinį, kaip padėti vaistui patektį būtent į vėžines ląsteles ar audinį ir sumažinti riziką, kad vaistas pažeis normalius, sveikus audinius ir organus ir nepakenks jų funkcionavimui. Šiame tiriamajame darbe ir stengiamasi atsakyti į šią problemą, pasitelkus du metodus, kurie palengvina medžiagų patekimą į ląsteles – elektroporaciją ir sonoporaciją. Šių metodų funkcija yra panaši, tiek elektroporacijos, tiek sonoporacijos metu ląstelių plazminėse membranose susiformuoja poros, pro kurias gali patekti įvairios medžiagos (vaistai, dažai, baltymai, genai), kurios natūraliu būdu į ląstelę nepatenka arba patenka labai maži jų kiekiai, jei pernašoje dalyvauja ląstelės membranoje esantys baltymai nešikliai. Šiame darbe naudojami šie du, jau minėti metodai siekiant palengvinti chemoterapijoje naudojamo vaisto bleomicino patekimą į vėžines ląsteles in vivo. Tyrimams in vivo objektu buvo pasirinktos CBA – klono linijos pelės, kurioms į viršutinę nugaros dalį buvo įskiepyta MH22A hepatoma. Eksperimento duomenys rodo, kad tiek elektroporacija, tiek sonoporacija ir suminis abiejų metodų poveikis yra... [toliau žr. visą tekstą] / There is a lot of various information about cancer as well as plenty of knowledge and types of drugs to treat this disease. Pharmacy has discovered and developed a number of active anti-cancer chemotherapeutic agents for cancer treatment, or at least useful for reducing the spread of cancer. Therefore, another important and urgent problem is development of new method that would help to deliver directly into cancer cells or tissue. This in turn would allow to reduce side effects of the drug and preserve healthy tissues and organs. In this experimental work we attempted to answer this problem, using two methods that facilitate the transfer of materials into the cells - electroporation and sonoporation. These methods are based on similar principle: both electroporation and sonoporation affects the cell membranes to form pores that allow for various products (medicines, dyes, proteins, genes) to get access into the cell. The cell naturally is not accessible for those materials or the permeability is very small, in case special or nonspecific transport systems exist for this specific molecule. In this study we used the following two methods in order to facilitate the anticancer drug bleomycin delivery into cancer cells in vivo. The subject of these experiments in vivo is CBA – line clone mice bearing MH22A hepatoma tumors, transplanted on upper part of the flank. Experimental data showed that both electroporation and sonoporation and combination of both methods are effective in... [to full text]