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Caractérisation de l'opéron métabolique fru2 de Streptococcus agalactiae : phylogénie, induction, et régulation / Characterization of the Streptococcus agalactia fru carbohydrate metabolic operon : phylogeny, induction and regulation

Patron, Kévin 11 December 2015 (has links)
Streptococcus agalactiae est la première cause d’infections néonatales, et est aussi un pathogène émergent chez l’adulte immunodéprimé. L’objectif de ce travail de thèse a été de caractériser l’opéron métabolique fru2 de S. agalactiae (i) en étudiant sa phylogénie, (ii) en identifiant ses inducteurs, et (iii) en élaborant son schéma de régulation. Cet opéron est composé de 7 gènes qui codent un activateur transcriptionnel de la famille DeoR-like (Fru2R), un transporteur PTS (PTSFru2), et trois enzymes qui sont potentiellement impliquées dans la voie non oxydative des pentoses phosphates. Nous avons mis en évidence que cet opéron avait été acquis au cours de l’évolution, et n’était présent que chez les souches de complexes clonaux responsables d’infections chez l’adulte immunodéprimé et la personne âgée. Nous avons ensuite montré que certains milieux complexes, sources de carbone, et liquides biologiques humains permettaient l’activation de cet opéron. Ensuite, nous avons caractérisé le rôle et fonctionnement de la protéine Fru2R (i) en montrant son rôle d’activateur transcriptionnel, (ii) en identifiant les acides aminés essentiels à son activité, et (iii) en démontrant sa capacité à se fixer au niveau de la région promotrice de fru2. / Streptococcus agalactiae, commonly known as group B streptococcus, is a leading cause of neonatal morbidity and mortality. It is also an emergent pathogen in immunocompromised and elderly adults. The objective of this study was to characterize the phylogeny, the induction and the regulation of the S. agalactiae fru2 operon. This operon encodes a PTS transporter of the fructose-mannitol family, a transcriptional activator of the DeoR-like family, an allulose-6 phosphate-3-epimerase, a transaldolase and a transketolase. Our results, concerning the phylogeny, indicate that fru2 was acquired during the evolution of S. agalactiae. Then, we highlighted that the fru2 promoter was active in complex medium, in chemically defined medium with various carbon sources and in human biological fluids. Then, we demonstrated that the Fru2R protein (i) was a transcriptional activator, (ii) contains amino acids which are essential for the activity of the Fru2R and fru2 promoter, and (iii) interacts with the fru2 intergenic region. Then, we demonstrated the role of the PTSFru2 proteins of S. agalactiae A909 fru2.

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