Introdução: Métodos quantitativos sensíveis e acurados para monitorar o quimerismo hematopoiético após Transplante de Células-Tronco Hematopoiéticas (TCTH) são necessários para verificar o sucesso do enxerto, uma vez que os resultados influenciam a abordagem terapêutica. Método: A técnica de detecção de DNA baseada em primers inserção-específicos de marcadores genéticos do tipo InDel (Inserção/Deleção) foi avaliada quanto a sua utilidade em quantificar quimerismo em amostras de DNA em baixa concentração, em PCR em Tempo Real (qPCR). Para isso, amostras de DNA de dez pacientes submetidos a Transplante de Medula Óssea (TMO) foram analisados para quantificar a concentração de DNA residual em diferentes períodos pós-transplante. Os resultados obtidos pela InDelqPCR foram comparados com a evolução clínica descrita nos prontuários. Resultados: As quantificações do DNA residual variaram de 0,021 ng/µL a 11,71 ng/µL, correspondendo a fração de 0,065% a 40,6% do DNA total presente na amostra. Os resultados obtidos (presença ou ausência do alelo inserção) foram condizentes com a evolução clínica dos pacientes, em alguns casos, evidenciando quimerismo prévio ao relatado nos prontuários. Conclusão: Nossos dados demonstram a utilidade do método InDel-qPCR, baseada em primers inserçãoespecíficos, no monitoramento de quimerismo hematopoiético. / Introduction: Sensitive and accurate quantitative methods to monitor hematopoietic chimerism after Hematopoietic Stem Cell Transplantation (HSCT) are necessary to evaluate engraftment since the results influence a therapeutic approach. Method: DNA detection technique based on insert-specific primers for Insertion/Deletion polymorphism (InDel) was evaluated for chimerism quantification of samples with low amounts of DNA, by quantitative real-time polymerase chain reaction (qPCR). Samples of patients undergoing Bone Marrow Transplantation (BMT) collected at different post-transplantation times were analyzed to quantify the residual DNA concentration. Then, the results found using InDel-qPCR were compared to the medical records. Results: DNA quantifications ranged from 0.021 ng/?L to 11.71 ng/?L, corresponding to a fraction of 0.065% to 40.6% of the total DNA. Our results, in some cases, shows chimerism presence previously to that reported in the medical records. Conclusion: Our data demonstrate the usefulness of the InDelqPCR method based on insertion-specific primers in the monitoring of hematopoietic chimerism.

Submitted by LUCIA HELENA DE ALMEIDA TESTA null (luciatesta2011@gmail.com) on 2016-03-07T22:13:50Z No. of bitstreams: 1 Infecção viral respiratória comunitária e hospitalar em pacientes submetidos a transplante de células tronco hematopoiéticas.pdf: 1140941 bytes, checksum: 93b0313920244f35bff64660455608c7 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Grisoto (grisotoana@reitoria.unesp.br) on 2016-03-09T14:00:14Z (GMT) No. of bitstreams: 1 testa_lha_me_bot.pdf: 1140941 bytes, checksum: 93b0313920244f35bff64660455608c7 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-03-09T14:00:14Z (GMT). No. of bitstreams: 1 testa_lha_me_bot.pdf: 1140941 bytes, checksum: 93b0313920244f35bff64660455608c7 (MD5) Previous issue date: 2016-02-03 / As infecções por vírus respiratórios (VR) são causas importantes de mortalidade em pacientes submetidos a Transplante de Células-Tronco Hematopoiéticas (TCTH) especialmente no período anterior à pega do enxerto. Estas infecções também podem ser adquiridas dentro dos hospitais, possivelmente transmitida por contato com profissionais de saúde ou cuidadores infectados, ou com objetos ou superfícies contaminadas. Portanto, é importante caracterizar o tipo de transmissão para que medidas rigorosas de controle possam ser implantadas. Objetivos: Analisar os casos de infecção por vírus respiratórios (VR) nos pacientes submetidos a TCTH entre agosto de 2010 a dezembro de 2013 e caracterizar os tipos de transmissão durante esse período. Método: O presente estudo foi realizado no Hospital Amaral Carvalho de Jahu nas unidades de internação e ambulatório de TCTH e na unidade de hematologia, incluindo pacientes com diagnóstico comprovado de VR por imunofluorescência ou PCR multiplex em amostras de lavado nasal. A transmissão foi definida como hospitalar na ausência de sintomas respiratórios à admissão e diagnóstico de VR comprovado laboratorialmente após cinco dias da internação ou até cinco dias após a alta hospitalar. Resultados: Durante este período 187 pacientes tiveram 214 episódios de infecção por VR. Cento e oitenta e três (85,5%) foram considerados infecção comunitária e 31 (14,5%) episódios foram considerados infecção hospitalar, sendo que 17 (7,9 %) episódios ocorreram na unidade de TCTH e 21 (9,8 %) episódios na unidade de hematologia (p=NS). A permanência hospitalar por mais de 23 dias se associou a transmissão hospitalar (p=<0,001) e o ano de 2013 mostrou uma queda significante desse tipo de transmissão (p=0,04). O VSR foi o VR com maior frequência de progressão para pneumonia. Conclusão: Concluímos que a higienização das mãos, coleta de lavado nasal (LN) antes das internações para o transplante de células tronco hematopoiéticas (TCTH), isolamento de contato para os pacientes com vírus respiratório positivo, busca ativa de sintomas e a educação continuada para os pacientes, familiares e profissionais da saúde devem ser contínua para o controle das infecções por VR nas unidades de TCTH. A maioria dessas medidas são de baixo custo e altamente efetivas. Cuidadores, contactuantes domiciliares e profissionais de saúde devem aderir às medidas de controle para garantir a segurança dos pacientes. / Introduction: Community-acquired respiratory viruses (RV) are the most frequent etiologic agents causing acute respiratory infections (ARI) in humans. These agents have a wide antigenic range, universal distribution, affect people in all age groups, and may cause various clinical syndromes involving both the upper and lower respiratory tract. These respiratory infections are major causes of mortality in patients undergoing hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), especially in the period prior to engraftment. These infections may also be acquired in hospitals, possibly transmitted by contact with infected health professionals or patient caregivers, or with contaminated objects or surfaces. Since 2008, a continued education program was started at the HSCT Program of Amaral Carvalho Foundation aiming to improve the control of RV transmission. Patients, caregivers, donors, family members and employees are invited to participate in the activities. Objectives: To review the cases of RV infections in patients undergoing HSCT from August 2010 to December 2013, characterize the type of transmission, if community- or hospital-acquired during this period, and determine the morbidity and mortality of RV infections. Methods: The study was conducted at the HSCT Service of Amaral Carvalho Hospital, analyzing the charts of HSCT recipients with RV infection diagnosed by immunofluorescent assay or multiplex PCR. Medical data and images from patients admitted to the HSCT and hematology wards, as well as from patients assisted at the outpatient clinic were retrospectively reviewed. Hospital transmission was defined when the interval between hospital admission and the first symptoms was more than five days, or when the interval between patient discharge and the first symptoms was up to five days. Results: During this period, 187 patients had 214 episodes of VRI. Thirty-one episodes (14.5%) were considered hospital-acquired. Rates of hospital transmission were similar between HSCT unit (7,9%) and the hematology ward (9,8%). Hospital stay for more than 23 days was associated with hospital transmission (p=0.001) and a significant decrease in this type of transmission was observed in 2013 (p=0.04). VSR was the RV with the highest frequency of progression to pneumonia (42%). Conclusion: We conclude that hand hygiene, nasal lavage collection (LN) before hospitalizations for hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), contact isolation for patients with positive respiratory virus, active pursuit of symptoms and continuing education for patients, family and healthcare professionals should be continuous for the control of infections in HSCT VR units. Most of these policies have low cost and are highly effective. Caregivers, household contacts and health professionals must comply with the control policies to ensure the safety of patients.

Orientador: Clarisse Martins Machado / Resumo: As infecções por vírus respiratórios (VR) são causas importantes de mortalidade em pacientes submetidos a Transplante de Células-Tronco Hematopoiéticas (TCTH) especialmente no período anterior à pega do enxerto. Estas infecções também podem ser adquiridas dentro dos hospitais, possivelmente transmitida por contato com profissionais de saúde ou cuidadores infectados, ou com objetos ou superfícies contaminadas. Portanto, é importante caracterizar o tipo de transmissão para que medidas rigorosas de controle possam ser implantadas. Objetivos: Analisar os casos de infecção por vírus respiratórios (VR) nos pacientes submetidos a TCTH entre agosto de 2010 a dezembro de 2013 e caracterizar os tipos de transmissão durante esse período. Método: O presente estudo foi realizado no Hospital Amaral Carvalho de Jahu nas unidades de internação e ambulatório de TCTH e na unidade de hematologia, incluindo pacientes com diagnóstico comprovado de VR por imunofluorescência ou PCR multiplex em amostras de lavado nasal. A transmissão foi definida como hospitalar na ausência de sintomas respiratórios à admissão e diagnóstico de VR comprovado laboratorialmente após cinco dias da internação ou até cinco dias após a alta hospitalar. Resultados: Durante este período 187 pacientes tiveram 214 episódios de infecção por VR. Cento e oitenta e três (85,5%) foram considerados infecção comunitária e 31 (14,5%) episódios foram considerados infecção hospitalar, sendo que 17 (7,9 %) episódios oc... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Introduction: Community-acquired respiratory viruses (RV) are the most frequent etiologic agents causing acute respiratory infections (ARI) in humans. These agents have a wide antigenic range, universal distribution, affect people in all age groups, and may cause various clinical syndromes involving both the upper and lower respiratory tract. These respiratory infections are major causes of mortality in patients undergoing hematopoietic stem cell transplantation (HSCT), especially in the period prior to engraftment. These infections may also be acquired in hospitals, possibly transmitted by contact with infected health professionals or patient caregivers, or with contaminated objects or surfaces. Since 2008, a continued education program was started at the HSCT Program of Amaral Carvalho Foundation aiming to improve the control of RV transmission. Patients, caregivers, donors, family members and employees are invited to participate in the activities. Objectives: To review the cases of RV infections in patients undergoing HSCT from August 2010 to December 2013, characterize the type of transmission, if community- or hospital-acquired during this period, and determine the morbidity and mortality of RV infections. Methods: The study was conducted at the HSCT Service of Amaral Carvalho Hospital, analyzing the charts of HSCT recipients with RV infection diagnosed by immunofluorescent assay or multiplex PCR. Medical data and images from patients admitted to the HSC... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre