Submitted by Setor de Tratamento da Informa??o - BC/PUCRS (tede2@pucrs.br) on 2015-05-07T12:17:11Z No. of bitstreams: 1 468069 - Texto Completo.pdf: 1430495 bytes, checksum: 0bb6fedf792362692d6371829315b2e1 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-05-07T12:17:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 468069 - Texto Completo.pdf: 1430495 bytes, checksum: 0bb6fedf792362692d6371829315b2e1 (MD5) Previous issue date: 2015-03-31 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior - CAPES / Hyaluronic acid (HA) and polymethylmethacrylate (PMMA) are the most used dermal fillers nowadays. The indiscriminate use of such substances has brought to light unwanted adverse effects. Thus biocompatibility studies are a necessity, since the scientific literature does not clarify the etiology of these effects. The current research has evaluated cytotoxic, genotoxic and mutagenic responses from distinct in vitro tests performed in an independent manner. The cytotoxicity potential of the materials was evaluated by the induction of an inhibition halo in a solid yeast cultures. To conduce a preliminary view, the dilutions ranging from 10-2 to 10-5 were verified. For quantitative test, the colonies were counted to estimate the CFU/mL (colony-forming units per milliliter) values. Halo inhibition test showed that only silicone, used as a positive control, was capable of inducing cytotoxicity in this yeast. The preliminary experiment also indicated silicone and HA 16 mg/mL as a cellular toxicity inductor material. Quantitative test indicated that HA 20 mg/mL and 0.1mL volume inhibited cell proliferation (ANOVA, Tukey test, p? 0.05). PMMA was dosedependent to 2 and 10% concentrations (Tukey test, p? 0.05). 30% PMMA showed cell proliferation inhibition similar to the negative control. Silicone proved to inhibit S. cerevisiae cell proliferation (Tukey test, p? 0.05). In a second investigation, in Chinese hamster lung fibroblasts (V79 cells), the cytotoxic, genotoxic and mutagenic potentials of 20 mg/mL HA and 30% PMMA were determined. For testing these effects, clonogenic survival, comet and micronucleus assay were performed. HA and PMMA were able to decrease the colony formation when cultures were exposed to compounds by 24 h followed by 6 days in drug-free media. In addition, no genotoxic effects were detected in the 3 or 24 h of exposure to HA or PMMA. In the same manner, both dermal fillers did not induce increase in the micronucleus frequency in binucleated cells. Taken together, these results suggest that (1) 20 mg/mL HA and 10% PMMA are cytotoxicity inductors for the eukaryotic model S. cerevisiae; (2) 20 mg/mL HA and 30% PMMA have a weak cytotoxic activity in V79 cells; (3) the tested substances do not cause detectable DNA damage and chromosome alterations in V79 cells. / O ?cido hialur?nico (AH) e o polimetilmetacrilato (PMMA) s?o os materiais de preenchimento est?tico mais empregados na atualidade. Seu uso indiscriminado tem evidenciado efeitos indesej?veis nos usu?rios destes produtos, tornando necess?rio o estudo da biocompatibilidade dos mesmos, uma vez que a literatura cient?fica dispon?vel n?o esclarece, de forma conclusiva, a etiologia das rea??es adversas que podem se desenvolver a partir da sua inje??o. A presente pesquisa avaliou a resposta citot?xica, genot?xica e mutag?nica, a partir de testes in vitro distintos e efetuados de maneira independente. Utilizando a levedura Saccharomyces cerevisiae averiguou-se a citotoxicidade do AH (16 mg/mL e 20 mg/mL) e do PMMA (2%, 10% e 30%), por meio de experimentos qualitativos e quantitativos. O primeiro procedeu-se pela indu??o de halo de inibi??o. Para conduzir uma an?lise preliminar, as dilui??es 10-2 a 10-5 foram verificadas. No teste quantitativo, as col?nias formadas foram contadas em UFC/mL (unidades formadoras de col?nias por mililitro). Os dados observados em levedura demonstraram que no teste do halo de inibi??o, o silicone, utilizado como controle positivo, foi o ?nico material capaz de induzir citotoxicidade. O exame preliminar tamb?m indicou o silicone e o AH 16 mg/mL como indutores de toxicidade celular. Na an?lise quantitativa, o AH 20 mg/mL no volume de 0,1 mL inibiu a prolifera??o celular (ANOVA, teste de Tukey, p? 0,05). O PMMA apresentou resposta dose-dependente nas concentra??es de 2% e 10% (teste de Tukey, p? 0,05). Por outro lado, o PMMA 30% exibiu n?veis de crescimento celular semelhantes ao controle negativo. O silicone confirmou o impedimento de prolifera??o celular em S. cerevisiae (teste de Tukey, p? 0,05). Numa segunda investiga??o, em cultura de fibroblastos pulmonares de hamster Chin?s (linhagem V79), foram determinados os potenciais de citotoxicidade, genotoxicidade e mutagenicidade do AH 20 mg/mL e do PMMA 30%. Para esses par?metros, a abordagem envolveu os ensaios clonog?nico, cometa e micron?cleos. O AH e o PMMA foram capazes de diminuir o crescimento de col?nias quando as culturas foram expostas aos produtos por 24 h, seguidos por 6 dias em meio com aus?ncia das drogas. N?o foram detectados efeitos genot?xicos em 3 h ou 24 h de exposi??o ao AH ou PMMA. Da mesma maneira, ambas as subst?ncias n?o induziram aumento na frequ?ncia de micron?cleos em c?lulas binucleadas. Os resultados obtidos permitem sugerir que (1) o AH 20 mg/mL e o PMMA 10% s?o indutores de citotoxicidade em modelo eucarioto S. cerevisiae; (2) o AH e o PMMA possuem fraca citotoxicidade sobre a linhagem V79; (3) os materiais testados n?o provocam danos no DNA e altera??es cromoss?micas detect?veis.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:29:43Z (GMT). No. of bitstreams: 1 425578.pdf: 1317181 bytes, checksum: b20aaf08d45d26e52a920073367ead4a (MD5) Previous issue date: 2010-01-18 / O objetivo do presente estudo foi avaliar a rea??o tecidual local, em calota craniana de ratos, frente ? implanta??o de discos de poli (?cido L/D-l?ctico) e avaliar a sua toxicidade gen?tica, pela indu??o de micron?cleos em eritr?citos policrom?ticos (EPC) na medula ?ssea de ratos. Foram utilizados 25 ratos Wistar, machos, com 200 e 300 gramas. 20 animais sofreram procedimento cir?rgicos e tiveram os discos implantados, e 5 animais receberam medica??o p?s-operat?ria da mesma maneira, servindo como grupo controle para genotoxicidade. Com uma broca trefina 4,1mm foram realizadas duas ostectomias circulares, uma em cada osso parietal. Na perfura??o direita foi inserido um disco de poli(?cido L/D-l?ctico), e a do lado esquerdo foi preenchida por co?gulo sangu?neo (grupo controle). Os animais foram eutanasiados nos tempos apropriados (15, 30, 90 e 120 dias ap?s a cirurgia), por inala??o de isoflurano. Nos 20 animais operados foi retirada a calota craniana e fixada em formalina tamponada a 10%. As amostras foram submetidas ? descalcifica??o e ap?s emblocados em parafina e submetidos a cortes de 6 &#956;m, no sentido transversal, na por??o de maior di?metro dos discos. As l?minas obtidas foram submetidas ? t?cnica histoqu?mica de colora??o HE. Para avalia??o da genotoxicidade, ambos os f?mures de cada animal foram removidos e o conte?do da medula ?ssea extra?do diretamente sobre uma l?mina com uma gota de soro bovino fetal, e homogeinizada. Com este material foi feito um esfrega?o. As l?minas foram secas, fixadas em metanol e coradas uma l?mina de cada f?mur com Giemsa e a outra com Acridine Orange. Os resultados obtidos foram submetidos a avalia??o estat?stica pela An?lise de Vari?ncia (ANOVA). Na avalia??o histol?gica, no per?odo de 15 e 30 dias, em ambos os grupos o defeito ?sseo foi bem evidenciado, n?o sendo observados neoforma??o ?ssea, epis?dios de reabsor??o ?ssea nem rea??o de corpo estranho. Nos per?odos de 90 e 120 dias, no grupo controle, observou-se neoforma??o nas bordas do defeito. No grupo experimental, houve neoforma??o ?ssea nas bordas do defeito e migrando abaixo do local ocupado pelo disco e aus?ncia de infiltrado inflamat?rio. Quanto a avalia??o de genotoxicidade, n?o foi detectada redu??o significativa (p < 0,05) da frequ?ncia de EPC em rela??o ao controle negativo nem aumento significante (p < 0,05) nos EPC com micron?cleos. Pode-se concluir que o material utilizado neste estudo ? biocompat?vel e bem tolerado pelos tecidos estudados, sendo considerado negativo para mutagenicidade cromoss?mica no ensaio realizado.

Made available in DSpace on 2015-04-14T13:30:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 447511.pdf: 1543889 bytes, checksum: f32bae75cdf85ab505b6c186240b2db8 (MD5) Previous issue date: 2013-03-08 / In the present study, the cytotoxic and genotoxic effects of the silver solder and laser soldering used in Orthodontics were evaluated. For this, HepG2 e HOK cell lines were employed to evaluate the cytotoxicity (MTT reduction) and the genotoxicity (comet assay and cytokinesis block micronucleus cytome assay) of orthodontic bands containing or not silver soldered joints. Ionic metal release in the culture medium was verified by means of atomic absorption espectrophotometry. DNA effects on buccal mucosal cells of patients treated with Hyrax type expander appliances containing eight silver soldered joints were also evaluated through the buccal comet assay and the buccal micronucleus cytome assay. The in vitro cytotoxicity of orthodontic bands containing or not silver soldered or laser soldered joints was investigated and compared using the Saccharomyces cerevisiae model. Data obtained indicated that orthodontic bands suffer corrosion and are able to release ions to culture medium, being cadmium also detected in the samples evaluated. Silver soldered bands cause significant cytotoxic and genotoxic effects in mammal cells under in vitro conditions. The genotoxic effects are in part related to direct toxic effects and in part related to oxidative DNA damage. In humans, less intense genotoxic effects were observed. Laser soldering was less cytotoxic than silver soldering in in vitro conditions and should be more investigated since it seems to be a promising alternative to connect wires in Orthodontics. / Foram investigados os efeitos citot?xicos e genot?xicos da solda de prata e da soldagem a laser utilizadas em Ortodontia. Para tanto, avaliaram-se, nas linhagens celulares HepG2 e HOK, a citotoxicidade (redu??o MTT) e a genotoxicidade (cometa alcalino ou associado a enzimas de reparo e citoma de micron?cleos) de an?is contendo ou n?o uni?es com solda de prata. Quantificaram-se, empregando espectrofotometria de absor??o at?mica, os ?ons met?licos liberados no meio de cultura. Tamb?m foram investigados os efeitos sobre o DNA em c?lulas da mucosa bucal de pacientes em tratamento com aparelhos auxiliares do tipo Hyrax contendo oito uni?es soldadas com prata, empregando o ensaio cometa em c?lulas bucais e o citoma bucal de micron?cleos. Por fim, a citotoxicidade in vitro de an?is contendo ou n?o uni?es soldadas a prata ou a laser foi investigada e comparada mediante o emprego de leveduras Saccharomyces cerevisiae. Os dados obtidos permitiram concluir que an?is ortod?nticos sofreram corros?o e liberaram ?ons met?licos em condi??es laboratoriais, sendo inclusive detectada a presen?a de c?dmio nas amostras. Os an?is contendo solda de prata foram capazes de causar importantes e significativos efeitos citot?xicos e genot?xicos em c?lulas de mam?feros em condi??es in vitro. Os efeitos genot?xicos observados est?o, em parte, relacionados a efeitos diretos, assim como a efeitos indiretos, tais como danos oxidativos. Apesar do efeito t?xico observado in vitro, em humanos a resposta de toxicidade a aparelhos contendo uni?es soldadas com liga de prata apresentou menor intensidade, sendo identificada genotoxicidade tamb?m in vivo. A soldagem a laser se mostrou menos citot?xica que a soldagem com liga de prata em condi??es in vitro, devendo ser melhor investigada por se tratar de uma alternativa promissora para a uni?o de metais em Ortodontia.