Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:40Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2008-06-06Bitstream added on 2014-06-13T19:50:38Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_pgg_me_botfmvz.pdf: 5765072 bytes, checksum: aceb85a2bc65f9e47b05b3aeb424eb32 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A lesão do tendão do músculo flexor digital superficial é uma importante afecção que leva à claudicação em eqüinos atletas, com prevalência de 13 a 30% de acordo com a atividade eqüestre. Sua instalação pode comprometer a carreira do potro por serem lesões debilitantes, podendo inclusive haver recidivas. Os tratamentos propostos são diversos, mas efeitos como melhora da qualidade da matriz tendínea não foram confirmados por estudos controlados. Recentemente, os avanços médicos demonstram crescente interesse na utilização das célulastronco em terapia de doenças degenerativas, em cicatrizações lentas ou ineficazes. O objetivo deste estudo foi avaliar a qualidade da cicatrização tendínea de animais tratados com o implante autólogo de células da fração mononuclear proveniente de medula óssea, tendo como foco a caracterização das fibras colágenas tipo I e tipo III, via imunoistoquímica, presentes no tecido cicatricial tendíneo. Foi induzida lesão do tendão flexor digital superficial (TFDS) de ambos os membros anteriores de 6 eqüinos, seguida de implante autólogo em apenas um membro de cada animal. Os animais foram avaliados por parâmetros clínicos e ultra-sonográficos e após biópsia, realizada no 120o dia do experimento, sendo verificadas características histológicas e imunoistoquímicas. A terapia com implante autólogo das células da fração mononuclear acelerou o processo de cicatrização tendínea, melhorando a organização tecidual e com expressão significativa para colágeno tipo I. O procedimento foi seguro e não apresentou risco aos animais. / The superficial digital flexor tendonitis (SDFT) is an important cause of lameness in athletic horses, with incidence from 13 to 30 %, depending of the exercise modality. Its ocurrence can compromise yearlings animals carrers being debilitant, inclusive the possibility of reinjury. Many treatments have been proposed, but effects as a higher quality of the tendineous matrix haven´t been confirmed by controlled studies. Recently, medical interest has been directed to the stem cells therapy of degenerative diseases and cases of deficient and slow healing process. This study aims to evaluate the influence of autologous implant of the mononuclear cells from the bone marrow, focusing on the collagen fibers type I and type III characteristics, evaluated by immunohistochemic, present on the healing tendon. Induced collagen lesions were in both forelimbs SDFT from six horses, followed by autologous implant in one forelimb from each animal. The horses were evaluated by clinical and ultrasonographic exams during the hole period, and by histopathologic and immunohistochemistry patterns after biopsy on the 120th day. The therapy with autologous implant of the mononuclear fraction has accelerated healing process, improving the tissue organization, having a higher expression of collagen type with. The procedure was safe, not presenting any risk for the animals.

Orientador: Ana Liz Garcia Alves / Banca: Sergio Luis Felisbino / Banca: Raquel Yvonne Arantes Baccarin / Resumo: A lesão do tendão do músculo flexor digital superficial é uma importante afecção que leva à claudicação em eqüinos atletas, com prevalência de 13 a 30% de acordo com a atividade eqüestre. Sua instalação pode comprometer a carreira do potro por serem lesões debilitantes, podendo inclusive haver recidivas. Os tratamentos propostos são diversos, mas efeitos como melhora da qualidade da matriz tendínea não foram confirmados por estudos controlados. Recentemente, os avanços médicos demonstram crescente interesse na utilização das célulastronco em terapia de doenças degenerativas, em cicatrizações lentas ou ineficazes. O objetivo deste estudo foi avaliar a qualidade da cicatrização tendínea de animais tratados com o implante autólogo de células da fração mononuclear proveniente de medula óssea, tendo como foco a caracterização das fibras colágenas tipo I e tipo III, via imunoistoquímica, presentes no tecido cicatricial tendíneo. Foi induzida lesão do tendão flexor digital superficial (TFDS) de ambos os membros anteriores de 6 eqüinos, seguida de implante autólogo em apenas um membro de cada animal. Os animais foram avaliados por parâmetros clínicos e ultra-sonográficos e após biópsia, realizada no 120o dia do experimento, sendo verificadas características histológicas e imunoistoquímicas. A terapia com implante autólogo das células da fração mononuclear acelerou o processo de cicatrização tendínea, melhorando a organização tecidual e com expressão significativa para colágeno tipo I. O procedimento foi seguro e não apresentou risco aos animais. / Abstract: The superficial digital flexor tendonitis (SDFT) is an important cause of lameness in athletic horses, with incidence from 13 to 30 %, depending of the exercise modality. Its ocurrence can compromise yearlings animals carrers being debilitant, inclusive the possibility of reinjury. Many treatments have been proposed, but effects as a higher quality of the tendineous matrix haven't been confirmed by controlled studies. Recently, medical interest has been directed to the stem cells therapy of degenerative diseases and cases of deficient and slow healing process. This study aims to evaluate the influence of autologous implant of the mononuclear cells from the bone marrow, focusing on the collagen fibers type I and type III characteristics, evaluated by immunohistochemic, present on the healing tendon. Induced collagen lesions were in both forelimbs SDFT from six horses, followed by autologous implant in one forelimb from each animal. The horses were evaluated by clinical and ultrasonographic exams during the hole period, and by histopathologic and immunohistochemistry patterns after biopsy on the 120th day. The therapy with autologous implant of the mononuclear fraction has accelerated healing process, improving the tissue organization, having a higher expression of collagen type with. The procedure was safe, not presenting any risk for the animals. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:31:06Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-12-09Bitstream added on 2014-06-13T19:01:25Z : No. of bitstreams: 1 oliveira_pgg_dr_botfmvz.pdf: 525074 bytes, checksum: 52d948b8418c2241104df84f8dd60b54 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Lesões tendíneas, especialmente do tendão flexor digital superficial dos membros torácicos, são importantes enfermidades que acometem a espécie equina, e apresentam alto índice de recidivas e afastamento da atividade atlética. Os avanços médicos e pesquisas relacionadas têm mostrado crescente interesse na utilização da terapia celular em tratamentos dessas lesões que apresentam uma cicatrização lenta ou ineficaz. Existem dúvidas quanto à persistência e comportamento das células tronco mesenquimais (CTM) implantadas no local da lesão e de sua migração a outros locais inflamados. Sendo assim, este estudo teve como objetivo identificar CTM marcadas com nanocristais antes e após o implante em lesões experimentais do tendão flexor digital superficial (TFDS) de eqüinos, observando a possibilidade de migração das CTM para outro foco de lesão realizado no membro contralateral do animal. Para isso, foram utilizados cinco equinos, submetidos à indução de lesões no TFDS em ambos os membros torácicos e, após sete dias, foram implantadas as CTM autólogas marcadas com nanocristais Qtracker 655 em um dos membros do animal. Sete dias após o implante, foram realizadas biópsias dos tendões, congelados em nitrogênio, sendo posteriormente realizados cortes histológicos para visualização em microscópio de fluorescência. Paralelamente, células marcadas com nanocristal foram mantidas em cultivo por 24 horas e, após este período, avaliou-se a sua viabilidade. Nas lesões que receberam células marcadas, foram visualizados sinais fluorescentes nas amostras, enquanto estes eram ausentes nas lesões dos membros contralaterais. As CTM marcadas e injetadas no tecido tendíneo mantiveram sua fluorescência sete dias após o implante in vivo, não sendo observado migração para o membro contralateral. As células mantiveram sua viabilidade após 24 horas de incubação com o marcador Qtracker / Tendon lesions, especially of the superficial digital flexor tendon (SDFT) on forelimb, are important injuries in equine, because have high reinjury incidence and can cause retirement of athletic activities. Medical researches have shown growing interest on using stem cell therapy in the treatment of lesion with slow or ineffective repair. There are doubts regarding the persistency of the mesenchymal stem cells (MSC) implanted on the lesion site and of its migration to other injury sites. This study aims to identify marked MSC with nanoparticles quantum dots (QD) before and after the implant in equine induced tendinitis and to verify if there is a migration to another injury site on the contralateral. Five equines have a SDFT tendinitis induced on both forelimb and, after seven days, have seeded autologous MSC, marked with quantum dots Qtracker 655 in one of the limbs. Seven days after the implant, biopsies of the tendons were conducted, in which histological cuts were made for visualization in fluorescence microscope. The viability of the cells marked with nanoparticles and kept in cultivation was evaluated after 24 hours of incubation. Fluorescent signs were visualized on samples of the lesions that received marked cells, while they were absent on the lesions of the contralaterals. The marked MSCs kept their fluorescent emission, making it possible to identify them after seven days of in vivo implant, not occurring migration to the opposite limb. The cells maintained their viability in cultivation after 24 hours of incubation with the Qtracker marker

Thèse (Ph. D.)--Université Laval, 2005. / Titre de l'écran-titre (visionné le 28 mars 2007). Bibliogr.

Thèse (M.Sc.)--Université Laval, 2004. / Bibliogr. Publié aussi en version électronique.

Orientador: Ana Liz Garcia Alves / Coorientador: Fernanda da Cruz Landim e Alvarenga / Banca: Anna Paula Balesdent Barreira / Banca: Brunna Patricia Almeida da Fonseca / Banca: Rogério Martins Amorim / Banca: Carlos Alberto Hussni / Resumo: Lesões tendíneas, especialmente do tendão flexor digital superficial dos membros torácicos, são importantes enfermidades que acometem a espécie equina, e apresentam alto índice de recidivas e afastamento da atividade atlética. Os avanços médicos e pesquisas relacionadas têm mostrado crescente interesse na utilização da terapia celular em tratamentos dessas lesões que apresentam uma cicatrização lenta ou ineficaz. Existem dúvidas quanto à persistência e comportamento das células tronco mesenquimais (CTM) implantadas no local da lesão e de sua migração a outros locais inflamados. Sendo assim, este estudo teve como objetivo identificar CTM marcadas com nanocristais antes e após o implante em lesões experimentais do tendão flexor digital superficial (TFDS) de eqüinos, observando a possibilidade de migração das CTM para outro foco de lesão realizado no membro contralateral do animal. Para isso, foram utilizados cinco equinos, submetidos à indução de lesões no TFDS em ambos os membros torácicos e, após sete dias, foram implantadas as CTM autólogas marcadas com nanocristais Qtracker 655 em um dos membros do animal. Sete dias após o implante, foram realizadas biópsias dos tendões, congelados em nitrogênio, sendo posteriormente realizados cortes histológicos para visualização em microscópio de fluorescência. Paralelamente, células marcadas com nanocristal foram mantidas em cultivo por 24 horas e, após este período, avaliou-se a sua viabilidade. Nas lesões que receberam células marcadas, foram visualizados sinais fluorescentes nas amostras, enquanto estes eram ausentes nas lesões dos membros contralaterais. As CTM marcadas e injetadas no tecido tendíneo mantiveram sua fluorescência sete dias após o implante in vivo, não sendo observado migração para o membro contralateral. As células mantiveram sua viabilidade após 24 horas de incubação com o marcador Qtracker / Abstract: Tendon lesions, especially of the superficial digital flexor tendon (SDFT) on forelimb, are important injuries in equine, because have high reinjury incidence and can cause retirement of athletic activities. Medical researches have shown growing interest on using stem cell therapy in the treatment of lesion with slow or ineffective repair. There are doubts regarding the persistency of the mesenchymal stem cells (MSC) implanted on the lesion site and of its migration to other injury sites. This study aims to identify marked MSC with nanoparticles quantum dots (QD) before and after the implant in equine induced tendinitis and to verify if there is a migration to another injury site on the contralateral. Five equines have a SDFT tendinitis induced on both forelimb and, after seven days, have seeded autologous MSC, marked with quantum dots Qtracker 655 in one of the limbs. Seven days after the implant, biopsies of the tendons were conducted, in which histological cuts were made for visualization in fluorescence microscope. The viability of the cells marked with nanoparticles and kept in cultivation was evaluated after 24 hours of incubation. Fluorescent signs were visualized on samples of the lesions that received marked cells, while they were absent on the lesions of the contralaterals. The marked MSCs kept their fluorescent emission, making it possible to identify them after seven days of in vivo implant, not occurring migration to the opposite limb. The cells maintained their viability in cultivation after 24 hours of incubation with the Qtracker marker / Doutor

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:30:11Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2009-06-25Bitstream added on 2014-06-13T19:46:58Z : No. of bitstreams: 1 carvalho_am_me_botfmvz.pdf: 6452813 bytes, checksum: 2c5d2178d018a38200ebc1699fe4b029 (MD5) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A lesão do tendão do músculo flexor digital superficial é uma importante causa de claudicação em eqüinos atletas. Embora existam diversos tratamentos descritos, poucos são eficazes na melhora significativa da qualidade da matriz extracelular. Com isso, há um grande potencial de desenvolvimento de recidivas, e em alguns casos até causar o término precoce da carreira atlética do animal. Recentemente, diversos experimentos vêm focando no potencial terapêutico das células-tronco mesenquimais em casos de lesões de difícil cicatrização. O objetivo deste estudo foi avaliar a qualidade da cicatrização tendínea de animais tratados com o implante autólogo das células-tronco mesenquimais cultivadas derivadas do tecido adiposo, tendo como foco a caracterização das fibras colágenas tipo I e tipo III, via imunoistoquímica, presentes no tecido cicatricial tendíneo. Foi induzida lesão do tendão flexor digital superficial (TFDS) de ambos os membros anteriores de 8 eqüinos, seguida de implante autólogo em apenas um membro de cada animal. Os animais foram avaliados por parâmetros clínicos e ultrassonográficos e após biópsia, realizada em dois diferentes momentos 60º dia e no 150o dia do experimento, sendo verificadas características histológicas e imunoistoquímicas. A terapia com implante autólogo das células-tronco mesenquimais acelerou o processo de cicatrização tendínea, melhorou a organização cicatricial, e fazendo uma comparação entre o grupo tratado e o grupo controle houve maior expressão do colágeno tipo I. O procedimento demonstrou ser seguro e viável / The injury of the tendon of superficial digital flexor muscle is a major cause of lameness in equine athletes. Although there are various treatments described, few are effective in significant improvement of the quality of the extracellular matrix. Therefore, there is great potential for development of reincidence, and in some cases even cause the early termination of the athletic career of the animal. Recently, several experiments are focusing on therapeutic potential of mesenchymal stem cells in cases of difficult healing. The aim of this study was to evaluate the quality of tendon healing from animals treated with the implantation of autologous mesenchymal stem cells derived from adipose tissue cultured, focusing the characterization of collagen fibers type I and type III, by immunohistochemistry, in the tendinous scar tissue. There was induced injury of the superficial digital flexor tendon (TFDS) in both previous members, 8 horses, followed by autologous implantation in only one member from each animal. The animals were evaluated by clinical parameters and ultrasound and after biopsy, performed at two different times in 60 days and the 150th day of the experiment. Histological and immunohistochemical analyzes were done. The therapy with implantation of autologous mesenchymal stem cells accelerate the process of tendon healing, improved matrix organization with higher expression of collagen type I in the treated group compared with the control group. The procedure has proved safe and feasible

Para avaliar a eficácia do laser de arsenito de gálio em acelerar a cicatrização tendínea em cavalos PSI de corrida com lesão no tendão flexor digital superficial, foram realizados dois experimentos, primeiro (E1) com 14 casos clínicos onde as lesões foram decorrentes do esporte em um dos membros torácicos, o segundo (E2) com cinco casos experimentais, onde as lesões foram induzidas com colagenase em ambos os membros torácicos. No E1, após a detecção da lesão no tendão flexor digital superficial por exame ultra-sonográfico, todos os animais receberam antiinflamatório não esteróide associado à dimetilsulfóxido por via intravascular, crioterapia no local da lesão, e caminharam ao passo duas vezes ao dia por 15 minutos durante os 30 dias de acompanhamento. Os membros tratados pertenceram a onze animais que receberam uma sessão diária de laser de arsenito de gálio na dose de 20 J/cm2, realizadas durante 10 dias consecutivos, após término do antiinflamatório e da crioterapia. Os membros controle pertenceram a três animais, os quais não foram tratados com laser. No E2, após identificação das lesões, foram escolhidos aleatoriamente um membro torácico controle e outro a ser tratado por laser em cada animal. Da mesma forma, estes animais foram mantidos a passo e receberam o mesmo protocolo de laserterapia que os membros tratados do E1. Todos os membros foram avaliados através de exames ultra-sonográficos, utilizando-se como parâmetros o paralelismo das fibras tendíneas em corte longitudinal; a ecogenicidade, a área do tendão, a área da lesão e a porcentagem de ocupação da lesão em corte transversal. No E1, os membros controle não apresentaram diferença significativa (P>0,05) nos parâmetros avaliados entre os dias 0 e 30. Nos membros tratados, a área do tendão também não apresentou diferença significativa (P>0,05) entre os dias analisados, porém houve diminuição muito significativa nos escores de ecogenicidade e paralelismo (P<0,001), assim como diminuição no tamanho da lesão (P<0,05) e na porcentagem de ocupação da lesão (P<0,05). No E2 também não houve diferença significativa entre os dias em todos os critérios avaliados nos membros controles (P>0,05). Nos membros tratados a ecogenicidade, o paralelismo e o tamanho do tendão, não sofreram alterações significativas (P>0,05) entre os dias avaliados, porém o tamanho da lesão (P<0,05) e a porcentagem de ocupação da lesão (P<0,01) apresentaram diminuição significativa. O laser de arsenito de gálio na dose de 20 J/cm2 mostrou-se eficaz em acelerar a reparação da lesão tendínea nos membros tratados em relação aos membros controle, tanto no grupo de casos clínicos quanto no grupo experimental, quando comparados aos 30 dias do aparecimento da lesão. Esses resultados sugerem a participação positiva do laser de arsenito de gálio nos resultados e a validação do mesmo no tratamento da tendinite do flexor digital superficial de cavalos Puro Sangue Inglês de corrida. / This study conducted two trials to evaluate the efficacy of Gallium Arsenide Laser in the speed of the healing process of superficial digital flexor tendon (SDFT) lesions in thoroughbred horses. One trial group (T1) comprises 14 horses with lesions, which resulted from the sport, in the SDFT in one of the front limbs. The other trial group (T2) was formed by five horses that had lesions induced in both front limbs by collagenase injection. In the T1, after the detection of the lesion in the SDFT by ultrasonography all horses were treated by intravenous injection, once a day, over five days, with an association of two AINS: phenylbutazone and dimethylsulfoxide. Cryotherapy was also applied on the affected tendon (three times a day over five days) and the horses were kept in stalls and allowed controlled exercise (hand-walked twice daily for 15 minutes) during the 30 days of the study. The treated limbs belong to 11 horses that received laser sessions once a day for ten days at a dosage of 20J/cm2. These sessions started after the AINS association and cryotherapy. The control limbs belong to the other three horses that received the same treatment, except by the laser sessions. In the T2, after the detection of the lesion, a limb from each horse was randomly chosen to be the control limb and the other limb was treated by laser. These horses were also kept in stall under controlled exercise and the treated limb was under the same laser protocol that T1. All horses were evaluated by two ultrasonographic exams with a 30-day interval. The parameters evaluated were: the fiber alignment, the echogenicity, the tendon area, the lesion area and the proportion of the cross sectional area involved. In the T1, the control limbs showed no significant difference (p>0,05) in the echogenicity, the fiber alignment, the tendon area, the lesion area or the proportion of the cross sectional area involved, between the day 0 and 30. The treated limb, didn´t show any significant difference of the tendon area, but showed a significant difference on the echogenicity (P<0,001), the fiber alignment (P<0,001), the lesion area (P<0,05) and the proportion of the cross sectional area involved (P<0,05). In the T2, only one limb received the laser treatment, the other limb acted as a control. The control limbs showed no significant difference (P>0,05) in the echogenicity, the fiber alignment, the tendon area, the lesion area and the proportion of the cross sectional area involved between the day 0 and 30. The treated limbs showed no significant difference (P>0,05) in the echogenicity, the fiber alignment and the tendon area, but showed significant difference in the lesion area (P<0,05) and the proportion of the cross sectional area involved (P<0,01). The treatment dose of 20J/cm2 of gallium arsenide laser was efficient in speeding the healing process of SDFT lesions of the laser treated limbs in both groups (T1 and T2), when compared with the control limbs, at 30 days of the onset of the lesion. The group which lesions occurred due to the sport (T1) had a better response to the treatment than the group which lesions were induced by collagenasis (T2). The limbs treated by laser showed a positive response which validates the use of the Gallium Arsenide laser for the treatment of tendinitis in the Superficial Digital Flexor in race horses.

Os equinos atletas, especialmente os cavalos de corrida, são frequentemente acometidos por lesões do sistema locomotor. A tendinite é uma enfermidade frequente, sendo o flexor digital superficial (TFDS) o mais acometido. Muitos dos métodos de tratamento para lesões de tendão são utilizados, mas poucos proporcionam cura eficiente e duradoura. Este trabalho tem por finalidade investigar o efeito do ultrassom terapêutico (UST) no processo de cicatrização do TFDS em equinos. Para tanto foram utilizados 20 equinos da raça Puro Sangue Inglês, com idade variando entre dois e nove anos, machos e fêmeas, distribuídos em três grupos (G1, G2 e G3). O G1 foi formado por oito animais, sendo que os TFDS de seus membros torácicos não foram infiltrados com colagenase e nem expostos ao UST. O G2 e o G3 foram compostos por seis animais cada. A indução da lesão foi realizada no terço médio do TFDS com 1ml da solução de colagenase (2,5mg/ml), em todos os membros torácicos dos animais do G2 e do G3. A cicatrização dos tendões foi acompanhada pelos exames clínicos e ultrassonográficos. Aleatoriamente, apenas um membro torácico de cada cavalo do G2 e do G3 foi tratado com UST, modo pulsado (ciclo de trabalho 20%), frequência de 1 MHz e intensidade 0,5 W/cm2 (SATA spatial average temporal average), por 5 minutos. Foram colhidas amostras de tecido tendíneo lesado no 15° dia após o início do tratamento (T15) no G2 para determinar a expressão das proteínas IGF-1, TGF-&beta;1 e PCNA por imunoistoquimica; no 60° dia após o início do tratamento (T60) no G3 para detectar e mensurar a variação da organização dos feixes de colágenos por análise da birrefringência. Não foram observadas diferenças clínicas entre os membros tratados e não tratados dos grupos G2 e G3. Por meio da avaliação ultrassonográfica observou-se que o tamanho e ecogenicidade do tendão, tamanho e ecogenicidade da lesão, alinhamento longitudinal das fibras dos membros tratados do G3 não diferiram de tendões normais (G1) (P>0,05). Não houve diferença estatística entre os grupos para a expressão de PCNA. Entretanto, os membros tratados do G2 apresentaram maior expressão do TGF-&beta;1, enquanto os membros não tratados apresentaram maior expressão para o IGF-1 (P<0,05). Os resultados da birrefringência mostraram diferença estatística significativa entre o G1 e os membros não tratados do G3 e, entre os membros tratados e não tratados do G3 (P<0,001). A análise dos resultados sugere que o tempo de tratamento com UST não foi suficiente no G2 para promover regeneração do tendão, mas alterou a expressão de IGF-1 e TGF-&beta;1, indicando aceleração do processo cicatricial. Já a irradiação do UST no G3 promoveu reorganização, agregação das fibras de colágeno e regeneração do tendão. Conclui-se que, este protocolo de tratamento de UST é eficaz tanto para acelerar o processo de cicatrização do tendão, como para melhorar a organização de suas fibras de colágeno. / Equine athletes are frequently afflicted with locomotor injuries, especially racing horses. Tendinitis is a common problem of lameness in horse, and then the superficial digital flexor tendinitis (SDFT) is the greatest affected. Many of the tendinitis methods of treatment have an empirical basis; but none has proved an effective cure. The purpose of this study was to evaluate the effects of therapeutic ultrasound (TUS) on equine SDFT healing process. It was submitted 20 thoroughbred horses, mares and stallions, between two and nine years old, which were divided into three groups (G1, G2 and G3). The G1 was composed of eight horses; no tendinitis was induced, so they did not received any treatment. G2 and G3 were composed of six animals each one. All G2 and G3 forelimbs received 1.0 ml of collagenase (2.5 mg/ml) in the middle of SDFT. Healing process was monitored by clinical and sonographic evaluations. Randomly, one forelimb from each horse of G2 and G3 was treated with TUS performed at a frequency of 1 MHz on pulsed mode, an intensity of 0.5 W/cm2 (SATA - spatial average temporal average), for 5 minutes. After 15 treatment days, a tendon biopsy was performed on G2 tendons and protein expression for IGF-1, TGF-&beta;1 and PCNA were determined by immunohistochemistry. After 60 treatment days, a tendon biopsy was performed on G3 with the purpose of detecting and measuring the organization of collagen fibers through birefringence. Results showed no statistically difference for clinical examination on G2 and G3 treated and untreated tendons. Sonographic evaluation parameters such as isoechogenicity of tendon and lesion, diminution of lesion and tendon cross-sectional area, good axial alignment of collagen fibers was demonstrated by G3 treated limbs compared with normal tendon (P>0,05). The results showed no statistically difference between G1 and G2 treated and untreated tendons cells for PCNA expression. However, ultrasound-treated tendon cells (G2) were stained more strongly for TGF-&beta;1; whereas untreated tendon cells (G2) stained more strongly for IGF-1. The results showed a statistically difference (P<0.001) between G1 x G3 untreated tendons and between G3 treated and untreated tendons. Our results suggest that G2 TUS treatment time was not sufficient to improve tendon regeneration; although it modified IGF-1 and TGF-&beta;1 expression, accelerating tissue healing rate. In addition, G3 TUS protocol improved the arrangement and aggregation state of the collagen fibril, and promotes tendon regeneration. In conclusion, this TUS protocol is effective either to accelerate tendon healing or to improve the arrangement of the collagen fibril.

Os equinos atletas, especialmente os cavalos de corrida, são frequentemente acometidos por lesões do sistema locomotor. A tendinite é uma enfermidade frequente, sendo o flexor digital superficial (TFDS) o mais acometido. Muitos dos métodos de tratamento para lesões de tendão são utilizados, mas poucos proporcionam cura eficiente e duradoura. Este trabalho tem por finalidade investigar o efeito do ultrassom terapêutico (UST) no processo de cicatrização do TFDS em equinos. Para tanto foram utilizados 20 equinos da raça Puro Sangue Inglês, com idade variando entre dois e nove anos, machos e fêmeas, distribuídos em três grupos (G1, G2 e G3). O G1 foi formado por oito animais, sendo que os TFDS de seus membros torácicos não foram infiltrados com colagenase e nem expostos ao UST. O G2 e o G3 foram compostos por seis animais cada. A indução da lesão foi realizada no terço médio do TFDS com 1ml da solução de colagenase (2,5mg/ml), em todos os membros torácicos dos animais do G2 e do G3. A cicatrização dos tendões foi acompanhada pelos exames clínicos e ultrassonográficos. Aleatoriamente, apenas um membro torácico de cada cavalo do G2 e do G3 foi tratado com UST, modo pulsado (ciclo de trabalho 20%), frequência de 1 MHz e intensidade 0,5 W/cm2 (SATA spatial average temporal average), por 5 minutos. Foram colhidas amostras de tecido tendíneo lesado no 15° dia após o início do tratamento (T15) no G2 para determinar a expressão das proteínas IGF-1, TGF-&beta;1 e PCNA por imunoistoquimica; no 60° dia após o início do tratamento (T60) no G3 para detectar e mensurar a variação da organização dos feixes de colágenos por análise da birrefringência. Não foram observadas diferenças clínicas entre os membros tratados e não tratados dos grupos G2 e G3. Por meio da avaliação ultrassonográfica observou-se que o tamanho e ecogenicidade do tendão, tamanho e ecogenicidade da lesão, alinhamento longitudinal das fibras dos membros tratados do G3 não diferiram de tendões normais (G1) (P>0,05). Não houve diferença estatística entre os grupos para a expressão de PCNA. Entretanto, os membros tratados do G2 apresentaram maior expressão do TGF-&beta;1, enquanto os membros não tratados apresentaram maior expressão para o IGF-1 (P<0,05). Os resultados da birrefringência mostraram diferença estatística significativa entre o G1 e os membros não tratados do G3 e, entre os membros tratados e não tratados do G3 (P<0,001). A análise dos resultados sugere que o tempo de tratamento com UST não foi suficiente no G2 para promover regeneração do tendão, mas alterou a expressão de IGF-1 e TGF-&beta;1, indicando aceleração do processo cicatricial. Já a irradiação do UST no G3 promoveu reorganização, agregação das fibras de colágeno e regeneração do tendão. Conclui-se que, este protocolo de tratamento de UST é eficaz tanto para acelerar o processo de cicatrização do tendão, como para melhorar a organização de suas fibras de colágeno. / Equine athletes are frequently afflicted with locomotor injuries, especially racing horses. Tendinitis is a common problem of lameness in horse, and then the superficial digital flexor tendinitis (SDFT) is the greatest affected. Many of the tendinitis methods of treatment have an empirical basis; but none has proved an effective cure. The purpose of this study was to evaluate the effects of therapeutic ultrasound (TUS) on equine SDFT healing process. It was submitted 20 thoroughbred horses, mares and stallions, between two and nine years old, which were divided into three groups (G1, G2 and G3). The G1 was composed of eight horses; no tendinitis was induced, so they did not received any treatment. G2 and G3 were composed of six animals each one. All G2 and G3 forelimbs received 1.0 ml of collagenase (2.5 mg/ml) in the middle of SDFT. Healing process was monitored by clinical and sonographic evaluations. Randomly, one forelimb from each horse of G2 and G3 was treated with TUS performed at a frequency of 1 MHz on pulsed mode, an intensity of 0.5 W/cm2 (SATA - spatial average temporal average), for 5 minutes. After 15 treatment days, a tendon biopsy was performed on G2 tendons and protein expression for IGF-1, TGF-&beta;1 and PCNA were determined by immunohistochemistry. After 60 treatment days, a tendon biopsy was performed on G3 with the purpose of detecting and measuring the organization of collagen fibers through birefringence. Results showed no statistically difference for clinical examination on G2 and G3 treated and untreated tendons. Sonographic evaluation parameters such as isoechogenicity of tendon and lesion, diminution of lesion and tendon cross-sectional area, good axial alignment of collagen fibers was demonstrated by G3 treated limbs compared with normal tendon (P>0,05). The results showed no statistically difference between G1 and G2 treated and untreated tendons cells for PCNA expression. However, ultrasound-treated tendon cells (G2) were stained more strongly for TGF-&beta;1; whereas untreated tendon cells (G2) stained more strongly for IGF-1. The results showed a statistically difference (P<0.001) between G1 x G3 untreated tendons and between G3 treated and untreated tendons. Our results suggest that G2 TUS treatment time was not sufficient to improve tendon regeneration; although it modified IGF-1 and TGF-&beta;1 expression, accelerating tissue healing rate. In addition, G3 TUS protocol improved the arrangement and aggregation state of the collagen fibril, and promotes tendon regeneration. In conclusion, this TUS protocol is effective either to accelerate tendon healing or to improve the arrangement of the collagen fibril.