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Efeito do ultrassom contínuo sobre o processo de regeneração do tecido conjuntivo muscular de ratos / Effects of continuous ultrasound onto the conjunctive muscular tissue regeneration process in rats

Fernandes, Bernardo Luiz Ferreira 15 April 2010 (has links)
Introdução: A escolha de parâmetros mais eficientes na aplicação terapêutica de um recurso de eletroterapia garante uma efetividade clínica maior ao tratamento realizado. O modo contínuo de aplicação do ultrassom vem sendo pouco estudado nas fases agudas das lesões. Objetivo: Avaliar os efeitos do ultrassom contínuo nas fases inflamatória, proliferativa e de remodelação no processo de regeneração do tecido conjuntivo muscular de ratos. Material e Métodos: Trinta ratos foram submetidos à lesão muscular nos músculos tibial anterior de ambos os membros traseiros e divididos em dois grupos, sendo o grupo Lesado (L) composto pelos membros traseiros esquerdos dos animais e o grupo lesado tratado com ultrassom (LUS), composto pelos membros traseiros direitos. Cada grupo foi subdividido em seis pequenos grupos (n = 5), que foram formados de acordo com o número de dias após a lesão em que os animais foram mortos, sendo no 3º, 7º, 14º, 21º, 28º e 35º dias. Após 24 horas da realização da lesão cirúrgica, o Grupo LUS começou a receber a aplicação do ultrassom no modo contínuo, área de radiação efetiva de 1cm2, com freqüência de transdutor de 1MHz, intensidade de 0,2W/cm2, por 1 minuto, uma vez ao dia. Os membros traseiros esquerdos submetidos à lesão cirúrgica e não tratados serviram como grupo controle (L). Para análise morfológica das fibras musculares foram realizados cortes seriados de 10 ?m de espessura, obtidos através de em um micrótomo criostato. Os músculos foram congelados em uma posição onde os cortes pudessem fornecer imagens longitudinais das fibras musculares e da fenda incisional. Cada série de corte foi obtida a partir da região superficial do músculo, a cada 100 ?m de profundidade e forneceu duas lâminas que foram coradas com a técnica Hematoxilina Eosina. A contagem de células foi feita em uma área de 0,625mm2 (área de um campo microscópico), com auxílio de uma câmera acoplada ao microscópio e monitor de vídeo e tendo como ponto de referência os limites da fenda incisional, ou seja, a região com fibras musculares lesionadas de um lado e as células infiltradas na fenda incisional de outro. A determinação da densidade de leucócitos polimorfonucleares e mononucleares, e de fibroblastos foi feita através da contagem média de 10 campos por amostra, sendo cinco campos representativos do tecido muscular seccionado e cinco campos da fenda incisional, totalizando 300 campos por grupo experimental (30 ratos ao todo). As células com morfologia de células satélites ou mioblastos foram ignoradas. Resultados: A análise da contagem de células revelou diferenças significativas (p <= 0,05) entre o número de células polimorfonucleares no 3º, 7º, 21º e 28º dias de tratamento com as seguintes xiii médias: L3 = 27,0; L7 = 29,6; L21 = 20,0 e L28 = 12,8 e LUS3 = 43,2; LUS7 = 29,2; LUS21 = 8,8 e LUS28 = 3,6. O número de fibroblastos foi significativamente maior (p<=0,05) apenas no 21º dia com L21 = 14,2 e LUS21 = 27,0. Conclusão: O ultrassom contínuo promoveu um aumento na densidade de células polimorfonucleares e fibroblastos durante o processo de regeneração do músculo tibial anterior de ratos, incrementando a recuperação deste tecido. / Introduction: The choice of more efficient parameters in the ultrasound application allows a major clinical effectivity to the performed treatment. The therapeutic continuous ultrasound has been being poorly studied in injury acute phases. Objective: To assess the effects of the continuous ultrasound in the inflammatory, proliferative and remodeling phases of rats\' conjunctive muscular tissue regeneration process. Material and Methods: Thirty rats were submitted to muscular lesion in tibialis anterior muscle of both rear limbs. They were divided into two groups, the lesion group (L) consisting of the rats left rear limbs, and the lesion group treated with ultrasound (LUS) consisting of the right rear limbs. Each group was subdivided into six small groups (n = 5), which were formed according to period of time (in days) after the lesion in which the rats were killed, on the 3rd, 7th, 14th, 21st, 28th and 35th days. Twenty four hours after performing the surgical lesion, the LUS group received the first 1MHz continuous ultrasound treatment with effective radiating area = 1cm2, intensity of 0.2W/cm2, for one minute, once a day. The left rear limbs submitted to the surgical lesion and not treated at all composed the control group (L). To perform the muscle fibers morphological analysis, a series of 10?m thick slices were made using a microtome with criostate. The muscles were frozen in a position which the slices could provide longitudinal images of the muscle fibers and incision gap. A series of samples were collected from the lesion area surface, and further two deeper series, at 100?m distance from one another. Two slices were thus provided and stained with hematoxilin-eosin. Cell count was made on an area of 0.625 mm2, by means of a camera coupled to the microscope and to a video monitor. The reference point were the limits of the incision gap, which is a region with injured muscle fibers in one side and infiltrated cells of the incision gap on the other. The determination of the density of polymorphonuclear and mononuclear leukocytes, and fibroblasts was made by the exam of 10 fields per sample (five fields representing the cut muscular tissue and more five fields of the incision gap), totaling 300 fields per group. Cells with myoblast or satellite cells morphology were ignored. Results: The cells counting analysis revealed significant differences (p <= 0.05) in the density of polymorphonuclear cells on the 3rd, 7th, 21st and 28th treatment days and the means are: L3 = 27; L7 = 29.6; L21 = 20; L28 = 12.8 and LUS3 = 43.2; LUS7 = 29.2; LUS21 = 8.8; LUS28 = 3.6. The density of fibroblasts was significant greater (p <= 0.05) only in the 21st day with means of L21 = 14.2 and LUS21 = 27. Conclusion: The continuous ultrasound increased the density of polymorphonuclear and fibroblasts cells during the anterior tibialis muscle regenerating process of rats, enhancing the recovery of this tissue.
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Estudo experimental dos efeitos da sonoforese com Arnica montana sobre o processo de regeneração do músculo esquelético em ratos Wistar / Experimental study on the effects of phonophoresis with Arnica montana onto regeneration process in Wistar rats lesioned skeletal muscles

Alfredo, Patrícia Pereira 12 May 2008 (has links)
A proposta deste estudo foi verificar o efeito da sonoforese com Arnica montana sobre a fase inflamatória aguda de uma lesão muscular. Para isso, 40 ratos Wistar machos (300±50 g), lesados cirurgicamente, foram divididos em 4 grupos: grupo controle (C), 10 ratos lesados, não submetidos a tratamento algum; grupo ultra-som (US), 10 ratos lesados, tratados com US; grupo ultrasom+ arnica (US+A), 10 ratos lesados, tratados com sonoforese com gel de arnica; e grupo arnica (A), 10 ratos lesados, tratados com massagem de gel de arnica. O ultra-som com freqüência de 1 MHz e 0,5 W/cm2 de intensidade foi aplicado 24 h após a lesão uma vez ao dia durante 3 minutos, por 3 dias; o grupo US+A recebeu aplicação de ultra-som idêntica, mas com gel de arnica; o grupo A recebeu massagem de gel de arnica nos mesmos tempo e período. O terço médio do músculo tibial anterior lesado foi removido, montando-se séries de lâminas para análise quantitativa (contagem de células mononucleares e polimorfonucleares) e qualitativa (morfologia das fibras musculares). Os resultados foram tratados estatisticamente, com nível de significância p<0,05. Foi encontrada maior densidade de células mononucleares nos grupos US, US+A e A, sem diferença entre estes, mas com diferença significativa (p<0,0001) destes para o grupo controle, onde a densidade de células polimorfonucleares também foi significativamente diferente (p=0,0134) dos demais. Ainda quanto a essa densidade, não houve diferença entre os grupos US e US+A, mas houve entre o grupo A (p=0,0134) e os demais. A análise qualitativa revelou estágio mais avançado de regeneração nos tecidos dos grupos US e US+A igualmente. A similaridade de resultados entre os grupos US e US+A leva a concluir que a sonoforese com arnica não foi mais eficaz que o ultra-som na recuperação da lesão muscular. Sugere-se que o US pode ter anulado ou minimizado o efeito regenerativo da Arnica montana por sonoforese na fase inflamatória aguda da lesão muscular. / This study aimed at verifying the effects of ultrasound associated to Arnica montana (phonophoresis) onto the acute phase of an inflammatory muscle lesion. Forty Wistar male rats (300±50 g), of which the Tibialis Anterior muscle was surgically lesioned, were divided into 4 groups (n=10 each): control group received no treatment; the ultrasound group (US) was treated with 1-MHz, 0.5W/cm2-intensity US during 3 minutes, once a day, for 3 days; the US+A group was treated with arnica phonophoresis (the same US parameters plus arnica gel); and the arnica group (A) was submitted to massage with arnica gel, also during 3 minutes, once a day, for 3 days. Treatment started 24 h after the surgical lesion. On the 4th day after lesion animals were sacrificed and sections of the lesioned, inflamed muscle were removed for quantitative (mononuclear and polymorphonuclear cell count) and qualitative analysis (muscle fiber morphology). Collected data from the 4 groups were statistically analysed and the significance level set at p<0.05. Results show higher mononuclear cell density in all three treated groups with no significant difference between them, but values were significantly different (p<.0001) when compared to control group\'s. As to polymorphonuclear cell density, significant differences were found between control group (p=0.0134) and the other three groups; the arnica group presented lesser density of polymorphonuclear cells when compared (p=0.0134) to the other groups, and no significant differences were found between US and US+A groups. Qualitative analysis showed a more advanced regeneration stage in tissues from both US and US+A groups. The similarity of results between US and US+A groups points to ineffectiveness of Arnica montana phonophoresis, US having seemingly checked or minimized its anti-inflammatory effect.
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Estudo experimental dos efeitos da sonoforese com Arnica montana sobre o processo de regeneração do músculo esquelético em ratos Wistar / Experimental study on the effects of phonophoresis with Arnica montana onto regeneration process in Wistar rats lesioned skeletal muscles

Patrícia Pereira Alfredo 12 May 2008 (has links)
A proposta deste estudo foi verificar o efeito da sonoforese com Arnica montana sobre a fase inflamatória aguda de uma lesão muscular. Para isso, 40 ratos Wistar machos (300±50 g), lesados cirurgicamente, foram divididos em 4 grupos: grupo controle (C), 10 ratos lesados, não submetidos a tratamento algum; grupo ultra-som (US), 10 ratos lesados, tratados com US; grupo ultrasom+ arnica (US+A), 10 ratos lesados, tratados com sonoforese com gel de arnica; e grupo arnica (A), 10 ratos lesados, tratados com massagem de gel de arnica. O ultra-som com freqüência de 1 MHz e 0,5 W/cm2 de intensidade foi aplicado 24 h após a lesão uma vez ao dia durante 3 minutos, por 3 dias; o grupo US+A recebeu aplicação de ultra-som idêntica, mas com gel de arnica; o grupo A recebeu massagem de gel de arnica nos mesmos tempo e período. O terço médio do músculo tibial anterior lesado foi removido, montando-se séries de lâminas para análise quantitativa (contagem de células mononucleares e polimorfonucleares) e qualitativa (morfologia das fibras musculares). Os resultados foram tratados estatisticamente, com nível de significância p<0,05. Foi encontrada maior densidade de células mononucleares nos grupos US, US+A e A, sem diferença entre estes, mas com diferença significativa (p<0,0001) destes para o grupo controle, onde a densidade de células polimorfonucleares também foi significativamente diferente (p=0,0134) dos demais. Ainda quanto a essa densidade, não houve diferença entre os grupos US e US+A, mas houve entre o grupo A (p=0,0134) e os demais. A análise qualitativa revelou estágio mais avançado de regeneração nos tecidos dos grupos US e US+A igualmente. A similaridade de resultados entre os grupos US e US+A leva a concluir que a sonoforese com arnica não foi mais eficaz que o ultra-som na recuperação da lesão muscular. Sugere-se que o US pode ter anulado ou minimizado o efeito regenerativo da Arnica montana por sonoforese na fase inflamatória aguda da lesão muscular. / This study aimed at verifying the effects of ultrasound associated to Arnica montana (phonophoresis) onto the acute phase of an inflammatory muscle lesion. Forty Wistar male rats (300±50 g), of which the Tibialis Anterior muscle was surgically lesioned, were divided into 4 groups (n=10 each): control group received no treatment; the ultrasound group (US) was treated with 1-MHz, 0.5W/cm2-intensity US during 3 minutes, once a day, for 3 days; the US+A group was treated with arnica phonophoresis (the same US parameters plus arnica gel); and the arnica group (A) was submitted to massage with arnica gel, also during 3 minutes, once a day, for 3 days. Treatment started 24 h after the surgical lesion. On the 4th day after lesion animals were sacrificed and sections of the lesioned, inflamed muscle were removed for quantitative (mononuclear and polymorphonuclear cell count) and qualitative analysis (muscle fiber morphology). Collected data from the 4 groups were statistically analysed and the significance level set at p<0.05. Results show higher mononuclear cell density in all three treated groups with no significant difference between them, but values were significantly different (p<.0001) when compared to control group\'s. As to polymorphonuclear cell density, significant differences were found between control group (p=0.0134) and the other three groups; the arnica group presented lesser density of polymorphonuclear cells when compared (p=0.0134) to the other groups, and no significant differences were found between US and US+A groups. Qualitative analysis showed a more advanced regeneration stage in tissues from both US and US+A groups. The similarity of results between US and US+A groups points to ineffectiveness of Arnica montana phonophoresis, US having seemingly checked or minimized its anti-inflammatory effect.
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Efeito do ultrassom contínuo sobre o processo de regeneração do tecido conjuntivo muscular de ratos / Effects of continuous ultrasound onto the conjunctive muscular tissue regeneration process in rats

Bernardo Luiz Ferreira Fernandes 15 April 2010 (has links)
Introdução: A escolha de parâmetros mais eficientes na aplicação terapêutica de um recurso de eletroterapia garante uma efetividade clínica maior ao tratamento realizado. O modo contínuo de aplicação do ultrassom vem sendo pouco estudado nas fases agudas das lesões. Objetivo: Avaliar os efeitos do ultrassom contínuo nas fases inflamatória, proliferativa e de remodelação no processo de regeneração do tecido conjuntivo muscular de ratos. Material e Métodos: Trinta ratos foram submetidos à lesão muscular nos músculos tibial anterior de ambos os membros traseiros e divididos em dois grupos, sendo o grupo Lesado (L) composto pelos membros traseiros esquerdos dos animais e o grupo lesado tratado com ultrassom (LUS), composto pelos membros traseiros direitos. Cada grupo foi subdividido em seis pequenos grupos (n = 5), que foram formados de acordo com o número de dias após a lesão em que os animais foram mortos, sendo no 3º, 7º, 14º, 21º, 28º e 35º dias. Após 24 horas da realização da lesão cirúrgica, o Grupo LUS começou a receber a aplicação do ultrassom no modo contínuo, área de radiação efetiva de 1cm2, com freqüência de transdutor de 1MHz, intensidade de 0,2W/cm2, por 1 minuto, uma vez ao dia. Os membros traseiros esquerdos submetidos à lesão cirúrgica e não tratados serviram como grupo controle (L). Para análise morfológica das fibras musculares foram realizados cortes seriados de 10 ?m de espessura, obtidos através de em um micrótomo criostato. Os músculos foram congelados em uma posição onde os cortes pudessem fornecer imagens longitudinais das fibras musculares e da fenda incisional. Cada série de corte foi obtida a partir da região superficial do músculo, a cada 100 ?m de profundidade e forneceu duas lâminas que foram coradas com a técnica Hematoxilina Eosina. A contagem de células foi feita em uma área de 0,625mm2 (área de um campo microscópico), com auxílio de uma câmera acoplada ao microscópio e monitor de vídeo e tendo como ponto de referência os limites da fenda incisional, ou seja, a região com fibras musculares lesionadas de um lado e as células infiltradas na fenda incisional de outro. A determinação da densidade de leucócitos polimorfonucleares e mononucleares, e de fibroblastos foi feita através da contagem média de 10 campos por amostra, sendo cinco campos representativos do tecido muscular seccionado e cinco campos da fenda incisional, totalizando 300 campos por grupo experimental (30 ratos ao todo). As células com morfologia de células satélites ou mioblastos foram ignoradas. Resultados: A análise da contagem de células revelou diferenças significativas (p <= 0,05) entre o número de células polimorfonucleares no 3º, 7º, 21º e 28º dias de tratamento com as seguintes xiii médias: L3 = 27,0; L7 = 29,6; L21 = 20,0 e L28 = 12,8 e LUS3 = 43,2; LUS7 = 29,2; LUS21 = 8,8 e LUS28 = 3,6. O número de fibroblastos foi significativamente maior (p<=0,05) apenas no 21º dia com L21 = 14,2 e LUS21 = 27,0. Conclusão: O ultrassom contínuo promoveu um aumento na densidade de células polimorfonucleares e fibroblastos durante o processo de regeneração do músculo tibial anterior de ratos, incrementando a recuperação deste tecido. / Introduction: The choice of more efficient parameters in the ultrasound application allows a major clinical effectivity to the performed treatment. The therapeutic continuous ultrasound has been being poorly studied in injury acute phases. Objective: To assess the effects of the continuous ultrasound in the inflammatory, proliferative and remodeling phases of rats\' conjunctive muscular tissue regeneration process. Material and Methods: Thirty rats were submitted to muscular lesion in tibialis anterior muscle of both rear limbs. They were divided into two groups, the lesion group (L) consisting of the rats left rear limbs, and the lesion group treated with ultrasound (LUS) consisting of the right rear limbs. Each group was subdivided into six small groups (n = 5), which were formed according to period of time (in days) after the lesion in which the rats were killed, on the 3rd, 7th, 14th, 21st, 28th and 35th days. Twenty four hours after performing the surgical lesion, the LUS group received the first 1MHz continuous ultrasound treatment with effective radiating area = 1cm2, intensity of 0.2W/cm2, for one minute, once a day. The left rear limbs submitted to the surgical lesion and not treated at all composed the control group (L). To perform the muscle fibers morphological analysis, a series of 10?m thick slices were made using a microtome with criostate. The muscles were frozen in a position which the slices could provide longitudinal images of the muscle fibers and incision gap. A series of samples were collected from the lesion area surface, and further two deeper series, at 100?m distance from one another. Two slices were thus provided and stained with hematoxilin-eosin. Cell count was made on an area of 0.625 mm2, by means of a camera coupled to the microscope and to a video monitor. The reference point were the limits of the incision gap, which is a region with injured muscle fibers in one side and infiltrated cells of the incision gap on the other. The determination of the density of polymorphonuclear and mononuclear leukocytes, and fibroblasts was made by the exam of 10 fields per sample (five fields representing the cut muscular tissue and more five fields of the incision gap), totaling 300 fields per group. Cells with myoblast or satellite cells morphology were ignored. Results: The cells counting analysis revealed significant differences (p <= 0.05) in the density of polymorphonuclear cells on the 3rd, 7th, 21st and 28th treatment days and the means are: L3 = 27; L7 = 29.6; L21 = 20; L28 = 12.8 and LUS3 = 43.2; LUS7 = 29.2; LUS21 = 8.8; LUS28 = 3.6. The density of fibroblasts was significant greater (p <= 0.05) only in the 21st day with means of L21 = 14.2 and LUS21 = 27. Conclusion: The continuous ultrasound increased the density of polymorphonuclear and fibroblasts cells during the anterior tibialis muscle regenerating process of rats, enhancing the recovery of this tissue.

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