Neste trabalho foram estabelecidos os níveis basais de concentração de metais nos sedimentos do sistema estuarino da Baixada Santista. O local da área de estudo foi o Canal de Bertioga que apresentou as seguintes concentrações basais: Ag (<1,00 mg.kg-1), Al (27.213 mg.kg-1), As (9,84 mg.kg-1), B (90,1 mg.kg-1), Ba (26,2 mg.kg-1), Be (<0,03 mg.kg-1), Cd (<0,02 mg.kg-1), Co (6,70 mg.kg-1), Cr (27,8 mg.kg-1), Cu (11,0 mg.kg-1), Fe (31.954 mg.kg-1), Hg (<0,02 mg.kg-1), Mn (299 mg.kg-1), Mo (<4,00 mg.kg-1), Ni (11,2 mg.kg-1), Pb (<0,26 mg.kg-1), Sb (<1,10 mg.kg-1), Se (<0,20 mg.kg-1), Sn (<5,00 mg.kg-1), Ti (336 mg.kg-1), Tl (<2,30 mg.kg-1), V (37,3 mg.kg-1) e Zn (63,8 mg.kg-1), onde o As foi o elemento que apresentou concentrações mais elevadas em comparação com a Resolução CONAMA Nº 344/04. No estudo realizado para avaliar a distribuição das concentrações de metais em duas diferentes frações granulométricas (<2,00 mm e <63 &#181;m), mostrou que na maioria dos casos a fração mais fina (<63&#181;m ) incorpora mais metais que a fração total (<2,00 mm) e a fração granulométrica mais adequada para determinação de metais em amostras de sedimentos para a maioria dos estudos ambientais é a fração <2,00 mm. Para avaliar e comparar métodos de solubilização de amostras de sedimentos para determinação de metais por técnicas espectrométricas, três diferentes métodos foram utilizados, sendo dois com solubilização parcial da amostra de sedimento (U.S EPA 3051a, com HNO3 e HNO3 + HCl) e um terceiro com solubilização total (U.S EPA 3052, com HNO3 + HCl + HF), os resultados mostraram que ambos os métodos da U.S EPA 3051a são estatisticamente equivalentes e a solubilização pelo método U.S EPA 3052 apresentou concentrações mais altas em relação aos valores obtidos na solubilização parcial para a maioria dos metais. Outro objetivo deste trabalho foi testar e avaliar duas técnicas para determinação de granulometria, com ao menos um método conservativo, mostrando que os dois métodos são estatisticamente equivalentes, porém o método conservativo não foi adequado para estimar a fração orgânica. No estudo para estimar e avaliar as concentrações de metais em ostras, mostrou que as concentrações de As, Cd, Cu, Hg, Ni, Pb, Sb, Sn e Se apresentaram-se abaixo dos níveis estabelecidos pela ANVISA, enquanto que para o Zn os valores estiveram acima do valor estabelecido pela ANVISA, mas em concordância com níveis encontrados em outros estudos ambientais. / In this work were established the background concentrations of metals in sediments of Estuarine System of Baixada Santista. The location of study area was the Canal de Bertioga which presented the following basal concentrations: Ag (<1,00 mg.kg-1), Al (27.213mg.kg-1 ), As (9,84 mg.kg-1), B (90,1 mg.kg-1), Ba (26,2 mg.kg-1), Be (<0,03 mg.kg-1), Cd (<0,02 mg.kg-1), Co (6,70 mg.kg-1), Cr (27,8 mg.kg-1), Cu (11,0 mg.kg-1 ), Fe (31.954 mg.kg-1 ), Hg (<0,02 mg.kg-1), Mn (299 mg.kg-1), Mo (<4,00 mg.kg-1), Ni (11,2 mg.kg-1), Pb (<0,26 mg.kg-1), Sb (<1,10 mg.kg-1), Se (<0,20 mg.kg-1), Sn (<5,00 mg.kg-1), Ti (336 mg.kg-1), Tl (<2,30 mg.kg-1), V (37,3 mg.kg-1) and Zn (63,8 mg.kg-1), where As was the element that presented high concentrations incomparison to Resolucao CONAMA Nº 344/04 (Brazilian Guidelines). In the study to evaluate the distribution of metals concentrations in two different size fractions (<2,00 mm and <63&#181;m), showed that in most of the cases that the finest fraction (<63&#181;m) can incorporate much more metals than total fraction (<2,00 mm) and the most adequate fraction for determination of metals in sediments samples in the majority of environmental studies is <2,00 mm. In order to evaluate and compare methods of solubilization of sediments samples for determination of metals by spectrometry techniques were used three different methods, two for total-recoverable concentrations (U.S EPA 3051a, com HNO3 e HNO3 + HCl) and a third one for total-total concentrations (U.S EPA 3052, com HNO3 + HCl + HF), the results showed that both U.S 3051a methods are statistically similar and U.S EPA 3052 method presented higher concentrations in relation to U.S 3051a method for the huge majority of metals. Another objective of this work was to test and evaluate two methods for determination of particle size with at least one method without destruction of organic matter called sieving and the results showed that sieving method wasn\'t adequate to estimate organic matter fraction (<20 &#181;m). In the study to estimate and evaluate metals concentrations in oyster tissue showed that As, Cd, Cr, Cu, Hg, Ni, Pb, Sb, Sn and Se presented values lower than the levels established by ANVISA while Zn presented higher values but in according to levels found in other environmental studies.

As cianobactérias são micro-organismos reconhecidos por seu potencial em produzir cianotoxinas que afetam não só o ecossistema e a outros organismos dos ambientes aquáticos, mas também aos seres humanos, agindo em diversos órgãos e tecidos. Cerca de 600 metabólitos secundários produzidos por cianobactérias já foram descritos na literatura, sendo que muitos deles possuem potencial biológico. Os peptídeos de baixo peso molecular, produzidos por cianobactérias chamados cianopeptídeos, dos quais se podem citar as anabaenopeptinas, aeruginosinas, microviridinas, cianopeptolinas e microgininas, são compostos provindos do metabolismo secundário de cianobactérias e são descritos como inibidores de proteases e fosfatases em alguns sistemas biológicos. Sendo assim, o objetivo do estudo foi identificar a ocorrência de cianopeptídeos em cianobactérias brasileiras e testar seu efeito de inibição da atividade sobre enzimas proteases. Os objetos de estudo foram: uma linhagem da espécie Sphaerospermopsis torques-reginae, duas de Cylindrospermopsis raciborskii, duas de Microcystis sp, uma de Oscillatoria e uma de Pseudanabena sp. A partir dos resultados obtidos pode-se afirmar que do total de linhagens analisadas, ao menos 4 destas parecem produzir os cianopeptídeos de interesse, quando avaliados por cromatografia líquida de alta eficiência com detector de arranjo de diodos (HPLC-DAD). Em seguida, culturas de duas linhagens de C. raciborskii (uma produtora e outra não produtora de saxitoxina) foram amostradas a cada 3 dias, para a avaliação do crescimento celular, produção de cianopeptídeos e de saxitoxina e suas variantes. Não foi possível confirmar a produção de cianopeptídeos nas duas linhagens desta espécie. Por outro lado, foi evidenciado um aumento da produção de saxitoxinas quando cultivada num meio sem nitrogênio em comparação com a condição controle. Quando analisada a linhagem de Microcystis sp. (LTPNA 08), produtora de microcistinas, foi possível confirmar por cromatografia líquida acoplada a espectrometria de massas (LC-MS) a produção de dois cianopeptídeos, sendo estes, duas microgininas. Desta forma, desenvolveu-se um método cromatográfico para a separação desses compostos e purificação por cromatografia líquida semi-preparativa, onde foi possível a obtenção de frações enriquecidas de microgininas e microcistinas-RR e LR, com cerca de 70%, 86% e 97% de pureza. Por fim, realizaram-se ensaios avaliando a atividade da enzima conversora de angiotensina (ECA) e aminopeptidase M (AMP M) com as frações isoladas de microgininas e microcistina-LR. A atividade da ECA foi ± 50% inibida pelas frações testadas de cianopeptídeos, microcistina-LR isolada e microcistins-lR comercial. A atividade da AMP M foi 100% e 24,5% inibida quando incubada com 20 &#181;M da fração de microgininas e microcistina-LR, respectivamente. Desta forma, as microgininas isoladas de cianobactérias brasileiras, mostraram-se como importantes inibidores da ECA e AMP M, podendo, no futuro, serem utilizadas como compostos para o tratamento de patologias cardiovasculares e renais. / Cyanobacteria are micro-organisms recognized for their potential to produce cyanotoxins that affect not only the ecosystem and other organisms of aquatic environments, but also humans, acting in various organs and tissues. Around 600 secondary metabolites produced by cyanobacteria have been described in the literature; many of them have biological potential. Low molecular weight peptides produced by cyanobacteria are called cyanopeptides, among them we can cite the anabaenopeptins, aeruginosins, microviridins, cyanopeptolins and microginins, these compounds are derived from secondary metabolisms of cyanobacteria and apparently cause inhibition of proteases and phosphatases in some biological systems. Therefore, this study targeted the identification of the occurrence of cyanopeptides in Brazilian cyanobacterias and testing its effect on the inhibition of proteases activity. The targets of study were: a strain of species Sphaerospermopsis torques-reginae, two strains of Cylindrospermopsis raciborskii, two strains of Microcystis sp. and, one strain of Pseudanabena and Oscillatoria sp. From the results obtained in this study it can be stated that at least four of the total of strains analyzed appear to produce cyanopeptides of interest, when analyzed by high-performance liquid chromatography whit phodo diodo array detector (HPLC-PDA). The cultures of two strains of C. raciborskii (a producer of saxitoxin and a non-producer) were sampled every 3 days for assessment of cell growth, production of cyanopeptides and saxitoxins. It was not possible to confirm the production of cyanopeptides in strains of this species. Nevertheless, an increase in production of saxitoxins was shown when cultivated in an environment without nitrogen, as compared to the control condition. When the strain of Microcystis sp. (LTPNA 08), a producer of microcystins, was analyzed, the production of two cyanopeptides was confirmed by using liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS). After confirmation, a method using HPLC-PDA was used to do the separation and purification of these compounds by semi-preparative chromatography, in which it was possible to obtain an enriched fraction of microginins, microcystin-RR and microcystin-LR with approximately 70%, 86% and 97% purity, respectively. Lastly, inhibition experiments were run with angiotensin-converting enzyme (ACE) and aminopeptidase M (AMP M) with the isolated fractions. The microginins fractions, MC-LR commercial and MC-LR isolated, showed an inhibition of ± 50% of the angiotensin-converting enzyme. The activity of AMP M was 100% and 24.5% inhibited when incubated with microginins and microcystin-LR fractions in a concentration of 20 &#181;M, respectively. Thus, isolated microginins from Brazilian cyanobacteria have exhibited properties as potential therapeutic agents in development of inhibitors of ACE and AMP M, which can be a benefit of using these molecules in the treatment of cardiovascular and renal pathologies.

Orientador: Gisela de Aragão Umbuzeiro / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Tecnologia / Made available in DSpace on 2018-08-21T02:00:16Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Ribeiro_AlysonRogerio_M.pdf: 3701819 bytes, checksum: b2f0a69f435398e5de38f031d75649e3 (MD5) Previous issue date: 2012 / Resumo: As planarias de água doce possuem vasta distribuição geográfica, plasticidade biologica, facilidade de cultivo em laboratório, sensibilidade a contaminantes diversos e capacidade regenerativa, por isso vem sendo utilizadas como organismos-teste em ensaios ecotoxicologicos. Porem, ainda não ha normatização internacional ou nacional que padronize esses ensaios. O objetivo deste trabalho foi verificar o potencial do uso de planarias de agua doce (Girardia tigrina) na avaliação de alguns contaminantes e amostras ambientais utilizando protocolos padronizados avaliando-se mortalidade e atraso na regeneração encefálica. Foram empregados 15 organismos por concentração-teste nos ensaios de mortalidade de filhotes (96h) e 20 planarias adultas regenerantes por concentração-teste nos ensaios de regeneração encefálica (120h). Avaliou-se cromo e zinco como substancias de referencia e empregou-se cobre, azo corante têxtil Disperse Red 1, herbicida atrazina, nanotubos de carbono de parede múltipla, alem de amostras da ETE Carioba e do Ribeirão dos Cristais. Carta controle com substancia de referencia foi realizada, sendo estabelecido um protocolo para o monitoramento da sensibilidade das culturas de G. trigrina. O zinco foi a substancia mais apropriada que o cromo, com a vantagem do ensaio de sensibilidade poder ser finalizado em 24h. Os métodos utilizados para realização do ensaio de regeneração encefálica e de mortalidade de filhotes foram eficazes para a observação de efeitos adversos das substancias analisadas. Todas as amostras testadas apresentaram toxicidade as planarias, exceto os nanotubos de carbono. Atraso na regeneração encefálica foi o endpoint mais sensível para os contaminantes avaliados. Os protocolos utilizados neste estudo podem ser utilizados como subsídios na elaboração futura de normas técnicas de testes ecotoxicologicos com planarias de agua doce / Abstract: Freshwater planarians are worldwide distributed, have biological plasticity and a unique body regenerative capacity. They are easily maintained under laboratorial conditions and are sensitive for several compounds. For these reasons they have been used in ecotoxicological testing although the lack of national or international guidelines. This research aimed to verify the potential use of freshwater planarians (Girardia tigrina) in mortality and regeneration delay endpoints to assess the toxicity of environmental contaminants using standardized protocols. The culture sensitivity of G. tigrina was monitored with zinc, which was the most suitable substance for this purpose, providing responses in only 24h. The adopted protocols for regeneration and mortality tests were efficient to assess the adverse effects of the chemical agents (copper, an azo textile dye, atrazine), carbon nanotubes and wastewater and water samples from Carioba WWTP and Cristais River. The regeneration test was the most sensitive endpoint and all analyzed substances showed toxicity for planarians, except carbon nanotubes. The methods adopted in this research can be used as basis for the development of a testing guideline using freshwater planarians / Mestrado / Tecnologia e Inovação / Mestre em Tecnologia

Orientador: Altair Benedito Moreira / Coorientador: César Ricardo Teixeira Tarley / Banca: Diogo Paschoaline / Banca: Ana Cristi Basile Dias / Resumo: / Abstract: / Mestre

Orientador: Chang Hung Kiang / Banca: Sueli Caleffi / Banca: Luciana Polese / Resumo: Quando as raízes entram em contato com a zona não saturada ou águas subterrâneas rasas contaminadas por compostos orgânicos voláteis, esses compostos são transportados pelos vasos de xilema e entram no fluxo de transpiração das árvores. Logo, o método de amostragem de parte do tronco das árvores é uma ferramenta de investigação que indica a presença desses contaminantes em subsuperfície e é denominado phytoscreening. O objetivo deste trabalho foi verificar a aplicabilidade e eficácia do método phytoscreening na investigação e determinação de plumas de contaminação em áreas impactadas por compostos orgânicos clorados. As amostras de tronco de árvore foram coletadas em uma área contaminada no município de Porto Feliz, SP. Foi realizada uma varredura na maioria das árvores presentes na área e na região de entorno; foram também coletadas partes vegetativas das árvores para posterior identificação das espécies. Para a coleta das amostras de árvore (tree core) utilizou-se uma ferramenta, que consiste em uma broca vazada apropriada para perfuração e um extrator para retirada da amostra do interior da broca. Após a perfuração, as amostras foram rapidamente transferidas para frascos e lacradas. Neste trabalho foram testados diferentes equipamentos de análise química para a detecção dos contaminantes em amostras de árvore. Dentre eles o GC-TID e o HS-GC-MS de campo e laboratório. As amostras analisadas em laboratório foram submetidas à analise com amostrador headspace e cromatografia gasosa acoplada à espectrometria de massas (HS-GC-MS). Após o tratamento dos dados obtidos, foi possível a confecção de mapas da extensão da pluma de contaminação e da distribuição espacial dos contaminantes orgânicos encontrados. Diferentes compostos orgânicos clorados foram detectados pelo método phytoscreening dentre eles o clorofórmio,trans-1,2-dicloroeteno; cis-1,2-dicloroeteno; tetracloreto de carbono;... / Abstract: When tree roots come in contact with the unsaturated zone and shallow groundwater contaminated by volatile organic compounds, these compounds are transported by xylem vessels and enter on the flow of perspiration trees. Thus, the sampling method of the bark of trees is a research tool that indicates the presence of these contaminants in the subsurface and is called phytoscreening. The objective of this work was to verify the applicability and effectiveness of phytoscreening method for investigating and determining contamination plumes in areas impacted by chlorinated organic compounds. Samples of tree trunks were collected in a contaminated area in Porto Feliz, Brazil. A scan was performed in most of the trees present in the area and the surrounding area, were also collected vegetative parts of trees for identification of species. To collect tree colors used a tool which consists of a hollow drill suitable for drilling and an extractor to remove the sample from inside the drill. After drilling, the samples were transferred to vials and sealed . In this study we tested different chemical analysis device for the detection of contaminants in tree cores. Among them the GC- TID and the HS- GC- MS laboratory and field. The samples were subjected to laboratory analysis and headspace sampler coupled to mass spectrometry (HS-GC-MS) gas chromatography. After treatment of the data, it was possible to making maps of the extent of the contamination plume and the spatial distribution of different organic contaminants. Different chlorinated organics were detected by the method phytoscreening as chloroform, trans -1,2-dichloroethene, cis-1,2-dichloroethene, carbon tetrachloride, 1,2-dichloroethane, trichloroethene, tetrachloroethene, 1,1,2-trichloroethane and 1,1,2,2-tetrachlorethane. All equipment used in the testing of samples confirmed the existence of contamination at the site and were efficient in the use of the method for screening.... / Mestre

As microcistinas constituem uma família de heptapeptídeos cíclicos com cerca de 70 variantes caracterizadas. São biossintetizadas em condições específicas por cianobactérias, principalmente em corpos d\'água eutrofizados. Apresentam organotropismo ao fígado e DL50 entre 50-500 &#181;g.kg-1 peso (rato, i.p.). A exposição aguda pode impactar a saúde humana ao desarranjar o parênquima hepatocelular por hiperfosforilação do citoesqueleto e produzir intenso sangramento, podendo levar à morte por choque hipovulêmico um homem adulto e são promotoras tumorais, quando ocorre exposição crônica, por inibição de fosfatases 1 e 2A. Os congêneres das microcistinas apresentam toxicidades distintas e é importante caracterizá-los em corpos d\'água para se estimar o risco à saúde humana. Na literatura, não há convergência quanto à forma de extração das toxinas, preparo das amostras para análise e condições cromatográficas para o isolamento e quantificação. Neste trabalho, diversas análises foram conduzidas para se determinar as melhores formas de extração das toxinas, clean up da amostra e condições cromatográficas para amostras de campo ou cultura de cianobactérias. A extração hidro-alcoólica (MeOH:H2O, 3:1, v/v) parece ser a melhor forma de extração, seguida de partição líquido-líquido para amostras de campo (florações) e extração em fase sólida (cartuchos C18) para algas cultivadas em laboratório. Por meio de isolamento por cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) com detectores UV-VIS e pela análise do padrão de fragmentação das moléculas por espectrometria de massas (MS) com ionização por eletrospray em Tandem (ESI-MS/MS) determinou-se a presença das variantes de microcistinas MC-RR, MC-LR, MC-YR e MC-hRhR na amostra de água do Reservatório Billings e [Asp3]MC-LR na cepa Microcystis aeruginosa BCCUSP 235. Este método parece ser adequado para a extração e caracterização de microcistinas presente em corpos d\'água e em cultura de laboratório e a variante MC-hRhR foi caracterizada pela primeira vez na literatura mundial. / It is well known that eutrophicated lakes and water reservoirs can be a serious concern to wildlife, domestic livestock and human health since cyanobacterial blooms are prone to occur. Some cyanobacteria (blue-green algae) species which form bloom may biosynthesize a family of hepatotoxic peptides named microcystins under certain circumstances, related specially to nitrogen: phosphorus ratio, temperature, pH and light intensity of the water body. There are at least 70 variants of microcystins with different toxicity, DL50 ranging from 50 to 500 &#181;g.kg-1 (in mouse, i.p.). Acute exposure provoke hyperphosphorylation of the cytoskeleton, in liver cells, leading to cellular disruption with haemorrhage and the long term exposure can cause tumor promotion by inactivation of serine/threonine phosphatases 1 and 2A (PP1 and PP2A). Therefore, it is very important to determine and quantify microcystin variants present in water reservoirs. There are several methods available to evaluate qualitative and quantitatively microcystin and its variants in water reservoir and estimate human risks. Such methods comprise biological, biochemical and physico-chemical assays. In this work, we have isolated and analyzed hepatotoxins by High Performance Liquid Chromatography (HPLC) with photodiode array (PDA) detector and their structures were elucidated by Tandem - MS/MS with eletrospray ionization (ESI-MS/MS). MC-RR, MC-LR, MC-YR and MC-hRhR were determined in samples collected at Billings reservoir and [Asp3]MC-LR was found in the strain Microcystis aeruginosa BCCUSP 235. The procedures developed herein can be a powerful tool for isolation and determination of microcistin and its derivatives founded in water reservoirs. Also, we have described for the first time a new variant of microcistin: MC-hRhR.

O crescimento desordenado das cidades tem trazido à tona problemas de saneamento e degradação dos recursos naturais, entre eles a água. O despejo de efluentes domésticos e industriais têm ocasionado a eutrofização dos mananciais, culminando com a proliferação dos fitoplânctons. Esta proliferação tem chegado ao ponto, em certos momentos, de acarretar episódios de floração de algas. Entre os organismos fitoplanctônicos que se desenvolvem no ambiente, estão as cianobactérias, com vários gêneros capazes de produzir diversas cianotoxinas, tais como as microcistinas, anatoxinas, cilindrospermopsinas (CY), saxitoxinas (PSPs), entre outras. Com o aumento da freqüência dos episódios de floração de algas, a probabilidade da ocorrência destas toxinas também aumenta. Como conseqüência disto e devido às exigências legais, os corpos dágua devem ser monitorados para garantir a qualidade da água para consumo humano. Com vistas ao monitoramento da presença das cianotoxinas CY e PSPs, foram realizadas investigações em alguns corpos dágua do Estado de São Paulo. Das investigações realizadas, a neosaxitoxina foi identificada pela primeira vez no Reservatório Billings e os congêneres, saxitoxina, goniautoxina 2, goniautoxina 3, foram identificados de forma inédita em amostras de água deste reservatório. Com relação à CY, foi desenvolvido um método analítico, parcialmente validado. Entretanto, esta cianotoxina não foi localizada nas amostras de água ou cianobactérias das águas superficiais dos corpos dágua estudados. Este estudo mostra a importância do monitoramento da qualidade das águas dos mananciais quanto à presença de cianotoxinas, especialmente daqueles corpos dágua com a finalidade do consumo humano. / Cities growth usually occur in an unorganized manner. This tendence can generate a variety of sanitary problems, including the degradation of natural resources, such as water bodies. As a consequence, domestic and industrial efluents cause eutrofication of water reservoir, increasing the natural level of phytoplancton, what may form algal bloom. Among the phytoplanktonic organisms that grow in this modified environment it is found the cyanobacteria. Some of them can produce different types of cyanotoxins such as microcystin, anatoxin, cylindrospermopsin (CY) and saxitoxin (PSPs). The probability of production of these cyanotoxins increase according to frequent occurrence of algal blooms episodes. Consequently, water bodies monitoring becomes important to assure water quality. The aim of this project was to develop a specific method to identify the presence of cyanotoxins CY and to investigate PSPs in water bodies in São Paulo State. The results confirmed the presence of neosaxitoxin (NEO), a toxin of PSPs family. It was the first time that Neo was indentified in Billings Reservoir along with other PSPs types: saxitoxin, gonyautoxin 2, gonyautoxin 3. Although the study also included CY monitoring, CY was not identified in the tested samples. The present study confirmed the importance of continuous searching and monitoring of water bodies to grant quality to water used for human consumption.

Orientador: Eduardo Alves de Almeida / Coorientador: Daniel Schlenk / Banca: Claudia Bueno dos Reis Martinez / Banca: Gisela de Aragão Umbuzeiro / Banca: Larissa Paola Rodrigues Venancio / Banca: Igor Dias de Medeiros / Resumo: O Brasil é o principal produtor de cana-de-açúcar do mundo e, para que esta demanda seja suprida, muitos compostos químicos são aplicados nas culturas, visando controlar o surgimento e proliferação de pragas. Assim, faz-se o uso dos praguicidas, dentre eles, o diuron (N-(3,4-diclorofenil)-N,N-dimetiluréia), que é aplicado em plantações ao redor do mundo. O diuron pode ser biodegradado em outros três principais compostos o 3,4-dicloroanilina (DCA), 3,4-diclorofenilureia (DCPMU) e 2,4-diclorofenil-N-metilureia (DCPMU). Normalmente, o diuron é aplicado nas plantações juntamente com os alquilfenóis etoxilatos (APE), como o nonilfenol etoxilato (NPE) e o octilfenol etoxilato (OPE), compostos que facilitam a dispersão do diuron. Alguns estudos têm demonstrado que tanto o diuron quanto os alquilfenóis podem causar alterações enzimáticas e/ou estrogênicas em diversos organismos. Dentre as enzimas que podem ser alteradas, estão as enzimas de biotransformação, tanto de fase I (7-etoxirresorufina-O-deetilase - EROD, 7-pentóxiresorufinaO-desalquilase - PROD, 7-benzilóxiresorufina-O-desalquilase - BROD e a P450 aromatase), quanto as de fase II (glutationa-S-transferase - GST) e as proteínas de fase III (resistência a multixenobioticos - MXR). Outros parâmetros que podem sofrer alterações são os antioxidantes (superóxido dismutase - SOD, catalase - CAT, glutationa peroxidase - GPx, glutationa redutase - GR, glutationa-6-fosfato desidrogenase - G6PDH, aldeído desidrogenase - ALDH e... / Abstract: Brazil is the main sugar cane producer in the world, and to support these productions many chemical compounds have being apply in agriculture, aiming to control the appearance and proliferation of pests. Therefore, the use of pesticide, as diuron, (N- (3,4-dichlorophenyl) -N,N-dimethylurea), in some crops in the world is common. Diuron can be biodegraded in three others compounds, 3,4-dichloroaniline (DCA), 3,4-dichlorophenylurea (DCPU) and 2,4-dichlorophenyl-N-methylurea (DCPMU). Normally, diuron have being applied associated with alkylphenols ethoxylates (APE), like nonilphenol (NP) and octylphenol (OP), which increase the solubility and dispersion of the herbicide. Some studies have shown that diuron and alkylphenols can cause enzymatic and/or estrogenic changes, in various organisms. Therefore, biotransformation enzymes, phase I (7-ethoxirresorufin-O-deethylase - EROD, 7- pentaxirisorufin-O-dealkylase - PROD, 7-benzyloxysorufin-O-desalkylase - BROD and P450 aromatase), phase II (glutathione-S-transferase-GST) and phase III proteins (multixenobiotic resistance - MXR), and antioxidant parameters (superoxide dismutase - SOD, catalase - CAT, glutathione peroxidase - GPx, glutathione reductase - GR, glutathione-6-phosphate dehydrogenase - G6PDH, aldehyde dehydrogenase - ALDH and lipid peroxidation), which are responsible for the control between production and degradation of reactive oxygen species (ROS). The endocrine parameters that can be altered and used as biomarkers are ... / Doutor

The environmental agencies has been monitoring water reservoirs such as the Billings dam with the purpose of protection and conservation of water resources based on periodical water and sediment analyses, but it does not use fish as bioindicators routinely. The study aimed to characterize water quality of the Billings dam based on integrated analyses of water and sediment parameters in addition to pathological assessment of tilapias (n=103), acaras (Geophagus brasiliensis, n=246), and trairas (Hoplias malabaricus, n=78). Samplings of water, sediment and fish were executed in six sites of the dam in summer and spring of 2014 and 2015. Analytical methods for water and sediment parameters were carried out according to standard methods, while the pathological evaluation of fish involved the Fulton index, gross lesions evaluations, the macroscopic index and histopathological diagnosis of gills, liver, kidney, and spleen lesions, and their histopathological indices. Water and sediment analyses characterized the water as a eutrophic environment and polluted by metals. Water parameters showed improvement in 2015, but physicochemical, biological, chronic toxicity results, and metals criteria were in part above historic average and legal limits required. The pathological evaluation revealed that the three fish species responded to environmental conditions in different ways and presented worse indices in 2015. Gills were the main organ affected in all species studied and the principal tissue response was regressive and reversible pattern. The indices of trairas were the highest and this species was considered the best for biomonitoring the Billings dam. Comprehensive approach of water, sediment and fishes parameters allowed the evaluation of water quality of the Billings dam and it may represent one of the ways to evaluate its environmental conditions as well as the quality of the fish consumed in the region. / Os reservatórios de água, como a represa Billings, são monitorados com o propósito de proteger e conservar os recursos hídricos baseando-se na análise periódica de água e do sedimento, porém não são utilizados de rotina peixes como bioindicadores. O objetivo do estudo foi caracterizar a qualidade de água da represa Billings, considerando a análise integrada dos parâmetros de água e sedimentos somados à avaliação anatomopatológica de tilápias (n=103), acarás (Geophagus brasiliensis, n=246), e traíras (Hoplias malabaricus, n=78). Amostras de água, sedimento e peixes foram coletadas em seis pontos da represa durante o verão e a primavera de 2014 e 2015. Métodos analíticos padronizados foram utilizados para avaliação da água e do sedimento, e a avaliação anatomopatológica dos peixes, incluiu o índice Fulton, lesões macroscópicas e histopatológicas de brânquias, fígado, rins e baço. As análises de água e sedimentos caracterizaram a água como ambiente eutrofizado e poluído por metais. Os parâmetros da água mostraram melhora no ano de 2015, porém os resultados físicoquímicos, biológicos, de toxicidade crônica e de metais estiveram acima da média histórica e dos limites permitidos pela legislação. A avaliação anatomopatológica revelou que as três espécies de peixes responderam às condições ambientais de formas diferentes, apresentando índices mais altos de lesão em 2015. A brânquia foi o principal órgão afetado em todas as espécies de peixes. O principal padrão de resposta tecidual foi o regressivo e reversível. Os índices das trairas foram os maiores e esta espécie foi considerada a melhor espécie para o biomonitoramento da represa Billings. A análise integrada de parâmetros de água, sedimento e dos peixes permitiu a avaliação da qualidade da água da represa Billings, e pode representar uma das formas de avaliar as condições ambientais bem como a qualidade dos peixes consumidos na região.

Orientador: Mario Henrique Gonzalez / Coorientador: Ana Rita de A. Nogueira / Banca: Márcia Cristina Bisinoti / Banca: Edilene Cristina Ferreira / Resumo: O mercado de pescados no Brasil tem se expandido muito nos últimos anos e com previsão de um crescimento ainda maior. A busca crescente por essa fonte de alimento no país leva à uma preocupação associada a qualidade do pescado, principalmente se tratando de metais tóxicos presentes nas águas e sedimentos dos rios. Os peixes, assim como outros frutos do mar, têm a capacidade de bioacumular estes metais em seu organismo, seja por contato direto ou indireto. O arsênio é um destes contaminantes e está presente naturalmente em águas e sedimentos, e também advindo de atividades antropogênicas como queima de combustíveis fósseis e agrotóxicos. A concentração de arsênio total nos principais tecidos da tilápia foram determinados e uma estimativa dos riscos associados ao consumo deste peixe na região Noroeste de São Paulo foi realizada, levando em conta as diretrizes estabelecidas pela FAO/OMS. As análises foram realizadas por espectrometria de massa com plasma indutivamente acoplado (ICP-MS) no modo de discriminação de energia cinética (KED). Materiais de referência certificados foram analisados com recuperações de 101, 110 e 80% de NIST 1640a, NIST 1566b e DORM-3, respectivamente. Na parte consumível (o tecido muscular dos peixes), a concentração média encontrada foi de 0,030 ± 0,008 μg g-1, que é inferior ao valor máximo permitido de arsênio estabelecido pelas agências reguladoras nacionais e internacionais. A concentração média encontrada nas vísceras (estômago, brânquias e fígado... / Abstract: Seafood market in Brazil has expanded greatly in recent years and is expected to grow even more. The search for this food source in the country leads to a concern associated with the quality of the fish, mainly by the treatment of toxic metals in the waters and sediments of the rivers. Fish, like other seafood, have the ability to bioaccumulate these metals in your body by direct or indirect contact. Arsenic is one of these contaminants and is naturally present in waters and sediments, as well as from anthropogenic activities such as the burning of fossil fuels and agrochemicals. The concentration of total arsenic in the main tissues of tilapia were evaluated and an estimation of the risks associated with the consumption of this fish was done, taking into account the guidelines established by FAO/WHO. The analyses were performed by inductively coupled plasma mass spectrometry (ICP-MS) in kinetic energy discrimination mode (KED). Certified reference materials were analyzed with recoveries of 101, 110, and 80% from NIST 1640a, NIST 1566b, and DORM-3 respectively. In the consumable portion (the muscle fish tissue), the average concentration found was 0,030 ± 0,008 µg g-1 which it is below the arsenic maximum level established by international regulatory agencies. The mean concentration found in the viscera (stomach, gills and liver) was in the range of 0,016 - 1,170 μg g-1, demonstrating a higher bioaccumulation capacity of arsenic. Bioaccumulation tests were performed with As(III) (most toxic arsenic species) with laboratory grown tilapia. The assay was divided into 7 days of exposure and 7 days of clearance to the contaminant. The results demonstrated that the stomach and liver play an important role in the absorption and accumulation of this semimetal present in contaminated water. The estimation of the toxicokinetic parameters (absorption, depuration and Bioconcentration ... / Mestre