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Prospecção e caracterização de peptaibols produzidos porlinhagem de Trichodermaasperellum / Prospection and characterization of peptaibols produced by a Trichoderma asperellum strain

Brito, João Paulo Cabral de 08 August 2014 (has links)
Submitted by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-01-27T14:53:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação - João Paulo Cabral de Brito - 2014.pdf: 977293 bytes, checksum: f8d05d4259ea9bbd904419bbd7674cf9 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-01-28T13:20:49Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação - João Paulo Cabral de Brito - 2014.pdf: 977293 bytes, checksum: f8d05d4259ea9bbd904419bbd7674cf9 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-01-28T13:20:49Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Dissertação - João Paulo Cabral de Brito - 2014.pdf: 977293 bytes, checksum: f8d05d4259ea9bbd904419bbd7674cf9 (MD5) Previous issue date: 2014-08-08 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior - CAPES / Trichoderma genus corresponds to free-living filamentous fungi, including species able to act as biological control agents against pathogenic fungi. It is believed that this ability is due to the synergy of several mechanisms, including a wide variety of secondary metabolites produced by these organisms. Among them, there is the production of peptaibols, an antibiotic peptide group characterized by the presence of non-proteinogenic amino acids such as α-aminoisobutyrate (Aib), presence of N-terminal modifications and amino alcohols in the C-terminal region. These peptaibols have amphipathic nature, allowing the formation of ion channels in lipid membranes, which are believed to be related to its antimicrobial activity. This study aimed to draw a profile of production and identify of secreted peptaibols from Trichoderma asperellum TR356 strain. The fungi was grown in TLE with 0.3% glucose medium for 5 days, 120 rpm in the dark. Liquid medium filtrate was used as metabolites source. These extracts were subjected to high performance liquid chromatography (HPLC) and subsequent analysis by matrix-assisted laser desorption ionization mass spectrometry (MALDI-TOF). The results indicate the production of two classes of peptaibols for this T. asperellum strain. Primary structure of two Asperelines (A and E) and five Trichotoxins (T5D2, T5E, T5F, and T5G 1717A) has been elucidated. Most of these peptaibols had been previously described in T. viride and T. asperellum marine strains. This is the first report of some of these compounds being produced by a T. asperellumstrain from soil. Future analysis will be necessary to elucidate the three-dimensional structures and their activity against pathogens. / O gênero Trichoderma corresponde a fungos filamentosos, de vida livre, que inclui espécies capazes de agir como agentes de controle biológicoeficazes contra fungos fitopatogênicos. Acredita-se que esta capacidade é devida a sinergia de vários mecanismos, incluindo a ampla variedade de metabólitos secundários produzidos por estes organismos. Dentre eles, há a produção de peptídeos antibióticos conhecidos como “peptaibols”, compostos caracterizados pela presença de aminoácidos não proteinogênicos como α-aminoisobutirato (Aib), e por possuírem modificações N-terminais e presença de amino álcoois na região C-terminal. Estes peptaibols apresentam natureza anfipática, permitindo a formação de canais iônicos nas membranas lipídicas, o que se acredita estar relacionado com sua atividade antimicrobiana. Este trabalhoteve como objetivo traçar um perfil de produção e identificar peptaibols secretados pela linhagem de Trichoderma asperellum TR356. O isolado foi crescido em meio TLE contendo 0,3% de glicose, por 5 dias, 120 rpm no escuro. O sobrenadante filtrado foi utilizado como fonte para extração de metabólitos. Estes extratos foram submetidos a cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE) e posterior análise pela técnica de espectrometria de massas por ionização e dessorção a laser assistida por matriz (MALDI-TOF). Os resultados indicam a produção de duas classes de peptaibols por esta linhagem de T. asperellum. Foram elucidadas as estruturas primárias de duas Asperelinas (A e E), e de cinco Trichotoxinas (T5D2, T5E, T5F, T5G e 1717A). A maior parte destes peptaibols havia sido descrito anteriormente em linhagens de T. viride e linhagens de T. asperellum marinhas. Este é o primeiro relato de alguns destes compostos sendo produzidos por uma linhagem de T. asperellum proveniente do solo. Futuras análises serão necessárias para a elucidação de suas estruturas tridimensionais e atividade destes compostos contra fitopatógenos.

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