Orientador: Jose Geraldo P. Ferraz / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-06T17:03:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Coppi_LucianeCristina_D.pdf: 5991264 bytes, checksum: bbcad7dd36b02092b27ac1c30b751988 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Os eosinófilos estão envolvidos na patogênese de várias doenças inflamatórias crônicas? incluindo doenças inflamatórias intestinais (Dll)? como doença de Crohn (DC) e retocolite ulcerativa inespecífica (RCVI). No entanto? ainda é desconhecido como os eosinófilos contribuem para a patogênese das Dll. Portanto? o objetivo deste estudo foi avaliar a atividade dos eosinófilos isolados de sangue periférico de pacientes com Dll comparada aos voluntários sadios. Eosinófilos dos voluntários sadios (n=5)? com DC (n=5) e RCVI (n=5) foram purificados usando-se um gradiente de Percoll? seguido de separação imunomagnética. A atividade dos eosinófilos foi avaliada usando-se os ensaios de quimiotaxi~ adesão? liberação de peroxidase do eosinófilo (EPO)? citometria de fluxo? contagem histológica e análise morfométrica. A quimiotaxia dos eosinófilos induzida pelo N-formyl-metionyl-Ieucyl-fenilanina(fMLP) foi significativamente maior para as células isoladas de pacientes com DC e RCVI? quando comparada aos voluntários sadios.A adesão basal dos eosinófilos de pacientes com DC aumentou significativamente para fibronectina ou soro? quando comparada aos voluntários sadios e RCVI. A liberação basal e estimulada de EPO foi reduzida em células de pacientes com DC? quando comparada aos voluntários sadios. Entretanto? em células isoladas de pacientes com RCVI? a liberação de EPO basal foi significativamente maior quando comparada aos voluntários sadios. A expressão das moléculas de adesão macrophage-l antigen (Mac-l) e very late antigen 4 (VLA-4) não apresentou diferença em relação aos voluntários sadios. A contagem histológica dos eosinófilos em tecido intestinal e morfométrica dos grânulos destas células mostrar~ respectivamente? aumento significativo do número de eosinófilos e de seus grânulos em pacientes com DC e RCVI quando comparadas aos voluntários sadios. Nossos resultados sugerem que os eosinófilos periféricos estão pré-ativados em pacientes com Dll. A ativação dos eosinófilos periféricos? seguida da migração para o tecido intestinal deve contribuir para a patogênese das Dll / Abstract: Eosinophils are involved in the pathogenesis of several chronic inflammatory diseases, including inflammatory bowel disease (ffiD), as Crohn's disease (CD) and ulcerative colites (DC). However, how activation of intravascular eosinophils contributes to disease activity or ffiD pathogenesis is still unknown. The aim of this study was to investigate if eosinophils isolated ITomperipheral blood ITomffiD patients are activated compared to healthy volunteers. Eosinophils ITomhea1thyvolunteers (n=5), CD (n=5) and DC patients (n=5) were purified using a Percoll gradient followed by immunomagnetic cell separator. Eosinophil activity was investigated using chemotaxis, adhesion and mediator release assays (eosinophil peroxidase, EPO), flow cytometric, histologic counting and morphometric analysis. -formyl-metionyl-Ieucyl-fenilanina (fMLP) induced eosinophil chemotaxis was significandy augmented in cells isolated from CD and DC patients compared to hea1thyvolunteers. Eosinophil basal adhesion of CD significantlyincreased to fibronectin or serum if compared to DC or hea1thyvolunteers. Basal and stimulated EPO release was reduced in cells ITomCD patients compared to hea1thyvolunteers. However, basal EPO release was significantly enhanced in cells isolated from DC patients when compared to hea1thy volunteers. The expression of adhesion molecules macrophage-l antigen (Mac-l) and very late antigen 4 (VLA-4) isn't different in patients with DC and CD compared to hea1thyvolunteers. Histologic counting of eosinophils in intestinal tissue and morphometric analysis of granules of this cells showed, respectively, significant augmentation in the number of eosinophils and its granules in CD and DC patients compared to hea1thy volunteers. Our results suggest that peripheral eosinophils are preactivated in ffiD patients. Activation of peripheral eosinophils followed by migration to intestinal tissue probably contributes to ffiD pathogenesis / Doutorado / Ciencias Basicas / Doutor em Clínica Médica