Orientador: ‰Ângelo Berchieri JŠnior / Banca: Luiz Augusto do Amaral / Banca: Nilce Maria Soares / Resumo: A presença de Salmonella spp. foi analisada em lotes galinhas para postura comercial de ovos de mesa por meio da pesquisa bacteriológica em amostras de mecônio colhidas das caixas de transporte de aves para reposição, de um dia de vida, e em fezes frescas cecais e ovos de oito lotes de aves poedeiras comerciais adultas, em período de produção, quatro vacinados e quatro não vacinados com bacterina oleosa contra SE. A colheita das amostras e a rotina bacteriológica seguiram as recomendações de ZANCAN et al., (2000) e de WRAY & DAVIES (1994). Obteve-se o isolamento de Salmonella spp. em 50% dos lotes de aves para reposição avaliados e nas fezes de 25% dos oito lotes de aves adultas. Não houve isolamento do agente nas amostras de ovos examinados. Foram isolados os sorovares: Salmonella enterica subsp. enterica 4,12:r:-; Salmonella Mbandaka; Salmonella enterica subsp. enterica 6,7:z10:-; Salmonella Enteritidis e Salmonella Havana, que foram associados a surtos de enfermidades transmitidas por alimentos para seres humanos, principalmente pelo consumo de produtos de origem avícola como carne de aves, ovos e seus derivados. Os resultados obtidos neste estudo sugerem que há falhas nos programas de monitoria e biossegurança das granjas matrizes e incubatórios; indica que as galinhas estão infectadas, que há presença do patógeno no ambiente de criação de galinhas para postura comercial de ovos e, sugere que medidas de higiene e biossegurança associadas à vacinação contra SE, pode ter contribuído para a ausência do sorovar em lotes vacinados. / Abstract: The presence of Salmonella spp. was analyzed in flocks of laying hens by means of bacteriological samples taken from meconium in transport box of newly hatched chicks, at the moment they were received in the farms, in feces samples and eggs of eight flocks of adult laying hens, in the production period, that four flocks were vaccinated with oil-emulsion bacterin against SE and four unvaccinated. The sampling and routine bacteriological analysis followed the recommendations of ZANCAN et al., (2000) and WRAY & DAVIES (1994). Salmonella spp. was isolated from 50% of the replacement poultry flocks evaluated, and 25% of the feces samples from eight flocks of adult laying hens. There was no isolation of the agent in samples of eggs assessed. Isolated serovars were: Salmonella enterica subsp. enterica 4,12:r:-; Salmonella Mbandaka; Salmonella enterica subsp. enterica 6,7:z10:-; Salmonella Enteritidis and Salmonella Havana whom have been associated with outbreaks of food-borne diseases to humans, especially by the consumption of products of poultry and poultry meat, eggs and egg products. The result of this study shows that there are flaws in monitoring and biossecurity programs in breeder farms and hatcheries. It demonstrated that there is infection and presence of the pathogen into the environment of commercial laying hens, and suggests that measures of hygiene and biossecurity associated with vaccination against SE, may have contributed to the absence of Salmonella Enteritidis in vaccinated flocks. / Mestre

Resumo: A enterotoxemia causada pela ação da toxina épsilon produzida pelo Clostridium perfringens tipo D é uma das causas mais comuns de óbitos em ovinos e caprinos de todo o mundo e geralmente os animais mais jovens e em boas condições nutricionais são os mais acometidos. Cordeiros jovens podem apresentar concentração sérica de anticorpos antitoxina épsilon em virtude de o microrganismo ser ubiqüitário do solo e trato digestivo dos animais. No entanto, tal concentração não é considerada protetora quando a enfermidade é desencadeada, sendo necessária a vacinação dos animais para proteção da enfermidade. No presente estudo foram testados diferentes protocolos de vacinação em cordeiros jovens com vacina comercial polivalente contra clostridioses. Avaliando-se a resposta sorológica pela técnica de ELISA-I, observou-se diferenças significativas (p<0,05) entre os protocolos vacinais, no entanto todos conferiram título considerado protetor nos animais avaliados. Quanto às cinco vacinas avaliadas frente a dois protocolos testados, todas apresentaram título considerado protetor, sendo que para duas delas, os títulos séricos foram mais elevados frente as demais. Utilizou-se a técnica ELISA-I também para avaliar e comparar a cinética de anticorpos antitoxina épsilon de cordeiros filhos de ovelhas não-vacinadas e vacinadas 30 dias antes da parição. Houve uma diferença significativa nas concentrações séricas de anticorpos antitoxina épsilon nos grupos de cordeiros, sendo o título do grupo de cordeiros, filhos de matrizes vacinadas, considerado protetor (≥ 0,2UI/ml) no período de avaliação / Abstract: The enterotoxemia caused by the action of epsilon toxin produced by Clostridium perfringens type D is one of the most common causes of deaths in sheep and goats from around the world and usually the younger animals and in good nutritional conditions are most affected. Young lambs may have serum antibodies against epsilon antitoxin because the organism is ubiquitous in soil and in the digestive tracts of animals, but this concentration is not considered protective. Vaccination is essential for protection from disease. In this study we tested different vaccination protocols of young lambs with five commercial polyvalent vaccines against clostridial. Evaluating the antibody response by ELISA-I significant differences (p <0.05) between vaccination protocols, were observed but all were considered protective. All the five evaluated vaccines by two protocol resulted in protective title, and two of the five tested vaccines showed higher titers against the others. We also used the ELISA technique to evaluate and compare the kinetics of epsilon antitoxin antibodies lambs of non-vaccinated and vaccinated ewe at 30 days before parturition. There was a significant difference in the serum concentrations of epsilon antitoxin antibodies in the groups of lambs, with protective title (≥ 0.2 IU / ml ) in the group of lambs from vaccinated ewe, considered protective (≥ 0.2 IU / ml) in the evaluated period / Orientador: José Rafael Modolo / Coorientador: Iveraldo dos Santos Dutra / Banca: Cáris Marone Nunes / Banca: Simone Baldini Lucheis / Mestre

Orientador: Márcio Garcia Ribeiro / Banca: Paulo Francisco Domingues / Banca: André Mendes Jorge / Banca: Lília Paulin / Banca: Daniel Moura de Aguiar / Resumo: O perfil sorológico de 21 fêmeas bubalinas vacinadas entre três a oito meses de idade, com amostra-padrão da vacina B19 (Brucella abortus), foi avaliado pelas provas do antígeno acidificado tamponado corado com rosa bengala (AAT), 2-mercaptoetanol (2-ME) e fixação de complemento (FC). As colheitas foram realizadas no dia zero (vacinação), 15, 30, 45,60 e, subsequentemente, a cada 30 dias até o 720o dia pós-vacinal. Nenhum animal foi reagente no dia zero. No 15o dia pós-vacinal, acima de 95% dos animais reagiram em todas as provas. Os títulos máximos na soroaglutinação lenta em tubos e 2- mercaptoetanol foram obtidos entre 15o e 45o dia após a vacinação. Entre 120 e 150 dias foi observado o declínio das reações nos animais em todas as provas. Na FC, AAT e 2-ME todos os animais resultaram não reagentes, respectivamente, aos 270, 300 e 360 dias da vacinação. Nenhum dos animais apresentou oscilação de títulos ou reações nas três provas após 360 dias de acompanhamento. / Abstract: The serological profiles of 21 female buffaloes, vaccinatedd at three to eight months of age using the B19 standard strain of Brucella abortus were evaluated by rose bengal plate, 2-mercaptoethanol and complement fixation tests. The serum samples were collected in day zero (vaccination), 15, 30, 45, 60th and, subsequently to each 30 months, until 720th day after vaccination. No animal showed reaction in day zero. In 15th day, more tham 95% of animals showed reaction in all tests. The maximum levels of antibodies detected by the tube agglutination and 2-mercaptoethanol tests were found between the 15 and 45th days after vaccination. Between 120 and 150 days after vaccination was observed decreased of reactions in all the tests. All the animals showed absence of reactions in complement fixation, rose bengal plate and 2- mercaptoethanol tests at 270, 300 and 360 days respectively after vaccination. None of animals presented oscillation of titers on reactions in any test after 360 day of study. / Doutor

Resumo: Foram avaliados parâmetros fisiológicos e imunológicos de matrizes de corte vacinadas ou não contra o vírus da bronquite infecciosa das galinhas (VBIG), submetidas a diferentes períodos de jejum após a eclosão, seguido de alimentação até a terceira semana de vida. No Capítulo 2, encontram-se os resultados do desempenho zootécnico e o desenvolvimento de órgãos gastrintestinais. No Capítulo 3, estão descritos os resultados de parâmetros hematológicos e bioquímicos. O Capítulo 4 apresenta as cinéticas de decaimento dos anticorpos maternos e os perfis cinéticos da reposta imune humoral nos compartimentos local e sistêmico. A vacina contra a BIG influenciou parâmetros de desempenho, de morfometria intestinal, o hematócrito, parâmetros bioquímicos, percentuais de heterófilos e linfócitos e induziu a resposta imune humoral na secreção lacrimal. O jejum pós-eclosão prolongado seguido de alimentação influenciou negativamente o desempenho, o desenvolvimento das vísceras gastrintestinais, as variáveis bioquímicas, imunológicas e a maioria das variáveis hematológicas. Os dados indicam que períodos de jejum pós-eclosão superiores a 48 h devem ser evitados, pois ao afetar negativamente parâmetros hematológicos, intestinais e imunológicos, podem comprometer o crescimento das matrizes e inferir negativamente sobre sua resposta imune. No entanto, o jejum moderado pode favorecer a resposta imune vacinal / Abstract: Immunological and physiological parameters were evaluated in broiler breeder vaccinated or not against infectious bronchitis virus (IBV), submitted to different periods of fasting post-hatching, followed by feed until the third week of life. In Chapter 2, are the results of zootechnical performance and development of gastrointestinal organs. The Chapter 3 describes the results of hematological and biochemical parameters of blood. Chapter 4 presents the kinetics of decay of maternal antibodies and the kinetic profiles of humoral immune response in local and systemic compartments. The IBV vaccine influenced parameters of performance, intestinal morphology, hematocrit, biochemical parameters, percentage of heterophils and lymphocytes, and induced humoral immune response in tear secretion. Prolonged fasting post-hatching, followed by feeding, negatively affected the performance, the development of gastrointestinal organs, biochemical variables, immunological and the most of hematological variables. The data indicate that periods of fasting post-hatching over 48 h should be avoided as they adversely affect the hematological, gastrointestinal and immunologic, may compromise the growth of broiler breeder and infer a negative effect on their immune response. However, moderate fasting can promote the immune response vaccine / Orientador: Renato Luís Furlan / Coorientador: Hélio José Montassier / Banca: Ricardo de Albuquerque / Banca: Vera Maria Barbosa de Moraes / Mestre

Orientador: Flávio Ruas de Moraes / Banca: Margaria Maria Barros / Banca: Júlio Hermann Leonhardt / Banca: Maria José Tavares Ranzani de Paiva / Banca: Newton Castagnolli / Resumo: O presente trabalho teve por objetivos avaliar a inter-relação entre a suplementação alimentar com 0,3% de parede celular de levedura e vacinação com extrato oleoso de Streptococcus agalactiae sobre o desempenho produtivo, parâmetros fisiopatológicos e componente celular inflamatório em tilápia do Nilo. Oitenta e quatro tilápia com peso médio inicial de 125,0 + 1,5g foram distribuídas em 12 caixas de fibra, seguindo o esquema fatorial 2x2x3, correspondente a dois níveis de parede celular de levedura (0,0 e 0,3% parede celular), dois tratamentos (solução salina e vacina) e três coletas após o desafio com a bactéria viva (seis, 24 e 48h) com sete repetições. Os peixes foram alimentados durante 77 dias. A vacinação foi realizada 60 dias após o início da alimentação, por meio da inoculação intraperitoneal de 0,5 mL da vacina contendo 108 UFC/mL. Após 15 dias da vacinação, todos os peixes foram submetidos ao desafio com Streptococcus agalactiae vivo, por meio da inoculação intraperitoneal de 108 UFC/mL, veiculadas em 0,5 mL de solução salina (0,85%). As análises do desempenho produtivo mostraram que a suplementação dietética com parede celular de levedura associada à vacinação não influenciou o desempenho produtivo da tilápia do Nilo e o melhor desempenho ocorreu na utilização da parede celular de levedura. Os parâmetros hematológicos mostraram que a suplementação com 0,3% de parede celular de levedura associada à vacinação contra Streptococcus agalactiae em tilápia do Nilo foi essencial para incrementar a hematopoiese. A suplementação alimentar com 0,3% de parede celular de levedura associada à vacinação melhorou a resposta de defesa dos peixes, no que se refere à inflamação aguda e destaca a importância da vacinação. / Abstract: The work evaluates the interrelation between supplementation diets with 0,3% of cellular wall of yeast and vaccination with oily extract of Streptococcus agalactiae in the growth performance, phisiopathological parameters and inflamatory cellular component of Nile tilapia (Oreochromis niloticus). Eighty four tilapia with initial average weight of 125,0 ± 1,5g were distributed in 12 fiber aquaria, following the factorial design 2x2x3, corresponding to two levels of cellular wall of yeast (0,0 and 0,3% cellular wall), two treatments (saline solution and vaccine) and three collections, after challenge with bacteria (six, 24 and 48h) with seven repetitions. Fish were fed during 77 days. The vaccination was accomplished 60 days after the beginning of the feeding, through inoculation intraperitoneal of 0,5 mL of the vaccine containing 108 UFC/mL. After 15 days of the vaccination, all fishes were challenged with Streptococcus agalactiae, through inoculation intraperitoneal of 108 UFC/ml, diluted in 0,5 mL of saline solution (0,85%). The analyses of the pattern performance showed that supplementation diets with cellular wall of yeast associated to vaccination did not influence the growth performance of Nile tilapia and the best growth performance was obtained using cellular wall of yeast. The phisiopathological parameters showed supplementation diets with 0,3% of cellular wall of yeast associated to the vaccination against Streptococcus agalactiae in Nile tilapia were essential to increase the hematopoiesis. The supplementation diets with 0,3% of cellular wall of yeast associated to the vaccination improved the immune response of fish, in relation to the sharp inflammation and it detaches the importance of the vaccination. / Doutor

Orientador: Antonio Carlos Paulillo / Banca: Ângela Cleusa de Fátima Banzatto de Carvalho / Banca: Márcia Nishizawa / Resumo: Parâmetros clínicos, imunitários, proteinograma sérico e epidemiológicos da vacinação em gansos-da-China foram avaliados por três experimentos. Amostras vacinais Ulster 2C, B1 e La Sota do VDN foram utilizadas. A importância epidemiológica e pesquisa do estado de portador do VDN também foram avaliadas. No experimento 1, foram utilizados 120 gansos-da-China de um dia a 60 dias de idade, distribuídos em 4 tratamentos com 30 animais, submetidos a diferentes esquemas imunoprofiláticos. Os resultados dos títulos de anticorpos (HI) mostraram que os programas imunoprofiláticos ensaiados foram igualmente eficientes no estímulo da resposta imune humoral. Após o desafio frente a uma estirpe patogênica do VDN, aos 60 dias de vida das aves, em todos os grupos, realizou-se a extração de RNA viral através da reação de cadeia de polimerase pós Transcrição Reversa (RT-PCR). No experimento 2, foram utilizadas aves SPF conviventes com gansos-da-China inoculados com uma estirpe patogênica do VDN, decorridos seis, 10 e 20 dias da infecção experimental, após a infecção com o VDN, nas duas espécies, empregou-se a técnica do RT-PCR. Observou-se a transmissão de vírus patogênico (VDN) dos gansos-da- China para as aves SPF conviventes decorridos até 14 dias da infecção experimental com este patógeno, o que vem realçar a importância do ganso-da-China como fonte potencial de infecção de VDN para aves domésticas No experimento 3, foram determinadas as concentrações séricas das proteínas totais, albumina e globulinas das aves vacinadas e não vacinadas contra a doença de Newcastle. Notou-se que aos 42 dias de idade, de forma geral, os gansos vacinados com as estirpes Ulster 2C, B1 e Lasota apresentaram diferença de forma significativa em relação ao grupo controle para as concentrações séricas de albumina, especialmente o grupo vacinado com a estirpe LaSota. / Abstract: The clinical, epidemiological, immunological parameters and the serum proteinogram of vaccination in Chinese geese were investigated using 3 experiments. Ulster 2C, B1 and LaSota vaccines strains of the NDV were used. In experiment 1, 120 one-day-old Chinese geese were used, and divided into 4 different groups with 30 birds per group. They were submitted to different vaccination programs. The immunological responses in these birds were measured by HI test. These birds were also challenged with a pathogenic VDN strain at 60 days of age. After challenge, in all the groups, tracheal and cloacal swabs were collected for RT-PCR. Independent of the group, clinical signs of reaction to the vaccine were not observed. The antibody titers (HI) results showed that the immune vaccine programs adopted were equally efficient in stimulating protective levels of humoral immune responses. Challenged Chinese geese were refractory to the NDV clinical disease. However, a NDV carrier state was shown in this species until 20 days after experimental infection. The vaccinated groups of Chinese geese did not present any genetic material of virus in the RT-PCR. Therefore, these results show the relevance of vaccination in suppressing a NDV carrier state in the Chinese geese. In experiment 2, SPF chickens housed with Chinese geese which were previously inoculated with a pathogenic NDV strain, developed severe and characteristic NDV lesions and died, after five and 14 days. In experiment 3, the serum proteinogram showed significantly differences for albumin concentrations between the vaccinated and the control group at 42 days of age, especially the birds vaccinated with LaSota strain. / Mestre

Orientador: Antonio Carlos Paulillo / Banca: Elizabeth Moreira dos Santos Schmidt / Banca: Adriano de Oliveira Torres Carrasco / Resumo: Foram avaliados parâmetros clínicos, imunitários e epidemiológicos da vacinação contra a Doença de Newcastle em periquitos-australianos (Melopsittacus undulatus) através de dois experimentos. Foram utilizadas amostras vacinais Ulster 2C, B1 e La Sota do VDN. No experimento 1, foram utilizados 72 periquitos australianos com cinco meses de idade, distribuídos em 4 tratamentos de 18 animais cada, num total de três repetições, submetidos a diferentes esquemas imunoprofiláticos. A resposta imune foi avaliada pelo teste de HI, com posterior desafio frente a estirpe patogênica do VDN, aos 11 meses de vida das aves. Em todos os grupos, coletou-se suabes cloacais para pesquisa de RNA viral através da reação de cadeia de polimerase pós Transcrição Reversa (RT-PCR). Independente do grupo experimental, sinais clínicos da reação vacinal não foram observados. Os resultados dos títulos de anticorpos (HI) mostraram que os programas imunoprofiláticos ensaiados foram igualmente eficientes no estímulo da resposta imune humoral. Os periquitos-australianos desafiados mostraram-se refratários à enfermidade clínica com o VDN. Entretanto, ficou caracterizado o estado de portador de VDN nesta espécie decorridos até 19 dias da infecção experimental com este patógeno. No experimento 2, foram utilizadas aves SPF conviventes com periquitos-australianos inoculados com uma estirpe patogênica do VDN. Observou-se a transmissão de vírus patogênico (VDN) dos periquitos-australianos para as aves SPF conviventes decorridos até 19 dias da infecção experimental com este patógeno, o que vem realçar a importância do periquito-australiano como fonte potencial de infecção de VDN para aves domésticas / Abstract: The clinical, epidemiological, immunological and parameters of vaccination against Newcastle disease in budgerigars (Melopsittacus undulatus) were investigated using 2 experiments. Ulster 2C, B1 and LaSota vaccines strains of the Newcastle disease virus (NDV) were used. In experiment 1, 72 budgerigars were used, and divided into 4 different groups with 18 birds per group. They were submitted to different vaccination programs. The immunological responses in these birds were measured by HI test. These birds were also challenged with a pathogenic VDN strain at 11 months of age. In all the groups, cloacal swabs were collected for RT-PCR. Independent of the group, clinical signs of reaction to the vaccine were not observed. The antibody titers (HI) results showed that the immune vaccine programs adopted were equally efficient in stimulating protective levels of humoral immune responses. Challenged budgerigars were refractory to the NDV clinical disease. However, a NDV carrier state was shown in this species until 19 days after experimental infection. In experiment 2, SPF chickens were housed with budgerigars which were previously inoculated with a pathogenic NDV strain. Therefore, the pathogenic virus (NDV) was transmitted from the budgerigars to SPF birds up to 19 days after challenge, showing the importance of the budgerigars as source of dissemination of NDV to domestic birds / Mestre