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Imunolocalização do fator de crescimento semelhante à insulina (IGF-I) e do fator de crescimento epidermal (EGF) em ovários caninos e seus efeitos sobre a maturação in vitro de oócitos : avaliação nuclear /

Cardilli, Diogo José. January 2012 (has links)
Orientador: Gilson Helio Toniollo / Banca: Rosemeri de Oliveira Vasconcelos / Banca: Kellen de Sousa Oliveira / Banca: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima / Banca: Maria Denise Lopes / Resumo: O objetivo do presente estudo foi avaliar o efeito dos fatores de crescimento IGF-I e EGF sobre a maturação nuclear de oócitos caninos e também imunolocalizar estes fatores em amostras de ovários de cadelas. Foram selecionados 787 complexos cumulus-oocitos (COCs), provenientes de ovários de 34 cadelas, em diferentes fases do ciclo estral, submetidas a ovário-histerectomias eletivas. Os COCs foram dividos em três grupos para diferentes tratamentos, A (TCM 199, n=199), B (TCM 199 + 100ng/mL de EGF, n=208) e C (TCM 199 + 100 ng/mL IGF-1, n=204). Após 96 horas de incubação a 38 °C em atmosfera de 5% de CO2, 50% dos oócitos, desprovidos das células do cumulus, de cada grupo foram corados com Bisbenzimida H33342 (Hoechst) e 50% com 4',6-Diamidino-2-phenylindole (Dapi). A adição de EGF ou de IGF-1 ao meio TCM 199 não foi benéfica à maturação in vitro (MIV) de oócitos de cadelas, e a coloração Hoechst foi mais eficaz para a avaliação dos estágios de maturação nuclear de oócitos de cadelas. Os tratos reprodutivos das 34 cadelas foram coletados, fixados, processados e incluídos em parafina. Os fragmentos de ovários foram cortados, montados em lâmina, desparafinIzados e reidratados. A técnica de Imuno-histoquímica foi realizada utilizando os seguintes anticorpos: Anti-EGF-pc (Ab-3, Calbiochem), Anti- IGF-1-pc (Ab-2, Calbiochem). As amostras foram incubadas overnight. O anticorpo primário foi detectado utilizando IgG secundária biotinilada de cabra anti-coelho ou de coelho anti-cabra, com complexo avidina-biotina-peroxidase. A detecção da reação foi feita com o AEC (Vector). A imuno-histoquímica revelou a presença de EGF e do IGF-1 no ovário da cadela. O EGF foi imunolocalizado no citoplasma das células foliculares (CF) e nos oócitos de folículos secundários e terciários e também na parede vascular, nos cordões... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the present study was to assess the effect of the addition of EGF or IGF-1 to the culture medium TCM 199 on nuclear maturation of canine oocytes and to determine the distribution of these growth factors in the ovary of the bitch. 787 comulus-oocyte complexes (COCs) were sampled during different phases of the oestral cycle from 34 bitches submitted to elective ovariohysterectomy. The COCs were distributed into three groups: A (TCM 199, n= 199); B (TCM 199 + 100ng/ml of EGF, n=208) and; C (TCM 199 + 100ng/ml of IGF-1, n=204). Following 96 hours of incubation at 38 ºC, in sterile atmosphere with 5% CO2, the nuclear maturation stage was evaluated following bisbenzimide 33342 (50%) or 4',6-Diamidino-2-phenylindole staining (50%). The addition of EGF or IGF-1 to the TCM 199 did not favour the IVM of canine oocytes. The bisbenzimide 33342 staining was better than 4',6-Diamidino-2- phenylindole staining in the assessment of nuclear maturation stage of canine oocytes. . Reproductive tracts from 34 bitches at the different phases of the estrous cycle were collected, fixed and processed with paraffin embedding. Sections were cut, mounted, dried, deparaffinized and rehydrated. Immunocytochemistry was performed using a dilution of the following antisera: anti-EGF-pc (Ab-3, Calbiochem) and Anti-IGF-1-pc (Ab- 2, Calbiochem ). Samples were incubated overnight. Primary antibody binding was detected using a biotynilated secondary goat-anti-rabbit or rabbit anti-goat IgG with avidin-biotin-peroxidase complexing. The detection reagent was AEC (Vector). Immunohistochemistry revealed the presence of EGF and IGF-1 in the ovary of the bitch. EGF was localized in the cytoplasm, while IGF-1 staining was nuclear. EGF was immunolocalized in the follicular cells (FC) and in... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Ocorrência de anticorpos e caracterização genotípica de isolados de Toxoplasma gondii em pombos (Zenaida auriculata) de vida livre capturados em Londrina, Paraná /

Barros, Luiz Daniel de. January 2012 (has links)
Orientador: Rosangela Zacarias Machado / Coorientador: João Luis Garcia / Banca: Aramis Augusto Pinto / Banca: Odilon Vidotto / Resumo: O presente trabalho teve como objetivos determinar a soro-ocorrência de anticorpos, isolar e caracterizar geneticamente T. gondii de pombos Zenaida auriculata de vida livre do município de Londrina, Paraná. Foram capturados 206 pombos da espécie Z. auriculata utilizando armadilhas tipo arapuca, em três regiões do município de Londrina, dentre elas o campus universitário, zona urbana e rural. Após a eutanásia em câmara de CO2, realizou-se a punção cardíaca de cada animal para a colheita de sangue e obtenção de soro para a pesquisa de IgG anti-T. gondii pelo Teste de Aglutinação Modificado (MAT). Em seguida foi realizada a necropsia para a colheita de tecidos (pulmão, coração, fígado, cérebro e músculo peitoral) para o isolamento do agente por meio do bioensaio em camundongos. Os isolados obtidos foram caracterizados por meio da PCR-RFLP utilizando 12 marcadores genéticos. Os resultados foram comparados e classificados de acordo com os genótipos presentes no ToxoDB (http://toxodb.org/toxo/). No MAT, 22,3% (46/206) das amostras foram consideradas soropositivas, com títulos variando de 16 até 4096. A soro-ocorrência de acordo com a região de captura foi de 56%, 12,1% e 6,2% para campus universitário, zona urbana e zona rural respectivamente (p<0,05). Doze (5,8%) animais foram positivos no bioensaio, obtendo-se os isolados Pb01, Pb06, Pb12, Pb13, Pb14, Pb36, Pb150, Pb153, Pb155, Pb164, Pb185 e Pb200. A análise genotípica revelou a presença de sete genótipos, quatro dos quais se classificam como genótipos #1, #6, #17 e #65 do ToxoDB e três não descritos anteriormente. O trabalho é o primeiro relato na literatura de isolamento do parasita em pombos Z. auriculata, além disso, foi observado o tipo clonal II, genótipo raro no Brasil, confirmando a diversidade genética dos isolados de T. gondii no Brasil / Abstract: This study aimed to evaluate the serum occurrence of anti-Toxoplasma gondii antibodies, isolate and genetically characterize this parasite from 206 wildlife pigeons (Zenaida auriculata) trap captured in Londrina city, Paraná. The birds were captured in three regions of Londrina, among them college campus, the urban and rural area. After euthanasia by CO2 chamber, the animals were bleeding by cardiac puncture, after what the serum was obtained. Lung, heart, liver, brain and pectoral muscle were collected from pigeons to performer mouse bioassay. Detection of IgG anti-T. gondii was performed by modified agglutination test (MAT). The isolates were molecularly characterized by PCR-RFLP using 12 genetic markers and the results were compared and ranked according the genotypes present in ToxoDB (http://toxodb.org/toxo/). Through MAT, 22,3% (26/206) of samples were considered positive, with titers ranging from 16 to 4096. The infection rate according to the capture region was 56%, 12,1% and 6,2% for university campus, urban and rural areas respectively. Twelve (5,8%) animals were positive in the bioassay, obtaining the isolates Pb01, Pb06, Pb12, Pb13, Pb14, Pb36, Pb150, Pb153, Pb155, Pb164, Pb185 and Pb200. Genotypic analysis revealed the presence of seven different ones, genotypes #1, #6, #17 and #65, and three not previously described. This study is the first report of isolation of the parasite in pigeons Z. auriculata. Furthermore, was observed the clonal type II, genotype rare in Brazil, confirming the genetic diversity of isolates of T. gondii in Brazil / Mestre
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Avaliação clínica, citopatológica e histopatológica seriada da esporotricose em gatos (Felis catus-Linnaeus, 1758) infectados experimentalmente /

Farias, Marconi Rodrigues de. January 2000 (has links)
Orientador : Sônia Regina Verde da Silva Franco. / Mestre
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Características ecográficas da lente cataratogênica senil em cães (Canis familiaris Linnaeus, 1758) e sua correlação com parâmetros de facoemulsificação /

Martins, Bianca da Costa. January 2008 (has links)
Orientador: José Luiz Laus / Banca: Cristiane dos Santos Honsho / Banca: Adriana Morales / Banca: Alexandre Lima de Andrade / Banca: Julio Carlos Canola / Resumo: O restabelecimento da visão em pacientes acometidos por catarata constituiu-se objetivo daqueles que militam na oftalmologia. Novas tecnicas operatórias, como a facoemulsificação, foram desenvolvidas e aprimoradas a fimde se obterem melhores resultados terapeuticos. Entretanto, alguns tipos de catarata, como a senil, ainda são um desafio para os cirurgiões, em especial por apresentarem o núcleo da lente duro, uma cápsula mais frágil e um cortex denso ou liquefeito. A avaliação da lente pela ultra-sonografia, previamente à facoemulsificação, pode fornecer informações relevantes, notadamente qunato ao seu aspecto e dimensões, permitindo delinear estratégias cirúrgicas mais seguras, com melhores resultados. Nesta pesquisa, estudaram-se as características ecográficas da lente com catarata e sua correlação com parâmetros de facoemulsificação, em 15 cães acometidos por catarata senil. Verificou-se que a ecografia em modo B auxilia na localização predictiva das opacidades, entretanto, não oferece dados conclusivos quanto à consistência das lentes. Concluiu-se, ainda que a biometria da lente não oferece dados consistentes quanto às características cirúrgicas da lente na facoemulsificação / Abstract: The vision reestablishment in caractous patients is an important goal for ophthalmologists. New surgical techniques, such as phacoemulsification, have bee develped and improved to achive better therapeutics results. Nevertheless, some types of caracts, such as the senile, are considered a real challenge for surgeons, mainly for its hard nucleus, fragile capsule and dense or liquefied cortex. The ultrasonographic lens evaluation preview to phacoemulsification provides important information regarding its aspects and sizes, leading to the estabilishment of safer surgical strategies. This study aimed to evaluate the echographics aspects of the senile cataractous lens of dogs and its correlation to phacoemulsification parameters. It has been concluded that the mode B echography is helpful for the opacities location prediction; however, it does not provide conclusive data regarding the lens hardness. Also, that the lens biometry does not offer consistent data regarding the surgical aspects of lens during phacoemulsification / Doutor
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Avaliação da densidade mineral óssea do rádio e ulna de gatos por meio da técnica de densiometria óptica em imagem radiográfica e sua correlação com o peso, porcentagem de cinzas e níveis de cálcio e fósforo da amostra do tecido da região estudada /

Campos, José Fernando Augusto de. January 2005 (has links)
Orientador: Luiz Carlos Vulcano / Resumo: O trabalho teve por objetivo estabelecer a correlação entre a densidade mineral óssea (DMO) em mmAl e o conteúdo mineral ósseo (CMO) da extremidade do rádio e ulna de gatos. A DMO foi correlacionada com o peso dos animais, o peso das amostras, o peso e a porcentagem das cinzas, bem como os níveis de cálcio e fósforo da amostra. Neste estudo foram utilizados 61 animais que foram divididos em grupos segundo o sexo e o fechamento epifisário e que vieram a óbito sem doenças relacionadas aos tecidos ósseos. Os membros anteriores direitos foram radiografados juntamente com uma escala de alumínio (penetrômetro). As imagens obtidas foram digitalizadas e analisadas por meio de um software (CROMOX) que compara as imagens da região óssea analisada com as tonalidades de cinza da escala, obtendo-se valores em milímetros de Alumínio (mmAl). Os membros foram processados a fim de remover todo o tecido mole, restando somente o rádio-ulna que, após o devido preparo, foram seccionados no tamanho e forma da imagem estudada. Em seguida foi obtido o peso das amostras, as mesmas foram incineradas e suas cinzas analisadas. Os valores médios da DMO foram: 2,01 l 0,32 mmAl e 1,94 l 0,23 mmAl para os machos e fêmeas adultos e 1,68 l 0,17 mmAl e 1,66 l 0,30 mmAl para machos e fêmeas jovens. Foram observadas correlações lineares entre DMO, em mmAl, e os níveis de cálcio, em miligramas, nas cinzas nos machos e fêmeas adultos r = 0,58 e r= 0,61 (P<0,05) e nos machos e fêmeas jovens r = 0,60 e r = 0,67 (P<0,05). Também ocorreu correlação linear entre DMO e os níveis de fósforo, em gramas, presentes nas amostras de cinzas nos machos e fêmeas adultos r = 0,62 e r = 0,63 (P<0,05) e para os machos e fêmeas jovens r = 0,52 e r = 0,59 (P<0,05). Apesar das correlações terem sido lineares e positivas, as mesmas ficaram abaixo do esperado para que uma grandeza (peso de Ca e P) pudesse ser determinada pelo valor DMO em mmAl. / Abstract: The aim of this research was to establish the correlation between the bone mineral density (BMD) in mmAl from cats, young and adult male and female, and weight of the animals, weight and percentage of ashes as well (Ca) and ( P ) amount. There were used 61 cat's right front members. The pieces were X-rayed joined an aluminum scale (penetrometer). The images obtained were digitalized and analyzed by software (CROMOX) that compares member and scale's image establishing the bone densitometry in millimeters of aluminum (mmAl). The members were processed to remove all soft tissue, remaining only radius-ulna witch were prepared and sectioned as the image figure. The bone pieces were measured in mass and volume, incinerated and ashes were analyzed. The average of DMO was 2,01 l 0,32 mmAl e 1,94 l 0,23 mmAl to adult male and female, and 1,68 l 0,17 mmAl e 1,66 l 0,30 mmAl to young male and female respectively. They was observed linear correlation between BMD and Ca : r = 0,58 and r = 0,61 (P<0,05) to adult male and female and r = 0,60 e r = 0,67 ( P<0,05) to young male and female. And between BMD and (P): r = 0,62 and r = 0,63 to adult male and female and r = 0,52 and r = 0,59 to young male and female (P<0,05) respectively. They also occurred linear correlation between BMD and P: r = 0,62 and r = 0,63 (P<0,05) to adult male and female and r = 0,52 and r = 0,59 to young male and female. Despite the correlations were linear and positive, there were below the expected in order that one value (weight of Ca and P) should not be determinate by another one (BMD mmAl). / Mestre
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Influência das proteínas morfogenéticas ósseas adsorvidas à hidroxiapatita e aglutinantes do colágeno bovino na consolidação da fratura do rádio em coelhos /

Lima, Alfredo Feio da Maia. January 2003 (has links)
Resumo: O propósito do estudo foi avaliar a influência de única aplicação da combinação de proteínas morfogenéticas do osso (BMPs) com colágeno liofilizado de origem bovina, no processo de reparação de fraturas instáveis do rádio. Utilizaram-se 15 coelhos, da raça Norfolk, com idade média de cinco meses e peso corpóreo médio de 3,5 kg. Foi induzida fratura transversa na porção média da diáfise de ambos os rádios. No foco de fratura do rádio direito aplicou-se a associação de BMPs adsorvidas à hidroxiapatita e aglutinante de colágeno bovino em grânulos, ao passo que no foco de fratura do rádio esquerdo, considerado controle, nada foi utilizado. Efetuou-se exames radiográficos e densitometria óptica por imagens radiográficas dos focos de fratura ao término do procedimento cirúrgico e aos 30, 60 e 90 dias de pós-operatório. Os exames histológicos, de cada cinco animais, foram realizados aos 30, 60 e 90 dias após a indução da fratura. Na avaliação radiográfica, no 30° dia de pós-cirúrgico, houve melhor restabelecimento cortical das fraturas tratadas com BMPs; no entanto, no 60° e 90° dia de pós-operatório, não foram observadas diferenças entre os membros. Na análise densitométrica não foram detectadas diferenças estatísticas. Pela análise histológica a via de reparação das fratura foi semelhante entre os membros tratados e controles, contudo o conjunto de BMPs acelerou a maturação do calo ósseo apenas aos 30 dias de pós-cirúrgico. Foi possível concluir que o tipo de BMP utilizada interferiu positivamente na evolução da consolidação de fratura. Palavras-chave: BMP; Biomaterial; Colágeno; Fratura; Coelho; Bovino. / Abstract: The objective of this study was to evaluate the influence of an only administration of a combination of bone morphogenetic proteins (BMPs) with lyophilized collagen from bovines in the reparation of unstable fractures of the radius. Fifteen (15) Norfolk rabbits, average age of five months and average weight of 3.5kg, were used. A transversal fracture was induced in the middle portion of the diaphysis of both radius. In the focus of the right radius fracture, the association of BMPs adsorbed to the hydroxyapatite and agglutinant of bovine collagen in granules was applied; whereas in the focus of the left radius fracture, considered control, nothing was used. Radiographic exams and optical densitometry through radiographic images of the fracture focuses were performed immediately and 30, 60 and 90 days post-operatively. The histological exams of each animal were accomplished on the 30th, 60th and 90th days after the induction of the fracture. In the radiographic evaluation, on the 30th day after surgery, there was better cortical re-establishment of the fractures treated with BMPs; however, on the 60th and 90th day after surgery, differences were not observed between the limbs. No statistical differences could not be detected in the densitometric analysis either. In the histological analysis, the reparation process of the fractures was similar between the treated and the control; however the pool of BMPs accelerated the maturation of the bone callus on the 30th day after surgery. Therefore, it is possible to conclude that the type of BMP used in this study interfered positively in the evolution of fracture consolidation. KEY WORDS: BMP; Biomaterial; Collagen; Fracture; Rabbit; Bovine. / Orientador: Sheila Canavese Rahal / Coorientador: Reinaldo dos Santos Volpi / Mestre
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Helmintofauna Columba livia (Aves, Columbidae) procedentes do Estado de São Paulo /

Perez, Regina Raquel. January 2005 (has links)
Orientador: Reinaldo José da Silva / Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a helmintofauna parasita de Columba livia procedentes do Estado de São Paulo. O estudo foi realizado em exemplares de C. livia coletados no Parque Zoológico Municipal de Bauru, Parque Zoológico Municipal Quinzinho de Barros de Sorocaba, Fundação Parque Zoológico de São Paulo e em Botucatu, cidade que não há parques zoológicos. Para cada ave foi pesquisado o número de helmintos presentes no trato digestório (pró-ventrículo, moela, intestino delgado e intestino grosso) e rins. Para cada helminto das classes Nematoda, Trematoda e Cestoda, foi realizada a identificação das espécies encontradas, após fixação e preparações adequadas. As espécies de helmintos encontradas foram desenhadas em câmara clara adaptada em microscópio óptico DMLS (Leica). Dados morfométricos e fotomicrografias dos helmintos foram obtidos em sistema computadorizado para análise de imagens QWin Lite 2.5, adaptado em microscópio DMLB (Leica). Os resultados obtidos revelaram a presença de duas espécies de nematódeos: Ascaridia columbae e Capillaria columbae parasitando o intestino delgado; duas espécies de trematódeos: Paratanaisia bragai, parasito localizado nos rins e Brachylaemus (Mazzantia) mazzantii no intestino delgado e, duas espécies de cestódeos, Raillietina (Raillietina) allomyodes e Raillietina (Fuhrmannetta) crassula ambos localizados parasitando o intestino delgado. / Abstract: This work was undertaken to evaluate the parasitic helminthofauna in Columba livia from State São Paulo. The study was performed with C. livia specimens collected at the Municipal Zoological Garden (Bauru), Municipal Zoological Garden 'Quinzinho de Barros' (Sorocaba), 'Fundação Parque Zoológico' (São Paulo) and Botucatu, a city without any zoos. The number of helminths in the digestive tract (proventriculus, gizzard, small and large intestine) and kidneys was counted in every animal. For helminths of the classes Nematoda, Trematoda and Cestoda, an identification of the species was performed after adequate fixation and preparation. All helminth species were drawn in a camera lucida adapted in a DMLS optical microscope (Leica). Morphometric data and helminth photomicrographies were obtained in a computerized system of image analysis (QWin Lite 2.5), adapted in a DMLB microscope (Leica). Results show two nematode species Ascaridia columbae and Capillaria columbae parasitizing the small intestine; two trematode species Paratanaisia bragai (kidneys) and Brachylaemus (Mazzantia) mazzantii (small intestine), two cestode species, Raillietina (Raillietina) allomyodes and Raillietina (Fuhrmannetta) crassula, both in the small intestine. / Mestre
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Ocorrência e transmissão transplacentária de Neospora caninum em novilhas prenhes /

Vianna, Luis Carlos. January 2004 (has links)
Orientador : Izidoro Francisco Sartor / Resumo: Com o objetivo de determinar a ocorrência da transmissão vertical de Neospora caninum 518 novilhas prenhes tiveram o sangue materno e fetal analisados pelo método sorológico de ELISA e pela reação da polimerase em cadeia (PCR). Das novilhas testadas 103 (19,88%) possuíam anticorpos contra Neospora caninum, e 38 (7,34%) fetos foram positivos enquanto que 65 (12,55%) foram negativos. Os 415 (80,11%) animais restantes não apresentaram anticorpos anti-Neospora caninum tanto as mães quanto os fetos. A detecção de anticorpos fetais ocorreu a partir dos quatro meses de gestação. A técnica da reação da PCR convencional não apresentou amplificação de pares de bases em nenhum tecido fetal analisado. Esse fato, sugere a utilização da PCR de duas amplificações. / Abstract: In order to determine occurrence of vertical transmission of Neospora caninum in bovine (Bos taurus indicus), we have analized maternal and fetal blood samples obtained from 518 pregnant heifers by either ELISA and polymerase chain reaction (PCR). We have found a total of 103 heifers (19,88%) with antibodies against Neospora caninum, from which 38 fetuses (7,34%) showed positive results. Animals remaining (415/80,11%) neither presented anti-Neospora caninum antibodies in heifers or fetuses. Fetal antibodies detection were detected from the fourth month of gestation. There was not amplification of N. caninum sequence in fetal tissue samples, what could suggest employment of nested-PCR. / Doutor
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Histologia e histomorfometria do papel da lactoferrina em importantes eventos de injúria intestinal e cutânea, em animais de experimentação /

Caruso, Marcio. January 2011 (has links)
Orientador: Valdir Augusto Neves / Banca: Alfredo Di Vito Neto / Banca: Aureluce Demonte / Banca: Carlos Benatti Neto / Banca: José Ângelo Camilli / Resumo: O propósito desse trabalho, dividido em dois experimentos, foi estudar os efeitos da Lactoferrina (Lf) em três situações de injúria tecidual. Todas as análises estatísticas consideraram nível de significância (alfa) p < 0,05. O Experimento I abordou a cicatrização de feridas cutâneas abertas, induzidas cirurgicamente. Utilizaram-se seis coelhos da espécie Oryctolagus cuniculus, machos, com seis semanas de idade. Realizaram-se na região dorsal, duas incisões na pele, com 10 mm de diâmetro. A cada 24 horas, uma ferida (FL) recebeu 1mL de Lf a 100µg/mL em solução salina e a outra (FC) somente solução salina. Fotografou-se diariamente para análise morfométrica. No décimo dia removeram-se retalhos do tecido de cicatrização para estudo histológico, histoquímico e imunohistoquímico dos elementos cicatriciais. Os resultados mostraram para FL maior: proliferação vascular (p < 0,01), fibroblástica (p < 0,01) e de mononucleares (p < 0,001); intensidade de colagenização (p < 0,01), reepitelização (p < 0,01), deposição de colágeno tipo I (p < 0,01); e melhor índice de Maturação (IMac) (p < 0,01). O número e área dos miofibroblastos foram maiores para FL com p < 0,001. A redução da área... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The purpose of this work, divided into two experiments, was to study the effects of Lactoferrin (LF) in three situations of tissue injury. All statistical analysis found significance level (alpha) p <0.05. Experiment I addressed the healing of open wounds, surgically induced. We used six species of rabbits Oryctolagus cuniculus, males, six weeks old. Performed in the dorsal region, two skin incisions, with 10mm diameter. Every 24 hours, a wound (FL) received 1 mL of the Lf 100µg/mL saline and the other (FC) only saline. Photographed daily to morphometric analysis. On the tenth day, flaps of the scar tissue were removed, for the histological, histochemical and immunohistochemical evidence of scarring. The results showed greater for FL: vascular proliferation (p < 0.01), fibroblastic (p < 0.01) and mononuclear (p < 0.001), intensity of collagen (p < 0.01), re-epithelialization (p < 0,01), deposition of collagen type I (p < 0.01), and better rate of maturation (iMac) (p < 0.01). The number and area of myofibroblasts were... (Complete abstract click electronic access below) / Doutor
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Resposta inflamatória em éguas após inoculação intrauterina de três diferentes cepas de Escherichia coli / Endometritis in mares experimentally infected with three different strains of E. coli

Camozzato, Giovani Casanova January 2014 (has links)
A endometrite é a causa mais importante de infertilidade em éguas falhadas e inflige grandes perdas na indústria de criação de equinos. Infecções uterinas bacterianas podem ocorrer em 25 % a 60 % das éguas estéreis e os agentes patogênicos mais frequentemente isolados são Streptococcus zooepidemicus e Escherichia coli. A endometrite causada por Streptococcus sp tem sido amplamente estudada, no entanto, pouco se sabe sobre a resposta endometrial da égua à E. Coli. Infecção focal induzida por E. coli foi associada com resposta inflamatória uterina menos exsudativa do que infecção por Streptococcus zooepidemicus. Em contrapartida, alguns estudos têm mostrado que as infecções uterinas por E. coli foram menos propensos a ter evidência citológica de inflamação. O objetivo deste estudo foi descrever a resposta inflamatória após a inoculação intra-uterina com três diferentes cepas de E. coli na égua. Nove éguas cíclicas , com idades entre 7 e 20 anos, foram selecionadas e seu estro detectado por palpação transretal e ultrassom. Somente éguas clinicamente normais com citologia negativa e bacteriologia foram utilizadas no experimento. Três diferentes cepas de E. coli obtidas a partir de: (UT) swab uterino de uma égua com endometrite, (VE) swab do vestíbulo de uma égua saudável e (FE) a partir de fezes de égua, foram utlizadas. Subsequentemente , as éguas foram submetidas a inoculação intrauterina com 3x109de bactérias de uma das três diferentes cepas E. coli. Todas as éguas foram desafiadas com as três cepas de E. coli de forma aleatória nos ciclos subseqüentes. Um dia após a infecção, foram realizados exame clínico do trato genital por espéculo, ultrassonografia, citologia endometrial e cultura bacteriológica. Estes procedimentos foram repetidos diariamente até ser diagnosticado cultura bacteriana e citologia negativa. Todas as éguas tiveram leve (<10/campo ) a grave (> 20/campo) neutrofilia endometrial 24h após a inoculação de E. coli. Em 25 das 27 infecções ( 92,6 %), sinais clínicos vaginais e líquido intra-uterino (LIU) foram detectados. Sinais clínicos vaginais graves como aspecto purulento e mucosa hiperêmica foram observadas em 17 infecções e 8 apresentaram sinais leves. Apenas 59,2% das infecções experimentais (16/27) foram positivas à cultura para E. coli 24h após a infecção. O tempo necessário para a eliminação das bactérias foi, em média de 2,8 dias ( ± 1,0 ). O tempo para o desaparecimento da inflamação (presença de leucócitos polimorfonucleares) foi em média 3,4 dias (±0.8). Em conclusão, a endometrite causada por E. coli provocou citologia positiva e a maioria das éguas desenvolveram sinais clínicos vaginais de endometrite e acúmulo de liquido intrauterino, não havendo diferença entre as cepas de E. coli. / Endometritis is the most important cause of infertility in barren mares and inflicts major losses on the equine breeding industry. Bacterial uterine infections occur in 25% to 60% of barren mares and the most frequently isolated pathogens are Streptococcus zooepidemicus and Escherichia coli. Endometritis caused by Streptococcus sp has been widely studied. However, little is known about the mare’s endometrial response to E. coli. Focal infection induced by E. coli was associated with less exudative uterine inflammatory response than by Streptococcus zooepidemicus. In contrast some studies have shown that uterine infections by E coli were less likely to have cytological evidence of inflammation. Treatment of mares with persistent uterine infections needs to be directed towards the underlying breakdown of the uterine defense and against the microbial agent. The aim of this study was to describe the inflammatory response after intrauterine inoculation with three different strains of E. coli in the mare. Nine cyclic mares aged between 7 and 20 years old were selected and their estrous detected by transrectal palpation and ultrasound. Only clinically normal mares with negative cytology and bacteriology were used. Three different strains of E. coli obtained from: (UT) uterine swab of a mare with endometritis, (VE) vestibular swab from a healthy mare and (MA) from mare manure, were used. Subsequently, the mares were submitted to intrauterine inoculation with 3x109 E. coli of one of the three different strains. All mares were challenged with each strain of E. coli in a randomized order in the subsequent different cycles. One day after infection, clinical examination of the genital tract by speculum, ultrasound, endometrial cytology and bacteriological cultures were performed. These procedures were repeated daily until negative culture and negative cytology were diagnosed. All mares had slight (<10/field) to severe (> 20/field) endometrial neutrophilia 24h after E. coli inoculation. In 25 of 27 infections (92.6%), vaginal clinical signs and intrauterine fluid (IUF) were detected. Severe vaginal signs with purulent aspect and hyperemic mucosa were observed in 17 infections and 8 presented mild signs. Only 59.2% of the examinations (16/27) were E. coli positive 24h after the infection. The time needed for elimination of bacteria in mares treated with leukocytes and mares of control group was in average 2.8 days and the cytology remained positive 3.4 days in average. In conclusion, E. coli endometritis provoke a positive cytology and most of the mares developed vaginal clinical signs of endometritis and IUF, with no difference among E. coli strains.

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