Orientador: Fernando Carlos Pagnocca / Banca: Sandra Regina Ceccato Antonini / Banca: Vanderlei Geraldo Martins / Resumo: Polybia ignobilis é uma vespa social que apresenta uma alimentação variável e inespecífica, consumindo outros insetos, pedaços de animais mortos, néctar, polpa de madeira e água. Dentro do ninho ocorre a trofalaxia, onde o alimento é distribuído entre os indivíduos da colônia através de secreção labial, podendo ocorrer entre adulto e larva ou apenas entre adultos, propiciando a dispersão de micro-organismos. A associação entre leveduras e insetos pode ser considerada transitória, onde os insetos podem atuar como vetores na dispersão desses micro-organismos sem benefício nutricional; por outro lado, também pode ser considerada como uma associação benéfica, onde o inseto utiliza as leveduras como complemento alimentar. O presente estudo teve como objetivos: caracterizar a comunidade de leveduras associadas à P. ignobilis; verificar se há relação entre a distribuição das leveduras nas diferentes castas da vespa e contribuir com a formação de um banco temático de leveduras isoladas de insetos sociais. Indivíduos do ninho de P. ignobilis e amostras de mel foram coletados no campus da UNESP - Rio Claro. O isolamento e identificação das estirpes foi feita de acordo com a metodologia clássica descrita em YARROW (1998). Foram isoladas 167 estirpes, sendo 59 do primeiro ninho e 108 do segundo. Após uma seleção baseada em análises morfológicas, bioquímicas e perfil de bandas de microsatélites (MSP-PCR) estirpes representativas de cada grupo, bem como as estirpes únicas foram identificadas pelo sequênciamento da região D1/D2 do rDNA 26S. Os resultados revelaram a prevalência no primeiro ninho dos gêneros Candida, Cryptococcus, Hanseniaspora e Rhodotorula, compreendendo 45% do total das estirpes, sendo as espécies mais freqüentes Candida azyma, Candida chrysomelidarum, Cryptococcus liquefaciens e Rhodotorula mucilaginosa. No segundo ninho, as espécies... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Polybia ignobilis is a social wasp that features a variable and unspecific alimentation, eats other insects, bits of dead animals, nectar, wood pulp and water. Inside the nest occurs trofalaxis, where food is distributed among individuals of the colony through labial secretion, it can occur between adult and larva or adults only, being vectors in the dispersion of microorganisms. The association between yeasts and insects can be considered temporary, where the insects serve as vectors in the dispersal of these micro-organisms without nutritional benefit; on the other hand, can also be regarded as a beneficial association, where the insect uses the yeasts as a food supplement. This present study aimed to characterize the yeast community associated with P. ignobilis; verify whether exists a relation between the distribution of yeasts in different varieties of wasp and contribute to the formation of a thematic database of yeasts isolated from social insects. Individuals from the nest of P. ignobilis and honey samples were collected on the campus of UNESP - Rio Claro. The isolation and identification of strains was made according to classical methodology described in YARROW (1998). We isolated 167 strains, 59 and 108 of the first and second nest. After a selection based on morphological, biochemical and microsatellite band profiles (MSP-PCR) representative strains of each group as well as unique strains were identified by sequencing the D1/D2 region of 26S rDNA. The results revealed the prevalence in the first nest of Candida, Cryptococcus, Hanseniaspora and Rhodotorula, comprising 45% of all strains, being the most frequent species Candida azyma, Candida chrysomelidarum, Cryptococcus liquefaciens and Rhodotorula mucilaginosa. In the second nest of the species that prevailed were Aureobasidium pullulans, Meyerozyma guillermondii. Some strains may constitute new... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Resumo: O presente trabalho descreve e compara duas metodologias enzimáticas de dosagem de etanol (métodos UV e colorimétrico), que utilizam desidrogenase alcoólica (álcool: NAD+: oxidoredutase EC 1.1.1.1) de fermento de panificação (Mauri Brasil Ind. Comp. e Imp. Ltda), adquirida no comércio na forma desidratada. A atividade da álcool desidrogenase (ADH) presente no extrato bruto de levedura de panificação, da ordem de 5,66 U/mL, foi utilizada nos ensaios colorimétricos, enquanto que nos ensaios no ultravioleta (UV), atividades ao redor de 30 U/mL foram obtidas através da otimização das condições de extração e purificação parcial da ADH. A estabilidade da ADH foi mantida durante 2 meses, na forma liofilizada a 4oC (retenção de 96,2% de sua atividade), na presença de 1 mM de azida de sódio. A mesma preparação enzimática, reconstituída em PEG 15% e armazenada durante 12 meses em freezer (-18oC), apresentou retenção de 50% de sua atividade até 2 meses. O método ultravioleta de dosagem de etanol (detecção na faixa de 2,3 x 10-4 g/L a 6,91 x 10-3 g/L ou 5 æM a 150 æM) baseia-se na conversão enzimática do etanol a acetaldeído, através de reação de óxido-redução, tendo o NAD+ como aceptor de elétrons. O NADH formado pela reação é quantificado com leituras espectrofométricas a 340 nm, conforme descrito por Gattás (2002). Uma preparação enzimática parcialmente purificada e diluída foi utilizada na quantificação de etanol em diferentes bebidas, mostrando desvios dos teores alcoólicos de no máximo 2,1% quando comparados às especificações do produtor. O ensaio de etanol em vinho foi realizado com recuperação da ordem de 99,25% em amostra contendo, originalmente, 249,65 g/L de etanol. O método colorimétrico de dosagem de etanol (detecção na faixa de 4,6 x 10-2 g/L a 23,0 x 10-2 g/L ou 1000 æM a 5000 æM)... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The present work describes and compares two enzymatic methodology of ethanol dosage (UV and colorimetric methods), that use alcohol dehydrogenase (alcohol: NAD+: oxidoredutase EC 1.1.1.1) of baker’s yeast (Mauri Brasil Ind. Comp. e Imp. Ltda) acquired in the commerce in the dry form. The activity of the alcohol dehydrogenase (ADH) at around 5.66 U/mL present in the crude extract of baker’s yeast was used in the colorimetric assay, whereas activities at around of 30 U/mL were obtained through the optimization of the extraction conditions and partial purification of ADH in the ultraviolet assay (UV). The stability of liophilized ADH at 4ºC was maintained for 2 months (retention of 96.2% of activity) in the presence of 1 mM sodium azide. The same enzymatic preparation reconstituted in PEG 15% and stored for 12 months in freezer (-18ºC) presented retention of 50% of your activity up to 2 months. The ultraviolet method of ethanol dosage (detection range of 2.3 x10-4 g/L to 6.91 x 10-3 g/L or 5 æM to 150 æM) is based on the enzymatic conversion of ethanol into acetaldehyde, through oxido-reduction reaction with NAD+ as the aceptor of electrons. The NADH formed by the reaction was quantified spectrophotometrically at 340 nm, as described by Gattás (2002). A partially purified and diluted enzymatic preparation was used for ethanol quantification in different beverages, showing alcoholic contents deviations up to 2.1% when compared to the specifications of the manufacturer. The ethanol assay in wine was accomplished with a recovery at around 99.25% in sample originally containing 249.65 g/L of ethanol. The colorimetric method of ethanol dosage (detection range of 4.6 x 10-2 g/L to 23.0 x 10-2 g/L or 1000 æM to 5000 æM) uses the color reagents system MTT/PMS dissolved in saline phosphate buffer (PBS), determined spectrophotometrically at 570-655 nm... (Complete abstract, click electronic address below) / Orientador: Edwil Aparecida de Lucca Gattás / Coorientador: Maristela de Freitas Sanches Peres / Banca: Rubens Monti / Banca: Luis Henrique Souza Guimarães / Mestre

Resumo: Objetivou-se avaliar a levedura Saccharomyces cerevisiae, como pronutriente em dietas para matrizes e alevinos de tilápia-do-Nilo, em experimento realizado em duas etapas na UNESP. Dois grupos de fêmeas reprodutoras de tilápia do Nilo (734,47 ± 202,08 g), variedade GIFT foram arraçoados por 100 dias com rações isoprotéicas (34% PD) e isoenergéticas (3400 kcal ED/kg), uma contendo 2% de levedura íntegra e outra ausente de levedura. As fêmeas desses dois tratamentos foram fecundadas naturalmente e as larvas, ao final da absorção do saco vitelino, foram alocadas em aquários de 3,5 L e alimentadas por 30 dias com três rações isoprotéicas (35% PD) e isoenergéticas (3280 kcal ED/kg): ausente de levedura; contendo 1% de levedura íntegra ou; 1% de levedura autolisada. Após abate, foram calculadas as seguintes variáveis de desempenho produtivo: biomassa final; ganho de peso; consumo de ração; conversão alimentar aparente; peso final; comprimento total; fator de condição corporal; altura média, e mortalidade. Foi analisado ainda, o teor de matéria seca, matéria mineral, proteína bruta e extrato etéreo da carcaça dos animais. Verificou-se interação significativa dos fatores analisados para todas as variáveis de desempenho produtivo, exceto para o consumo de ração. A levedura íntegra (2,0%) em dietas de matrizes ou na dieta de alevinos de tilápia-do-Nilo (1,0%) aumenta a sobrevivência dos alevinos. / Abstract: This trial was conducted to evaluate dietary yeast Saccharomyces cerevisiae as pronutrient of Nile tilapia broodstock female and fingerling diets. The trial was conducted in two phases at São Paulo State University. Two groups of Nile tilapia broodstock female (734,47 ± 202,08 g), genealogy GIFT, were for 100 days fed with isoproteic (34% DP) and isoenergy (3400 kcal DE/kg) diets, one with 2% autolized yeast and the other with no yeast. The broodstock female from this treatment were naturally fecundated and its larvae, at the end of vitellinic sac absorption, were stocked into 3.5 L-aquarium and fed 30 days with three isoproteic (35% DP) and isoenergy (3280 kcal DE/kg) diets: with no yeast, containing 1% full yeast or 1% autolized yeast. After, the fingerling were killed and final biomass; weight gain; ration consumption; apparent feed conversion; final weight; total length; corporal condition factor; mean height and mortality were determined. Dry matter, ash, crude protein and ether extract from fish body were determined. There was interaction of analysed factors for all growth performance variables, except to feed intake. The full yeast (2,0%) in Nile tilapia broodstock female diets or in fingerling diets (1,0%) improvement fingerling survival. / Orientador: Luiz Edivaldo Pezzato / Coorientador: Margarida Maria Barros / Banca: Wilson Massamitu Furuya / Banca: Dirlei Antonio Berto / Mestre

Resumo: O gene GPD2 de Saccharomyces cerevisiae, que codifica a enzima glicerol-3- fosfato desidrogenase (G3PDH; EC 1.1.1.8; NAD+: oxidoredutase) foi clonado na levedura Pichia pastoris para expressar extracelularmente a enzima em meio de cultura. Essa enzima apresenta aplicação prática em diversos sistemas acoplados para determinação quantitativa de triacilglicerol, glicerol, ácido fosfatídico e outros fosfolipidios também podendo ser usada para medir atividades enzimáticas em diversos tipos de amostras. Para que a atividade extracelular fosse suficiente em ensaios industriais e biológicos, um estudo de indução da expressão da enzima foi realizado no presente trabalho, que consistiu em escolher o clone que melhor secreta a enzima e estudar o meio de crescimento (BMGY), a densidade inicial celular (0,05 mg/mL), o meio de indução enzimática (BMMY), a natureza do tampão (tampão fosfato), o pH (6,0), o tempo de produção da proteína (4 dias), a concentração da enzima através de membrana filtrante (120 vezes), a melhor fonte de peptona (Acumédia), o estudo de pré-indução celular por estresse osmótico (atividade de 0,477 ± 0,0 U/mL em 24 horas com NaCl 0,35M). O processo de produção da G3PDH mostrou que a máxima produtividade enzimática (795 U/mL e atividade específica de 44,49 U/mg) e biomassa final de 17,75 mg/mL foi obtida com as seguintes condições experimentais: 48 horas de indução com meio BMMY, utilizando 1% de metanol, 1% de glicerol, densidade inicial celular de 0,05 mg/mL, pH 5,0 e sobrenadante concentrado 120 vezes em membrana filtrante. / Abstract: The GPD2 gene from Saccharomyces cerevisiae, which encodes the enzyme glycerol-3-phosphate dehydrogenase (G3PDH, EC 1.1.1.8, NAD +: oxidoredutase) was cloned in the yeast Pichia pastoris to express the enzyme extracellularly in the culture medium. The enzyme G3PDH has practical application in various systems coupled to quantitative determination of triacylglycerol, glycerol, phosphatidic acid and other phospholipids. It can also be used to measure the enzymatic activities in diverse types of samples. For the application of the enzyme extracellular in industrial and biological tests, a study of induction of expression of the enzyme was accomplished in the present work, that consisted of to choose of clone that more expressing the enzyme, the growth medium (BMGY), the cellular initial density (0.05 mg/mL), the medium of enzymatic induction (BMMY), the buffer nature (phosphate potassium), pH (6.0), the time of production of the protein (4 days), the concentration of the protein (120-fold), the peptone source (Acumédia), the study of pre-induction cellular for osmotic stress (activity of 0.477 ± 0.0 U/mL in 24 hours with NaCl 0.35M). The study of the variable determinative in the process of production of the G3PDH it showed that the maximum enzymatic productivity (0.795 U/mL and 44.49 U/mg of specific activity) and final biomass of 17.75 mg/mL was obtained with the following experimental conditions: 48 hours of induction with medium BMMY, using 1% methanol, 1% glycerol, cellular initial density of 0.05mg/mL, pH 5.0 and the supernatant concentrated 120-fold in filter menbrane. / Orientador: Edwil Aparecida de Lucca Gattás / Coorientador: Maristela de Freitas Sanches Peres / Banca: Edwil Aparecida de Lucca Gattás / Banca: José Roberto Ernandes / Banca: Luiz Henrique Souza Guimarães / Mestre

Resumo: No presente trabalho, a atividade da enzima glicerol quinase (GK; EC 2.7.1.30; ATP: glicerol 3-fosfotransferase), proveniente de extratos de levedura seca de panificação, foi otimizada. A melhor preparação enzimática da GK foi obtida por rompimento celular com esferas de vidro, durante sete minutos, com lise de 54,2% das células. O extrato celular foi parcialmente purificado com 1% de sulfato de estreptomicina, antes da precipitação com igual volume de solução a 30% (m/v) de polietilenoglicol 3350, e posteriormente dialisado. A atividade máxima da GK foi obtida em pH 10,0, a 60ºC e 50mM de substrato, por metodologia clássica. A enzima apresentou alta estabilidade térmica ― a atividade foi completamente mantida até 50ºC, durante uma hora ― e em pH entre 6,0 e 8,0. Além disso, manteve-se estável, por quatro meses, a 4°C, na presença de azida de sódio 0,05% e cloreto de cobalto 10mM, e, por até oito meses, com o extrato liofilizado. Calculados pelos métodos de Lineweaver-Burk, Hanes-Woolf e Eadie-Hofstee, o valor da constante de Michaelis (Km) da enzima variou entre 1,99mM e 3,11mM, e a Vmax, entre 1,14U/mL e 1,19U/mL. Utilizou-se a metodologia de superfície de resposta (MSR) para melhor definição dos parâmetros da reação enzimática, observando-se valores ótimos de atividades a temperaturas entre 52ºC e 56ºC, pH entre 10,2 e 10,5 e concentração de substrato de 150mM a 170mM. A MSR mostrou-se adequada para modelar a reação e maximizar a atividade da glicerol quinase. Este método, de baixo custo, dosa a glicerol quinase em uma seqüência de reações, sendo de grande importância para diversas indústrias, como a de alimentos, açúcar e álcool. / Abstract: In the present study, the activity of the enzyme glycerol kinase (GK; EC 2.7.1.30; ATP: glycerol 3-phosphotransferase) from dry baker's yeast, was optimized. The best enzymatic preparation of GK was obtained by cell disruption with glass beads, for seven minutes, with 54.2% of lysed cells. Cell extract was partially purified with 1% of streptomycin sulphate, before the precipitation with equal volume of a 30% solution (m/v) of polyethylene glycol 3350, and then it was dialyzed. The maximum activity of GK was obtained with pH 10.0, at 60ºC and 50mM of substrate, by the classic methodology. The enzyme presented high thermal stability ― the activity was completely maintained up to 50ºC, during one hour ― and at pH between 6.0 and 8.0. Besides, it was stable, for four months, at 4°C, in the presence of sodium azide 0.05% and cobalt chloride 10mM, and, for up to eight months, with the lyophilized extract. The value of the Michaelis constant (Km) of the enzyme was calculated by the methods of Lineweaver-Burk, Hanes-Woolf and Eadie-Hofstee,and it varied between 1.99mM and 3.11mM, and Vmax, between 1.14U/mL and 1.19U/mL. Response surface methodology (RSM) was used for better definition of the parameters of the enzymatic reaction, being observed higher activity values at temperatures between 52ºC and 56ºC, pH between 10.2 and 10.5 and substrate concentration from 150mM to 170mM. RSM showed to be an adequate approach for modeling the reaction and maximizing the glycerol kinase activity. This low cost method doses glycerol kinase in a sequence of reactions, being of great importance for many industries, like food, sugar and alcohol. / Orientador: Maristela de Freitas Sanches Peres / Coorientador: Edwil Aparecida de Lucca Gattás / Banca: Luis Henrique Souza Guimarães / Banca: Rubens Monti / Mestre

Resumo: Os resultados descritos neste trabalho para a produção de etanol utilizando-se a levedura IQ-AR/45-1, forneceram informações sobre os melhores suplementos nutricionais e melhor tamanho de inóculo para a fermentação em batelada alimentada. Dadas as variações na composição do melaço e o uso de uma nova levedura, faz-se necessário o estudo de suas exigências nutricionais em processos fermentativos. Experimentos preliminares em batelada simples mostraram que a adição de DAP diminuiu o tempo de fermentação, estimulou o acúmulo da biomassa e produção de etanol enquanto o ZnSO4.7H2O diminuiu o tempo da fermentação, e aumentou o acúmulo de etanol elevando a produtividade. A adição de MgSO4.7H2O produziu mais etanol, melhorou o rendimento alcoólico e a produtividade. Estes resultados obtidos em batelada simples foram transferidos para o sistema em batelada alimentada. A melhor vazão do melaço 20 % em ART foi de 0,40 mL.min-1 para um volume final de trabalho de 100,0 mL. O aumento da temperatura de fermentação de 34 ºC para 37 ºC em meio suplementado com DAP e ZnSO4.7H2O ou DAP e MgSO4.7H2O diminuiu o tempo da fermentação e a biomassa produzida, porém, com menor rendimento e maior produtividade de etanol. O tamanho do inóculo foi estudado com meio suplementado a 34ºC. As melhores condições foram obtidas no processo em batelada alimentada a 34ºC no qual foi utilizado melaço clarificado com ácido sulfúrico e uma quantidade de inóculo de (23,7±0,1) g.L-1 que levou a um tempo de fermentação de 5 horas. Nestas condições, o rendimento alcoólico foi de (79,1±0,7) % e a produtividade de (16,17±0,56) g.L-1 .h-1 / Abstract: The results of the fermentative processes for ethanol production using the yeast IQ-AR/45-1, provided information about the best nutritional supplementation and inoculum size for the batch fermentation. Due to the differences in the sugarcane molasses and the use of a new yeast strain, it was necessary to study the nutritional requirements of the new yeast. Previous experiments in batch fermentation showed that the DAP addition reduced the fermentation time, enhanced the biomass and ethanol production while the ZnSO4.7H2O reduced the fermentation time and increased both the ethanol production and productivity. The addiction of MgSO4.7H2O to the molasses increased the ethanol yield and enhanced the productivity. These results obtained in batch cultures were assayed in fed-batch fermentation. Using 20 % molasses (TRS), the best flow was 0.40 mL.min-1 for a final working volume of 100.0 mL. When molasses supplemented with DAP and ZnSO4.7H2O or DAP and MgSO4.7H2O was used in the fed-batch experiments, the raise in the temperature from 34 ºC to 37 ºC led to decreases in the fermentation time, production of biomass, and ethanol yield followed by increases in ethanol productivity. The best inoculum size to the ethanol fermentation was (23.7±0.1) g.L-1 which led to a yield of (79.1±0.7) % and productivity of (16.17±0.56) g.L-1 .h-1 / Orientador: Cecília Laluce / Coorientador: Reinaldo Marchetto / Banca: Leinig Antonio Perazolli / Banca: Douglas Wagner Franco / Mestre

Resumo: A composição nutricional da levedura a destaca como alimento funcional. O presente trabalho objetivou avaliar a ação da levedura (Saccharomyces cerevisiae) nas respostas reprodutivas de fêmeas de tilápia do Nilo. No Estudo-I 105 fêmeas da linhagem GIFT foram distribuídas em 15 aquários de 500L (três tratamentos e cinco repetições com sete peixes/aquário). No Estudo-II foram utilizados 63 fêmeas e 21 machos da linhagem GIFT distribuídos em três aquários com capacidade de 7000L de água/cada (21 fêmeas e sete machos/aquário). Em ambos os Estudos, os reprodutores foram alimentados ad libitum com dietas isoprotéica e isoenergética contendo 2,0% de levedura íntegra, 2,0% de levedura autolisada ou ausente de inclusão. O Estudo-I foi realizado na UNESP - AquaNutri, Campus de Botucatu e o Estudo-II foi conduzido no Caunesp - Tilapilcultura Campus de Jaboticabal. Avaliou-se nas fêmeas o desempenho produtivo, status nutricional e composição química das gônadas e, o desempenho reprodutivo e o desenvolvimento inicial das larvas. Os dados foram submetidos à análise de variância e quando significativo aplicou-se o teste de comparações múltiplas de médias. A suplementação de levedura íntegra ou autolisada na dieta das reprodutoras, não melhorou o desempenho produtivo e não influenciou o desempenho reprodutivo das fêmeas. Entretanto, melhorou o desenvolvimento larval 72h após eclosão, com melhor desenvolvimento nas larvas dos reprodutores alimentados com a dieta suplementada com 2,0% de levedura íntegra. / Abstract: The nutritional composition yeast detach how functional food. The research present objective evaluates the action yeast (Saccharomyces cerevisiae) in the response reproductive of females of Nile tilapia. In Study-I 105 females of GIFT lineage was randomized in 15 500L-aquarius (three treatments and five repetition with seven fish/aquarium). In Study-II was utilized 63 females and 21 males of GIFT lineage was randomized in three 7000L-aquarium (21 female and seven male for aquarium). The spawning was feed ad libitum with diet isoproteic and isoenergetic with 2,0% whole yeast and autolised yeast or supplementation absent. In Study-I were realize in UNESP - AquaNutri Campus de Botucatu and Study-II in Caunesp - Tilapicultura Campus de Jaboticabal. Was evaluation in female productive performance, nutritional status and chemistry composition of gonad (Study-I) and reproductive performance of spawning and development larvae (Study-II). The data was submitted variance analyses and multiple comparison test of mean. The supplemented whole yeast or autolised yeast in diet of spawning didn't improvement productive performance and didn't influence reproductive performance of female. Therefore improved of development larvae at 72h after eclosion with improved development in larvae of spawning feed with diet 2,0% whole yeast. / Orientador: Luiz Edivaldo Pezzato / Coorientador: Margarida Maria Barros / Coorientador: Teresa Cristina Dias Ribeiro Koberstein / Doutor

Resumo: A efetiva produção de etanol lignocelulósico depende de leveduras capazes de fermentar a fração hemicelulósica da biomassa lignocelulósica que é composta em sua maioria por xilose. Há uma grande dificuldade em encontrar esses microrganismos já que a capacidade de utilizar xilose como fonte de carbono não é apresentada pela maioria das leveduras. Neste trabalho leveduras isoladas de diferentes materiais da zona rural,foram testadas quanto à assimilação de xilose e glicose, e fermentação de xilose a 30°C, onde observou-se diferentes comportamentos entre diferentes linhagens da mesma espécie. As linhagens de leveduras isoladas foram identificadas pela técnica molecular PCR-RFLP empregando-se as regiôes ITS 5,8 S e D1/D2 do DNA ribossômico. Três leveduras identificadas como espécies de Cândida tropicalis foram avaliadas quanto a capacidade de produção de xilitol e etanol a partir de meio basal com xilose como única fonte de carbono e do licor negro da extração da celulose hidrolisado por enzimas do fungo Thermoascus aurantiacus. A produção de xilitol foi semelhante nos dois substratos, entretanto a produção de etanol foi maior quando o licor negro foi empregado, esses resultados mostraram que a quantidade e a natureza dos açúcares presentes nos meios foram um interferente maior no metabolismo da levedura que os compostos tóxicos presentes no licor negro / Abstract: The effective lignocellulosic ethanol production depends on yeasts that are able to ferment the hemicellulosic biomass fraction, which is mostly composed by xylose. There is a big difficulty in finding such microorganisms because most yeasts do not use xylose as a carbon source. In this work, yeasts isolated from different materials were tested for xylose and glucose assimilation and xylose fermentation at 30°C ,where it was observed different behaviors between strains of the same species. The strains isolated were identified by PCR-RFLP molecular technique employing the ITS 5,8 and D1/D2 regions of ribosomal DNA. Three yeasts were identified as Cândida tropicalis species and their ability to produce xylitol and ethanol from xylose and the black liquor from the cellulose extraction hydrolyzed by enzymes of the fungus Thermoascus aurantiacus was evaluated. The xylitol production was similar in both media, but the ethanol production was higher when the black liquor was used, these results shows that the quantity and nature of the sugars present in the media have a bigger interference in the metabolism of yeast to toxic compounds present in black liquor / Orientador: Roberto da Silva / Coorientador: Daniela Alonso Bocchini Martins / Banca: Eleni Gomes / Banca: Sandra Regina Ceccato Antonini / Mestre

Orientador: Ricardo Andrade Reis / Banca: Telma Teresinha Berchielli / Banca: Ana Claudia Ruggieri / Banca: Flávio Augusto Portela Santos / Banca: Valdo Rodrigues Herling / Resumo: O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da suplementação protéica e do uso de monensina e/ou Saccharomyces cerevisiae, nos parâmetros da fermentação ruminal (pH, NH3 e ácidos acético, propiônico e butírico), no consumo de forragem e desempenho de novilhas de corte recriadas em pastagem de capim-Marandú, em duas épocas do ano (transição águas/secas e secas). Os tratamentos avaliados foram: sal mineral (SM); suplemento protéico (SP); suplemento protéico com monensina (SPM); suplemento protéico com levedura (SPL); e suplemento protéico com monensina e levedura (SPML). De acordo com a fermentação ruminal, observou-se alterações no teor do ácido propiônico e razão C2:C3, em resposta ao tratamento SPM. Nas águas, observou-se a influência do pasto no padrão de fermentação ruminal, pois a concentração total de AGCC (133,1mM), ácido acético (101, 4 mM), ácido propiônico (21,1 mM) e ácido butírico (10,7 mM) foram superiores aos demais tratamentos às 6 h. Nas secas, a suplementação mineral protéica melhorou os atributos de fermentação ruminal, porém não houve diferenças estatísticas entre os tratamentos e, a inclusão de levedura à dieta (SPL) aumentou as concentrações de AGCCtotal (109,2mM), acético (80,7mM), propiônico (19,1mm) e butírico (9,4 mM), em relação à inclusão de monensina (67,0, 50,4, 11,8 e 4,8 mM, respectivamente). Quanto ao teor de NH3, na transição águas/secas e secas, respectivamente, às 3h após a refeição foi de 6,7 e 4,8 mg/dL nos animais que consumiam...(Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: To evaluate the protein supplementation associated with monensin and/or Saccharomyces cerevisiae effects on the ruminal parameters (pH, NH3, acetic, propionic and butiric acids), dry matter intake, and heifers performance grazing Marandu grass pasture in different times (the end of rainy and dry season) this trial was conducted. The evaluated treatments were: mineral salt (MS), protein supplement (PS), PS plus monensin (PSM), PS plus S. cerevisiae (PSL), PS plus monensin and S. cerevisiae (PSML). The PSM changed the ruminal propionic acid values and the C2:C3 ratio. In the end of rainy season, the forage characteristics affected the ruminal parameters. Total fatty acid (133.1 mM), acetic (101.4 mM), propionic (21.1 mM), and butiric acid (10.7 mM) values were greatest on the PSM animals evaluated at six hours after the supplementation. In the dry season, the protein supplementation in general changed the ruminal parameters. In the end of the rainy season and dry season, the MS animals presented NH3 level, respectively of the 6.7 and 4.8 mg/dL, three hours after supplementation. However, the supplemented animals, in average showed 22.3, and 27.6 mg/dL of the ruminal NH3. Low herbage mass was observed on August (2.8 t/ha), and September (1.9 t/ha). The weights gains were 0.4, and 0.2 kg/d on the SP, and 0.2, and -0.06 kg/d on the SM animals, on August and September, respectively. On the end of the rainy season the PSM animal showed 9.8 kg more gain than the PSML. During the end of rainy season the SM heifers presented highest forage intake (2.16% BW), and monensin addition reduced forage intake in 18%. In the dry season the MS heifers presented 2.08% BW of forage, compared to the supplemented animals (1.55% BW)...(Complete abstract click electronic access below) / Doutor

Orientador: Margarida Maria Barros / Banca: José Roberto Sartori / Banca: Luiz Edivaldo Pezzato / Resumo: A levedura e o zinco são conhecidos por melhorarem o desempenho produtivo, a saÚde e beneficiar o sistema de defesa imune dos peixes. O presente experimento avaliou o efeito da suplementação da levedura autolisada e zinco nas dietas no desempenho produtivo, respostas metabólicas, parâmetros hematológicos e a resistência à baixa temperatura da tilápia do Nilo. O experimento foi constituído por nove tratamentos e três repetições. As rações formuladas de forma a conter 32,0% PD e 3240 kcal ED/kg, mantendoas isoprotéicas, isoaminoacídicas, isocnergéticas e igual relação Ca/!> .. Foram distribuídos aleatoriamente 135 alevinos machos de tilápia do Nilo em 27 aquários de SOL com sistema de filtro biológico e aquecimento (26,0 l ] ,O°C). O arraçoamento dos peixes foi ad libilllm, quatro vezes ao dia 8hOO, IlhOO, 14hOO e 17hOO. O experimento foi conduzido por 128 dias para avaliar a inclusão de levedura autolisada e zinco nas dietas sobre o ganho médio de pesd, consumo diário aparente, conversão alimentar aparente, eficiência protéica, porcentagem de sobrevivência; concentrações de amônia e atividade da fosfatase alcalina no plasma e no fígado, de lipídeos totais e uréia no plasma e; de minerais no plasma, no figado e nos óssos dos peixes. Após as avaliações do desempenho produtivo, 81 peixes (nove/tratamento) foram transferidos a sala experimental de desafio pelo frio e distribuídos aleatoriamente em 27 aquários de 40L (três/aquário) e submetidos à baixa temperatura (13,0°C) por sete dias. Foram avaliados os parâmetros hematológicos: nÚmero de eritrócitos, porcentagem de hematócrito, taxa de hemoglobina, volume corpuscular médio, concentração de hemoglobina corpuscular média, proteína plasmática total, leucócitos totais, porcentagem de linfócitos, neutrófilos e monócitos antes e após o desafio pelo frio... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Yeast and zinc are known to improve growth performance and health mainly fish immune system. This trial evaluated the effect of autolised yeast and zinc supplementation on growth performance, metabolic response, hematologic parameters and cold stress resistence for Nile tilapia. The experiment were constituted by nine treatments and three replicates. Diets were formulated to contain 32% DP and 3240 kcal DE/kg and they presented isonitrogen, isoenergetic and the same amino acid and pattem an C:P ratio. 135 ali male Nile tilapia fingerlings were randomly assigned to 27 50L-aquarium with a bioJogic filtcr and temperature controlcd (26.0 l I,O°C). Feeding of tish was ad libitum four times/day (llhOO. II hOO, 14hOO and 17hOO). A I 28-days trial was conducted to evaluute the effect of autolised yeast and zinc inclusion on mean weight gain, daily feed intake, feed conversion ratio, protein efficiency ratio, survival percentage; ammonia concentration and alkaline, phosphatase activity in plasma and liver and total urea and lipid in plasma and; mineral in plasma, liver and bones of fish. After growth performance evaluation 81 fish (nine/treatment) were transfered to 27 40L-aquarium in room experimental the cold stress and randomly assigned (three/aquarium) and submited to cold stress (13°C) during seven days. Hematologic parameters evalueted were: erythrocytes number, hematocrit, hemoglobin, corpuscular volume, mean corpuscular volume, total plasmatic protein, total leucocytes, Iymphocytes, neutrophils and monocytes percentage before and after cold stress. The results shown that: the inclusion until 6.0% autolised yeast and 600 mg zinc/kg diet doesn't worsed growth performance in Nile tilapia; 2,0% autolised yeast in diet without zinc inclusion showed better growth performance of fish; supplementation levels high than 6.0% autolised yeast and 600 mg zinc/kg diet worsed the metabolism and growth of fish... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre