Orientadores: Tomomasa Yano, Marlene Braide Serafim / Dissertação (mestrado) Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-07-24T10:56:30Z (GMT). No. of bitstreams: 1 FalconMarquez_Rosabel_M.pdf: 4335530 bytes, checksum: 25ab93b338c1572b6cca199ad30a0b46 (MD5) Previous issue date: 1998 / Resumo: Aeromonas hydrophila vem se tornando um dos mais freqüentes agentes de infeções gastrointestinais. A enterotoxina citotóxica por ela sintetizada é considerada como um de seus principais fatores de virulência. No presente estudo, diferentes procedimentos foram empregados visando purificar e caracterizar biologicamente a enterotoxina citotóxica de Aeromonas hydrophila: A toxina protéica foi precipitada com sulfato de amônio e submetida a processos cromatográficos usando colunas de interações hidrofóbicas (Phenyl Sepharose CL-4B), troca iônica (Q Sepharose Fast Flow e Mono Q) e de exclusão molecular (Superdex 200) no sistema HPLC. O teste de alça ligada de intestino de coelho mostrou a enteropatogenicidade da Ent-ctx. Sua análise em PAGE e SDS-PAGE evidenciou uma banda protéica de peso molecular estimado de 68.000 Da. Ensaios biológicos em diferentes linhagens celulares mostraram uma cinética rápida (2 horas) na indução de efeito citopático. A Ent-ctx induziu alterações morfológicas, tais como vacuolização citoplasmática e condensação cromatínica em células Vero. Alguns dos aspectos morfológicos observados sugerem a indução à apoptose / Abstract: Not informed. / Mestrado / Microbiologia / Mestre em Ciências Biológicas

[No abstract available] / Science, Faculty of / Microbiology and Immunology, Department of / Graduate

Esta dissertação analisa o meio ambiente do trabalho no Brasil, dando especial ênfase para o trabalho na construção civil, através da análise de dados oficiais sobre os acidentes de trabalho e as doenças profissionais deste setor, bem como suas principais irregularidades e as formas de combatê-las. Além disso, também é analisada a aplicação dos Princípios de Direito Ambiental na promoção de um meio ambiente de trabalho saudável e adequado no setor da consA criação de suínos representa uma importante atividade econômica, sendo o Brasil o quarto exportador de carne suína. O aumento da participação brasileira no mercado externo depende da adequação às normas internacionais de qualidade microbiológica nos produtos. Entre os microrgansmos encontrados em carnes suínas destacam-se as bactérias dos gêneros Salmonella, Escherichia,, Yersinia, Aeromonas, Listeria, Staphylococcus, Campylobacter, Bacillus, Clostridium. Aeromonas é um gênero de bactérias enteropatogênicas emergente encontrado no trato intestinal de divesos animais, incluindo o porco. No presente trabalho foi avaliada a ocorrência de Aeromonas em carcaças suínas na entrada de abate, utilizando plaqueamento e PCR do gene lipA. Os isolados foram classificados através de testes bioquímicos e RFLP-PCR 16S rRNA, e avaliados quanto à resistência a antibióticos e fatores de virulência. Os resultados obtidos mostraram que a amplificação por PCR do gene lipA representa um método rápido, eficiente e sensível de determinação da presença de Aeromonas em amostras de origem animal. Elevada incidência de Aeromonas foi constatada tanto por PCR-lipA (97%), quanto por plaqueamento (86,7%). As contagens bacterianas em carcaças suínas foi da ordem de 1 a 4 logUFC/100cm2. As espécies de Aeromonas mais prevelentes em suínos foram A. media (35,7%), A. hydrophila (26,2%) e A. caviae (21,4%). A maior parte dos isolados apresentaram produção de mais de um fator de virulência, indicando o seu potencial patogênico. A alta frequência observada de isolados resistentes a sulfametoxazol/trimetoprima e tetraciclina é indicativo do uso indiscriminado destes antibióticos durante a criação de suínos. De um modo geral os dados reforçam a necessidade de avaliação de Aeromonas em amostras animais e alimentos derivados, assim como o potencial do PCR-lipA na determinação qualitativa destas bactérias. / Submitted by Ana Guimarães Pereira (agpereir@ucs.br) on 2015-09-21T18:37:24Z No. of bitstreams: 1 Dissertacao Roberto Francisco Lucena.pdf: 1252163 bytes, checksum: c106b386c62f574352d7e72d7c4af81c (MD5) / Made available in DSpace on 2015-09-21T18:37:24Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao Roberto Francisco Lucena.pdf: 1252163 bytes, checksum: c106b386c62f574352d7e72d7c4af81c (MD5) / Pork production represents a very important economic activity in South Brazil. Today, Brazil hold the forth place in pork meat international marker. The expansion of Brazilian exports depends of the adequation to the international roules of microbiological quality. Among the microorganisms currently found in porc meat, the most importants belong to the genera: Salmonella, Escherichia,, Yersinia, Aeromonas, Listeria, Staphylococcus, Campylobacter, Bacillus, Clostridium. Aeromonas is a genus of emmergent enteropathogenic bacteria found in the intestinal tract of several animals, including pigs. In the present work it was evaluated the occurrence of Aeromonas in carcasses of pig using plating and PCR-lipA methods. The isolates were classified by biochemical tests and RFLP-PCR 16S rRNA, and evaluated for antibiotic resistance and the production of virulence factors. The results obtained showed that PCR amplification of lipA gene represents a rapid, efficient and sensible method to determine the presence of Aeromonas in animal samples. High incidence of Aeromonas in carcasses of pig was verified both by PCR-lipA (97%), and a conventional plating method (86.7%). Bacterial counts in carcasses of pig ranged from 1 to 4 logUFC/100cm2. The most prevalente Aeromonas species isolated from carcasses of pig were A. media (35,7%), A. hydrophila (26,2%) and A. caviae (21,4%). Most isolates showed the production of more than one virulence factor, indicating their pathogenic potential. The hig frequency of sulfametoxazol/trimetoprima and tetraciclina resistant isolates is an indicative of the indiscriminate use of these antibiotics during pig production. In general, the present results reinforce the necessity of Aeromonas evaluation in animal samples and derived products, as well as the potential of PCR-lipA in the qualitative determination of Aeromonas.

Esta dissertação analisa o meio ambiente do trabalho no Brasil, dando especial ênfase para o trabalho na construção civil, através da análise de dados oficiais sobre os acidentes de trabalho e as doenças profissionais deste setor, bem como suas principais irregularidades e as formas de combatê-las. Além disso, também é analisada a aplicação dos Princípios de Direito Ambiental na promoção de um meio ambiente de trabalho saudável e adequado no setor da consA criação de suínos representa uma importante atividade econômica, sendo o Brasil o quarto exportador de carne suína. O aumento da participação brasileira no mercado externo depende da adequação às normas internacionais de qualidade microbiológica nos produtos. Entre os microrgansmos encontrados em carnes suínas destacam-se as bactérias dos gêneros Salmonella, Escherichia,, Yersinia, Aeromonas, Listeria, Staphylococcus, Campylobacter, Bacillus, Clostridium. Aeromonas é um gênero de bactérias enteropatogênicas emergente encontrado no trato intestinal de divesos animais, incluindo o porco. No presente trabalho foi avaliada a ocorrência de Aeromonas em carcaças suínas na entrada de abate, utilizando plaqueamento e PCR do gene lipA. Os isolados foram classificados através de testes bioquímicos e RFLP-PCR 16S rRNA, e avaliados quanto à resistência a antibióticos e fatores de virulência. Os resultados obtidos mostraram que a amplificação por PCR do gene lipA representa um método rápido, eficiente e sensível de determinação da presença de Aeromonas em amostras de origem animal. Elevada incidência de Aeromonas foi constatada tanto por PCR-lipA (97%), quanto por plaqueamento (86,7%). As contagens bacterianas em carcaças suínas foi da ordem de 1 a 4 logUFC/100cm2. As espécies de Aeromonas mais prevelentes em suínos foram A. media (35,7%), A. hydrophila (26,2%) e A. caviae (21,4%). A maior parte dos isolados apresentaram produção de mais de um fator de virulência, indicando o seu potencial patogênico. A alta frequência observada de isolados resistentes a sulfametoxazol/trimetoprima e tetraciclina é indicativo do uso indiscriminado destes antibióticos durante a criação de suínos. De um modo geral os dados reforçam a necessidade de avaliação de Aeromonas em amostras animais e alimentos derivados, assim como o potencial do PCR-lipA na determinação qualitativa destas bactérias. / Pork production represents a very important economic activity in South Brazil. Today, Brazil hold the forth place in pork meat international marker. The expansion of Brazilian exports depends of the adequation to the international roules of microbiological quality. Among the microorganisms currently found in porc meat, the most importants belong to the genera: Salmonella, Escherichia,, Yersinia, Aeromonas, Listeria, Staphylococcus, Campylobacter, Bacillus, Clostridium. Aeromonas is a genus of emmergent enteropathogenic bacteria found in the intestinal tract of several animals, including pigs. In the present work it was evaluated the occurrence of Aeromonas in carcasses of pig using plating and PCR-lipA methods. The isolates were classified by biochemical tests and RFLP-PCR 16S rRNA, and evaluated for antibiotic resistance and the production of virulence factors. The results obtained showed that PCR amplification of lipA gene represents a rapid, efficient and sensible method to determine the presence of Aeromonas in animal samples. High incidence of Aeromonas in carcasses of pig was verified both by PCR-lipA (97%), and a conventional plating method (86.7%). Bacterial counts in carcasses of pig ranged from 1 to 4 logUFC/100cm2. The most prevalente Aeromonas species isolated from carcasses of pig were A. media (35,7%), A. hydrophila (26,2%) and A. caviae (21,4%). Most isolates showed the production of more than one virulence factor, indicating their pathogenic potential. The hig frequency of sulfametoxazol/trimetoprima and tetraciclina resistant isolates is an indicative of the indiscriminate use of these antibiotics during pig production. In general, the present results reinforce the necessity of Aeromonas evaluation in animal samples and derived products, as well as the potential of PCR-lipA in the qualitative determination of Aeromonas.

Orientador: Tomomasa Yano / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias / Made available in DSpace on 2018-08-13T16:19:40Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Lopes_AnaCarolinaAmaral_M.pdf: 3074203 bytes, checksum: 0f5613fc1b5f356261b1158697b4d8c1 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: Neste estudo foram analisadas 20 amostras de Aeromonas caviae, isoladas no Estado de Pernambuco, de fezes diarréicas, quanto à produção de fatores de virulência. Os isolados bacterianos apresentaram atividade hemolítica quando crescidos em placas de ágar sangue, porém quando analisados os sobrenadantes de cultura destas bactérias, a presença de hemolisinas não foi detectada. Foram observadas entre as amostras as presenças de enterotoxinas em camundongos recém-nascidos e de citotoxinas em células Vero, HeLa e CaCo-2. Essas atividades biológicas foram mantidas após aquecimento à 100ºC por 30 minutos, mostrando ser termo-estável. Ensaios de viabilidade celular conduzidos com células Vero demonstraram, no ensaio com vermelho neutro, uma redução de 50% após 6 horas de exposição dos sobrenadantes de cultura. Nos ensaios com MTT e LDH, as reduções na viabilidade apresentaram-se após 4 e 2 horas respectivamente. O desarranjo do citoesqueleto foi verificado em ensaios onde a faloidina conjugada com fluoresceína (FITC) foi empregada, revelando que os sobrenadantes de cultura provocaram contração e desordenamento dos filamentos de actina. Através de PCR foi verificado que as amostras de A. caviae não apresentaram amplificação para o gene Aer, responsável pela codificação da aerolisina, uma toxina termo-lábil de Aeromonas, o que demonstra que a toxina termoestável e a aerolisina são fatores de virulência diferentes. / Abstract: In this study we worked with 20 Aeromonas caviae samples isolated in the state of Pernambuco and associated to diarrheic stools. The samples were analysed for the production of virulence factors, as the bacterial isolates showed haemolytic activity when grown on blood agar plates, but when analyzed the culture supernatants, the presence of haemolysin wasn't detected. The presence of enterotoxins were observed among the samples by suckling mouse test and cytotoxins on Vero cells, HeLa and CaCo-2. The biological activities were kept after the heat treatment at 100ºC for 30 minutes, showing it to be thermo stable. Cell viability tests conducted with neutral red dye on Vero cells demonstrated a 50% reduction on cell viability after 6 hours of toxin exposure, what was confirmed by the MTT and LDH assays, where the cell viability reduction was presented after 4 and 2 hours respectively. The cytoskeleton disorders provoked by the enterotoxin were observed in trials where the fluorescein conjugated phalloidine (FITC) was used, showing that the culture supernatants caused contraction and lack of actin filaments. Tests to "aerolysin" gene detection were performed with the samples, but the amplification of this gene has not been verified. According to these results and by the fact that aerolysin is a thermo labile toxin, it shows that aerolysin and the thermo stable toxin produced by A. caviae are different. / Mestrado / Ciencias Basicas / Mestre em Clinica Medica

Orientador: Tomomasa Yano / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas / Made available in DSpace on 2018-08-24T08:32:23Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oliveira_Luciana_M.pdf: 438742 bytes, checksum: a5f9e3b963ae7457238c742a983b8733 (MD5) Previous issue date: 2013 / Resumo: Aeromonas são bacilos Gram-negativos, anaeróbios facultativos, ermentadores, oxidase e catalase positivos, ubíquos em ambientes aquáticos e capazes de causar uma variedade de doenças em humanos, principalmente gastroenterite. As espécies mais comumente associadas com infecções em humanos são A. hydrophila, A.caviae e A. veronii biovar sobria. Entre os vários fatores de virulência descritos, Aerolisina é considerada um dos principais fatores de virulência do genero Aeromonas, sendo esta além de provocar a lise em eritrócitos de carneiro tem atividade enterotóxica. Recentemente foi descrito pelo nosso uma enterotoxina citotóxica denominada Fator Citotóxico Vacuolizante (VCF), diferente de Aerolisina biologica e molecularmente, no sobrenadante da cultura de Aeromonas veronni biovar sobria, isoladas de casos clinicos. O VCF purificado apresentou atividade citotóxica em linhagens de células tumorais humanas tais como, HEp-2, Caco-2, HeLa e NCI-H 292. No ensaio de efeito anti-proliferativo o VCF apresentou potencial atividade de inibição de crescimento de células tumorais NCI-ADR/RES, uma linhagem celular com resistência a múltiplas drogas de quimioterapia e K562, uma linhagem de células leucêmicas. Estes resultados sugerem que o VCF apresenta potencial toxigênico sobre células tumorais de origem humana / Abstract: Aeromonas is a Gram-negative, facultative anaerobic rod, fermenting, oxidase and catalase positive ubiquitous in fresh and brackish water and capable of causing several human diseases, specially gastroenteritis. The most important pathogens species associated with human infections are A. hydrophila, A. caviae, and A. veronii biovar sobria. Between the several virulence factors described, Aerolisin is considered as one of the main virulence factors of the Aeromonas genus, this one causing lysis in lamb erythrocytes and has an enterotoxic activity. Was recently described by our a citotoxic enterotoxin named as Vacuolating Cytotoxic Factor (VCF), differing biologicaly and molecularly from the Aerolisin, at the supernatant of a culture of A. veronii biovar sobria, isolated from clinic cases. The purified VCF presented citotoxic activitiy on lineages of human tumorous cells such as , HEp-2, Caco-2, HeLa and NCI-H 292. On the test antiproliferative effect the VCF presented a potencial activity of growth inhibition on tumour cells NCI-ADR/RES, a cellular lineage with resistance to multiple chemotherapy drugs and K562, a lineage of leukemic cells. This results sugests that the VCF presents toxigenic potencial over human tumorous cells / Mestrado / Clinica Medica / Mestra em Clínica Médica

No description available.

In recent years, the skin and muscle hemorrhagic ulcer occurred in grouper hatchery, suggesting that the bacteria extracellular protease was involved. In this study I surveyed the extracellular protease activity of marine bacteria and investigated the characteristics of the pathogen isolated from diseased grouper. The sampling sites of background survey were located along the coast of Taitung. The cultured media were MB2216 and PPESII. The extracellular protease activity was measured using milk seawater medium (MS) and dye-modified proteins of azocasein and azoalbumin. The extracellular protease activities of the marine bacteria were 1~5 U/mg. The average protease activities of the bacteria from MB2216 media were higher than those from PPESII media. The extracellular protease activity assay using azocasein and azoalbumin had similar tendency but the result by the clear zone measurement on the MS medium was of high variations. The FI-02 isolated from the diseased grouper skin was identified as Aeromonas hydrophila by the biochemicial characteristics and 16S rDNA sequence analysis. FI-02 was able to grow on the LB broth with 0~4% NaCl. The FI-02 was resistant to ampillicin, cefazolin, erythomycin, sulfisoxazole, whereas it was sensitive to streptomycin, doxycline, norfloxacin, cefotazime, oxolinic acid, and tetracycline. When FI-02 growing in the four media, the extracellular protease activities were higher than 4 U/mg. The highest protease activity was 6.08 U/mg when the bacteria grew on the LB medium. After heating on 27, 37, 42 and 56¢J for 20 mins, the protease activities remained the same. In the investigation of the fish immunity, owing to the complex compositions of the fish serum, no conclusion can be drawn on the specificity of the antibody against the bacterium.

Thesis (Ph. D.)--Illinois State University, 1984. / Title from title page screen, viewed May 20, 2005. Dissertation Committee: Harry Huizinga (chair), Marcia Miller, Tak Cheung, Mathew Nadakavukaren, Anthony Liberta. Includes bibliographical references (leaves 209-222) and abstract. Also available in print.

Thesis (M. Sc.)--Carleton University, 2001. / Includes bibliographical references (p. 62-71). Also available in electronic format on the Internet.