Orientadores: Oswaldo Di Hipolito Junior, Plinio Trabasso / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba / Made available in DSpace on 2018-08-07T03:11:34Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Alcure_MonicaLeal_D.pdf: 2751232 bytes, checksum: 9ec1e6f0e9b7aa9c25ff089f07e417eb (MD5) Previous issue date: 2006 / Resumo: As infecções superficiais e sistêmicas provocadas por Candida são freqüentes causas de morbidade e mortalidade em pacientes submetidos a transplante de células progenitoras hematopoiéticas (TCPH). Entre os fatores de risco destaca-se a colonização prévia a qual parece ser um pré-requisito para o desenvolvimento de infecção. Desta forma, a cavidade oral pode atuar como um reservatório para esses microorganismos. O presente estudo teve como objetivo avaliar, prospectivamente, o fluxo salivar e os efeitos da profilaxia antifúngica com fluconazol (200mg/dia) no número de pacientes colonizados por Candida spp. e no número de unidades formadoras de colônias (UFC) das espécies Candida encontradas na saliva dos pacientes submetidos a TCPH. Objetivou, ainda, realizar testes susceptibilidade antifúngica dos isolados, determinar o cariótipo eletroforético por meio de eletroforese em campo pulsátil (PFGE) nos isolados de Candida albicans e verificar a similaridade entre as cepas colonizadoras e as responsáveis pelos quadros de infecção. Foram incluídos no estudo 35 pacientes, 21 do TCPH Alogênico e 14 do TCPH Autólogo, com mediana de idade de 44 anos (21-71) sendo 22 (63%) do gênero masculino e 13 (37%) do gênero feminino. O fluxo salivar variou de modo estatisticamente significativo nos grupo Alogênico (p=0,0003) e no grupo Autólogo (p=0,009) no decorrer do estudo. Colonização por Candida ocorreu em 57% dos pacientes sendo que durante o transplante, estando o paciente sob profilaxia com fluconazol, houve redução de 60% no número de pacientes colonizados. Nesse período também ocorreu uma redução da média do número de UFC/ml seguida de expressivo aumento nas coletas subseqüentes, alcançando valores maiores que os obtidos na coleta inicial. O número de UFC/ml apresentou uma relação inversamente proporcional com o fluxo salivar (p=0,005). Não foi possível estabelecer relação entre o número de UFC/ml de saliva e a presença de candidose oral. Candida albicans foi a espécie mais freqüentemente encontrada representando 63% de todos os isolados seguida da Candida parapsilosis. Resistência aos antifúngicos foi encontrada em 6 isolados de Candida não albicans sendo 2 Candida parapsilosis, 2 Candida guilliermondii, 1 Candida krusei e 1 Candidq sp. Foram encontrados 9 diferentes perfis de cariótipo eletroforético de Candida albicans. Em 6 pacientes a mesma cepa encontrada na coleta inicial foi identificada ao longo do estudo. Quatro (11,4%) pacientes desenvolveram candidose oral no período pós-enxertia. Em todos os casos somente isolados de Candida albicans foram identificados. Todos esses pacientes foram colonizados inicialmente pela , mesma espécie sendo que em 3 pacientes, a mesma cepa colonizadora foi a responsável pela infecção. A maior ocorrência de candidose oral no período pós-enxertia pode estar relacionada com fatores inerentes ao hospedeiro. A persistência da mesma cepa sugere que a profilaxia com fluconazol durante o transplante não erradica a cepa colonizadora e que a colonização prévia parece ser um pré-requisito para o desenvolvimento de infecção / Abstract: Superficial and systemic Candida infections are usually responsible for morbidity and mortality in hematopoietic stem cell transplant (HSCT) recipients. Previous colonization is an important risk factor and seems to be a pre-requisite for infection and the oral cavity may be a reservoir for these microorganisms. The aim of this study was to ana1yze, prospectively, the unstimulated salivary flow rate and the fluconazole prophylactic regimen effects (200mg/day) in the number of Candida colonized patients and in the colonyforming unit (CFU) count of the Candida species identified in the saliva of HSCT recipients. The objective was also performed antifungal susceptibility tests in clinical isolates, determine the electrophoretic karyotype by pulsed-field gel electrophoresis (pFGE) in the Candida albicans isolates and verify the similarity between colonization and infection strains. Thirty-five patients were enrolled, 21 Allogeneic and 14 Autologous HSCT recipients. The median age was 44 years old (range 21-71). Twenty-two (63%) were male and 13 (37%) were female. The salivary flow rate varied in the Allogeneic (p=0,0003) and in the Autologous groups (p=0,009). Candida colonization was found in 57% of the patients. There was a 60% reduction of the number of colonized in patients under prophylactic fluconazole regimen. In this same time, there also was a reduction of the median CFU/ml count followed by an important increase of the sequential samples, reaching values higher than the count found in the initial collection. There was a significant inverse relationship between salivary flow and Candida CFU/rnl count (p=0,005). It was not possible to correlate the CFU/rnl count and oral candidosis. Candida albicans was the most frequent specie identified (63%) followed by Candida parapsilosis. Antifungal resistance was found in 6 clinical isolates of non-albicans species of Candida, 2 Candida parapsilosis,2 Candida guilliermondii, 1 Candida krusei and 1 Candida sp. We found 9 pattems of Candida albicans electrophoretic karyotyping. In 6 patients the initial colonization strain was found during the following study. Four patients (11,4%) developed oral candidosis by Candida albicans in the post engraftment period. AlI patients were initially colonized by the same specie. In 3 of these patients the same colonization strain was identified in the infection period. The major occurrence of oral candidosis in the post engraftment period may be related with inherent host factors. The persistence of the same strain suggests that the fluconazole prophylaxis does not eradicate the colonization strain. The previous colonization appears be a pre-requisite for de infection development / Doutorado / Patologia / Doutor em Estomatopatologia

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:30:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fabio Silvestre.pdf: 2956413 bytes, checksum: 836474631eb4bcc7cdf144ad6ffb8efb (MD5) Previous issue date: 2010-02-24 / Onychomycosis is the nail infection caused by a wide spectrum of fungi species, including yeasts, dermatophyte and filamentous fungi nondermatophytes (FFND). In this work, patients with lesions nails from Dermatology Department in Clinics Hospital of the Federal University of Goiás were studied. These patients were submitted to mycologic tests and the etiologic agents identified were evaluated on in vitro activity for systemic antifungal agents. During the period of March 2008 to March 2009, 114 patients clinically suspected of having onychomycosis were examinated. The nail samples collected were submitted to direct examination with potassium hydroxide 20% and grown in dextrose Sabouraud agar and specific fungal pathogens agar. The antifungal susceptibility test was performed according to the method of broth microdilution, recommended by the Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI), through M38-A and M27-A2 documents. The onychomycosis diagnosis was established in 83.3% (95/114) patients, of which most were women between 40 to 59 years old. The isolated fungi were identified as yeasts in 54.6%; dermatophytes in 28.7%; and filamentous fungi nondermatophytes in 16.7%. Among yeasts, Candida parapsilosis was the most common etiologic agent (52.5%); among dermatophytes, Trichophyton rubrum was the most found (74.2), and among the filamentous fungi nondermatophytes, Fusarium spp was the most isolated genus (44.4%). Both distal and lateral subungual lesions were predominant in cases of onychomycosis by all the agents identified, showing that there was no correlation with the clinical presentation and etiology. Although most of the isolates have showed susceptible to several antifungal agents studied, five Candida spp strains were resistant; one to voriconazole, one species to itraconazole and three to amphotericin B. The in vitro susceptibility testing profile for dermatophytes was similar for each antifungal agent analyzed. The minimal inhibitory concentration (MIC) of itraconazole, ketoconazole and griseofulvin for 50% of isolates were lower than 1 μg/mL, and terbinafine was extremely low, with concentration 0.015 μg/mL for 90% of isolates. The MIC for itraconazole in 90% isolates of FFND was 16 g/mL, while for amphotericin B and voriconazole was 8 g/mL. In summary, this study showed a higher frequency of onychomycosis in women. Candida spp and dermatophytes with FFND emergence, especially of the genus Fusarium, were the main fungi involved. Besides, the presence of resistant fungi to some antifungal agents showed the need of using susceptibility tests for these fungi. / Onicomicose é a infecção da unha causada por amplo espectro de espécies fúngicas, incluindo leveduras, dermatófitos e fungos filamentosos não dermatofíticos (FFND). Neste trabalho, foram estudados pacientes com lesões de unhas atendidos no Departamento de Dermatologia, Hospital das Clínicas da Universidade Federal de Goiás, os quais foram submetidos a exames micológicos. Os agentes etiológicos identificados foram avaliados em testes de atividade in vitro para agentes antifúngicos sistêmicos. Durante o período de março de 2008 a março de 2009, foram examinados 114 pacientes com suspeita clínica de onicomicose. As amostras de unhas coletadas foram submetidas ao exame direto com hidróxido de potássio 20% e cultivadas em ágar Sabouraud dextrose e ágar específico para fungos patogênicos. O teste de suscetibilidade antifúngico foi realizado de acordo com o método de microdiluição em caldo, preconizado pelo Clinical Laboratory Standards Institute (CLSI), através dos documentos M38-A e M27-A2. O diagnóstico de onicomicose foi estabelecido em 83,3% (95/114) dos pacientes, dos quais a maioria era constituída por indivíduos do gênero feminino e com idade entre 40-59 anos. Os fungos isolados foram identificados como leveduras em 54,6%, dermatófitos em 28,7%, e FFND em 16,7%. Entre as leveduras, Candida parapsilosis (52,5%) foi o agente etiológico mais comum; entre os dermatófitos, Trichophyton rubrum foi o mais encontrado (74,2%) e, entre os FFND, Fusarium spp foi o gênero mais frequentemente isolado (44,4%). Lesões subungueal distal e lateral foram predominantes nos casos de onicomicose por todos os agentes identificados, mostrando que não havia correlação com a clínica e a etiologia. Embora a maioria dos isolados tenha se mostrado suscetível aos diferentes antifúngicos estudados, cinco isolados de Candida foram resistentes; um ao voriconazol, um ao itraconazol e três a anfotericina B. O perfil de suscetibilidade in vitro para dermatófitos foi semelhante para cada antifúngico analisado. A concentração inibitória mínima (CIM) de itraconazol, cetoconazol e griseofulvina para 50% dos isolados foram menores do que 1 μg/mL, e para terbinafina foi extremamente baixa, com concentração 0,015 μg/mL para 90% dos isolados. A CIM para o itraconazol foi de 16 μg/mL em 90% dos isolados de FFND, e para anfotericina B e voriconazol obteve-se uma concentração de 8 μg/mL. Em resumo, este estudo demonstrou uma maior frequência de onicomicose em mulheres, sendo que os principais fungos envolvidos nesta infecção foram Candida spp e dermatófitos, com emergência de FFND, em especial do gênero Fusarium. Além disso, em decorrência da resistência observada a alguns antifúngicos, demonstrou-se a necessidade do uso dos testes de suscetibilidade para estes fungos.