La leucémie myéloïde chronique (LMC) est une transformation maligne d'une cellule souche hématopoïétique, caractérisée par une anomalie génétique acquise : le chromosome Philadelphie (Ph), résultant de la translocation réciproque t(9 ;22)(q34 ;q11), et son équivalent moléculaire, l'oncogène BCR-ABL. La protéine BCR-ABL présente une activité tyrosine kinase constitutive qui agit sur les voies de survie et de prolifération. La progression de la maladie vers la phase accélérée puis blastique s'accompagne d'anomalies génétiques additionnelles marqueurs d'une instabilité génomique croissante. La responsabilité de BCR-ABL dans la genèse de cette instabilité génomique est fortement suspectée. Dérivé de 2-phénylamino-pyrimidines, l'Imatinib inhibe l'activité tyrosine kinase de BCR-ABL ainsi que la prolifération de lignées cellulaires BCR-ABL positives et induit leur apoptose. Les échecs du traitement par l'Imatinib sont dus à des mécanismes de résistance qui ne sont pas tous entièrement caractérisés. Des nouveaux inhibiteurs de tyrosine kinases (ITKs) ou des associations avec l'Imatinib ont été développés afin de la surmonter. Cependant, une résistance croisée et multiple demeure difficile à traiter et nécessite une meilleure compréhension des mécanismes de résistance afin d'éradiquer la maladie dans un avenir proche. Les travaux réalisés au cours de cette thèse ont montré que la présence de microremaniements génétiques (traduisant une instabilité) au sein de progéniteurs leucémiques CD34+ de patients traités par l'Imatinib corrélait avec la perte de réponse à l'Imatinib chez les patients diagnostiqués en phase chronique, suggérant que la résistance à l'Imatinib pourrait être corrélée aux altérations génétiques survenant précocement dans la physiopathologie de la maladie. 113 gènes affectés ont été détectés dont certains sont localisés dans des régions connues pour être hypervariables (CNV) suggérant un rôle de ces régions dans le développement de la LMC ou la résistance à l'Imatinib. Nous avons mis en évidence la présence d'une anomalie acquise récurrente dans telle région localisée en 8p23.1 qui groupe les gènes de la famille de la Défensine B. Ce microremaniement n'est pas lié à la résistance à l'Imatinib car il est retrouvé dans les populations cellulaires CD34+ Ph+ et Ph-, il peut donc être considéré comme un marqueur de l'instabilité d'une sous-population cellulaire clonale de CD34+ présentant une grande prédisposition à acquérir des altérations génétiques additionnelles, comme la fusion BCR-ABL. Nos études montrent que des altérations secondaires pourraient être le support d'une résistance à l'Imatinib. La résistance à l'Imatinib peut alors être liée à la dérégulation des voies de signalisation en amont ou en aval de BCR-ABL, affectant ainsi la prolifération, la survie, la différenciation et l'intégrité du génome. Il semble donc que le traitement par l'Imatinib seul ne soit pas suffisant pour éradiquer la maladie. Pour cette raison, de nouvelles molécules à associer avec l'Imatinib sont actuellement en cours d'évaluation. Parmi ces associations, les inhibiteurs de la voie Ras ont montré une certaine efficacité dans la restauration de l'activité proapoptotique de l'Imatinib. Il était donc intéressant de chercher une cible thérapeutique régulant négativement cette voie afin de surmonter cette résistance. GILZ (Glucocorticoid-Induced Leucine Zipper) inhibe la voie Ras/Raf par une interaction directe. Il inhibe également la voie NFκB dont certains antagonistes sont capables de surmonter la résistance à l'Imatinib. Nos résultats montrent, pour la première fois, que l'expression de GILZ est diminuée dans des lignées humaines ou murines exprimant BCR-ABL sensibles ou résistantes aux ITKs ainsi que dans les cellules dormantes résiduelles isolées d'un modèle cellulaire murin développé au laboratoire. L'expression forcée de GILZ dans ces lignées résistantes restaure la sensibilité à l'Imatinib. Nos résultats montrent que le mécanisme passe par une inhibition de la voie mTORC2/Akt Ser473. Elle est due à une interaction directe de GILZ avec mTORC2 permettant l'activation de FoxO3a et l'induction de l'expression de la protéine proapoptotique Bim. Dans ce système, GILZ augmente l'expression de Bim tandis qu'Imatinib, par ses effets "Off-target", diminue celle de Mcl-1 inversant ainsi le rapport des membres antiapoptotiques/proapoptotiques de la famille Bcl-2 et entrainant l'apoptose. Le traitement séquentiel par les glucocorticoïdes puis l'Imatinib induit l'apoptose de cellules souches de patients résistants par le même mécanisme, suggérant que la modulation de l'expression de GILZ pourrait représenter une nouvelle stratégie thérapeutique pour cibler les cellules leucémiques résistantes ou résiduelles. La régulation de la voie mTORC2/Akt Ser473 semble être d'une importance cruciale dans la survie des cellules BCR-ABL+, ainsi que dans la résistance aux ITKs. Parmi les gènes méthylés dans notre étude, on retrouve un gène impliqué dans la régulation de cette voie et qui code pour la phosphatase PHLPP (PH domain and Leucine rich repeat Protein Phosphatase) dont l'activité est de déphosphoryler la sérine 473 d'Akt favorisant son inactivation. Nos résultats montrent que la réexpression du variant 1 de cette phosphatase (PHLPP1) dans notre modèle murin de résistance restaure la sensibilité à l'Imatinib et que la répression de celui-ci n'est pas exclusivement due à l'activité tyrosine kinase de BCR-ABL, mais aussi à des modifications épigénétiques. Nos études ont permis d'identifier des gènes impliqués dans la résistance des LMC aux ITKs et de proposer de nouveaux traitements pour surmonter cette résistance en inhibant la voie Akt Ser473

Contexte. Non seulement le cancer est toujours la principale cause de décès par maladie chez les enfants, mais les deux tiers des survivants présenteront, à l’âge adulte, des séquelles liées aux traitements reçus. Tel qu’il sera décrit dans le présent mémoire, le programme VIE (Valorisation, Implication, Éducation) au Centre hospitalier universitaire Sainte-Justine propose d’implanter un programme d’interventions pour sensibiliser les patients en cours de traitement et leur famille aux bienfaits d’adopter de saines habitudes de vie et les supporter dans le changement de comportements attendus. Un volet de ce programme comprend des ateliers d’éducation culinaire et nutritionnelle. Objectifs. L’objectif principal de ce projet est de développer et de valider un curriculum d’ateliers d’éducation culinaire et nutritionnelle qui permettra de répondre aux particularités d’une clientèle en oncologie pédiatrique en cours de traitements et de prévenir les complications cardiométaboliques à long terme. Un second objectif consiste au développement d’un outil d’évaluation des ateliers. Méthode. Les thèmes, les objectifs d’apprentissages et le contenu des ateliers ont fait l’objet d’un processus de développement et de validation en huit étapes, incluant la consultation d’un comité d’experts. Les recettes en démonstration ont été développées et standardisées par deux nutritionnistes de l’équipe de recherche et leur valeur nutritive analysée à l’aide d’un logiciel d’analyse nutritionnelle. Les outils d’évaluation ont été développés en fonction des objectifs d’apprentissages des ateliers en s’inspirant d’outils de mesure existants et révisés par un expert. Résultats. Six ateliers d’éducation culinaire et nutritionnelle basés sur les données probantes et l’expérience clinique de trois nutritionnistes en oncologie pédiatrique ont été développés et validés. Douze recettes en lien avec les thèmes des ateliers, deux pour chaque atelier, ont été développées, standardisées et leur valeur nutritive validée. Six questionnaires ont été développés pour mesurer la perception de l’acquisition de connaissances, l’intention d’appliquer les apprentissages et la satisfaction des participants pour chacun des ateliers. Conclusion. À notre connaissance, il s’agit du premier programme d’éducation culinaire et nutritionnelle élaboré spécifiquement pour les familles d’une clientèle d’oncologie pédiatrique en cours de traitement. Nous pensons que ce programme répondra aux besoins spécifiques des patients en oncologie pédiatrique et de leur famille et contribuera à les sensibiliser à l’importance d’instaurer ou de maintenir de saines habitudes alimentaires pendant et après les traitements du cancer. / Context. Cancer is still the main cause of death by illness in children. Furthermore, two third of the survivors will present treatment-related late effects in adulthood. As it will be described in this thesis, the VIE program (Valorisation, Implication, Education) at the Sainte-Justine University Hospital Center aims to implement an intervention program to raise awareness of patients ongoing cancer treatments and their family to the benefits of adopting a healthy lifestyle and to support them with expected behavior change. One component of this program consists in nutrition and cooking education workshops. Objectives. The main objective of this project is to develop and validate a nutrition and cooking education workshop curriculum which will address concerns specific to on-treatment pediatric oncology patients and help prevent cardiometabolic late effects. A second objective is to develop an evaluation tool for the workshops. Methodology. The workshops’ themes, specific objectives and content have been subject to an eight-steps development and validation process, including steering committee consultation. The recipes in demonstration have been developed and standardized by two research staff registered dietitians and their nutritional value analyzed with a nutritional analysis software. Evaluation tools have been developed in accordance with the workshops learning objectives, inspired by existing tools and reviewed by expert. Results. Six nutrition and cooking education workshops based on scientific evidence and clinical experience of three pediatric oncology registered dietitians have been developed and validated. Twelve recipes related to the workshops themes, two for each workshop, have been developed, standardized and their nutritional value validated. Six questionnaires have been developed for each workshop to measure participants’ perception of knowledge acquisition, behavioral intention and satisfaction. Conclusion. It is, to our knowledge, the first nutrition and cooking education workshop curriculum elaborated specifically for families of an on-treatment pediatric oncology population. We think that this program will address the needs specific to pediatric oncology patients and their family, while contributing to raise awareness to the importance of adopting and maintaining healthy eating habits during and after cancer treatments.

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