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Imperméabilisation, traitement antiseptique et teinture d'une prothèse vasculaire fonctionnalisée par la cyclodextrine / Blood proofing, antiseptic treatment and dyeing of vascular prosthesis functionalised by cyclodextrinsLaurent, Thomas 02 October 2008 (has links)
Les infections post-opératoires surviennent dans 1 à 6% des cas d'implantation de prothèses vasculaires. Afin de résoudre ce problème, nous avons envisagé de fonctionnaliser la prothèse vasculaire en polyester par une méthode développée dans notre laboratoire et permettant l'enrobage des fibres par un polymère de cyclodextrines, ce dernier permettant l'encapsulation de nombreux principes actifs, dont des agents antimicrobiens. Les résultats de DSC, de MEB et d'ATG ont montré que le polymère de cyclodextrines était bien fixé physiquement sur la prothèse et qu'il ne modifiait aucunement ses propriétés. Des essais de dégradation ont montré que le revêtement de cyclodextrine se résorbait sur environ 10 semaines dans le plasma sanguin et que les produits de dégradation n'étaient pas toxiques. Enfin, les essais histopathologiques in vivo et d'hémocompatibilité in vitro ont confirmé que cette prothèse était parfaitement biocompatible. Ce revêtement nous a permis de fixer de façon efficace le bleu de méthylène sur la prothèse, connu dans le domaine médical pour ses propriétés antiseptiques. Les essais bactériologiques ont démontré une efficacité prolongée de la prothèse contre les bactéries à gram (+) et gram (-) dans des conditions in vitro. D'autre part, ce colorant nous a également permis de résoudre un problème rencontré en coelioscopie, en évitant le phénomène d'interférences par réduction de la réverbération de la lumière blanche sur les parois de la prothèse, ceci favorisant les conditions de l'intervention chirurgicale. Un deuxième volet de notre travail a consisté à substituer les hydrogels d'origine animale, encore couramment utilisés pour imperméabiliser la prothèse textile, par des polymères synthétiques. Ces recherches nous ont permis de répondre au cahier des charges en trouvant le meilleur compromis entre souplesse et imperméabilité du greffon synthétique tout en exprimant une parfaite innocuité, supérieure à celle du témoin traité au collagène vis-à-vis des cellules endothéliales et du sang à travers les tests de cytocompatibilité et d'hémocompatibilité. Pour conclure, nos travaux ont permis de mettre au point une prothèse vasculaire qui apporte trois qualité supplémentaires et donc trois avantages par rapports aux produits actuellement utilisés, c'est à dire une activité antiseptique, une intervention chirurgicale facilitée, et une réduction totale des risques de transmission d'agents pathogènes (virus, prions ...) issus des produits d'origine animale. / Post operative infections occur in 1 to 6% of patients implanted with a vascular prosthesis. To solve this problem, we functionalised the polyester prostheses by a method developed in our laboratory. This method can be used to coat the fibre by a cyclodexrin polymer, which allows the complexation of drugs like antiseptics. DSC, SEM and TGA results showed that cyclodextrin polymer was physically fixed onto the prosthesis and that no properties of the prosthesis were modified. Degradation tests revealed that cyclodextrin coating was eliminated after about 10 weeks in human blood plasma and that degradation products were non-toxic. Finally, in vivo histopathological tests and in vitro hemocompatibility tests confirmed that this new prosthesis was perfectly biocompatible. This coating allows us to impregnate methylen-blue known in the medical field to have antiseptic properties. Bacteriological in vitro tests have shown a prolonged efficiency of the functionalised prosthesis against gram(+) and gram(-) bacteria compared to the virgin prosthesis. Moreover, this dye allows to solve the problem met in coelioscopie surgery avoiding the interference phenomena by reducing white light reflection onto the prosthesis wall. The operating conditions can subsequently be improved. A second component of our work was to blood proof the prosthesis by replacing the still widely used hydrogels of animal origin by synthetic polymers. These investigations have allowed us to fulfil the specifications requires by elaborating the best compromise between flexibility and blood proofing of the synthetic graft. Cytocompatibility and hemocompatibility results also ensure a higher safety against cells and blood of the functionalised prosthesis compared to the collagen-treated prosthesis used as the control. ln conclusion, our work has allowed us to develop a vascular prosthesis, which provides three additional qualities an therefore three advantages with respect to the currently used products, i.e. an antiseptic activity, improved surgical conditions, and a total reduction of risks induced by pathogenic agents (viruses, prions...) from products of animal origin
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Développement d'une méthode originale pour l'évaluation de l'activité virucide des antiseptiques - désinfectants : détermination du pouvoir antiseptique de calixarènes sur le coronavirus Humain / Development of an original method for antiviral antiseptic-disinfectant activity evaluation : determination of antiseptic properties of calixarenic compounds on the Human coronavirus 229EGeller, Chloé 13 July 2010 (has links)
Une antisepsie-désinfection (ATS-D) efficace est fondamentale si l'on considère le manque de traitements antiviraux spécifiques, l'émergence de nouveaux virus et l'accroissement du nombre d'infections nosocomiales virales. A ce jour, une seule norme Européenne, la norme NF EN 14476+A1, propose un cadre pour évaluer l'activité ATS-D antivirale en médecine Humaine et certaines améliorations sont encore nécessaires.Dans ce but, nous avons développé et validé, biologiquement et physico-chimiquement, un protocole pour évaluer l'activité ATS-D antivirale. Ce dernier est basé sur une méthode originale de filtration sur gel faisant appel à des colonnes de Séphadex™ G-25 et G-10 de notre conception comme moyen de neutralisation. Nous avons ainsi évalué, sur le coronavirus Humain 229E (HCoV 229E), les activités ATS-D de deux molécules de référence, la chlorhexidine (CHX) et l'hexamidine (HXM), ainsi que de deux calixarènes : le tetra-para-sulfonato-calix[4]arène (C[4]S) et le 1,3-bis(bithiazolyl)-tetra-para-sulfonato-calix[4]arène (C[4]S-BTZ). Selon la norme Européenne, pour qu'une formulation puisse prétendre à une activité ATS-D antivirale, il faut qu'elle induise une diminution de 4 log10 dans les titres viraux. L'HXM et le C[4]S n'ont montré qu'une très faible activité vis à vis du HCoV 229E. La CHX a montré quant à elle une activité beaucoup plus intéressante bien qu'elle ne puisse néanmoins pas prétendre à une activité ATS sur le HCoV 229E. Enfin, le C[4]S-BTZ a montré une activité comparable, voire meilleure, que la CHX. Son activité s'est en effet avérée plus rapide, rémanente et dénuée de cytotoxicité, contrairement à la CHX / Efficient antisepsis-disinfection is fundamental, considering the lack in antiviral treatments, the emergence of new viruses and the raising of viral nosocomial infections. Only one European Standard (NF EN 14476 + A1) proposes a frame to evaluate antiseptic antiviral activity in Human medicine and some improvements are still needed. We thus developed and validated, biologically and physico-chemically, a virucidal assay based on an original gel filtration method, using “in-house” G-25 and G-10 Sephadex™ columns, as neutralization method. We evaluated, on the Human coronavirus 229E (HCoV 229E), the antiseptic activity of two reference molecules, chlorhexidine (CHX) and hexamidine (HXM), and of two new potent antiviral drugs: the tetra-para-sulfonatocalix[4]arene (C[4]S) and the 1,3-bis(bithiazolyl)-tetra-para-sulfonato calix[4]arene (C[4]S-BTZ). A 4 log10 reduction in viral titers is required, according to the European Standard.HXM and C[4]S showed almost no activity on the HCoV 229E. Considering the CHX, it showed a quite interesting activity, even if it did not reach the threshold to pretend to an antiseptic activity on the HCoV 229E. Finally, The C[4]S-BTZ showed a comparable activity to the CHX, and even better. Thanks to this original method, we could highlight a new interesting molecule, the C[4]S-BTZ, which showed a close activity to the CHX, but faster, residual and exempt of cytotoxicity, whereas chlorhexidine did
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