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Isolamento e caracterização dos metabólitos produzidos pelo fungo Nigrospora sphaerica (Sacc.) Mason endofítico de Indigofera suffructicosa Mill. e avaliação do potencial biotecnológicoSANTOS, Irailton Prazeres dos 11 February 2015 (has links)
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Previous issue date: 2015-02-11 / FACEPE, CAPES, CNPq / Fungos endofíticos vêm despertando grande interesse biotecnológico em virtude da
aplicabilidade de seus metabólitos secundários na medicina, indústria e agricultura. A espécie
Indigofera suffruticosa é uma planta encontrada no Brasil, conhecida por apresentar várias
atividades biológicas. Nesse trabalho fungos endofíticos foram isolados de folhas de I.
suffruticosa na Mata Atlântica e na Caatinga, do estado de Pernambuco, durante as estações
seca e chuvosa, taxonomicamente caracterizados e avaliados quanto a produção de
metabólitos com atividade antimicrobiana. Todos os fungos isolados foram submetidos a um
screening preliminar, e os que apresentaram melhores resultados foram fermentados em
diferentes meios de cultura líquidos e semi-sólidos, e tiveram sua atividade antimicrobiana
análisada através do método de difusão em disco. O extrato metanólico de Nigrospora
sphaerica (NsME) obtido a partir do clutivo em meio de cultura de arroz, e o extrato de
acetato de etila de N. sphaerica (NsEAE) obtido a partir do sobrenadante após o cultivo no
meio líquido Batata Dextrose, tiveram suas concentração mínima inibitória (CMI) e
concentração mínima bactericida (CMB) determinadas contra bactérias Gram-negativas e
bactérias Gram-positivas. O extrato NsEAE foi submetido a colunas cromatográficas e as
frações e subfrações obtidas foram analizadas através de ressonância magnética nuclear,
resultando na identificação do ácido indólico-3-carboxílico, o qual foi avaliado quanto a sua
atividade anti-Candida. Um total de 107 fungos foram isolados e identificados de acordo com
as características morfológicas e chaves taxonómicas. Entre os nove táxons identificados,
Colletotrichum gloeosporioides (13,4%), Pseudocochliobolus pallescens (8,3%), Nigrospora
sphaerica [Khuskia oryzae] (7,4%), e Pestalotiopsis maculans (6,9%) foram os mais
frequentes. Curvularia australiensis e Chaetomella raphigera foram isolados apenas na
Caatinga durante períodos seco e chuvoso, respectivamente e são relatadas como a primeira
vez que foram isoladas a partir de uma planta na Caatinga. Lasiodiplodia theobromae foi
encontrada apenas na Mata Atlântica no período de seco, floresta em que a diversidade de
fungos isolados foi maior. Entre os fungos endofíticos isolados, 18 fungos mostraram
atividade contra pelo menos um microorganismo teste em um screening preliminar, e os
melhores resultados foram obtidos com a espécie N. sphaerica (URM-6060) e P. maculans
(URM-6061). Após a fermentação, apenas N. sphaerica apresentou atividade antibacteriana
quando fermentada meio de cultura líquido Batata Dextrose e no meio semi-sólido arroz. Os
extrato NsME e NsEAE foram ativos contra bactérias Gram-negativas e Gram-positivas, com
CMI variando entre 1.56 e 6.25 mg/mL e CMB variando entre 6.25 e 50 mg/mL. O melhor
resultado foi observado contra Staphylococcus aureus, com CMI 1,56 mg/ml e CMB 6,25
mg/ml para NsME e CMI 0,39 mg/ml e CMB 3,12 mg/ml com o extrato NsEAE. O ácido
indólico-3-carboxílico apresentou atividade fungicida contra todas as espécies de Candida
testadas, com CMI variando entre 0.125 e 0.0039 mg/mL e concentração mínima fungicida
(CMF) variando entre 0.125 e 0.0039 mg/mL, sendo os melhores resultados observados
contra Candida guilermondii, C. haemulonii and C. albicans. Estes resultados representam o
primeiro relato sobre a micobiota endofítica de I. suffruticosa demonstrando que as
características da Mata Atlântica favorecem uma maior colonização de fungos endofíticos, em
comparação com a Caatinga, em que o fungo N. sphaerica demonstrou ser capaz para
produzir agentes bioativos com potencial uso farmacêutico na busca de novas fontes
biológicas de candidatos a fármacos.
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