Este estudo avaliou a efetividade de restaurações de classe II por meio da técnica do Tratamento Restaurador Atraumático (ART), com retenções adicionais nas caixas proximais, em dentes permanentes, usando cimento de ionômero de vidro (CIV) de alta viscosidade, em comparação com restaurações convencionais de resina composta. Um exame epidemiológico foi realizado em uma população maior e representativa dos participantes da pesquisa. Cento e trinta e três participantes, de 8 a 28 anos, com boa saúde geral com uma a duas cavidades de classe II em dentes permanentes sem comprometimento pulpar e dor de dente foram incluídos neste estudo, com aprovação pelo Comitê de Ética sob o número: CAAE: 24012913.0.1001.5417. Foram feitas setenta e sete restaurações com cada material restaurador (Equia Fil-GC Corporation e Z350-3M). As restaurações foram avaliadas aos 6, 12 e 24 meses pelos critérios do ART e do Serviço de Saúde Pública dos Estados Unidos (USPHS) modificado. Correlação de Spearman e Regressão Linear Múltipla foram realizados entre as variáveis dor de dente, índice de placa visível (IPV), índice de sangramento gengival (ISG) e os índices CAST (The Caries Assessment Sprectrum and Treatment) e CPOD (contagem de dentes cariados, perdidos e restaurados) dos participantes do levantamento epidemiológico por meio do programa Statistica 7.1. Quanto à efetividade restauradora, os dados foram analisados, utilizando o programa SPSS 23.0, por meio dos testes de Mann-Whitnney, Qui-quadrado, Exato de Fisher, Qui-quadrado com tendência linear e Regressão logística pelo método Enter, quando pertinentes (p<0,050). O Teste de Kaplan-Meier avaliou as taxas de sobrevida das restaurações em relação ao critério do ART e USPHS modificado. O teste de Log-Rank comparou as curvas de sobrevida. Do índice CAST (1,53; 2,17) foi possível extrair o CPOD (0,58; 1,32) o qual apresentou menor especificidade e sensibilidade no registro da cárie. As taxas de sucesso para as restaurações de resina composta foram de 100% (6 meses), 98,7% (12 meses) e 91,5% (24 meses) para ambos os critérios de avaliação e para as restaurações de ART foram as mesmas para 6 meses (98,7%) e 12 meses (95,8%) e para 24 meses foram de 92% quando utilizado o critério do USPHS modificado e 90,3% quando utilizado o critério do ART, não sendo observada diferença estatística (p=0,466). As variáveis sexo, localidade, idade, CPOD, IPV, ISG, dor de dente, oclusão, contato proximal, tamanho da cavidade, anestesia e cooperação do paciente não apresentaram associação estatística com as taxas de sucesso das restaurações (p>0,050). Após 24 meses, as variáveis IPV e ISG não apresentaram odds ratio (OR) estatisticamente significante para as restaurações de ART (p>0,050). As restaurações de ART apresentaram uma sobrevida inferior pelo critério do ART (83,7%) quando comparado à sobrevida pelo critério do USPHS modificado (87,8%), após 24 meses (p=0,051). A sobrevida das restaurações de resina composta foi de 90,7% para ambos os critérios de avaliação. Conclui-se que não há diferença na taxa de sucesso de restaurações de classe II de ART com CIV de alta viscosidade, em dentes permanentes, com sulcos de retenção proximais, em comparação com restaurações de classe II de resina composta, após 24 meses. / This study evaluated the effectiveness of Class II restorations through the Atraumatic Restorative Treatment (ART) technique, with additional retentions in the proximal boxes, in permanent teeth, using high viscosity glass ionomer cement (HVGIC), as compared to restorations of composite resin. An epidemiological examination was conducted in a larger and representative population of the participants of study. One hundred and thirty three participants, aged 8 to 28 years, with good general health with 1 to 2 class II cavities in permanent teeth without pulp involvement and tooth pain were included in this study, with was approved by the Ethics Committee under the number: CAAE: 24012913.0.1001.5417. Seventy-seven restorations were made with each restorative material (Equia Fil-GC Corporation and Z350-3M). Restorations were evaluated at 6, 12, and 24 months by the criteria of ART and the modified United States Public Health Service (USPHS). Spearman Correlation and Multiple Linear Regression were performed between the variables tooth pain, visible plaque index (VPI), gingival bleeding index (GBI) and the CAST (The Caries Assessment Sprectrum and Treatment) and DMFT (Decayed, Missing and Filled teeth) obtained at the epidemiological survey using the Statistica program 7.1. As for restorative effectiveness, data were analyzed using the Mann-Whitnney, Chi-square, Fisher\'s Exact, Chi-square tests with linear trend and Logistic Regression by Enter method, where relevant (p<0.050). The Kaplan-Meier test evaluated the survival rates of the restorations in relation to the ART and modified USPHS criteria. The Log-Rank test compared the survival curves. From the CAST index (1.53; 2.17) it was possible to extract the DMFT (0.58; 1.32) which presented lower specificity and sensitivity in caries detection. The success rates for composite resin restorations were 100% (6 months), 98.7% (12 months) and 91.5% (24 months) for both assessment criteria and for ART restorations were the same for 6 months (98.7%) and 12 months (95.8%) and for 24 months were 92% when using the criteria of modified USPHS and 90.3% when using the criteria of ART, and no statistical difference was observed (p=0.466). The variables gender, locality, age, DMFT, VPI, GBI, toothache, occlusion, proximal contact, cavity size, anesthesia and cooperation of the participant did not present a statistical association with the success rates of the restorations (p>0.050). After 24 months, the VPI and GBI variables did not present a statistically significant odds ratio (OR) for ART restorations (p>0.050). ART restorations presented a lower survival rate by the criteria of ART (83.7%) when compared to the criteria of USPHS modified (87.8%), after 24 months (p=0.051). The survival of composite resin restorations was 90.7% for both evaluation criteria. It was concluded that there is no difference in the success rate of class II restorations of ART with HVGIC, in permanent teeth, with proximal retention grooves, compared to class II resin composite restorations, after 24 months.

O objetivo desde estudo foi analisar a microdureza e as características morfológicas da interface de união entre uma resina composta flow autoadesiva (Vertise Flow) e a dentina humana hígida ou afetada por cárie, em comparação às interfaces formadas por outros dois materiais: um cimento de ionômero de vidro modificado por resina (Fuji II LC) e um sistema adesivo universal (Single Bond Universal). Foram realizadas cavidades do tipo classe I na dentina oclusal de molares humanos e dentina afetada por cárie foi produzida na parede pulpar das cavidades por meio do método microbiológico. Os espécimes foram restaurados de acordo com os grupos experimentais e cortados no sentido vestíbulo-lingual para evidenciação da interface adesiva. Os espécimes foram submetidos aos ensaios de microdureza Knoop (n=5) e analisados por meio de microscopia eletrônica de varredura (n=3) e microscopia confocal de varredura a laser (n=10). A análise de variância dois fatores e teste de Tukey foram realizados para a análise estatística quantitativa da variável dureza (p<0,05%). As características morfológicas foram descritas após análise qualitativa. A dureza da camada de material variou em função da composição de cada material. A dureza da camada híbrida foi influenciada de acordo com o material e os maiores valores de dureza foram obtidos quando o sistema adesivo universal foi utilizado. A camada híbrida formada pela dentina afetada por cárie apresentou dureza inferior independente do material utilizado. Quanto à morfologia, os materiais testados promoveram a formação de interfaces com características diferentes entre si, entretanto, todos os materiais foram capazes de formar tags na camada híbrida. Porém, quando a interface envolveu a dentina afetada por cárie, observou-se maior quantidade de falhas e as camadas apresentaram-se irregulares. / The aim of this study was to analyze the microhardness and morphological characteristics of the bonding interface between a self-adhesive flowable composite (Vertise Flow) and sound or caries-affected dentin, comparing to interfaces formed by other materials: a resin-modified glass ionomer cement (Fuji II LC) and a universal adhesive system (Scotchbond Universal Adhesive). Class I cavities were made in the occlusal dentin of human molars and dentin affected by caries was produced in their pulp wall, using the microbiological method. The specimens were restored according to the experimental groups and cut in the vestibular-lingual direction to expose the adhesive interface. The specimens were submitted to transversal Knoop microhardness tests (n=5) and analyzed by scanning electron microscopy (n=3) and confocal laser scanning microscopy (n=10). Two-way repeated measures analysis of variance and Tukey\'s post-hoc tests were performed for the hardness results (?:0.05). Morphological characteristics were qualitative analyzed. The hardness of the material layer varied according to the composition of each material. The hardness of the hybrid layer was influenced according to the material and the highest values of hardness were obtained when the universal system was used (p<0.05). The hybrid layer formed by dentin caries-affected presented low hardness values independently of the material used. Morphologically, the tested materials promoted the formation of interfaces with different characteristics, although all the materials were able to form tags in dentin. However, when the interfaces involved caries-affected dentin, a greater number of defects were observed and the layers were irregular.

O objetivo desde estudo foi analisar a microdureza e as características morfológicas da interface de união entre uma resina composta flow autoadesiva (Vertise Flow) e a dentina humana hígida ou afetada por cárie, em comparação às interfaces formadas por outros dois materiais: um cimento de ionômero de vidro modificado por resina (Fuji II LC) e um sistema adesivo universal (Single Bond Universal). Foram realizadas cavidades do tipo classe I na dentina oclusal de molares humanos e dentina afetada por cárie foi produzida na parede pulpar das cavidades por meio do método microbiológico. Os espécimes foram restaurados de acordo com os grupos experimentais e cortados no sentido vestíbulo-lingual para evidenciação da interface adesiva. Os espécimes foram submetidos aos ensaios de microdureza Knoop (n=5) e analisados por meio de microscopia eletrônica de varredura (n=3) e microscopia confocal de varredura a laser (n=10). A análise de variância dois fatores e teste de Tukey foram realizados para a análise estatística quantitativa da variável dureza (p<0,05%). As características morfológicas foram descritas após análise qualitativa. A dureza da camada de material variou em função da composição de cada material. A dureza da camada híbrida foi influenciada de acordo com o material e os maiores valores de dureza foram obtidos quando o sistema adesivo universal foi utilizado. A camada híbrida formada pela dentina afetada por cárie apresentou dureza inferior independente do material utilizado. Quanto à morfologia, os materiais testados promoveram a formação de interfaces com características diferentes entre si, entretanto, todos os materiais foram capazes de formar tags na camada híbrida. Porém, quando a interface envolveu a dentina afetada por cárie, observou-se maior quantidade de falhas e as camadas apresentaram-se irregulares. / The aim of this study was to analyze the microhardness and morphological characteristics of the bonding interface between a self-adhesive flowable composite (Vertise Flow) and sound or caries-affected dentin, comparing to interfaces formed by other materials: a resin-modified glass ionomer cement (Fuji II LC) and a universal adhesive system (Scotchbond Universal Adhesive). Class I cavities were made in the occlusal dentin of human molars and dentin affected by caries was produced in their pulp wall, using the microbiological method. The specimens were restored according to the experimental groups and cut in the vestibular-lingual direction to expose the adhesive interface. The specimens were submitted to transversal Knoop microhardness tests (n=5) and analyzed by scanning electron microscopy (n=3) and confocal laser scanning microscopy (n=10). Two-way repeated measures analysis of variance and Tukey\'s post-hoc tests were performed for the hardness results (?:0.05). Morphological characteristics were qualitative analyzed. The hardness of the material layer varied according to the composition of each material. The hardness of the hybrid layer was influenced according to the material and the highest values of hardness were obtained when the universal system was used (p<0.05). The hybrid layer formed by dentin caries-affected presented low hardness values independently of the material used. Morphologically, the tested materials promoted the formation of interfaces with different characteristics, although all the materials were able to form tags in dentin. However, when the interfaces involved caries-affected dentin, a greater number of defects were observed and the layers were irregular.

Este estudo avaliou a efetividade de restaurações de classe II por meio da técnica do Tratamento Restaurador Atraumático (ART), com retenções adicionais nas caixas proximais, em dentes permanentes, usando cimento de ionômero de vidro (CIV) de alta viscosidade, em comparação com restaurações convencionais de resina composta. Um exame epidemiológico foi realizado em uma população maior e representativa dos participantes da pesquisa. Cento e trinta e três participantes, de 8 a 28 anos, com boa saúde geral com uma a duas cavidades de classe II em dentes permanentes sem comprometimento pulpar e dor de dente foram incluídos neste estudo, com aprovação pelo Comitê de Ética sob o número: CAAE: 24012913.0.1001.5417. Foram feitas setenta e sete restaurações com cada material restaurador (Equia Fil-GC Corporation e Z350-3M). As restaurações foram avaliadas aos 6, 12 e 24 meses pelos critérios do ART e do Serviço de Saúde Pública dos Estados Unidos (USPHS) modificado. Correlação de Spearman e Regressão Linear Múltipla foram realizados entre as variáveis dor de dente, índice de placa visível (IPV), índice de sangramento gengival (ISG) e os índices CAST (The Caries Assessment Sprectrum and Treatment) e CPOD (contagem de dentes cariados, perdidos e restaurados) dos participantes do levantamento epidemiológico por meio do programa Statistica 7.1. Quanto à efetividade restauradora, os dados foram analisados, utilizando o programa SPSS 23.0, por meio dos testes de Mann-Whitnney, Qui-quadrado, Exato de Fisher, Qui-quadrado com tendência linear e Regressão logística pelo método Enter, quando pertinentes (p<0,050). O Teste de Kaplan-Meier avaliou as taxas de sobrevida das restaurações em relação ao critério do ART e USPHS modificado. O teste de Log-Rank comparou as curvas de sobrevida. Do índice CAST (1,53; 2,17) foi possível extrair o CPOD (0,58; 1,32) o qual apresentou menor especificidade e sensibilidade no registro da cárie. As taxas de sucesso para as restaurações de resina composta foram de 100% (6 meses), 98,7% (12 meses) e 91,5% (24 meses) para ambos os critérios de avaliação e para as restaurações de ART foram as mesmas para 6 meses (98,7%) e 12 meses (95,8%) e para 24 meses foram de 92% quando utilizado o critério do USPHS modificado e 90,3% quando utilizado o critério do ART, não sendo observada diferença estatística (p=0,466). As variáveis sexo, localidade, idade, CPOD, IPV, ISG, dor de dente, oclusão, contato proximal, tamanho da cavidade, anestesia e cooperação do paciente não apresentaram associação estatística com as taxas de sucesso das restaurações (p>0,050). Após 24 meses, as variáveis IPV e ISG não apresentaram odds ratio (OR) estatisticamente significante para as restaurações de ART (p>0,050). As restaurações de ART apresentaram uma sobrevida inferior pelo critério do ART (83,7%) quando comparado à sobrevida pelo critério do USPHS modificado (87,8%), após 24 meses (p=0,051). A sobrevida das restaurações de resina composta foi de 90,7% para ambos os critérios de avaliação. Conclui-se que não há diferença na taxa de sucesso de restaurações de classe II de ART com CIV de alta viscosidade, em dentes permanentes, com sulcos de retenção proximais, em comparação com restaurações de classe II de resina composta, após 24 meses. / This study evaluated the effectiveness of Class II restorations through the Atraumatic Restorative Treatment (ART) technique, with additional retentions in the proximal boxes, in permanent teeth, using high viscosity glass ionomer cement (HVGIC), as compared to restorations of composite resin. An epidemiological examination was conducted in a larger and representative population of the participants of study. One hundred and thirty three participants, aged 8 to 28 years, with good general health with 1 to 2 class II cavities in permanent teeth without pulp involvement and tooth pain were included in this study, with was approved by the Ethics Committee under the number: CAAE: 24012913.0.1001.5417. Seventy-seven restorations were made with each restorative material (Equia Fil-GC Corporation and Z350-3M). Restorations were evaluated at 6, 12, and 24 months by the criteria of ART and the modified United States Public Health Service (USPHS). Spearman Correlation and Multiple Linear Regression were performed between the variables tooth pain, visible plaque index (VPI), gingival bleeding index (GBI) and the CAST (The Caries Assessment Sprectrum and Treatment) and DMFT (Decayed, Missing and Filled teeth) obtained at the epidemiological survey using the Statistica program 7.1. As for restorative effectiveness, data were analyzed using the Mann-Whitnney, Chi-square, Fisher\'s Exact, Chi-square tests with linear trend and Logistic Regression by Enter method, where relevant (p<0.050). The Kaplan-Meier test evaluated the survival rates of the restorations in relation to the ART and modified USPHS criteria. The Log-Rank test compared the survival curves. From the CAST index (1.53; 2.17) it was possible to extract the DMFT (0.58; 1.32) which presented lower specificity and sensitivity in caries detection. The success rates for composite resin restorations were 100% (6 months), 98.7% (12 months) and 91.5% (24 months) for both assessment criteria and for ART restorations were the same for 6 months (98.7%) and 12 months (95.8%) and for 24 months were 92% when using the criteria of modified USPHS and 90.3% when using the criteria of ART, and no statistical difference was observed (p=0.466). The variables gender, locality, age, DMFT, VPI, GBI, toothache, occlusion, proximal contact, cavity size, anesthesia and cooperation of the participant did not present a statistical association with the success rates of the restorations (p>0.050). After 24 months, the VPI and GBI variables did not present a statistically significant odds ratio (OR) for ART restorations (p>0.050). ART restorations presented a lower survival rate by the criteria of ART (83.7%) when compared to the criteria of USPHS modified (87.8%), after 24 months (p=0.051). The survival of composite resin restorations was 90.7% for both evaluation criteria. It was concluded that there is no difference in the success rate of class II restorations of ART with HVGIC, in permanent teeth, with proximal retention grooves, compared to class II resin composite restorations, after 24 months.

A evidência científica da cariologia atual vem apontando para a promoção de saúde bucal, técnicas preventivas, diagnóstico precoce da doença cárie e suas lesões nos elementos dentais, remineralização de lesões de cárie incipientes e a intervenção restauradora célere como procedimentos minimamente invasivos. Durante o ato de remoção de lesão de cárie, é comum remover-se inadvertidamente também tecido dental hígido durante a fase final, por ser um tanto quanto difícil precisar clinicamente os limites entre tecido dental comprometido e tecido dental viável. Usando-se a tecnologia com lasers de Érbio, uma dica clínica subjetiva é a mudança da percepção do som emitido pela ablação do tecido dental ao passar-se de substrato cariado para hígido (de grave para agudo), como uma forma adicional de saber que a ablação naquele ponto deve ser interrompida. Este estudo visa classificar estas diferenças sonoras em dentina e torná-las um parâmetro objetivo para odontologia de mínima intervenção ao usar-se lasers de Érbio. Para tanto, foram realizadas três fases do estudo: primeiramente, utilizaram-se vinte dentes posteriores humanos, sendo dez cariados e dez hígidos. A dentina foi irradiada com laser de Er:YAG sob os mesmos parâmetros, distância e refrigeração e um microfone monodirecional foi posicionado a 10cm da área operatória para captação e gravação dos sons produzidos pela ablação ao se operar tanto em dentina hígida quanto cariada. Dez pulsos por arquivo foram então analisados em um software (200 análises). Foram encontradas diferenças entre os padrões sonoros produzidos dos grupos cariados e hígidos e encontrado um ponto de corte para estas freqüências sonoras, que seria testado a seguir. Em outra segunda etapa, foi desenvolvido, testado e aplicado um software limitador de freqüência sonora, para que, em tempo real, avisasse o operador se o tecido dentinário que estava sendo ablacionado pelo laser de Érbio (Er:YAG e Er,Cr:YSGG) era cariado ou viável, e este evitasse o sobrepreparo, ou seja, desgastar o tecido sadio inadvertidamente, de acordo com os preceitos de mínima intervenção. Finalmente, em uma terceira etapa, o método foi validado através dos critérios visual-tátil e de fluorescência a laser; ilustrações representativas dos espécimes testados foram obtidas através de microscopia de luz e de microscopia eletrônica de varredura. Conclui-se que o som da ablação dentinária é um parâmetro objetivo que pode ser utilizado como um recurso adicional de orientação no processo de remoção de dentina cariada com lasers de Érbio e que a ferramenta desenvolvida para tanto foi efetiva, devendo ser aprimorada. O método foi validado exitosamente pelos critérios propostos. / Studies in cariology have been struggling for the development of health promotion, caries prevention techniques, precocious diagnoses of lesions, re-mineralization of incipient carious lesions and early restorative intervention with minimally invasive procedures. When removing caries lesion, healthy dental structure is often removed inadvertently during its final phase, for being quite difficult to clinically precise the limits between viable and decayed dental tissues. With laser technologies, a subjective clinical hint, often used to indicate when tissue ablation should be stopped is that different sounds are perceptive whether in carious (bass) or in healthy (treble) dental structure; when sound produced by ablation turned treble it would mean that healthy tissue was reached. This study aims to classify those audio differences and to turn them into objective parameters for a conservative operative dentistry with minimally invasive tissue removal when using Erbium lasers. For so, three phases of this study were needed: at first, twenty freshly extracted posterior human teeth were used (10 decayed and 10 sound teeth). Dentine was irradiated with Er:YAG laser under the same parameters, distance and refrigeration and a mono directional microphone was set 10cm far from the operative area in order to capture and record the ablation produced sounds when working either on carious or healthy dentine. Ten pulses per file were then analyzed in a computer software (200 analyses).It was permitted to draw differences between decayed and healthy produced sounds and also to establish a cut-off value for these sound frequencies, that would be tested later on. On a second phase, a piece of software which was able to border the sound frequency was then developed and tested. This tool was meant to warn the operator, in real-time basis, if sound dentine was reached, while it was ablated by Erbium lasers (either Er:YAG or Er,Cr:YSGG) and so one could avoid over-treatment, which means not to remove sound tissue inadvertently, according to minimal intervention dentistry concepts. Finally, on a third part of the study, the proposed guiding method for dentine caries removal was validated through visuo-tactile and laser fluorescence criteria. Representative illustrations of the tested specimens were obtained by light microscopy and scanning electron microscopy. As a conclusion, audio analysis came out to be a technical reliable objective parameter to determine whether laser ablated dentine substrates are decayed or sound; therefore it can be proposed as an additional conservative parameter to guide the clinician during dentine caries removal process, and that the tool developed for so was effective and should be sharpened. This method was successfully validated by the proposed criteria.

A cárie dental é uma doença bacteriana infecciosa considerada como um dos principais problemas de saúde pública. O principal agente etiológico para o desenvolvimento da doença é o Streptococcus mutans. A proteína P1, também conhecida como antígeno I/II, do S. mutans é fundamental para a etapa inicial de adesão à superfície dental (sacarose-independente), sendo, portanto, considerada essencial para o processo de colonização deste patógeno. Algumas regiões dessa proteína vêm sendo empregadas como antígenos em estratégias vacinais contra a cárie, entre elas a região A, localizada na porção N-terminal, conhecida como região de ligação à saliva Saliva Binding Region (SBR). No entanto, apesar dos avanços, não existe vacina para a prevenção da cárie licenciada para uso em humanos. Diante disso, o presente trabalho tem como objetivo o desenvolvimento e caracterização de uma nova estratégia vacinal contra o S. mutans baseada em esquema de dose-reforço heterólogo, utilizando o fragmento P139-512, na forma de proteína purificada, expressa a partir de linhagens recombinantes de Bacillus subtilis. A proteína P139-512 compreende os aminoácidos 39-512 da proteína nativa, o que corresponde a toda região A e uma pequena porção da região variável da proteína P1. Utilizamos esporos de B. subtilis 1012, modificados para expressar o antígeno P139-512 (LDV702). A linhagem LDV704, além de expressar o antígeno, foi modificada para expressar uma invasina (InvA) com capacidade de se ligar a epitélios de mucosa. Camundongos da linhagem BALB/c foram imunizados por via sublingual com uma dose de esporos de B. subtilis (linhagens 1012, LDV702, LDV704 ou PBS) seguidos por dois reforços com a proteína P139-512, associada ou não com o adjuvante LTK63. Níveis significativos de anticorpos séricos foram induzidos pelas formulações em associação com o adjuvante após a terceira dose, e mostraram-se capazes de reconhecer os epítopos em diferentes linhagens de S. mutans. No entanto, nenhuma das formulações mostrou-se capaz de ativar respostas de mucosa (S-IgA). Porém, observamos que o adjuvante LTK63 empregado na estratégia dose-reforço heterólogo potencializou a resposta sérica de anticorpos IgG, sendo capaz de modular e melhorar qualitativamente as respostas induzidas. Assim, a administração das formulações na presença do adjuvante representa uma alternativa promissora para o controle do S. mutans. / Dental caries is an infectious bacterial disease considered as one of the main public health problems. The main etiological agent for the development of the disease is the Streptococcus mutans. The P1 protein, also known as S. mutans Ag I / II antigen, is essential for the initial stages of adhesion to the dental surface (sucrose-independent) and is, therefore, considered essential for the colonization process of this pathogen. Some regions of this protein have been used as antigens in vaccine strategies against caries, among them the A region, located at the amino terminal region also known as the Saliva Binding Region (SBR). However, despite the advances, there is no licensed anti-caries vaccine for human use. Therefore, the present work aims to develop and characterize a new vaccine strategy against S. mutans based on a heterologous priming/boost immunization regimen using the recombinant P139-512 fragment, expressed and purified from a Bacillus subtilis strain. The P139-512 protein comprises amino acids that encompasses the entire A region and a small portion of the variable region of the P1 protein. We used spores of B. subtilis 1012 (wild-strain) and recombinants that were modified to express the antigen P139-512 (LDV702). In addition to express the antigen, the LDV704 strain was modified to express a surface-exposed bacterial invasin (InvA) capable of binding to the mucosal epithelia. BALB/c mice were primed via the sublingual route with a dose of B. subtilis spores (1012, LDV702, or LDV704 strains) followed by two boosting doses with the purified protein P139-512, associated or not with the LTK63 adjuvant, by the same administration route. Significant serum antibody levels were induced by the formulations with the adjuvants after the third dose and the antibodies were shown to recognize epitopes exposed on the surface of different S. mutans strains. However, none of the formulations were capable to activate mucosal responses (S-IgA). Nevertheless, we observed that the LTK63 enhanced the serum IgG responses and qualitatively improved the induced antibody response. Thus, the administration of the formulations in the presence of the adjuvant represents a promising alternative for the control of S. mutans.

A evidência científica da cariologia atual vem apontando para a promoção de saúde bucal, técnicas preventivas, diagnóstico precoce da doença cárie e suas lesões nos elementos dentais, remineralização de lesões de cárie incipientes e a intervenção restauradora célere como procedimentos minimamente invasivos. Durante o ato de remoção de lesão de cárie, é comum remover-se inadvertidamente também tecido dental hígido durante a fase final, por ser um tanto quanto difícil precisar clinicamente os limites entre tecido dental comprometido e tecido dental viável. Usando-se a tecnologia com lasers de Érbio, uma dica clínica subjetiva é a mudança da percepção do som emitido pela ablação do tecido dental ao passar-se de substrato cariado para hígido (de grave para agudo), como uma forma adicional de saber que a ablação naquele ponto deve ser interrompida. Este estudo visa classificar estas diferenças sonoras em dentina e torná-las um parâmetro objetivo para odontologia de mínima intervenção ao usar-se lasers de Érbio. Para tanto, foram realizadas três fases do estudo: primeiramente, utilizaram-se vinte dentes posteriores humanos, sendo dez cariados e dez hígidos. A dentina foi irradiada com laser de Er:YAG sob os mesmos parâmetros, distância e refrigeração e um microfone monodirecional foi posicionado a 10cm da área operatória para captação e gravação dos sons produzidos pela ablação ao se operar tanto em dentina hígida quanto cariada. Dez pulsos por arquivo foram então analisados em um software (200 análises). Foram encontradas diferenças entre os padrões sonoros produzidos dos grupos cariados e hígidos e encontrado um ponto de corte para estas freqüências sonoras, que seria testado a seguir. Em outra segunda etapa, foi desenvolvido, testado e aplicado um software limitador de freqüência sonora, para que, em tempo real, avisasse o operador se o tecido dentinário que estava sendo ablacionado pelo laser de Érbio (Er:YAG e Er,Cr:YSGG) era cariado ou viável, e este evitasse o sobrepreparo, ou seja, desgastar o tecido sadio inadvertidamente, de acordo com os preceitos de mínima intervenção. Finalmente, em uma terceira etapa, o método foi validado através dos critérios visual-tátil e de fluorescência a laser; ilustrações representativas dos espécimes testados foram obtidas através de microscopia de luz e de microscopia eletrônica de varredura. Conclui-se que o som da ablação dentinária é um parâmetro objetivo que pode ser utilizado como um recurso adicional de orientação no processo de remoção de dentina cariada com lasers de Érbio e que a ferramenta desenvolvida para tanto foi efetiva, devendo ser aprimorada. O método foi validado exitosamente pelos critérios propostos. / Studies in cariology have been struggling for the development of health promotion, caries prevention techniques, precocious diagnoses of lesions, re-mineralization of incipient carious lesions and early restorative intervention with minimally invasive procedures. When removing caries lesion, healthy dental structure is often removed inadvertently during its final phase, for being quite difficult to clinically precise the limits between viable and decayed dental tissues. With laser technologies, a subjective clinical hint, often used to indicate when tissue ablation should be stopped is that different sounds are perceptive whether in carious (bass) or in healthy (treble) dental structure; when sound produced by ablation turned treble it would mean that healthy tissue was reached. This study aims to classify those audio differences and to turn them into objective parameters for a conservative operative dentistry with minimally invasive tissue removal when using Erbium lasers. For so, three phases of this study were needed: at first, twenty freshly extracted posterior human teeth were used (10 decayed and 10 sound teeth). Dentine was irradiated with Er:YAG laser under the same parameters, distance and refrigeration and a mono directional microphone was set 10cm far from the operative area in order to capture and record the ablation produced sounds when working either on carious or healthy dentine. Ten pulses per file were then analyzed in a computer software (200 analyses).It was permitted to draw differences between decayed and healthy produced sounds and also to establish a cut-off value for these sound frequencies, that would be tested later on. On a second phase, a piece of software which was able to border the sound frequency was then developed and tested. This tool was meant to warn the operator, in real-time basis, if sound dentine was reached, while it was ablated by Erbium lasers (either Er:YAG or Er,Cr:YSGG) and so one could avoid over-treatment, which means not to remove sound tissue inadvertently, according to minimal intervention dentistry concepts. Finally, on a third part of the study, the proposed guiding method for dentine caries removal was validated through visuo-tactile and laser fluorescence criteria. Representative illustrations of the tested specimens were obtained by light microscopy and scanning electron microscopy. As a conclusion, audio analysis came out to be a technical reliable objective parameter to determine whether laser ablated dentine substrates are decayed or sound; therefore it can be proposed as an additional conservative parameter to guide the clinician during dentine caries removal process, and that the tool developed for so was effective and should be sharpened. This method was successfully validated by the proposed criteria.