Orientador: Edson Antunes / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas / Made available in DSpace on 2018-08-04T02:40:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Costa_GislaineGomesda_M.pdf: 3654162 bytes, checksum: ae2e21b58ce18e882aab17b0529a6576 (MD5) Previous issue date: 2004 / Resumo: Neste estudo, investigamos se a IL-5, a eotaxina e a dexametasona modulam a migração e adesão de eosinófilos obtidos de indivíduos sadios e de pacientes com rinite alérgica. O ensaio de quimiotaxia e de adesão foi realizado com eosinófilos de sangue periférico usando-se sistema imunomagnético de separação celular. Para os ensaios de quimiotaxia, foram utilizadas placas ChemoTx-5, e para os ensaios de adesão, placas de adesão recobertas com fibronectina. Em ambos os ensaios, a medida da absorbância (490 nM) da peroxidase eosinofílica foi utilizada como índice de eosinófilos migrados ou aderidos. O PAF (10~ M) induziu quimiotaxia de mesma magnitude em eosinófilos de indivíduos sadios e de pacientes com rinite. A IL-5 (0,25 nglml) aumentou significativamente a quimiotaxia de eosinófilos induzida pelo PAF; porém, o aumento observado em eosinófilos de pacientes com rinite alérgica foi 65% maior (p<0,001) do que de indivíduos sadios. A eotaxina (100 nglml) não alterou a resposta quimiotáxica do PAF em nenhum dos grupos estudados. A dexametasona (100 J.1g/ml)reduziu significativamente a quimiotaxia, tanto no grupo de indivíduos sadios, como no de pacientes com rinite alérgica. A IL-5 (0,25 ng/ml) induziu resposta quimiotáxica significativamente maior em eosinófilos de pacientes com rinite, em comparação com eosinófilos de indivíduos sadios. A resposta quimiotáxica à IL-5 não foi modificada pela eotaxina (100 ng/ml) em eosinófilos de indivíduos sadios, mas foi marcantemente reduzida em eosinófilos de pacientes com rinite alérgica. A eotaxina (100 nglml) induziu resposta quimiotáxica significativamente maior em eosinófilos de pacientes com rinite, em comparação com eosinófilos de indivíduos sadios. A resposta quimiotáxica à eotaxina foi potencializada pela IL-5 (100 ng/ml)em eosinófilos de indivíduos sadios e de pacientes com rinite alérgica. Entretanto, o aumento observado nos eosinófilos de pacientes com nnite alérgica foi significativamente maior do que de indivíduos sadios. Em placas recobertas com fibronectina (10 J.1g1m,l) ligante oposto da molécula de adesão VLA-4, estudamos a adesão dos eosinófilos. A adesão espontânea foi maior com eosinófilos de pacientes com rinitealérgica do que de indivíduos sadios. A incubação dos eosinófilos com eotaxina (100 nglml) ou IL-5 (0,25 ng/ml) não modificou a adesão dos eosinófilos em nenhum dos grupos estudados. A incubação com dexametasona (100 J.1g1ml) reduziu significativamente a adesão celular em ambos os grupos experimentais. Nossos resultados mostram que eosinófilos de pacientes com rinite alérgica estão pré-ativados. Isto pode ser devido à exposição na circulação à IL-5, que leva ao aumento da expressão elou função da molécula de adesão VLA-4 e, conseqüentemente,de sua migração / Abstract: In this study, we tested whether IL-5, eotaxin and dexamethasone modulate the adhesion and migration of eosinophils obtained trom allergic rhinitis subjects, in comparison with healty individuais. The chemotaxis and adhesion assays were performed with eosinophils isolated from peripheral blood using an imunomagnetic cell separator. ChemoTx-5 plates were used for the chemotaxis assays, whereas fibronectin-coated plates were used for the adhesion assays. For both assays, measurement of eosinophil peroxidase activity was used as marker for migrated or adhered eosinophils. Platelet-activated factor (PAF; 10-8 M) induced a significant eosinophil chemotaxis in both studied groups. Interleukin-5 (IL-5, 0.25 nglml) significantly increased the PAF-induced chemotaxis in eosinophils trom both healthy individuais and rhinitis subjects. However, the increase in rhinitis subjects eosinophils was 65% higher (p<0.001) compared with healthy individuais eosinophils. Eotaxin (100 ng/ml) did not alter the PAF-induced eosinophil chemotaxis in either groups studied. Dexamethasone (100 Ilg/ml) significantly reduced PAF-induced chemotaxis in cells trom both groups. Interleukin-5 (0.25 nglm!) induced a higher chemotactic response in eosinophils trom rhinitis subjects compared with healthy individuais. Eotaxin (100 ng/ml) had no effect on IL-5-induced eosinophil chemotaxis in healthy individuais, but prevented the increase in eosinophil chemotaxis induced by IL-5 in rhinitis subjects. Eotaxin (100 ng/ml) induced a higher chemotactic response in eosinophils trom rhinitis subjects compared with healthy individuais. Eotaxin-induced eosinophil chemotaxis was significantly enhanced by IL-5 (0.25 nglml) in both group studied, but this enhancement was higher in eosinophils trom rhinitis subjects. In plated coated with fibronectin (an opposite ligand for VLA-4) we studied the eosinophil adhesion. The basal (spontaneous) cell adhesion was siginificantly higher (p<0.05) using eosinophils from rhinitis subjects compared with those trom healthy individuais. However, the pattem of cell adhesion in both groups was not significantlyaffectedby eotaxin (100 ng/ml) or IL-5 (0.25 nglm!). Dexamethasone (100 Ilg/ml) significantly reduced the eosinophil adhesion in cells from both studied groups. Ours results indicate that eosinophils trom rhinitissubjects are found primed, and that can be due to previous exposition to IL-5 while in peripheral blood. It is likelythat IL-5 increases the expression andlor function01adhesion molecule VLA- 4 in eosinophils leading consequently to an enhanced cell chemotaxis / Mestrado / Farmacologia / Mestre em Farmacologia

Cette thèse est articulée autour de deux facettes de l’étude des équations auxdérivées partielles. Dans une première partie, on étudie la stabilité des solutionspériodiques pour des lois de conservation. On démontre d’abord la stabilité asymptotiquedans L1 des solutions périodiques de lois de conservation scalaires et inhomogènes.On montre ensuite un résultat de stabilité structurelle des roll-waves. Plusprécisément, on montre que les solutions périodiques d’un système hyperbolique sansviscosité sont limites des solutions du problème avec viscosité, quand le terme deviscosité tend vers 0. Dans une deuxième partie, on s’intéresse à un système d’équationsaux dérivées partielles issu de la biologie : le modèle de Patlak-Keller-Segelen dimension 2 ; il décrit les phénomènes de chimiotactisme. Pour ce modèle, onconstruit un schéma de type volume fini, ce qui permet d’approcher la solution touten gardant certaines propriétés du système : positivité, conservation de la masse,estimation d’énergie. / This thesis is organized around two aspects of the study of partial differentialequations. In a first part, we study the stability of periodic solutions for conservationlaws. First, we prove asymptotic L1-stability of periodic solutions of scalarinhomogeneous conservation laws. Then, we show a result on structural stability ofroll-waves. More precisely, we prove that periodic solutions of a hyperbolic systemwithout viscosity are the limits of the solutions of the problem with viscosity, as theviscous term tends to 0. In a second part, we study a system of partial differentialequations derived from biology: the model of Patlak-Keller-Segel in dimension 2, describingthe phenomena of chemotaxis. For this model, we construct a finite-volumescheme, which approaches the solution while keeping some properties of the system:positivity, conservation of mass, energy estimate.