Submitted by Renata Lopes (renatasil82@gmail.com) on 2017-05-03T13:51:14Z No. of bitstreams: 1 vivannazaretholiveirafernandes.pdf: 1261363 bytes, checksum: 29d944a0020a492413570231b2056b50 (MD5) / Approved for entry into archive by Adriana Oliveira (adriana.oliveira@ufjf.edu.br) on 2017-05-13T13:34:27Z (GMT) No. of bitstreams: 1 vivannazaretholiveirafernandes.pdf: 1261363 bytes, checksum: 29d944a0020a492413570231b2056b50 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-05-13T13:34:27Z (GMT). No. of bitstreams: 1 vivannazaretholiveirafernandes.pdf: 1261363 bytes, checksum: 29d944a0020a492413570231b2056b50 (MD5) Previous issue date: 2010-02-25 / Foi desenvolvida inovadora metodologia para a separação e quantificação simultânea de aspartame, ciclamato, sacarina e acesulfame-K por eletroforese capilar, com detecção direta e indireta UV, tempo de análise de aproximadamente 6 minutos e sem derivatização da amostra. Como o ciclamato possui baixa absortividade, foi utilizado um sistema de eletrólito adicionado de um cromóforo, possibilitando a detecção indireta deste analito. O comprimento de onda foi escolhido considerando-se uma absortividade intermediária entre o cromóforo do eletrólito, o aspartame, sacarina e acesulfame-K. Após teste de alguns cromóforos, o ácido benzóico foi selecionado como o mais adequado. Um ponto a ser considerado é que matrizes de alimento possuem ácido benzóico em sua constituição, sendo utilizado como conservante. Apesar dele ainda ser detectado no sistema de eletrólito e condições de análise propostos, sua quantificação não pode ser realizada, devido sua inclusão no eletrólito, demonstrando indícios de falta de ajuste do modelo linear, com 95% de confiança. A condição ótima para separação eletroforética foi obtida mediante uso de planejamento fatorial 32. A otimização consistiu de 20,0 mmol L-1 de tetraborato de sódio e 15,0 mmol L-1 de tampão Tris-ABen (pH 9,15 ± 0,03), tensão de +20 kV, injeção de 4 segundos a 50 mbar, 215 nm, utilizando levofloxacina como padrão interno. Uma amostra de preparado sólido para bebida de chá sabor limão, possuindo em sua constituição os quatro edulcorantes foi analisada, sendo o seu pré-tratamento constituído unicamente da filtração da mesma, após reconstituição, sem nenhuma derivatização. Apesar da metodologia analítica não ter sido validada, algumas figuras de mérito foram avaliados: linearidade, seletividade, limites de detecção e quantificação, precisão, recuperação e robustez. Os parâmetros avaliados demonstram um coeficiente de regressão maior que 0,98, além não apresentar falta de ajuste na faixa de concentração testada, avaliado com 95% de confiança, para todos os analitos. A seletividade foi testada mediante curva de adição de padrão, podendo-se observar um paralelismo entre os coeficientes angulares dos padrões e na amostra, indicando seletividade da metodologia. O RSD (%) para tempo de migração e área utilizando razão com padrão interno foi menor que 5% para a área e menor que 2% para o tempo de migração para os quatro analitos, considerando amostra e padrão. Os limites de detecção encontrados foram 6,8 mg L-1 para aspartame, 12 mg L-1 para ciclamato, 0,50 mg L-1 para sacarina e 3,3 mg L-1 para acesulfame-K, sendo valores mais significativos do que aqueles encontrados na literatura para determinação por CE e muito competitivos, senão melhores, que a determinação por outras técnicas. A exatidão mostrou-se dentro de limites aceitáveis, tendo os valores de recuperação no intervalo de 91,9 a 102,2%. / An innovative methodology was developed to simultaneously separate and quantify aspartame, cyclamate, saccharin and acesulfame-K through capillary electrophoresis with direct and indirect detection of UV, analysis time of roughly 6 minutes and with no sample derivatization. As the cyclamate has low absorptivity we used a system of electrolyte added to a chromophore, which allowed the indirect detection of this analyte. The wavelength was chosen taking into account an intermediary absorptivity among chromophore electrolyte, aspartame, saccharin and acesulfame-K. After testing some chromophores, the benzoic acid was selected as the most appropriate. A point to be considered is that food matrices have benzoic acid in its constitution, used as a preservative. Although it is still detected in the electrolyte system and the proposed analytical conditions, its quantification cannot be attained due to its inclusion in the electrolyte, showing signs of lack of adjustments of the linear model with 95% confidence. The ideal condition for electrophoretic separation was obtained by applying 32 factorial design. The optimization consisted of 20.0 mmol L-1 of sodium tetraborate and 15.0 mmol L-1 Tris-Aben (pH 9.15 ± 0.03), voltage of +20 kV, injection of 4 seconds at 50 mbar, 215 nm, using levofloxacin as internal standard. A sample of a solid prepared for drink lemon tea with the four sweeteners in its constitution was analyzed, and its pre-treatment consisting only of filtering the sample, after reconstitution, without any derivatization. Even though the analytical methodology was not validated, some important figures were evaluated: linearity, selectivity, limits of detection and quantification, precision, recovery and strength. The parameters assessed showed a regression coefficient greater than 0.98 and did not show lack of adjustment in the concentration range tested, evaluated as 95% granted for all analytes. Selectivity was tested through standard addition curve, which makes possible the observation of parallelism between the slopes of the patterns and the sample, indicating selectivity of the methodology. The RSD (%) for migration time and area using ratio as internal standard was less than 5% for the area and less than 2% for migration time for the four analytes, considering sample and standard. The detection limits found were 6.8 mg L-1 for aspartame, 12 mg L-1 for cyclamate, 0.50 mg L-1 for saccharin and 3.3 mg L-1 for acesulfame-K. These values are more significant than those found in the literature for determination by CE and they are very competitive, if not better, than the determination by other techniques. The accuracy was found to be within acceptable limits, and the recovery values in the range of 91.9 to 102.2%.

Made available in DSpace on 2016-06-02T20:36:11Z (GMT). No. of bitstreams: 1 1617.pdf: 729214 bytes, checksum: 10ad5db9f5bca8eca9a3c32793d82e5c (MD5) Previous issue date: 2007-08-03 / Universidade Federal de Sao Carlos / The development of electroanalytical procedures for aspartame and sodium cyclamate determination in dietary products using a boron doped diamond (BDD) electrode and the square wave voltammetry (SWV) is reported in this work. The first procedure development is reported in related to the determination of aspartame in dietary products employing BDD electrode and the SWV technique after optimization of the experimental conditions. The recovery of aspartame from 8 samples ranged from 95.9 % to 104.4 % of the added amount. The analytical curve was linear in the aspartame concentration range from 9.9 x 10-6 mol L-1 to 5.2 x 10-5 mol L-1 with a detection limit of 2.3 x 10-7 mol L-1. The relative standard deviation for 5 successive determinations of 1.0 x 10-4 mol L-1 aspartame was 0.17 % and the relative standard deviation for 5 determinations of aspartame in different days was 2.8 %. The concentration of aspartame determined in several dietary products using the BDD electrode and those concentrations determined using a HPLC method are in close agreement (calculated t-values did not exceed the critical values at the 95 % confidence level) and within an acceptable range of error. In the sequence, the analytical determination of sodium cyclamate was studied by oxidation of this substance on BDD electrode employed the SWV. The analytical curve for sodium cyclamate was linear in the concentration range from 5.0 x 10-5 to 4.1 x 10-4 mol L-1 with a detection limit of 4.8 x 10-6 mol L-1. The relative standard deviation for five successive measurements was 1.1 % and the relative standard deviation for determinations of 3.0 x 10-3 mol L-1 sodium cyclamate in five different days was 2,4 %. The recoveries values from five samples ranged from 98.6 % to 106,0 % and the results found using the proposed method agreed at the 95% confidence level with those from a HPLC method. Finally, a procedure for simultaneous determination of aspartame and sodium cyclamate was developed, once the oxidation peak potentials of the aspartame and sodium cyclamate are 1.6 V and 1.9 V, respectively. The analytical curves were linear in the aspartame concentration range from 5.0 x 10-6 to 4.0 x 10-5 mol L-1, with detection limit of 3.5 x 10-7 mol L-1 and from 5.0 x 10-5 to 4.0 x 10-4 mol L-1, with detection limit of 4.5 x 10 -6 mol L-1 for sodium cyclamate. The simultaneous determination of these sweeteners in various dietary products was implemented with success. / Neste trabalho descreve-se o desenvolvimento de procedimentos eletroanalíticos para a determinação dos edulcorantes aspartame e ciclamato de sódio em produtos dietéticos utilizando um eletrodo de diamante dopado com boro (BDD) e a voltametria de onda quadrada (SWV). No primeiro procedimento desenvolvido determinou-se aspartame em produtos dietéticos empregando-se um eletrodo de BDD e a técnica voltamétrica por onda quadrada após otimização das condições experimentais. A recuperação de aspartame em 8 amostras variou de 95,9 % a 104,4 % dos valores adicionados. A curva analítica foi linear no intervalo de concentração de aspartame de 9,9 x 10-6 mol L-1 a 5,2 x 10-5 mol L-1 com um limite de detecção de 2,3 x 10-7 mol L-1. O desvio padrão relativo de 5 determinações sucessivas de aspartame 1,0 x 10-4 mol L-1 foi de 0,17 % (repetibilidade) e de 5 determinações em dias e soluções diferentes de aspartame foi de 2,8 % (reprodutibilidade). A quantificação de aspartame nos produtos dietéticos utilizando o eletrodo de BDD apresentou resultados concordantes com os resultados obtidos empregando-se o método cromatográfico a um nível de confiança de 95 %. Na seqüência, foi estudada a determinação de ciclamato de sódio por oxidação desta substância sobre o eletrodo de BDD, empregando-se a técnica SWV. A curva analítica para o ciclamato de sódio foi linear no intervalo de concentração de 5,0 x 10-5 e 4,1 x 10-4 mol L-1 com um limite de detecção de 4,8 x 10-6 mol L-1. O desvio padrão relativo de 5 medidas sucessivas de ciclamato de sódio 3,0 x 10-3 mol L-1 foi de 1,1 % (repetibilidade) e de 5 determinações em dias e soluções de ciclamato de sódio diferentes foi de 2,4 % (reprodutibilidade). Os valores do estudo de recuperação em 5 amostras comerciais variaram entre 98,6 % e 106 % e os resultados obtidos na XI determinação do ciclamato de sódio nessas amostras estão em concordância com os resultados obtidos empregando-se o método de referência (HPLC). Finalmente, foi desenvolvido um procedimento para a determinação simultânea de aspartame e ciclamato de sódio, uma vez que estes edulcorantes apresentaram potenciais de pico de oxidação bem distintos, 1,6 V e 1,9 V respectivamente. As curvas analíticas foram lineares no intervalo de concentração de aspartame entre 5,0 x 10-6 e 4,0 x 10-5 mol L-1, com um limite de detecção de 3,5 x 10-7 mol L-1 e de 5,0 x 10-5 a 4,0 x 10-4 mol L-1 com um limite de detecção de 4,5 x 10-6 mol L-1 para o ciclamato de sódio. A determinação simultânea destes edulcorantes em produtos dietéticos também apresentou resultados satisfatórios e concordantes com os resultados obtidos pelo método cromatográfico.

Made available in DSpace on 2016-01-26T12:51:12Z (GMT). No. of bitstreams: 1 veraluciafugitadossantos_tese.pdf: 270025 bytes, checksum: 8c9d7e6ebc77bbe636dd22a57632946e (MD5) Previous issue date: 2006-10-31 / Objective: To evaluate the effects of sodium cyclamate on fetal growth and on testicular cells of rat fetuses treated during embryogenesis. Method: From the tenth to the thirteenth day of pregnancy, 50 mg/Kg sodium cyclamate was administered via intraperitoneally in rats participating in the Treated Group. An equal volume of distilled water was similarly administered to rats of a Control Group. The fetuses were removed on the twentieth day by laparotomy, when 5 fetuses were randomly selected from the both Treated and Control Groups. Using karyometry, the nuclear parameters of the testicular cells were evaluated in respect to gonocytes, Sertoli cells and Leydig cells. Results: The mean fetal and placental weights of the animals from the Treated Group were lower than those of the Control Group, with a similar result seen in respect to the length of the umbilical cord. No changes were seen in the nuclei of the gonocytes. In relation to the Sertoli cells, differences were observed in the lowest diameter, mean diameter, volume, area, volume:area ratio and perimeter. No nuclear alterations were identified in the Leydig cells. Conclusions: This study identified alterations in fetal growth and in the testicular cells of rat fetuses caused by the administration of sodium cyclamate during the gestational period. / Objetivo: Avaliar os efeitos do ciclamato de sódio sobre o crescimento fetal e nas células testiculares de fetos de ratas tratadas durante a embriogênese. Método: Do décimo ao décimo terceiro dia de prenhez, foi administrado por via intraperitoneal, 50 mg/Kg de ciclamato de sódio nas ratas participantes do grupo tratado e, pela mesma via, igual volume de água destilada nas ratas do grupo controle. A laparotomia para a retirada dos fetos foi realizada no vigésimo dia da gestação, onde foram selecionados aleatoriamente cinco fetos das ratas tratadas e cinco das ratas controle. Por meio da cariometria, foi realizada a avaliação dos parâmetros nucleares de células testiculares dos fetos: gonócitos, células de Sertoli e células de Leydig. Resultados: As médias dos pesos fetal e placentário dos animais componentes do grupo tratado foram menores que os do grupo controle; sendo o mesmo resultado observado para o comprimento do cordão umbilical. Nos núcleos dos gonócitos não foram verificadas alterações. Nas células de Sertoli as modificações foram notadas nos seguintes parâmetros nucleares: diâmetro menor, diâmetro médio, volume, área, relação volume/área e no perímetro. Nas células de Leydig não foram registradas alterações nucleares. Conclusões: O desenvolvimento desta pesquisa possibilitou a observação de alterações no crescimento fetal e células testiculares de fetos de ratas, causadas pelo uso de ciclamato de sódio durante o período gestacional.