Submitted by Cássia Santos (cassia.bcufg@gmail.com) on 2015-02-04T11:45:28Z No. of bitstreams: 2 Dissertação - Jaires Gomes de Oliveira Filho - 2014.pdf: 933703 bytes, checksum: d3e9380eac662d534b9a901b441bbab0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Ferreira (lucgeral@gmail.com) on 2015-02-05T14:22:22Z (GMT) No. of bitstreams: 2 Dissertação - Jaires Gomes de Oliveira Filho - 2014.pdf: 933703 bytes, checksum: d3e9380eac662d534b9a901b441bbab0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) / Made available in DSpace on 2015-02-05T14:22:22Z (GMT). No. of bitstreams: 2 Dissertação - Jaires Gomes de Oliveira Filho - 2014.pdf: 933703 bytes, checksum: d3e9380eac662d534b9a901b441bbab0 (MD5) license_rdf: 23148 bytes, checksum: 9da0b6dfac957114c6a7714714b86306 (MD5) Previous issue date: 2014-02-14 / Conselho Nacional de Pesquisa e Desenvolvimento Científico e Tecnológico - CNPq / Ticks are arthropods of great importance in public health, due to the transmission of many pathogens. Rhipicephalus sanguineus parasites mainly dogs. It is known that Beagle dogs are less susceptible to R. sanguineus than English Cocker Spaniel, and still have resistance patterns linked to immunity. The lower susceptibility of Beagle dogs is due to chemical compounds they produce, which act in reducing the parasitic load of R. sanguineus on these animals. Given that this research aimed to verify the chemical repellency against R. sanguineus of compounds that have been identified in the odor of resistant dogs, and synthetic repellent compounds to other tick species. For testing chemical repellency two tests were used, the Petri dish and the Y-olfactometer. Five compounds identified in Beagle odors were selected and tested: 2 - hexanone, nonane, decane, undecane and benzaldehyde, the compound of botanical origin β-citronellol and the standard repellent DEET (N,N-diethyl-3-methylbenzamide). These compounds were tested alone and also two mixtures were evaluated: benzaldehyde and 2-hexanone (1:1), and benzaldehyde, 2-hexanone and undecane (1:1:1). All these compounds were prepared in a stock solution of 7.2 % ( ≈ 0.200 mg/cm²) and two lower concentrations were also tested: 0.100 and 0.050 mg/cm². DEET was repellent in the two highest concentrations and 68.33 to 86.67% of the ticks were found in untreated areas in different time points. At the concentration of 0.050 mg/cm² ticks were distributed similarly (without significant difference) in both areas. β-citronellol was the only compound tested that was repellent at all times and concentrations tested. The percentage of ticks in untreated areas ranged from 73.33 to 93.33 %. When compared β-citronellol with DEET the first compound was more effective at repelling the adults of R. sanguineus. For benzaldehyde, 30 minutes at a concentration of 0.200 mg/cm² a percentage of 63.33 % of ticks was observed in the untreated area. Percentage of 76.67 was observed after 5 min. at a concentration of 0.050 mg/cm². 2-hexanone was repellent at 30 min. at a concentration of 0.200 mg/cm² at 10 min. at a concentration of 0.100 mg/cm² and 30 minutes at a concentration of 0.050 mg/cm². For undecane a rate of 65.00% of ticks was observed in the untreated area in one moment of testing, the highest concentration during the first 5 min. of the evaluation. Nonane and decane not were not repellent at any of the concentrations and time intervals. The blend benzaldehyde + 2-hexanone was repellent in the three highest concentrations in almost all evaluated times, including in the olfactometer testing. During the whole test this mixture showed statistical similarity when compared with DEET. The addition of undecane to this blend did not potentiate its repellent power. The main result was the finding of natural repellents in resistant dogs to the tick R. sanguineus. / Carrapatos são artrópodes de grande importância dentro da saúde pública, devido à transmissão de inúmeros patógenos. Rhipicephalus sanguineus parasita principalmente cães. Sabe-se que cães da raça Beagle são menos susceptíveis ao R. sanguineus que cães Cocker Inglês, e ainda apresentam padrões de resistência ligados a imunidade. A menor susceptibilidade de cães Beagle está ligada a compostos químicos que estes produzem, os quais atuam na diminuição da carga parasitária de R. sanguineus sobre estes animais. Sabendo-se disso com esta pesquisa objetivou-se verificar a repelência química de compostos que foram identificados no odor de cães resistentes, além de compostos sintéticos repelentes para outros carrapatos, contra o R. sanguineus. Para os testes de repelência química foram utilizados dois ensaios de repelência, o da placa de Petri e do olfatômetro em Y. Foram testados cinco compostos com provável poder repelente e identificados nos odores de Beagle (2-hexanona, nonano, decano, undecano e benzaldeído), o composto de origem botânica β-citronelol e o repelente padrão DEET (N,N-dietil-3-metilbenzamida). Além destes compostos testados isoladamente, duas misturas foram avaliadas: benzaldeído e 2 -hexanona (1:1), e benzaldeído, 2-hexanona e undecano (1:1:1) Todos estes compostos foram formulados a partir de uma solução mãe de 7,2% (≈ 0,200 mg/cm²) da qual foi obtida posteriormente outras duas concentrações (0,100 e 0,050 mg/cm²). O DEET foi repelente nas duas maiores concentrações, sendo que 68,33 a 86,67% dos carrapatos foram encontrados nas áreas não tratadas, nos diferentes tempos de observação. Na concentração de 0,050 mg/cm² os carrapatos se distribuíram similarmente (sem diferença significativa) em ambas as áreas. β-citronelol foi o único composto testado que foi repelente em todos os tempos e concentrações testados. Os percentuais de carrapatos nas áreas não tratadas variaram de 73,33 a 93,33%. Quando comparado com o DEET o β-citronelol foi mais eficiente em repelir os adultos de R. sanguineus. Para o benzaldeido, aos 30 minutos, na concentração de 0,200 mg/cm² foi observado um percentual de 63,33% de carrapatos na área não tratada. Percentual de 76,67 foi observado aos cinco minutos, na concentração de 0,050 mg/cm². A 2-hexanona foi repelente aos 30 minutos, na concentração de 0,200 mg/cm², aos 10 minutos, na concentração de 0,100 mg/cm² e aos 30 minutos, na concentração de 0,050 mg/cm². Para o undecano foi observado um percentual de 65,00 de carrapatos na área não tratada em apenas um momento dos testes, na maior concentração, durante os primeiros cinco minutos de avaliação. Nonano e decano não causaram qualquer repelência para os carrapatos testados, em qualquer uma das concentrações ou intervalos de tempo avaliados. A mistura benzaldeido + 2-hexanona foi repelente nas três maiores concentrações, em quase todos os tempos avaliados, inclusive no teste de olfatometria. Durante todo o teste esta mistura mostrou semelhança estatística quando comparada com o DEET. A adição de undecano a esta mistura não potencializou o seu poder repelente. O principal resultado obtido foi a constatação da presença de repelentes naturais em cães resistentes ao carrapato R. sanguineus.

Made available in DSpace on 2015-04-22T22:02:06Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao-Diego de Moura Rabelo.pdf: 2580291 bytes, checksum: 8ad8d6efacf67c7b54cc06965a88c54a (MD5) Previous issue date: 2008-01-24 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The Guatteria citriodora Ducke is an Amazon species known family Annonaceae, popularly as enviara amarela or laranjinha , that occurs in rain forest on land-firm, with distribution on the states of Amazonas and Pará, being found in Guiane and Suriname. The phytochemical study of stem bark of this plant resulted on isolation of three oxoaporphine alkaloids, O-methylmoschatoline, liriodenine and oxoputerine, common in Annonaceae, and previously obtained from species of Guatteria genus. Their identifications were accomplished through spectroscopic analyses (IR, RMN 1H, HSQC and HMBC) and by comparison with the data of the literature. The essential oil extracted from leaves was analyzed by GC/MS and presented as major constituents the monoterpenoids citronnelal (25.5%) and citronnelol (22.4%). The biological evaluation of this oil showed leishmanicidal activity in vitro against Leishmania guianensis (IC50=12.1±1.5 g/mL), and 94.5% of lethality against Artemia salina Leach, in the concentration of 500 g/mL. The species needs more research for the study of its application, for presenting biotechnical potential in its constituents. / A Guatteria citriodora Ducke é uma espécie amazônica da família Annonaceae, conhecida popularmente como envira-amarela ou laranjinha, a qual ocorre em floresta pluvial de terra firme com distribuição nos estados do Amazonas e Pará, bem como nas Guianas, Suriname, Bolívia, Equador, Colômbia, Peru e Venezuela. O estudo fitoquímico da casca do caule dessa planta resultou no isolamento de três alcalóides oxoaporfínicos, O-metilmoshatolina, liriodenina e oxoputerina, essas substâncias foram previamente isoladas e descritas em espécies do gênero Guatteria. A identificação desses compostos foi realizada por meio de técnicas espectroscópicas (IV, RMN 1H, HSQC e HMBC) e por comparação com dados da literatura. O óleo essencial extraído das folhas foi analisado por CG/EM e apresentou como constituintes majoritários os monoterpenóides citronelal (25,5%) e citronelol (22,4%). A avaliação biológica desse óleo apresentou atividade leishmanicida in vitro contra Leishmania guyanensis (CI50=12,1±1,5 g/mL), e 94,5% de letalidade frente à Artemia salina Leach, na concentração de 500 g/mL. A espécie necessita de mais pesquisa para o estudo de suas aplicabilidades, por apresentar potencial biotecnológico em seus constituintes.

Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior / The Citronellol (CT) is an alcoholic monoterpene present in the essential oil of some medicinal plants such as Cymbopogon citratus. Some pharmacological effects such as the antispasmodic and anticonvulsant activities have been described, however it s possible antinociceptive and anti-inflammatory effect is unknown. Thus, the objective of this study was to evaluate the possible antinociceptive and anti-inflammatory action of CT in rodents. Therefore, 362 male Swiss mice (25-35 g) with 2 to 3 months were used. The animals were divided into groups and were treated with CT (25, 50 and 100 mg/kg, i.p.), vehicle (saline solution 0.9% + Tween 80 0.2%, i.p.) or standard drug (i.p.). To evaluate the antinociceptive activity, the animals were submitted to the test of abdomnal constrictions induced by acetic acid (0.85%), the formalin test (1%) and hot plate test. In order to evaluate the effect of CT on orofacial nociception, it was conducted the orofacial test induced by formalin (2%), capsaicin and glutamate. Motor coordination was assessed using the motor coordination test (rota rod) and the spontaneous movement test. The anti-inflammatory activity was evaluated based on the model of carrageenan-induced pleurisy, making up the total leucocyte count. It was also quantified, by using ELISA, TNF-α and nitric oxide generation by macrophages. To determine the central action, the animals were treated with CT, in three doses, or vehicle and, after ninety minutes, were anesthetized, perfused, the brains removed and cut in a cryostat. The brain sections were subjected to immunofluorescence protocol for Fos protein. Results are expressed as mean ± SEM Differences between groups were analyzed by using one way ANOVA test, and followed by Tukey test. Values of p < 0.05 were considered statistically significant. Intraperitoneal administration of CT produced a significant decrease (p < 0.001) of the abdominal constrictions induced by acetic acid. In nociception induced by formalin, the pretreatment with CT caused a significant antinociceptive effect (p <0.01) in both phases of the test. In the hot plate test, the reaction time increased significantly at all doses of CT (p < 0.05 or p < 0.001), while its effect was antagonized by naloxone. In the three orofacial nociception tests, the CT produced a significant decrease (p <0.001) in the face-rubbing time of the orofacial region. No changes were observed in the motor coordination and in the spontaneous movement test. In the evaluation of anti-inflammatory activity, treatment with CT gave rise to a significant decrease (p < 0.01) in total number of leukocytes, decreasing (p < 0.05) the levels of TNF-α and nitric oxide in macrophages (p < 0.05). By immunofluorescence, it was found that CT is able to activate signicantly (p < 0.05) neurons of the olfactory bulb, the piriform cortex, the restrosplenial cortex and the periaqueductal gray. So, it can be concluded that CT has antinociceptive and anti-inflammatory activity and its action is mediated by central and peripheral mechanisms. / O Citronelol (CT) é um monoterpeno alcóolico presente no óleo essencial de algumas plantas medicinais, como o Cymbopogon citratus. Alguns efeitos farmacológicos tais como anti-espasmódico e atividade anticonvulsivante já foram descritos, sendo desconhecido seu possível efeito antinociceptivo e anti-inflamatório. Desta forma, o objetivo do presente estudo foi avaliar a possível ação antinociceptiva e anti-inflamatória do CT em roedores. Para tanto, foram utilizados 362 camundongos Swiss machos (25 a 35 g) com 2 a 3 meses. Os animais foram divididos em grupos e foram tratados com CT (25, 50 e 100 mg/kg; i.p.), veículo (solução salina 0,9% + tween 80 0,2%; i.p.) ou droga padrão (i.p.). Para avaliação da atividade antinociceptiva, os animais foram submetidos ao teste de contorções abdominais induzidas por ácido acético (0,85%), ao teste da formalina (1%) e ao teste da placa quente. Com o intuito de avaliar a ação do CT na nocicepção orofacial, foram realizados os testes de dor orofacial induzida por formalina (2%), capsaicina e glutamato. A coordenação motora dos animais foi avaliada através do teste da coordenação motora (rota rod) e do teste da movimentação espontânea. A atividade anti-inflamatória foi avaliada a partir do modelo de pleurisia induzido por carragenina, realizando-se a contagem de leucócitos totais. Foi quantificado, ainda, através do ensaio imunoenzimático ELISA, o TNF-α e a geração de óxido nítrico por macrófagos. Para determinar a ação central, os animais foram tratados com CT, nas três doses, ou veículo e, noventa minutos após, foram anestesiados, perfundidos, os cérebros extraídos e cortados em criostato. As secções cerebrais foram submetidas ao protocolo de imunofluorescência para proteína Fos. Os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média. As diferenças entre os grupos foram analisadas por meio do teste de variância ANOVA, uma via, seguido pelo teste de Tukey. Valores de p < 0,05 foram considerados estatisticamente significantes. A administração intraperitoneal de CT produziu uma redução significativa (p < 0,001) das contorções abdominais. Na nocicepção induzida por formalina, o pré-tratamento com CT causou um efeito antinociceptivo significativo (p <0,01) em ambas as fases do teste. No teste da placa quente, o tempo de reação aumentou significativamente em todas as doses de CT (p < 0,05 ou p < 0,001), tendo seu efeito antagonizado pela naloxona. Nos três testes de nocicepção orofacial, o CT produziu uma redução significativa (p < 0,001) no tempo de fricção da região orofacial. Não foram observadas alterações no teste da coordenação motora e no teste da movimentação espontânea. Na avaliação da atividade anti-inflamatória, o tratamento com CT causou uma diminuição significativa (p < 0,01) no número total de leucócitos, diminuindo os níveis de TNF-α (p < 0,05) e de óxido nítrico em macrófagos (p < 0,05). Através da imunofluorescência, observou-se que o CT é capaz de ativar signicativamente (p < 0,05) neurônios do bulbo olfatório, do córtex piriforme, do córtex retroesplenial e da substância cinzenta periaquedutal. Conclui-se, assim, que o CT apresenta ação antinociceptiva e anti-inflamatória, tendo sua ação mediada por mecanismos centrais e periféricos.