A cobalamina (vitamina B12) e o ácido fólico são nutrientes essenciais para síntese de DNA, metionina e S-adenosilmetionina (SAM). A SAM é uma potente doadora de grupo metil necessário nas reações de metilação do DNA. Deficiências dessas vitaminas podem comprometer as concentrações da SAM e, indiretamente, a metilação do DNA. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito das concentrações de vitaminas (no sangue e na dieta), metabólitos (no soro) e do polimorfismo MTHFR C677T na taxa de metilação global do DNA. Participaram do estudo 103 gestantes, das quais foram colhidas amostras de sangue nas idades gestacionais de 16, 28 e 36 semanas. Foram realizadas as determinações dos valores de folato eritrocitário, e das concentrações séricas de folato, cobalamina, vitamina B6, homocisteína (tHcy), metionina, ácido metilmalônico (MMA), SAM e S-adenosilhomocisteína (SAH), além genotipagem para o polimorfismo MTHFR C677T por PCR-RFLP. A taxa de metilação global do DNA foi avaliada indiretamente por reação de extensão usando [3H]dCTP. Para avaliação nutricional foi aplicado um inquérito recordatório de 24 horas no dia de cada coleta. Devido ao uso de suplementação com ácido fólico e/ou polivitamínicos, as participantes foram classificadas em quatro grupos: grupo 1 (50 gestantes que não usaram suplementação); grupo 2 (14 mulheres que fizeram uso de suplementos nas três idades gestacionais); grupo 3 (21 participantes que usaram suplementação até a 16ª semana de gravidez) e grupo 4 (10 gestantes que utilizaram suplementação nas idades gestacionais de 16 e 28 semanas apenas). A taxa de metilação global do DNA foi menor na 28ª semana de gravidez quando comparada àquelas encontradas nas 16 e 36ª semanas em todos os grupos estudados. No grupo 1, as seguintes variáveis: concentrações de folato eritrocitário, vitamina B6 sérica, MMA, SAM, creatinina, vitamina B6 da dieta, proteínas de carnes (dieta), idade gestacional de 36 semanas e o genótipo CT + TT do polimorfismo MTHFR C677T foram associadas com a taxa de metilação do DNA, bem como as interações entre os genótipos CT + TT e folato eritrocitário ou sérico ou SAM; entre folato sérico e vitamina B6; entre creatinina e MMA ou vitamina B6 da dieta, e entre SAM e proteínas de carnes da dieta. As interações entre: 1 - menores concentrações de folato sérico e baixa ingestão de ácido fólico; 2 - maiores concentrações de MMA e baixa ingestão de vitamina B6; 3 - idade gestacional de 36 semanas e genótipo CT + TT do polimorfismo C677T no gene MTHFR foram associadas ao maior risco de apresentar menores taxas de metilação global do DNA no grupo 1. / Cobalamin (B12 vitamin) and folic acid are essential nutrients to DNA, methionine and S-adenosylmethinone (SAM) synthesis. SAM, the main methyl group donator, is necessary to DNA methylation reactions. Cobalamin and folic acid deficiencies might implicate SAM concentrations and, moreover, DNA methylation. The objective of this study was to evaluate the effects of serum vitamin and metabolites, vitamin intake and MTHFR C677T genetic polymorphism on global DNA methylation. Blood samples from 103 pregnant women were collected at gestational age of 16, 28 and 36 weeks. Red blood cell folate levels (RBC fol), and serum concentrations of folate (Fol), cobalamin, B6 vitamin, homocysteine (tHcy), methionine, methylmalonic acid (MMA), SAM and S-adenosylhomocysteine (SAH) were evaluated. The MTHFR C677T polymorphism was detected by PCR-RFLP. A radiolabeled [3H]dCTP extension assay was used to assess the level of global DNA methylation. Nutrient intake was assessed by 24 hour dietary recall applied at 16, 28 and 36 weeks of pregnancy. According to folic acid and/or multivitamins supplementation, women were classified in four groups: group 1 (50 women with no supplementation); group 2 (14 subjects who took supplements at three gestational ages); group 3 (21 women which took supplements until 16 weeks of pregnancy) and group 4 (10 subjects that took supplements at gestational ages of 16 and 28 weeks, but not at 36 weeks). Global DNA methylation level was lower at 28 weeks compared with 16 or 36 weeks.of pregnancy in women from four studied groups. In the group 1, not only values of RBC fol; serum concentrations of B6 vitamin, MMA, SAM and creatinine; vitamin B6 and meat protein intake; gestational age of 36 weeks and MTHFR 677T allele (CT+TT genotypes) were related to global DNA methylation in these women, but also interactions between MTHFR 677T allele and RBC fol or serum Fol or SAM; among serum Fol and B6 vitamin; between creatinine and MMA or vitamin B6 intake; and among SAM and meat protein intake. The following interactions between: 1 - lower serum Fol concentration and lower folate intake; 2 - higher serum MMA concentration and lower B6 vitamin intake; and 3 - gestational age of 36 weeks and MTHFR 677T allele were associated with higher risk of global DNA hypomethylation in pregnant women from group 1.

A cobalamina (vitamina B12) e o ácido fólico são nutrientes essenciais para síntese de DNA, metionina e S-adenosilmetionina (SAM). A SAM é uma potente doadora de grupo metil necessário nas reações de metilação do DNA. Deficiências dessas vitaminas podem comprometer as concentrações da SAM e, indiretamente, a metilação do DNA. O objetivo deste estudo foi avaliar o efeito das concentrações de vitaminas (no sangue e na dieta), metabólitos (no soro) e do polimorfismo MTHFR C677T na taxa de metilação global do DNA. Participaram do estudo 103 gestantes, das quais foram colhidas amostras de sangue nas idades gestacionais de 16, 28 e 36 semanas. Foram realizadas as determinações dos valores de folato eritrocitário, e das concentrações séricas de folato, cobalamina, vitamina B6, homocisteína (tHcy), metionina, ácido metilmalônico (MMA), SAM e S-adenosilhomocisteína (SAH), além genotipagem para o polimorfismo MTHFR C677T por PCR-RFLP. A taxa de metilação global do DNA foi avaliada indiretamente por reação de extensão usando [3H]dCTP. Para avaliação nutricional foi aplicado um inquérito recordatório de 24 horas no dia de cada coleta. Devido ao uso de suplementação com ácido fólico e/ou polivitamínicos, as participantes foram classificadas em quatro grupos: grupo 1 (50 gestantes que não usaram suplementação); grupo 2 (14 mulheres que fizeram uso de suplementos nas três idades gestacionais); grupo 3 (21 participantes que usaram suplementação até a 16ª semana de gravidez) e grupo 4 (10 gestantes que utilizaram suplementação nas idades gestacionais de 16 e 28 semanas apenas). A taxa de metilação global do DNA foi menor na 28ª semana de gravidez quando comparada àquelas encontradas nas 16 e 36ª semanas em todos os grupos estudados. No grupo 1, as seguintes variáveis: concentrações de folato eritrocitário, vitamina B6 sérica, MMA, SAM, creatinina, vitamina B6 da dieta, proteínas de carnes (dieta), idade gestacional de 36 semanas e o genótipo CT + TT do polimorfismo MTHFR C677T foram associadas com a taxa de metilação do DNA, bem como as interações entre os genótipos CT + TT e folato eritrocitário ou sérico ou SAM; entre folato sérico e vitamina B6; entre creatinina e MMA ou vitamina B6 da dieta, e entre SAM e proteínas de carnes da dieta. As interações entre: 1 - menores concentrações de folato sérico e baixa ingestão de ácido fólico; 2 - maiores concentrações de MMA e baixa ingestão de vitamina B6; 3 - idade gestacional de 36 semanas e genótipo CT + TT do polimorfismo C677T no gene MTHFR foram associadas ao maior risco de apresentar menores taxas de metilação global do DNA no grupo 1. / Cobalamin (B12 vitamin) and folic acid are essential nutrients to DNA, methionine and S-adenosylmethinone (SAM) synthesis. SAM, the main methyl group donator, is necessary to DNA methylation reactions. Cobalamin and folic acid deficiencies might implicate SAM concentrations and, moreover, DNA methylation. The objective of this study was to evaluate the effects of serum vitamin and metabolites, vitamin intake and MTHFR C677T genetic polymorphism on global DNA methylation. Blood samples from 103 pregnant women were collected at gestational age of 16, 28 and 36 weeks. Red blood cell folate levels (RBC fol), and serum concentrations of folate (Fol), cobalamin, B6 vitamin, homocysteine (tHcy), methionine, methylmalonic acid (MMA), SAM and S-adenosylhomocysteine (SAH) were evaluated. The MTHFR C677T polymorphism was detected by PCR-RFLP. A radiolabeled [3H]dCTP extension assay was used to assess the level of global DNA methylation. Nutrient intake was assessed by 24 hour dietary recall applied at 16, 28 and 36 weeks of pregnancy. According to folic acid and/or multivitamins supplementation, women were classified in four groups: group 1 (50 women with no supplementation); group 2 (14 subjects who took supplements at three gestational ages); group 3 (21 women which took supplements until 16 weeks of pregnancy) and group 4 (10 subjects that took supplements at gestational ages of 16 and 28 weeks, but not at 36 weeks). Global DNA methylation level was lower at 28 weeks compared with 16 or 36 weeks.of pregnancy in women from four studied groups. In the group 1, not only values of RBC fol; serum concentrations of B6 vitamin, MMA, SAM and creatinine; vitamin B6 and meat protein intake; gestational age of 36 weeks and MTHFR 677T allele (CT+TT genotypes) were related to global DNA methylation in these women, but also interactions between MTHFR 677T allele and RBC fol or serum Fol or SAM; among serum Fol and B6 vitamin; between creatinine and MMA or vitamin B6 intake; and among SAM and meat protein intake. The following interactions between: 1 - lower serum Fol concentration and lower folate intake; 2 - higher serum MMA concentration and lower B6 vitamin intake; and 3 - gestational age of 36 weeks and MTHFR 677T allele were associated with higher risk of global DNA hypomethylation in pregnant women from group 1.

A metilação do DNA é uma alteração epigenética que atua na regulação da expressão gênica. A deficiência de vitaminas (cobalamina, B6 e folato) pode interferir na taxa de metilação. O efeito da deficiência destas vitaminas foi determinado em estudos com cultura de células e em animais. No entanto, são raros os estudos realizados com seres humanos. Os objetivos deste trabalho foram: avaliar a taxa de metilação do DNA de leucócitos na região promotora dos genes Interferon gama (IFNγ), Serpin B5 e Stratifin; verificar se existe associação entre as concentrações das vitaminas e dos metabólitos com a taxa de metilação do DNA dos 3 genes; e analisar quais são os fatores de predição para a taxa de metilação do DNA (variável dependente) considerando como variáveis independentes os valores séricos das vitaminas e metabólitos, em mulheres com idades gestacionais de 16, 28 e 36 semanas. Cento e oitenta e três mulheres foram convidadas a participar desse estudo, porém apenas 96 completaram o estudo prospectivo. Foram determinadas as concentrações séricas da cobalamina (Cbl), folato, vitamina B6, S-adenosilmetionina (SAM), S-adenosilhomocisteína (SAH), ácido metilmalônico (MMA), homocisteína total (tHcy) e folato eritrocitário. A taxa de metilação nos 3 genes foi determinada por qMSP (Quantitative Methylation Specific - Polimerase Chain Reaction). Várias mulheres estavam fazendo uso de suplementação com ácido fólico e/ou polivitamínicos. Diante deste fato foram formados 4 subgrupos: Grupo 1 (constituído por mulheres que não usaram suplementação), Grupo 2 (mulheres que usaram suplementação em todas as idades gestacionais estudadas - 16, 28 e 36 semanas), Grupo 3 (mulheres que usaram suplementação no início da gestação até a 16ª semana) e Grupo 4 (mulheres que usaram suplementação na 16ª e 28ª semana gestacional). Não houve diferença entre as taxas de metilação do DNA dos genes IFNγ, Serpin B5 e Stratifin durante o período gestacional estudado. As taxas de metilação no gene IFNγ do grupo 1 foram maiores, quando comparadas as taxas dos demais grupos. Em modelos de regressão linear múltipla, considerando o período gestacional como um todo, apenas a vitamina B6 e a tHcy foram diretamente associadas aos valores da taxa de metilação do gene IFNγ. No entanto, a vitamina B6 foi inversamente associada, enquanto que tHcy esteve diretamente associada aos valores da taxa de metilação do gene Stratifin. A taxa de metilação não sofre alterações durante a gestação; a vitamina B6 e a tHcy foram os fatores de predição para as taxas de metilação do DNA na região promotora dos genes IFNγ e Stratifin. / DNA methylation is an epigenetic modification that regulates gene expression. Cobalamin, vitamin B6 and folate deficiencies can impair the DNA methylation index. Studies involving cultured cells and animals have evaluated the effect of vitamin deficiencies in DNA methylation. However, few studies were conducted in humans. The goals of this study were: to evaluate the leukocyte DNA methylation index in the promoter region of interferon gamma (IFNγ), Serpin B5 and Stratifin genes; to assess the association between vitamins and metabolites concentrations and DNA methylation index in three genes; and to examine the predictive factors for DNA methylation index using as independent variables: serum folate, serum cobalamin, serum vitamin B6, erythrocyte folate, methylmalonic acid (MMA), total homocysteine (tHcy) in three gestational ages (16th, 28th and 36,th weeks). A hundred eighty three women were included, but only 96 completed the prospective study. The serum concentrations of cobalamin, folate, vitamin B6, S-adenosylmethionine (SAM), Sadenosylhomocysteine (SAH), MMA, tHcy were determined. The erythrocyte folate concentration was also evaluated. The DNA methylation index was determined in three genes by qMSP (Quantitative Methylation Specific - Polymerase Chain Reaction). Several women were taking folic acid supplementation and/or multivitamins. Four groups were formed according to supplementation use: Group 1 (women who take no supplementation), Group 2 (women who took supplements at 16th, 28th and 36th weeks of pregnancy), Group 3 (women who took supplements in early pregnancy and up to 16 weeks) and Group 4 (women who took supplements in the 16th and 28th week of pregnancy). There was no difference between the DNA methylation index in the IFNγ, Serpin B5 and Stratifin genes during the gestational periods studied. The DNA methylation index in the IFNγ gene in group 1 was higher than those indexes from other groups. In multiple linear regression models considering the gestational periods as a whole, only vitamin B6 and tHcy were directly associated to DNA methylation index in IFNγ gene. However, vitamin B6 was inversely associated, whereas tHcy was directly associated with values of DNA methylation in Stratifin. The DNA methylation index does not change during pregnancy, vitamin B6 and tHcy were the predictors of DNA methylation in the promoter region of IFNγ and Stratifin genes.

A metionina sintase redutase (MTRR) catalisa a redução da cobalamina (Cbl) oxidada a metilcobalamina. Em presença de folato, a metionina sintase (MTR) utiliza a metilcobalamina como cofator na metilação da homocisteína (tHcy) a metionina. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos dos polimorfismos MTR A2756G e MTRR A66G nas concentrações dos metabólitos marcadores de deficiência de Cbl e folato em gestantes e neonatos. Os genótipos dos polimorfismos MTR A2756G e MTRR A66G foram obtidos por PCR-RFLP. O genótipo MTR 2756AA foi relacionado aos maiores valores de tHcy em gestantes e MMA em neonatos. Gestantes com genótipos MTRR 66AG e GG e com menores concentrações de Cbl apresentaram maior risco de apresentar concentrações elevadas de tHcy. Neonatos com genótipos com MTRR 66AG e GG apresentaram menores valores de SAM. Os polimorfismos MTR A2756G e MTRR A66G interferem nas reações dependentes de Cbl e folato em gestantes e neonatos. / Methionine synthase reductase (MTRR) catalyzes the reductive reaction of oxidized cobalamin to methylcobalamin. When folate is present, methionine synthase (MTR) uses methylcobalamin cofactor at homocysteine to methionine methylation process. The aim of this study was to evaluate the effects of MTR A2756G and MTRR A66G polymorphisms on total homocysteine (tHcy), methylmalonic acid (MMA), S-adenosylmethionine (SAM) concentrations and SAM/SAH ratio in Brazilian pregnant women and their newborns. Genotypes of two polymorphisms were determined by PCR-RFLP. MTR 2756AA genotype was associated with higher tHcy and MMA levels in mothers and babies, respectivelly. Lower cobalamin concentrations associated with MTRR 66AG and GG genotypes increased risk to elevated tHcy levels in pregnant women. The SAM levels were lower in neonates with MTRR 66AG e GG genotypes. The polymorphisms MTR A2756G and MTRR A66G could affect cobalamin and folate dependent reactions in pregnant women and newborns.

A metionina sintase redutase (MTRR) catalisa a redução da cobalamina (Cbl) oxidada a metilcobalamina. Em presença de folato, a metionina sintase (MTR) utiliza a metilcobalamina como cofator na metilação da homocisteína (tHcy) a metionina. O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos dos polimorfismos MTR A2756G e MTRR A66G nas concentrações dos metabólitos marcadores de deficiência de Cbl e folato em gestantes e neonatos. Os genótipos dos polimorfismos MTR A2756G e MTRR A66G foram obtidos por PCR-RFLP. O genótipo MTR 2756AA foi relacionado aos maiores valores de tHcy em gestantes e MMA em neonatos. Gestantes com genótipos MTRR 66AG e GG e com menores concentrações de Cbl apresentaram maior risco de apresentar concentrações elevadas de tHcy. Neonatos com genótipos com MTRR 66AG e GG apresentaram menores valores de SAM. Os polimorfismos MTR A2756G e MTRR A66G interferem nas reações dependentes de Cbl e folato em gestantes e neonatos. / Methionine synthase reductase (MTRR) catalyzes the reductive reaction of oxidized cobalamin to methylcobalamin. When folate is present, methionine synthase (MTR) uses methylcobalamin cofactor at homocysteine to methionine methylation process. The aim of this study was to evaluate the effects of MTR A2756G and MTRR A66G polymorphisms on total homocysteine (tHcy), methylmalonic acid (MMA), S-adenosylmethionine (SAM) concentrations and SAM/SAH ratio in Brazilian pregnant women and their newborns. Genotypes of two polymorphisms were determined by PCR-RFLP. MTR 2756AA genotype was associated with higher tHcy and MMA levels in mothers and babies, respectivelly. Lower cobalamin concentrations associated with MTRR 66AG and GG genotypes increased risk to elevated tHcy levels in pregnant women. The SAM levels were lower in neonates with MTRR 66AG e GG genotypes. The polymorphisms MTR A2756G and MTRR A66G could affect cobalamin and folate dependent reactions in pregnant women and newborns.