Orientador: João Lauro Viana de Camargo / Resumo: Evidências epidemiológicas sugerem a influência de xenobióticos no aumento da incidência de desordens do trato reprodutor masculino como criptorquidia, hipospadia, baixa qualidade do sêmen e tumores testiculares. Dentre elas, a criptorquidia é a anomalia congênita mais comum em meninos e é um fator de risco para o desenvolvimento de infertilidade e tumor testicular. O objetivo deste estudo foi avaliar morfologicamente os testículos de ratos criptorquídicos expostos in utero e no período pós-natal à acrilamida (AA) ou ao di-n-butil-ftalato (DBP). Durante a gestação e a lactação, as ratas prenhes foram expostas a AA 10 mg/kg/dia ou DBP 500 mg/kg/dia por gavagem e dieta, respectivamente. Após o desmame (dia pós-natal; DPN 21), a prole masculina foi submetida a cirurgia de criptorquidia (CPT), revertida por orquidopexia (R) após três semanas, continuamente expostos aos xenobióticos por dieta até a eutanásia quando com 16, 31 ou 58 semanas de idade. Os testículos foram avaliados por sistema de classificação de danos histológicos, imunohistoquímica para os antígenos tirosina quinase Kit (c-Kit) e fosfatase alcalina placentária (PLAP), e análise morfométrica das células de Leydig. Os resultados mostraram redução do peso corpóreo apenas no grupo AA/CPT-R na 16ª semana, mas ambos os grupos tratados apresentaram uma redução progressiva no peso testicular absoluto e no volume testicular em todos os momentos de estudo. As alterações histológicas apresentaram maior severidade nos grupos A... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Epidemiological evidence suggests the influence of xenobiotics on the increased incidence of male reproductive tract disorders such as cryptorchidism, hypospadias, poor semen quality and testicular tumors. Among them, cryptorchidism is the most common congenital anomaly in boys and is a risk factor for the development of infertility and testicular tumor. The aim of this study was to evaluate morphologically the testes of cryptorchid rats exposed in utero and postnatally to the acrylamide (AA) or di-n-butyl-phthalate (DBP). During gestation and lacta-tion, dams were exposed to AA 10 mg/kg/day or DBP 500 mg/kg/day by gavage and diet, respectively. After weaning (postnatal day; PND 21), male pups were surgically made cryp-torchid (CPT), reverted by orchiopexy (R) three weeks later, continuously exposed to the xe-nobiotics by diet until euthanasia when 16-, 31- or 58-week old. The testes were evaluated by histological damage classification system, immunohistochemical for the antigens tyrosine kinase Kit (c-Kit) and placental alkaline phosphatase (PLAP), and morphometric analysis of Leydig cells. The results showed a decrease in the body weight only in the AA/CPT-R group at 16th week, but both treated groups presented a progressive decrease in the absolute testicu-lar weight and testicular volume in all the moments of study. The histological alterations pre-sented greater severity in the AA/CPT-R and DBP/CPT-R groups. A significant predomi-nance of tubules with c-Kit strongly labe... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Thania Rios Rossi Lima null (thania.lima49@gmail.com) on 2018-03-23T01:44:07Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Ms. Thania_21.03.2018 - FINAL.pdf: 2338346 bytes, checksum: 1a021d8170dc5458c5963409fd3e1384 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Pizzani null (luciana@btu.unesp.br) on 2018-03-26T16:57:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 lima_trr_me_bot.pdf: 2260557 bytes, checksum: fe4f1058d32d837dd267cda79b2f5f46 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-26T16:57:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lima_trr_me_bot.pdf: 2260557 bytes, checksum: fe4f1058d32d837dd267cda79b2f5f46 (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Evidências epidemiológicas sugerem a influência de xenobióticos no aumento da incidência de desordens do trato reprodutor masculino como criptorquidia, hipospadia, baixa qualidade do sêmen e tumores testiculares. Dentre elas, a criptorquidia é a anomalia congênita mais comum em meninos e é um fator de risco para o desenvolvimento de infertilidade e tumor testicular. O objetivo deste estudo foi avaliar morfologicamente os testículos de ratos criptorquídicos expostos in utero e no período pós-natal à acrilamida (AA) ou ao di-n-butil-ftalato (DBP). Durante a gestação e a lactação, as ratas prenhes foram expostas a AA 10 mg/kg/dia ou DBP 500 mg/kg/dia por gavagem e dieta, respectivamente. Após o desmame (dia pós-natal; DPN 21), a prole masculina foi submetida a cirurgia de criptorquidia (CPT), revertida por orquidopexia (R) após três semanas, continuamente expostos aos xenobióticos por dieta até a eutanásia quando com 16, 31 ou 58 semanas de idade. Os testículos foram avaliados por sistema de classificação de danos histológicos, imunohistoquímica para os antígenos tirosina quinase Kit (c-Kit) e fosfatase alcalina placentária (PLAP), e análise morfométrica das células de Leydig. Os resultados mostraram redução do peso corpóreo apenas no grupo AA/CPT-R na 16ª semana, mas ambos os grupos tratados apresentaram uma redução progressiva no peso testicular absoluto e no volume testicular em todos os momentos de estudo. As alterações histológicas apresentaram maior severidade nos grupos AA/CPT-R e DBP/CPT-R. Na 31ª e 58ª semanas, em animais do grupo AA/CPT-R foi encontrada predominância significativa de túbulos com células marcadas com c-Kit associada à redução da imunorreatividade para PLAP; o grupo DBP/CPT-R apresentou redução da imunorreatividade para PLAP na 58ª semana. Na 16ª semana, o volume total ocupado pelas células de Leydig apresentou-se diminuído em ambos os grupos expostos às substâncias químicas; o índice Leydigossomático (volume relacionado a massa corporal) apresentou-se diminuído no grupo DBP/CPT-R. O número de células de Leydig/ml apresentou-se aumentado no grupo DBP/CPT-R na 16ª semana, e também nos grupos AA/CPT-R e DBP/CPT-R nas 31ª e 58ª semanas. Os métodos de avaliação testicular adotados são individualmente capazes de detectar o dano testicular e, particularmente, o comprometimento da espermatogênese. Este modelo experimental mostrou-se útil para avaliar alterações testiculares induzidas por xenobióticos. / Epidemiological evidence suggests the influence of xenobiotics on the increased incidence of male reproductive tract disorders such as cryptorchidism, hypospadias, poor semen quality and testicular tumors. Among them, cryptorchidism is the most common congenital anomaly in boys and is a risk factor for the development of infertility and testicular tumor. The aim of this study was to evaluate morphologically the testes of cryptorchid rats exposed in utero and postnatally to the acrylamide (AA) or di-n-butyl-phthalate (DBP). During gestation and lacta-tion, dams were exposed to AA 10 mg/kg/day or DBP 500 mg/kg/day by gavage and diet, respectively. After weaning (postnatal day; PND 21), male pups were surgically made cryp-torchid (CPT), reverted by orchiopexy (R) three weeks later, continuously exposed to the xe-nobiotics by diet until euthanasia when 16-, 31- or 58-week old. The testes were evaluated by histological damage classification system, immunohistochemical for the antigens tyrosine kinase Kit (c-Kit) and placental alkaline phosphatase (PLAP), and morphometric analysis of Leydig cells. The results showed a decrease in the body weight only in the AA/CPT-R group at 16th week, but both treated groups presented a progressive decrease in the absolute testicu-lar weight and testicular volume in all the moments of study. The histological alterations pre-sented greater severity in the AA/CPT-R and DBP/CPT-R groups. A significant predomi-nance of tubules with c-Kit strongly labeled cells was found in the AA/CPT-R group at the 31st and 58th weeks after birth, associated to reduction of the immunoreactivity for PLAP; DBP/CPT-R group presented decreased immunoreactivity for PLAP at the 58th week. The total volume occupied by Leydig cells decreased in both chemically-exposed groups at the 16th week; Leydig-somatic index (volume related to the body mass) was significantly de-creased in the DBP/CPT-R group. The number of Leydig cells/ml was increased in the DBP/CPT-R group at the 16th week, and in the AA/CPT-R and DBP/CPT-R groups at the 31st and 58th weeks. The methods of testicular evaluation adopted are individually able to detect testicular damage and, particularly, the compromising of the spermatogenesis. This experi-mental model showed to be useful to evaluate testicular alterations induced by xenobiotics. / FAPESP: 2012/09873-4

O objetivo deste trabalho é estudar a incidência, a estrutura dos apêndices testiculares (AT) em pacientes com criptorquia, comparando a sua incidência com as anomalias epididimárias e a patência do processo vaginal. Estudamos 55 pacientes (72 testículos) portadores de criptorquia e 8 testículos como controle (6 hidroceles e 2 torções). Analisamos as relações entre o testículo e o epidídimo, a patência do processo vaginal e a incidência e histologia dos ATs. Fibras musculares lisas (SMC), tecido conectivo (CT) e fibras do sistema elástico (ESF) foram estudados por métodos imuno-histoquímicos. Dos 72 testículos com criptorquia 20 (27.77%) apresentavam anomalias epididimárias, 41(56.9%) tinham processo vaginal patente e 44 (61.1%) tinham apêndices testiculares. Dos 44 testículos portadores de criptorquia com apêndices, 30 (68.18%) apresentavam o processo vaginal patente e 11 (25%) apresentavam anomalias epididimárias. O epitélio não apresentou alteração aparente nos apêndices de pacientes com criptorquia e no grupo controle. Análise estereológica documentou a prevalência de ESF (média de 1.48%); prevalência de vasos (média de 10,11%) e uma diminuição (p=0.14) da SMC nos AT de pacientes com criptorquia (média = 4.93%). O colágeno III prevaleceu nos AT de pacientes com criptorquia. Não houve alteração na incidência de anomalias anatômicas associadas aos testículos portadores de AT. Os apêndices testiculares apresentaram uma alteração estrutural significativa nos pacientes com criptorquia, o que indica que os AT apresentam uma remodelação estrutural significativa nos pacientes com criptorquia. / This work reports the incidence and structure of testicular appendices (TAs) in patients with cryptorchidism, comparing their incidence with epididymal anomalies and patency of the vaginal process. We studied 55 patients (72 testes) with cryptorchidism and 8 testes as controls (6 with hydroceles and 2 with torsion). We analyzed the relations among the testis, epididymis and patency of the vaginal process and prevalence and histology of the TAs. Smooth muscle cells (SMCs), connective tissue (CT) and elastic system fibers (ESFs) were studied by histochemical and immunolabeling methods. Of the 72 testes with cryptorchidism, 20 (27.77%) presented epididymal anomalies, 41 (56.9%) had patent vaginal processes and 44 (61.1%) had TAs. Of the 44 testes with cryptorchidism and appendices, 30 (68.18%) presented patent vaginal processes and 11 (25%) presented epididymal anomalies. There was no apparent alteration of the epithelium in the appendices of patients with cryptorchidism and in the control group. Stereological analysis documented the prevalence of ESFs (mean of 1.48%), prevalence of veins (mean of 10.11%) and decrease (p=0.14) of SMCs in the TAs of patients with cryptorchidism (mean = 4.93%). Collagen III prevailed in the TAs of patients with cryptorchidism. There was no alteration in the incidence of anatomical anomalies associated with the testes with TAs. The testicular appendices presented significant structural alteration in the patients with cryptorchidism, indicating that TAs present a significant structural remodeling in patients with cryptorchidism.

O objetivo deste trabalho é estudar a incidência, a estrutura dos apêndices testiculares (AT) em pacientes com criptorquia, comparando a sua incidência com as anomalias epididimárias e a patência do processo vaginal. Estudamos 55 pacientes (72 testículos) portadores de criptorquia e 8 testículos como controle (6 hidroceles e 2 torções). Analisamos as relações entre o testículo e o epidídimo, a patência do processo vaginal e a incidência e histologia dos ATs. Fibras musculares lisas (SMC), tecido conectivo (CT) e fibras do sistema elástico (ESF) foram estudados por métodos imuno-histoquímicos. Dos 72 testículos com criptorquia 20 (27.77%) apresentavam anomalias epididimárias, 41(56.9%) tinham processo vaginal patente e 44 (61.1%) tinham apêndices testiculares. Dos 44 testículos portadores de criptorquia com apêndices, 30 (68.18%) apresentavam o processo vaginal patente e 11 (25%) apresentavam anomalias epididimárias. O epitélio não apresentou alteração aparente nos apêndices de pacientes com criptorquia e no grupo controle. Análise estereológica documentou a prevalência de ESF (média de 1.48%); prevalência de vasos (média de 10,11%) e uma diminuição (p=0.14) da SMC nos AT de pacientes com criptorquia (média = 4.93%). O colágeno III prevaleceu nos AT de pacientes com criptorquia. Não houve alteração na incidência de anomalias anatômicas associadas aos testículos portadores de AT. Os apêndices testiculares apresentaram uma alteração estrutural significativa nos pacientes com criptorquia, o que indica que os AT apresentam uma remodelação estrutural significativa nos pacientes com criptorquia. / This work reports the incidence and structure of testicular appendices (TAs) in patients with cryptorchidism, comparing their incidence with epididymal anomalies and patency of the vaginal process. We studied 55 patients (72 testes) with cryptorchidism and 8 testes as controls (6 with hydroceles and 2 with torsion). We analyzed the relations among the testis, epididymis and patency of the vaginal process and prevalence and histology of the TAs. Smooth muscle cells (SMCs), connective tissue (CT) and elastic system fibers (ESFs) were studied by histochemical and immunolabeling methods. Of the 72 testes with cryptorchidism, 20 (27.77%) presented epididymal anomalies, 41 (56.9%) had patent vaginal processes and 44 (61.1%) had TAs. Of the 44 testes with cryptorchidism and appendices, 30 (68.18%) presented patent vaginal processes and 11 (25%) presented epididymal anomalies. There was no apparent alteration of the epithelium in the appendices of patients with cryptorchidism and in the control group. Stereological analysis documented the prevalence of ESFs (mean of 1.48%), prevalence of veins (mean of 10.11%) and decrease (p=0.14) of SMCs in the TAs of patients with cryptorchidism (mean = 4.93%). Collagen III prevailed in the TAs of patients with cryptorchidism. There was no alteration in the incidence of anatomical anomalies associated with the testes with TAs. The testicular appendices presented significant structural alteration in the patients with cryptorchidism, indicating that TAs present a significant structural remodeling in patients with cryptorchidism.