MELO, Révila Bianca Ferreira de. Estudo comparativo do perfil proteico do fluido intersticial testicular de espécies de valor zootécnico. 2017. 63 f. Dissertação (Mestrado em Zootecnia)–Universidade Federal do Ceará, Fortaleza, 2017. / Submitted by Francisca Gomes (francisbeserra@yahoo.com.br) on 2017-09-13T18:37:20Z No. of bitstreams: 1 2017_dis_ rbfmelo.pdf: 1100069 bytes, checksum: aaad6fa2df65b3120bad73c18b577398 (MD5) / Approved for entry into archive by Jairo Viana (jairo@ufc.br) on 2017-09-19T21:51:32Z (GMT) No. of bitstreams: 1 2017_dis_ rbfmelo.pdf: 1100069 bytes, checksum: aaad6fa2df65b3120bad73c18b577398 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-09-19T21:51:33Z (GMT). No. of bitstreams: 1 2017_dis_ rbfmelo.pdf: 1100069 bytes, checksum: aaad6fa2df65b3120bad73c18b577398 (MD5) Previous issue date: 2017 / The testicular interstitial fluid (FIT) is located in the interstitial region of the testis, which is synthesized by Leydig cells, lymphatic and blood cells and connective tissue. FIT performs several functions, such as: transport of hormones and nutrients to the seminiferous epithelium, transport of spermatozoa and has influence on endocrine and gametogenic functions of the testis. In the constitution of FIT it is possible to find proteins synthesized by several cell types, such as Sertoli cells, Leydig cells and germ cells. The volume and concentration of certain FIT proteins are sensitive to changes in the endocrine hormones and changes in the local testicular environment, thus, the protein constitution of FIT may reflect the status of spermatogenesis. From the information above, the objective of the present work was to build the protein profile of FIT, in addition to performing a comparative analysis of the protein profile with different species that present zootechnical value (bovine, ovine, rabbit and quail). The FIT was collected by percolation and the proteins were precipitated with cold ethanol (4 ° C). Subsequently, the proteins were sepals by one-dimensional electrophoresis with a 4% mesh in the stacking gel and 10% in the running gel. Then, the protein bands obtained on the gel were analyzed through the QuantityOne® program and compared through the unpaired T-test (p <0.05) through Statview®. 263 bands were detected in the triplicate of bovines, 317 proteins in triplicate of TIF geis of sheep, 218 bands in rabbits and 217 bands in TIF of quail. It was observed that there are 9 bands in common with all species and while in the mammals adopted in the study it was observed that there are 10 bands in common, however, the statistical difference in relation to these bands. Comparing the pattern of the gels made with other studies it was observed that TIF proteins have several origins, such as: blood plasma, seminiferous tubules, seminal plasma and others, and that most TIF proteins are synthesized by the Sertoli cells. Leydig and germinating. From the construction of the protein profile, it was observed that the electrophoresis technique is effective for the detection of protein bands. However, it is necessary to identify mass spectrometry to amplify the information about TIF proteins: origin of these proteins and how they can act under the spermatogenesis. / O fluido intersticial testicular (FIT) é localizado na região intersticial do testículo, ao qual é sintetizado pelas células de Leydig, células linfáticas e sanguineas e tecido conectivo. O FIT desempenha diversas funções, como: transporte de hormônios e nutrientes para o epitélio seminífero, transporte de espermatozoides e apresenta influência em funções endócrinas e gametogênicas do testículo. Na constituição do FIT é possível encontrar proteínas sintetizadas por diversos tipos celulares, como as células de Sertoli, células de Leydig e as células germinativas. O volume e a concentração de determinadas proteínas do FIT são sensíveis a mudanças dos hormônios endócrinos e alterações do ambiente local testicular, dessa maneira, a constituição proteica do FIT pode refletir o status da espermatogênese. A partir das informações acima, o objetivo do presente trabalho foi construir o perfil proteico do FIT, além de realizar uma análise comparativa do perfil protéico com diferentes espécies que apresentam valor zootécnico (bovino, ovino, coelho e codorna). O FIT foi coletado por percolação e, as proteínas foram precipitadas com etanol frio (4°C). Posteriormente, as proteínas foram separdas por eletroforese unidimensional ao qual apresentava uma malha de 4% no gel de empilhamento e 10% no gel de corrida. Em seguida, as bandas proteicas obtidas no gel foram analisadas através do programa QuantityOne® e comparadas através do teste T não pareado (p< 0,05) através do Statview®. Foram detectadas na triplicata 263 bandas na triplicata de bovinos, 317 proteínas na triplicata de geis de TIF de ovinos, 218 bandas em coelhos e 217 bandas em TIF de codorna. Foram observados que existe 9 bandas em comum com todas as espécies e enquanto nos mamíferos adotados no estudo se observou que existe 10 bandas em comum, entretanto, a diferença estatística em relação a essas bandas. Comparando o padrão dos géis confeccionados com outros estudos notou-se que as proteínas do TIF apresentam diversas origens, como: plasma sanguíneo, túbulos seminíferos, plasma seminal e dentre outros e que grande maioria das proteínas do TIF são sintetizada pelas células de Sertoli, de Leydig e germinativas. A partir da construção do perfil protéico, foi observado que a técnica de eletroforese é eficaz para detecção das bandas protéicas. Entretanto, é necessária a identificação da espectrometria de massa para ampliar as informações sobre as proteínas do TIF: origem dessas proteínas e como elas podem atuar sob a espermtogênese.

Made available in DSpace on 2015-07-22T20:49:23Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-09-29 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / A nicotina e altamente consumida, por ser um componente do cigarro. Em gestantes, atravessa a membrana placentaria e esta presente no leite materno. A nicotina induz apoptose em celulas de diferentes orgaos, interfere nas funcoes endocrinas e pode causar atrofia testicular, disfuncoes de erecao e das gonadas, bem como infertilidade masculina. Ela tambem suprime a secrecao de testosterona em ratos tratados na fase adulta. Como a testosterona e produzida por celulas de Leydig a partir do colesterol e este mecanismo envolve a participacao de macrofagos testiculares (importantes para o desenvolvimento pos-natal da celula de Leydig), gerou-se a hipotese de que a nicotina poderia provocar toxicidade testicular via alteracoes morfofuncionais em celulas de Leydig, com possivel envolvimento dos macrofagos. Desta forma, o objetivo desta pesquisa foi investigar se a nicotina administrada a ratas prenhes e lactantes, em dose equivalente a um maco diario de cigarros, consumida por gestantes fumantes, provoca na prole: a) alteracoes dos niveis plasmaticos e intratesticulares de colesterol e dos hormonios sexuais; b) alteracao morfologica e das densidades numericas de celulas de Leydig e macrofagos testiculares; Para tanto, 22 ratas foram tratadas com nicotina durante a gravidez e a lactacao. A nicotina foi administrada atraves de uma minibomba osmotica, calibrada de forma a liberar 2 mg/kg/dia de nicotina (equivalente ao consumo de 20 cigarros/dia). A minibomba foi implantada subcutaneamente, no dorso da rata, no primeiro dia de prenhez e substituida no 1 ‹ dia apos o nascimento (periodo de lactacao), garantindo a exposicao ate o desmame (22dpp). Minibombas sem nicotina foram implantados em outras 22 ratas prenhes e lactantes (grupo controle gSham h) com o objetivo de verificar a inocuidade deste procedimento. Mais 22 ratas prenhes e lactantes nao receberam qualquer tratamento ou manipulacao (grupo controle absoluto). Os filhotes machos provenientes de cada rata foram distribuidos em 4 subgrupos de acordo com a idade de eutanasia (1, 30, 60 e 90dpp). Apos a analise biometrica (peso e volume), os testiculos foram processados para analise histopatologica (historresina e parafina; metodo do PAS+H) e para analises imuno-histoquimicas (inclusoes em parafina) para marcacao de celulas de Leydig adultas (anticorpo anti-enzima esteroidogenica 11ƒÀ-HSD II) e de macrofagos residentes (anticorpo anti-ED2). As densidades numericas das celulas de Leydig e dos macrofagos foram computadas atraves do sistema de analise de Imagem Leica Q-Win. Foram realizadas dosagens plasmáticas de colesterol e testosterona (em todas as idades) e estradiol (30, 60 e 90 dias), além das dosagens intratesticulares de colesterol e testosterona (60 e 90 dias). Para comprovação da presença de nicotina no leite e de sua transferência para os filhotes, a nicotina e seu metabólito, a cotinina, além de seus subprodutos, foram detectados no leite materno, na urina e no plasma dos filhotes em fase de amamentação, por cromatografia. Os resultados da cromatografia confirmaram a passagem destas substâncias para a circulação sanguínea dos neonatos. Animais do subgrupo tratado apresentaram, ao nascimento, redução de peso corpóreo (p<0,05) e do colesterol plasmático (p<0,05), além de uma sugestiva redução da quantidade de gotículas de lipídeo no citoplasma das células de Leydig fetais. Aos 30 dias de idade, os testículos da prole exposta à nicotina apresentaram redução do peso (p<0,05) e do volume testicular (p<0,05) em relação ao controle absoluto. Aos 60 e 90 dias, os animais dos subgrupos tratados apresentaram peso corpóreo levemente maior (p<0,05) que o subgrupo controle absoluto e, aos 90 dias, tanto a dosagem de colesterol (p<0,05) quanto a dosagem de testosterona plasmática foram maiores no subgrupo tratado (p<0,05) em relação a ambos os controles. Embora não tenham ocorrido diferenças nas densidades numéricas de células de Leydig e macrófagos, a análise histopatológica mostrou, aos 60 e 90 dias, uma incidência maior de células de Leydig em degeneração, além de intensa descamação e desorganização do epitélio seminífero. Aos 90 dias, acompanhando o aumento de colesterol e testosterona, observou-se também uma sugestiva hipertrofia das células de Leydig e maior incidência de anáfases e metáfase meióticas, além de núcleos de célula de Sertoli soltos no lúmen. Como os níveis de estradiol se mostraram sutilmente reduzidos nas três idades analisadas (30, 60 e 90 dias), é possível que a ação da nicotina sobre o testículo possa ter provocado também alterações das células de Sertoli. Concluiu-se que a nicotina afeta o metabolismo de colesterol e testosterona, causa alterações morfofuncionais nas células de Leydig e alterações da espermatogênese e provoca redução do número de neonatos oriundos de ratas tratadas durante toda a prenhez, induzindo nestes a ocorrência de baixo peso corpóreo e de baixo índice de colesterol plasmático. Contudo, alterações quantitativas das populações de células de Leydig e de macrófagos testiculares das proles não foram observadas nas diferentes fases do desenvolvimento sexual. / Nicotine is largely consumed by worldwide people since it is a component of cigarettes. It reaches the maternal milk and is able to cross the placental membrane. Nicotine induces apoptosis in different cell types and interferes with endocrine functions. Reproductive side effects of this drug, such as testicular atrophy, erectile dysfunction and male infertility were also described. Nicotine suppresses testosterone secretion in adult male rats. Testosterone is produced from cholesterol and is synthesized by Leydig cells, with participation of the testicular resident macrophages, which are important for post-natal Leydig cell development. These data raised the hypothesis that the testicular damage induced by nicotine could be mediated by alterations or even apoptosis of Leydig cells. Because macrophages are also involved in testosterone synthesis and Leydig cell development, it is reasonable to consider the role of these cells in the nicotine-induced testicular damage. Given the complex testicular paracrine regulation, it is probable that such alterations induce germ cell damage in the post-natal phase. Thus, the aim of this study was to investigate whether the administration of nicotine to pregnant and lactating rats, in a dose equivalent to the consumption of one packet of cigarettes per day, provokes: a) alterations of cholesterol and sexual hormone levels in the plasma and in the testis; b) morphological and numerical alterations of Leydig cells and testicular macrophages. For this, 22 rats were treated with nicotine during pregnancy and lactation. Nicotine was administrated using an osmotic minipump calibrated in way to release 2mg/Kg/day of nicotine (equivalent to the consumption of 20 cigarettes/day). The minipump was implanted subcutaneously at the first day of pregnancy and replaced just after birth (lactation period). The second minipump was removed at the weaning day (22dpp). Minipumps without nicotine were implanted in other 22 pregnant and lactating rats (Sham group) with the aim to check the innocuousness of this procedure. More 22 pregnant and lactating rats did not receive any treatment or manipulation (Control group). The male pups of each offspring were distributed in 4 subgroups according to the age of euthanasia (1, 30, 60 and 90dpp). The testes were submitted to biometric analysis (weight and volume) after what they were processed for histopathological study (historesin and paraffin sections/PAS+H) and immuno-detection of adult Leydig cell (anti-11â-HSD type 2) and resident macrophages (anti-ED2). The numerical densities of Leydig cells and ED2+ macrophages were obtained using the Leica Q-Win image analysis system. Plasma levels of cholesterol and testosterone (all ages) and estrogen (30, 60 and 90 dpp) as well as intratesticular cholesterol and testosterone (60 and 90 dpp) were investigated. Plasma, urine and milk cotinine and nicotine levels were obtained at 22ddp by chromatography. The results showed that nicotine provoked decrease of body weight (p<0.05) and cholesterol plasma level (p<0.05) at (1dpp), besides the suggesting reduced lipids in the fetal Leydig cells cytoplasm. Decrease of testicular weight and volume occurred at 30dpp (p.0.05) but not at 60dpp and 90dpp. At 60 and 90dpp, the nicotine-treated rats showed increase of body weight and at 90dpp the nicotine-treated rats show increased in plasma cholesterol and testosterone levels (p<0.05). Although no alterations of the numerical densities of macrophages and Leydig cells were observed, the histopathological analysis showed that, at 60 and 90dpp, there was an increase of the frequency of degenerating Leydig cells and a pronounced disorganization and sloughing of the seminiferous epithelium. At 90dpp a suggestive hypertrophy of Leydig cells was also observed, what parallels the increase of cholesterol and testosterone levels. At this age a suggestive increase of the frequency of meiotic anaphase and metaphase figures and Sertoli cell nuclei in the tubular lumen were also observed. Since a subtle reduction of the estradiol levels was observed at the three ages studied (30, 60 and 90dpp), it is possible to suggest that the action of nicotine in the testis caused Sertoli cell alterations. Finally, it was concluded that nicotine provokes a reduction of the offspring number, body weight and cholesterol plasma level when administered to females during the whole pregnancy period. It was also concluded that nicotine administration in rats during the whole pregnancy period and during lactation affects the metabolism of cholesterol and testosterone and leads to morphofunctional alterations of Leydig cells and of spermatogenesis in the adult offspring. On the other hand, this treatment does not cause quantitative alterations of Leydig cell and macrophage populations. / TEDE / BV UNIFESP: Teses e dissertações

Introdução: O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da exposição em níveis habituais de poluição atmosférica em um ambiente urbano na função testicular de ratos. Método: Vinte ratos Wistar foram randomicamente alocados, desde o período fetal, em duas câmaras de exposição, filtrada (grupo CF) e não filtrada (grupo CNF). As câmaras foram construídas perto de uma área de tráfego intenso, com uma concentração ambiente média de material particulado de até 2.5 nanômetros de diâmetro (PM2.5) de 22.1 μg/m3. Após 150 dias os ratos foram mortos por guilhotinamento e a massa testicular, o estresse oxidativo do homogeneizado testicular e a concentração de testosterona total sérica e intra-testicular foram aferidos. Além disto, uma avaliação histológica testicular qualitativa e quantitativa foi realizada. Para cada rato, 10 tubulos seminíferos arredondados consecutivos em ciclo VII-VIII da espermatogênese foram avaliados em relação aos seguintes parâmetros: diâmetro tubular médio; contagem celular histológica de espermátides redondas, paquítenos e células de Sertoli com nucléolo evidente; avaliação das proporções entre estes tipos celulares. Resultados: As massas testiculares absolutas (gm) foram menores no grupo CNF (1.86 ± 0.18 vs 1.64 ± 0.13; p < 0.01). As médias das testosteronas sérica (ng/dL) e intratesticular (ng/gm de testículo) foram 2.8 vezes maiores no grupo CNF (respectivamente, 208 ± 109 vs 577 ± 395; p = 0.02 e 26.6 ± 17.2 vs 106.3 ± 76.5; p = 0.01). Não houve diferença estatística entre os grupos CF e CNF em relação ao estresse oxidativo do homogeneizado testicular e aos desfechos histológicos avaliados. Conclusões: Ratos machos expostos à poluição atmosférica em concentrações de ambientes urbanos apresentam testículos com menor massa e concentrações séricas e intra-testiculares de testosterona total maiores que ratos respirando ar filtrado. A espermatogênese, avaliada por contagem celular histológica, não foi influenciada pela exposição a estes níveis de poluição atmosférica.

Introdução: O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da exposição em níveis habituais de poluição atmosférica em um ambiente urbano na função testicular de ratos. Método: Vinte ratos Wistar foram randomicamente alocados, desde o período fetal, em duas câmaras de exposição, filtrada (grupo CF) e não filtrada (grupo CNF). As câmaras foram construídas perto de uma área de tráfego intenso, com uma concentração ambiente média de material particulado de até 2.5 nanômetros de diâmetro (PM2.5) de 22.1 μg/m3. Após 150 dias os ratos foram mortos por guilhotinamento e a massa testicular, o estresse oxidativo do homogeneizado testicular e a concentração de testosterona total sérica e intra-testicular foram aferidos. Além disto, uma avaliação histológica testicular qualitativa e quantitativa foi realizada. Para cada rato, 10 tubulos seminíferos arredondados consecutivos em ciclo VII-VIII da espermatogênese foram avaliados em relação aos seguintes parâmetros: diâmetro tubular médio; contagem celular histológica de espermátides redondas, paquítenos e células de Sertoli com nucléolo evidente; avaliação das proporções entre estes tipos celulares. Resultados: As massas testiculares absolutas (gm) foram menores no grupo CNF (1.86 ± 0.18 vs 1.64 ± 0.13; p < 0.01). As médias das testosteronas sérica (ng/dL) e intratesticular (ng/gm de testículo) foram 2.8 vezes maiores no grupo CNF (respectivamente, 208 ± 109 vs 577 ± 395; p = 0.02 e 26.6 ± 17.2 vs 106.3 ± 76.5; p = 0.01). Não houve diferença estatística entre os grupos CF e CNF em relação ao estresse oxidativo do homogeneizado testicular e aos desfechos histológicos avaliados. Conclusões: Ratos machos expostos à poluição atmosférica em concentrações de ambientes urbanos apresentam testículos com menor massa e concentrações séricas e intra-testiculares de testosterona total maiores que ratos respirando ar filtrado. A espermatogênese, avaliada por contagem celular histológica, não foi influenciada pela exposição a estes níveis de poluição atmosférica.

Introdução: O objetivo deste estudo foi avaliar os efeitos da exposição em níveis habituais de poluição atmosférica em um ambiente urbano na função testicular de ratos. Método: Vinte ratos Wistar foram randomicamente alocados, desde o período fetal, em duas câmaras de exposição, filtrada (grupo CF) e não filtrada (grupo CNF). As câmaras foram construídas perto de uma área de tráfego intenso, com uma concentração ambiente média de material particulado de até 2.5 nanômetros de diâmetro (PM2.5) de 22.1 μg/m3. Após 150 dias os ratos foram mortos por guilhotinamento e a massa testicular, o estresse oxidativo do homogeneizado testicular e a concentração de testosterona total sérica e intra-testicular foram aferidos. Além disto, uma avaliação histológica testicular qualitativa e quantitativa foi realizada. Para cada rato, 10 tubulos seminíferos arredondados consecutivos em ciclo VII-VIII da espermatogênese foram avaliados em relação aos seguintes parâmetros: diâmetro tubular médio; contagem celular histológica de espermátides redondas, paquítenos e células de Sertoli com nucléolo evidente; avaliação das proporções entre estes tipos celulares. Resultados: As massas testiculares absolutas (gm) foram menores no grupo CNF (1.86 ± 0.18 vs 1.64 ± 0.13; p < 0.01). As médias das testosteronas sérica (ng/dL) e intratesticular (ng/gm de testículo) foram 2.8 vezes maiores no grupo CNF (respectivamente, 208 ± 109 vs 577 ± 395; p = 0.02 e 26.6 ± 17.2 vs 106.3 ± 76.5; p = 0.01). Não houve diferença estatística entre os grupos CF e CNF em relação ao estresse oxidativo do homogeneizado testicular e aos desfechos histológicos avaliados. Conclusões: Ratos machos expostos à poluição atmosférica em concentrações de ambientes urbanos apresentam testículos com menor massa e concentrações séricas e intra-testiculares de testosterona total maiores que ratos respirando ar filtrado. A espermatogênese, avaliada por contagem celular histológica, não foi influenciada pela exposição a estes níveis de poluição atmosférica.

Orientador: Prof. Dr. Rogério de Fraga / Coorientador: Prof. Dr. Fernando Lorenzini / Dissertação (mestrado) - Universidade Federal do Paraná, Setor de Ciências da Saúde, Programa de Pós-Graduação em Clínica Cirúrgica. Defesa: Curitiba, 17/07/2017 / Referências: p. 47-49 / Resumo: Introdução: As células de Leydig são responsáveis pela produção de testosterona e sofrem os efeitos deletérios do envelhecimento. Com o avançar da idade, ocorre uma diminuição na esteroidogênese por alterações celulares ainda pouco conhecidas. Objetivos: Analisar os efeitos do envelhecimento nos ratos sobre o volume nuclear, citoplasmático, volume total e o número absoluto das células de Leydig. Material e métodos: Selecionados 72 ratos machos Wistar, aleatoriamente divididos em seis subgrupos com 12 roedores cada. Os animais foram submetidos à orquietomia direita aos 3, 6, 9, 12, 18 e 24 meses de vida. Foram avaliados o peso e o volume do testículo direito. Realizado estudo estereológico das células de Leydig com medidas do volume nuclear, citoplasmático, volume total e contabilizado o número destas células. Resultados: O peso e o volume dos testículos apresentaram reduções que acompanharam o desenvolvimento corporal dos ratos. O volume nuclear apresentou redução no subgrupo de ratos com 24 meses de vida. O volume citoplasmático e o volume total das células de Leydig apresentaram reduções significativas nos subgrupos de ratos idosos (18 e 24 meses). Não houve redução na contagem das células de Leydig nos subgrupos. Conclusão: O envelhecimento nos ratos causou alterações nas células de Leydig, caracterizadas pela redução do volume nuclear, citoplasmático e total. Não houve variação numérica destas células. Palavras-chave: Envelhecimento. Ratos. Testículo. Células de Leydig. Estereologia. Hipogonadismo. Testosterona. / Abstract: Introduction: Leydig cells are responsible for producing testosterone and suffer the deleterious effects of time. With aging, there is a decrease in testosterone production due to cellular changes that remain unknown. Purpose: To analyze the effects of aging in rats on the nuclear volume, cytoplasmic volume, and total volume of Leydig cells, as well as their number. Methods: Seventy-two Wistar rats were divided into six subgroups of 12 rats, which underwent right orchiectomy at 3, 6, 9, 12, 18, and 24 months of age. The weight and volume of the resected testicles were assessed. A stereological study of Leydig cells was conducted, which included measurements of cell number and nuclear, cytoplasmic, and total cell volumes. Results: The weight and volume of the resected testicles showed reductions with age. Only the subgroup composed of 24-month old rats showed a decrease in the nuclear volume of Leydig cells. Significant reductions in the cytoplasmic volume and total volume of Leydig cells were observed in 18- and 24-month old rats. The number of Leydig cells did not vary significantly with age. Conclusion: Aging in rats resulted in reduction of the nuclear, cytoplasmic, and total cell volumes of Leydig cells. There was no change in the total number of these cells during aging. Keywords: Aging. Rats. Leydig Cells. Testicle. Hypogonadism. Testosterone. Stereology

A regulação do processo de maturação e manutenção do metabolismo das células de Sertoli é fundamental para a promoção adequada da fertilidade masculina. Além dos hormônios andrógenos, com a testosterona (T), os retinóides possuem papel fundamental na regulação e manutenção da espermatogênese. Sabe-se que além dos efeitos individuais, os retinóides interagem com outros hormônios, modulando suas ações. Este trabalho teve como objetivos estudar as possíveis interações nas vias de sinalização do retinol e da T em rápidas respostas mediadas pela membrana plasmática, verificando a influência destes hormônios sobre o influxo de cálcio, analisando a influência dos canais de cálcio dependentes de voltagem do tipo L (CCDV-L) e dos canais de potássio dependentes de voltagem (Kv) em testículos de ratos imaturos de 10 dias de idade. Também foi objetivo deste trabalho analisar a resposta eletrofisiológica destes hormônios em cultura primária de células de Sertoli. Na técnica de influxo de cálcio foi realizada curva de dose-resposta, onde os tecidos foram tratados com retinol ou testosterona, por 2 minutos, nas concentrações 10-12, 10-9 e 10-6 M e 10-9 e 10-6 M, respectivamente. Após definido a concentração para os demais experimentos, foi analisado a interação entre estes dois hormônios. Em seguida foi verificada a influência dos canais CCDV-L e Kv, através da utilização dos bloqueadores nifedipina e cloreto de tetraetilamônio (TEA), respectivamente. Também foi realizada a técnica de eletrofisiologia Patch Clamp em whole cell onde foi analisada a atividade das correntes de potássio através da ação não clássica destes hormônios. Concluímos que o retinol estimula o influxo de cálcio em testículos de ratos imaturos. Este efeito estimulatório ocorre através dos CCDV-L e em parte através dos canais Kv. A T também estimula o influxo de cálcio em testículos de ratos imaturos. Este efeito estimulatório ocorre através dos canais Kv e em parte através dos CCDV- L. Além disso, o retinol e a T estimulam as correntes do íon potássio através da abertura dos canais de Kv das células de Sertoli imaturas de cultura primária. O retinol e a T interagem entre si, agindo de forma sinérgica, estimulando ainda mais o influxo de cálcio quando aplicados simultaneamente, demonstrando que sua ação é 6 desencadeada pela abertura de diferentes tipos de canais iônicos.

Orientador: Fábio Erminio Mingatto / Resumo: Fipronil é um inseticida de amplo-espectro de ação, utilizado para o controle de pragas nas lavouras e de ectoparasitas na medicina veterinária. O objetivo do trabalho foi avaliar os efeitos tóxicos do fipronil sobre a fertilidade de ratos machos por meio da avaliação da produção de espermatozoides e de danos oxidativos causados no homogenato de testículos, além de avaliar a ação protetora da vitamina E. Ratos Wistar machos pesando aproximadamente 200 g foram divididos em três grupos (n = 6): controle: DMSO (60%) mais salina (40%) por via intraperitoneal (i.p.); fipronil 5: fipronil dissolvido em DMSO (60%) mais salina (40%) (5 mg/kg de peso corporal i.p.); fipronil 5 + vitamina E: fipronil dissolvido em DMSO (60%) mais salina (40%) (5 mg/kg de peso corporal i.p.) e vitamina E (100 mg/kg de peso vivo via oral).Durante 14 dias os animais foram pesados e cada grupo recebeu seu respectivo tratamento conforme citado, sendo que no 15º dia os animais foram eutanasiados e os testículos e epidídimos foram isolados para realização das seguintes análises: concentração de espermatozoides nos epidídimos, atividade das enzimas glutationa peroxidase (GPx) e catalase (CAT), determinação das concentrações de glutationa reduzida (GSH), grupos tióis de proteínas e malondialdeído (MDA) no homogenato dos testículos. Os dados foram analisados por ANOVA seguido pelo teste de Tukey. O fipronil reduziu significantemente a produção de espermatozoides (P < 0,01) e a vitamina E apresentou efeito prote... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Mestre

Made available in DSpace on 2015-12-06T23:02:30Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2002 / Com o objetivo de contribuir para o conhecimento da biologia reprodutiva do peru Meleagris gafopavo, descreveu-se, nesta pesquisa, a morfologia, histoquimica e morfometria de orgaos genitais masculinos desta especie, utilizando as tecnicas histologicas de rotina, coloracoes histoquimicas e analises morfometricas. O testiculo, epididimo e ducto deferente sao orgaos pares, situados simetricamente de cada lado da linha mediana corporal, no interior da cavidade celomatica. Revestido por delicada tunica albuginea, o testiculo apresenta riqueza em tubulos seminiferos (76,4 por cento do conteudo testicular) e escasso tecido intertubular. No epitelio seminifero sao observadas celulas de Sertoli; espermatogonias (A escura, A clara 1, A clara 2 e 13); espermatocitos e espermatides, em 13 etapas de diferenciacao. O ciclo do epitelio seminifero apresenta 11 estagios, descritos de acordo com as mudancas observadas no acrossoma, forma do nucleo e aspecto da cromatina das espermatides, durante a espermiogenese. O epididimo e constituido pela rede testicular ductulo eferente, ductulo de ligacao e ducto epididimario, mostrando diferencas no epitelio de revestimento, de acordo com a estrutura analisada A positividade aos metodos histoquimicos observada na tunica albuginea, tecido conjuntivo peritubular e membrana basal do epitelio dos tubulos seminiferos e dos componentes das vias genitais, indica presenca de glicosaminoglicanas caboxiladas, sulfatadas, bem como glicoproteinas' ricas em acido sialico. O epitelio seminifero e negativo aos metodos do acido periodicoreativo de Shiff (PAS) e do azul de Alcian. O epitelio dos ductulos eferentes e o unico do epididimo que mostra caracteristicas de celulas secretoras de glicoproteinas neutras. Revestido por epitelio pseudoestratificado prismatico, o ducto deferente e longo e abre-se no urodeo da cloaca, atraves de papila. E positivo aos metodos histoquimicos somente nos segmentos medio e caudal, sendo capaz de secretar glicosaminoglicanas caboxiladas, sulfatadas e glicoproteinas ricas em acido sialico...(au) / BV UNIFESP: Teses e dissertações

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