O mecanismo não clássico de testosterona induz resposta celular rápida ao nível de membrana, enquanto que a ação clássica se dá pela ligação da testosterona ao seu receptor androgênico intracelular (iAR) que regula a expressão gênica. A Epitestosterona, o 17α-epímero da testosterona, tem sido descrito como um anti-andrógeno, inibindo o efeito da testosterona ou diidrotestosterona sobre o sobre o iAR. No entanto, a epitestosterona apresenta um efeito não clássico similar ao da da testosterona, despolarizando o potencial de membrana das células de Sertoli e induzindo a captação rápida de Ca2+ nos testículos. O objetivo deste estudo foi analizar o efeito do tratamento com epitestosterona e testosterona em animais castrados quimicamente com a utilização de um antagonista do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH), o cetrorelix. Ratos imaturos, a partir do 7º dia de idade receberam durante 7 dias o tratamento pela via intraperitoneal de acordo com os seguintes grupos: Controle (apenas o veículo hidroxipropil-beta-ciclodextrina, castrados (Cetrorelix (500 μg/kg/dia)), castrados com reposição de testosterona (2,5mg/kg/dia) (Cetrorelix+testosterona), castrados com reposição de epitestosterona (2,5mg/kg/dia) (cetrorelix+epitestosterona) e epitestosterona. Foram observados os efeitos dos tratamentos em parâmetros de desenvolvimento sexual de ratos imaturos como: peso corporal, peso testicular e medida da distância anogenital (DAG). Também foram feitos registros eletrofisiológicos da ação no potencial de membrana da testosterona nos túbulos seminíferos de testículos de ratos de todos os tratamentos. Para a avaliação a imunorreatividade ao iAR foi utilizado o anticorpo primário anti-iAR do tipo policlonal na concentração 1:250. Para o controle-negativo da técnica cortes de todas os tratamentos incubados com PBS-T. Para expressão foi utilizado o anticorpo primário anti-iAR do tipo policlonal na concentração de 1:1000 realizada pela técnica de Western Blot. A castração química com cetrorelix resultou na redução no peso dos testículos e da DAG. O tratamento com epitestosterona e testosterona restaurou tanto o peso testicular como a DAG. O efeito despolarizante em resposta à aplicação tópica da testosterona foi observado no grupo controle e no grupo de cetrorelix. Além disso, o grupo castrado com cetrorelix com reposição de epitestosterona impediu o efeito rápido da testosterona na despolarização da membrana celular. No grupo com reposição de testosterona, a resposta eletrofisiológica da testosterona na membrana também foi alterada. O tratamento com epitestosterona nos ratos castrados com cetrorelix produziu diminuição da expressão do iAR. Foi observada redução da imunorreatividade do iAR nos animais tratados com epitestosterona. Pode-se concluir que a epitestosterona participa do desenvolvimento genital em ratos imaturos, ou seja, produziu recuperação de AGD de forma semelhante à testosterona. Este resultado sugere que ambos os hormônios atuam pela mesma via de desenvolvimento deste parâmetro, provavelmente através de um mecanismo não-clássico. Além disso, o tratamento com o antagonista de GnRH e reposição de epitestosterona suprimiu a resposta não clássica da testosterona, mudando o padrão de via de sinalização da testosterona nas células de Sertoli. / The non-classical mechanism of testosterone induces a rapid cellular response at the membrane level, while the classical action is through the binding to the intracellular androgenic receptor (iAR) and the regulation of gene expression. Epitestosterone, the 17α-epimer of testosterone, has been described as an anti-androgen, inhibiting the testosterone or dihyidrotestosterone effect on the iAR. However, epitestosterone presents a non-classical effect similar to testosterone, depolarizing the membrane potential of Sertoli cells and inducing rapid Ca2+ uptake in testes. The aim of this study was to observe the effect of the treatment with epitestosterone and testosterone in rats chemically castrated with a gonadotropin-releasing hormone (GnRH) antagonist cetrorelix. From pnd 7 to pnd 14, the rats were given daily intraperitoneal injections with (i) hormones solvent, (2-hydroxypropyl β-cyclodextrin) as the control group (CTRL); (ii) 500 μg/kg/day of the GnRH antagonist cetrorelix as the cetrorelix group (CET); (iii) 500 μg/kg/day of cetrorelix + 2.5 mg/kg/day of testosterone as the cetrorelix plus testosterone group (CET+T); (iv) 500 μg/kg/day of cetrorelix + 2.5 mg/kg/day of epitestosterone as the cetrorelix plus epitestosterone group (CET+EpiT); and (v) 2.5 mg/kg of epitestosterone alone as the epitestosterone group (EpiT). The effect of different treatments were verified on the body and testicular weight and the anogenital distance (AGD). The potential and the membrane resistance of Sertoli cells were recorded by electrophysiological technique intracellular record. The electrophysiological effect of testosterone on membrane of Sertoli cells were evaluated in seminiferous tubules in testes from rats of the all experimental groups. For evaluating the immunoreactivity to the iAR we used the anti-iAR primary polyclonal antibody type in concentration 1: 250. For the negative control technique cuts all treatments incubated with PBS-T. For iAR expression we used the anti-iAR type polyclonal primary antibody at a concentration of 1: 1000 performed by the Western Blot technique. The chemical castration induced a reduction in testicular weight and AGD. The treatment with both epitestosterone and testosterone restored the AGD and the testicular weight. The depolarizing effect in response to topical testosterone application was observed in the control group and in the GnRH antagonist cetrorelix group. Moreover, in the GnRH antagonist cetrorelix replaced with the epitestosterone group, testosterone was not capable of changing the membrane potential. In the group replaced with testosterone, the membrane response to testosterone was smaller also. The treatment with epitestosterone in castrated rats also reduced the expression of the iAR in testes. The immunoreaction of iAR was reduced in the animals treated with epitestosterone. In conclusion, the effect of epitestosterone on genital development in immature rats, namely recovering of AGD, was similar to testosterone. This result suggest that both hormones act through the same pathway on this development parameter, probably by a non-classical mechanism. Additionally, the treatment with the GnRH antagonist plus epitestosterone suppressed the non-classical testosterone response, changing the pattern of testosterone signaling pathway through a membrane mechanism in Sertoli cells.

Made available in DSpace on 2015-05-27T13:34:57Z (GMT). No. of bitstreams: 2 747.pdf: 10524070 bytes, checksum: 63a709d300bc2d5346c2615523f68418 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2010 / Fundação Oswaldo Cruz. Centro de Pesquisas Aggeu Magalhães. Recife, PE, Brasil / O inibidor de fosfodiesterase-5 (PDE5), Sildenafil, é uma nova abordagem de tratamento oral para a hipertensão pulmonar. O esquema terapêutico envolve administração de doses elevadas diariamente e, até o momento, se desconhece a ação O inibidor de fosfodiesterase-5 (PDE5), Sildenafil, é uma nova abordagem de tratamento oral para a hipertensão pulmonar. O esquema terapêutico envolve a administração de doses elevadas diariamente e, até o momento, se desconhece a ação desta droga sobre células germinativas. Uma vez que as células de Leydig e células peritubulares apresentam a PDE5, este estudo foi conduzido para investigar os efeitos do tratamento crônico com Sildenafil sobre as células de Leydig e espermatozóides de camundongos. Após o ensaio experimental, células de Leydig e espermatozóides foram analisados por procedimentos morfológicos, imunocitoquímicos e moleculares, e a testosterona no soro foi avaliada por radioimunoensaio. Inúmeras alterações foram observadas após o tratamento. As células de Leydig apresentaram modificações ultra-estruturais, tais como REL vesicular, grandes vacúolos distribuídos no citoplasma, gotículas de lipídio claras, mitocôndrias dilatadas e círculos concêntricos de REL com vesículas na periferia, que são características típicas de células secretoras de esteróides ativadas. Os espermatozóides apresentaram mitocôndrias vacuolizadas. Um aumento na expressão da StAR, P450scc, testosterona, GCs, PKA e PKGI foi detectado nas células de Leydig. As sintases de óxido nítrico não foram detectadas nas células de Leydig pela técnica de western blot. Nos espermatozóides, a imunocitoquímica revelou uma diminuição na expressão da GCs e PKA, mas nenhuma alteração na marcação foi observada para a PKG. Nenhuma mudança significativa foi observada nos parâmetros de motilidade, viabilidade, integridade de acrossoma e DNA de espermatozóides. Adicionalmente, os níveis de testosterona no soro tornaram-se aumentados após quatro semanas de tratamento. Os resultados do presente estudo são consistentes com a hipótese de que a acumulação de GMPc, pela inibição da PDE5, e a ativação de suas vias dependentes estariam envolvidas na estimulação da biossíntese de androgênio e mudanças espermáticas. E testosterona no soro tornaram-se aumentados após quatro semanas de tratamento. Os resultados do presente estudo são consistentes com a hipótese de que a acumulação de GMPc, pela inibição da PDE5, e a ativação de suas vias dependentes estariam envolvidas na estimulação da biossíntese de androgênio e mudanças espermáticas

Submitted by Thania Rios Rossi Lima null (thania.lima49@gmail.com) on 2018-03-23T01:44:07Z No. of bitstreams: 1 Dissertação Ms. Thania_21.03.2018 - FINAL.pdf: 2338346 bytes, checksum: 1a021d8170dc5458c5963409fd3e1384 (MD5) / Approved for entry into archive by Luciana Pizzani null (luciana@btu.unesp.br) on 2018-03-26T16:57:50Z (GMT) No. of bitstreams: 1 lima_trr_me_bot.pdf: 2260557 bytes, checksum: fe4f1058d32d837dd267cda79b2f5f46 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-03-26T16:57:50Z (GMT). No. of bitstreams: 1 lima_trr_me_bot.pdf: 2260557 bytes, checksum: fe4f1058d32d837dd267cda79b2f5f46 (MD5) Previous issue date: 2018-02-26 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / Evidências epidemiológicas sugerem a influência de xenobióticos no aumento da incidência de desordens do trato reprodutor masculino como criptorquidia, hipospadia, baixa qualidade do sêmen e tumores testiculares. Dentre elas, a criptorquidia é a anomalia congênita mais comum em meninos e é um fator de risco para o desenvolvimento de infertilidade e tumor testicular. O objetivo deste estudo foi avaliar morfologicamente os testículos de ratos criptorquídicos expostos in utero e no período pós-natal à acrilamida (AA) ou ao di-n-butil-ftalato (DBP). Durante a gestação e a lactação, as ratas prenhes foram expostas a AA 10 mg/kg/dia ou DBP 500 mg/kg/dia por gavagem e dieta, respectivamente. Após o desmame (dia pós-natal; DPN 21), a prole masculina foi submetida a cirurgia de criptorquidia (CPT), revertida por orquidopexia (R) após três semanas, continuamente expostos aos xenobióticos por dieta até a eutanásia quando com 16, 31 ou 58 semanas de idade. Os testículos foram avaliados por sistema de classificação de danos histológicos, imunohistoquímica para os antígenos tirosina quinase Kit (c-Kit) e fosfatase alcalina placentária (PLAP), e análise morfométrica das células de Leydig. Os resultados mostraram redução do peso corpóreo apenas no grupo AA/CPT-R na 16ª semana, mas ambos os grupos tratados apresentaram uma redução progressiva no peso testicular absoluto e no volume testicular em todos os momentos de estudo. As alterações histológicas apresentaram maior severidade nos grupos AA/CPT-R e DBP/CPT-R. Na 31ª e 58ª semanas, em animais do grupo AA/CPT-R foi encontrada predominância significativa de túbulos com células marcadas com c-Kit associada à redução da imunorreatividade para PLAP; o grupo DBP/CPT-R apresentou redução da imunorreatividade para PLAP na 58ª semana. Na 16ª semana, o volume total ocupado pelas células de Leydig apresentou-se diminuído em ambos os grupos expostos às substâncias químicas; o índice Leydigossomático (volume relacionado a massa corporal) apresentou-se diminuído no grupo DBP/CPT-R. O número de células de Leydig/ml apresentou-se aumentado no grupo DBP/CPT-R na 16ª semana, e também nos grupos AA/CPT-R e DBP/CPT-R nas 31ª e 58ª semanas. Os métodos de avaliação testicular adotados são individualmente capazes de detectar o dano testicular e, particularmente, o comprometimento da espermatogênese. Este modelo experimental mostrou-se útil para avaliar alterações testiculares induzidas por xenobióticos. / Epidemiological evidence suggests the influence of xenobiotics on the increased incidence of male reproductive tract disorders such as cryptorchidism, hypospadias, poor semen quality and testicular tumors. Among them, cryptorchidism is the most common congenital anomaly in boys and is a risk factor for the development of infertility and testicular tumor. The aim of this study was to evaluate morphologically the testes of cryptorchid rats exposed in utero and postnatally to the acrylamide (AA) or di-n-butyl-phthalate (DBP). During gestation and lacta-tion, dams were exposed to AA 10 mg/kg/day or DBP 500 mg/kg/day by gavage and diet, respectively. After weaning (postnatal day; PND 21), male pups were surgically made cryp-torchid (CPT), reverted by orchiopexy (R) three weeks later, continuously exposed to the xe-nobiotics by diet until euthanasia when 16-, 31- or 58-week old. The testes were evaluated by histological damage classification system, immunohistochemical for the antigens tyrosine kinase Kit (c-Kit) and placental alkaline phosphatase (PLAP), and morphometric analysis of Leydig cells. The results showed a decrease in the body weight only in the AA/CPT-R group at 16th week, but both treated groups presented a progressive decrease in the absolute testicu-lar weight and testicular volume in all the moments of study. The histological alterations pre-sented greater severity in the AA/CPT-R and DBP/CPT-R groups. A significant predomi-nance of tubules with c-Kit strongly labeled cells was found in the AA/CPT-R group at the 31st and 58th weeks after birth, associated to reduction of the immunoreactivity for PLAP; DBP/CPT-R group presented decreased immunoreactivity for PLAP at the 58th week. The total volume occupied by Leydig cells decreased in both chemically-exposed groups at the 16th week; Leydig-somatic index (volume related to the body mass) was significantly de-creased in the DBP/CPT-R group. The number of Leydig cells/ml was increased in the DBP/CPT-R group at the 16th week, and in the AA/CPT-R and DBP/CPT-R groups at the 31st and 58th weeks. The methods of testicular evaluation adopted are individually able to detect testicular damage and, particularly, the compromising of the spermatogenesis. This experi-mental model showed to be useful to evaluate testicular alterations induced by xenobiotics. / FAPESP: 2012/09873-4

Resumo não disponível.

Resumo não disponível.

O mecanismo não clássico de testosterona induz resposta celular rápida ao nível de membrana, enquanto que a ação clássica se dá pela ligação da testosterona ao seu receptor androgênico intracelular (iAR) que regula a expressão gênica. A Epitestosterona, o 17α-epímero da testosterona, tem sido descrito como um anti-andrógeno, inibindo o efeito da testosterona ou diidrotestosterona sobre o sobre o iAR. No entanto, a epitestosterona apresenta um efeito não clássico similar ao da da testosterona, despolarizando o potencial de membrana das células de Sertoli e induzindo a captação rápida de Ca2+ nos testículos. O objetivo deste estudo foi analizar o efeito do tratamento com epitestosterona e testosterona em animais castrados quimicamente com a utilização de um antagonista do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH), o cetrorelix. Ratos imaturos, a partir do 7º dia de idade receberam durante 7 dias o tratamento pela via intraperitoneal de acordo com os seguintes grupos: Controle (apenas o veículo hidroxipropil-beta-ciclodextrina, castrados (Cetrorelix (500 μg/kg/dia)), castrados com reposição de testosterona (2,5mg/kg/dia) (Cetrorelix+testosterona), castrados com reposição de epitestosterona (2,5mg/kg/dia) (cetrorelix+epitestosterona) e epitestosterona. Foram observados os efeitos dos tratamentos em parâmetros de desenvolvimento sexual de ratos imaturos como: peso corporal, peso testicular e medida da distância anogenital (DAG). Também foram feitos registros eletrofisiológicos da ação no potencial de membrana da testosterona nos túbulos seminíferos de testículos de ratos de todos os tratamentos. Para a avaliação a imunorreatividade ao iAR foi utilizado o anticorpo primário anti-iAR do tipo policlonal na concentração 1:250. Para o controle-negativo da técnica cortes de todas os tratamentos incubados com PBS-T. Para expressão foi utilizado o anticorpo primário anti-iAR do tipo policlonal na concentração de 1:1000 realizada pela técnica de Western Blot. A castração química com cetrorelix resultou na redução no peso dos testículos e da DAG. O tratamento com epitestosterona e testosterona restaurou tanto o peso testicular como a DAG. O efeito despolarizante em resposta à aplicação tópica da testosterona foi observado no grupo controle e no grupo de cetrorelix. Além disso, o grupo castrado com cetrorelix com reposição de epitestosterona impediu o efeito rápido da testosterona na despolarização da membrana celular. No grupo com reposição de testosterona, a resposta eletrofisiológica da testosterona na membrana também foi alterada. O tratamento com epitestosterona nos ratos castrados com cetrorelix produziu diminuição da expressão do iAR. Foi observada redução da imunorreatividade do iAR nos animais tratados com epitestosterona. Pode-se concluir que a epitestosterona participa do desenvolvimento genital em ratos imaturos, ou seja, produziu recuperação de AGD de forma semelhante à testosterona. Este resultado sugere que ambos os hormônios atuam pela mesma via de desenvolvimento deste parâmetro, provavelmente através de um mecanismo não-clássico. Além disso, o tratamento com o antagonista de GnRH e reposição de epitestosterona suprimiu a resposta não clássica da testosterona, mudando o padrão de via de sinalização da testosterona nas células de Sertoli. / The non-classical mechanism of testosterone induces a rapid cellular response at the membrane level, while the classical action is through the binding to the intracellular androgenic receptor (iAR) and the regulation of gene expression. Epitestosterone, the 17α-epimer of testosterone, has been described as an anti-androgen, inhibiting the testosterone or dihyidrotestosterone effect on the iAR. However, epitestosterone presents a non-classical effect similar to testosterone, depolarizing the membrane potential of Sertoli cells and inducing rapid Ca2+ uptake in testes. The aim of this study was to observe the effect of the treatment with epitestosterone and testosterone in rats chemically castrated with a gonadotropin-releasing hormone (GnRH) antagonist cetrorelix. From pnd 7 to pnd 14, the rats were given daily intraperitoneal injections with (i) hormones solvent, (2-hydroxypropyl β-cyclodextrin) as the control group (CTRL); (ii) 500 μg/kg/day of the GnRH antagonist cetrorelix as the cetrorelix group (CET); (iii) 500 μg/kg/day of cetrorelix + 2.5 mg/kg/day of testosterone as the cetrorelix plus testosterone group (CET+T); (iv) 500 μg/kg/day of cetrorelix + 2.5 mg/kg/day of epitestosterone as the cetrorelix plus epitestosterone group (CET+EpiT); and (v) 2.5 mg/kg of epitestosterone alone as the epitestosterone group (EpiT). The effect of different treatments were verified on the body and testicular weight and the anogenital distance (AGD). The potential and the membrane resistance of Sertoli cells were recorded by electrophysiological technique intracellular record. The electrophysiological effect of testosterone on membrane of Sertoli cells were evaluated in seminiferous tubules in testes from rats of the all experimental groups. For evaluating the immunoreactivity to the iAR we used the anti-iAR primary polyclonal antibody type in concentration 1: 250. For the negative control technique cuts all treatments incubated with PBS-T. For iAR expression we used the anti-iAR type polyclonal primary antibody at a concentration of 1: 1000 performed by the Western Blot technique. The chemical castration induced a reduction in testicular weight and AGD. The treatment with both epitestosterone and testosterone restored the AGD and the testicular weight. The depolarizing effect in response to topical testosterone application was observed in the control group and in the GnRH antagonist cetrorelix group. Moreover, in the GnRH antagonist cetrorelix replaced with the epitestosterone group, testosterone was not capable of changing the membrane potential. In the group replaced with testosterone, the membrane response to testosterone was smaller also. The treatment with epitestosterone in castrated rats also reduced the expression of the iAR in testes. The immunoreaction of iAR was reduced in the animals treated with epitestosterone. In conclusion, the effect of epitestosterone on genital development in immature rats, namely recovering of AGD, was similar to testosterone. This result suggest that both hormones act through the same pathway on this development parameter, probably by a non-classical mechanism. Additionally, the treatment with the GnRH antagonist plus epitestosterone suppressed the non-classical testosterone response, changing the pattern of testosterone signaling pathway through a membrane mechanism in Sertoli cells.

Submitted by (lucia.rodrigues@ufrpe.br) on 2016-06-09T13:14:18Z No. of bitstreams: 1 Mariana Gomes do Rego.pdf: 2243053 bytes, checksum: dd4824e30534d9ff3b2e42d85610b850 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-06-09T13:14:18Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Mariana Gomes do Rego.pdf: 2243053 bytes, checksum: dd4824e30534d9ff3b2e42d85610b850 (MD5) Previous issue date: 2010-02-09 / This study aimed to evaluate the ovaries morphology and testes from oceanic sharks caught in the South Atlantic and Equatorial. For both samples were collected between January 2008 and March 2010, through the tuna fleet the vessels, captured along the South and Equatorial Atlantic, where they were collected 17 females and 164 males. In the vessels was removed visceral animals tract. After screening, the ovaries and testes were weighed and measured (length and width), identified macroscopically their maturational state. To perform the histological analysis of the material, the ovaries were fixed in 10% formalin sea water for 48 hours and testes in Bouin's fixative for 48 hours too. Then they were passed through the protocol histology. The microscopic analysis of ovaries was found three distinct maturational stages: Stage I (Immature), stage II (maturing) and stage III (mature). The first stage was classified immature ovaries; the second one was in five ovarian maturation and the third was nine ovarian mature. Immature females were found in ovaries with small width between 1.0 and 3.1 centimeters, with internal gelatinous structure or granules in maturing females, the ovaries were slightly higher showing varying width of 5.2 and 6.0 centimeters and mature ovaries had a width varying between 6.5 and 7.8 centimeters, with a rounded shape with large and well developed oocytes. On microscopic examination was observed that the ovaries are covered by epithelial tissue simple plan in the early stages of development, ranging for simple cubic in the final stages of maturation. Below the epithelium is the albuginea composed of dense connective tissue and regions of muscle fibers. In the initial stage of maturation, the ovaries presented epigone organ, they were not different histologically of the ovary. Now in the mature ovaries was shown a simple cubic epithelium, below the epithelium is a layer of dense connective tissue and muscle layer with the presence of vitellogenic oocytes and fat cells. It also showed a thin membrane enclosing the yolk oocytes. It was observed separating the pellucida zone of the oocyte from the follicle wall and a basal lamina between layers and granular teak layer. For the testes, of the 164 individuals collected, 52 were Isurus oxyrinchus, Carcharhinus falciformis 17 and 95 Carcharhinus longimanus. For the three species it was observed that the variation in the three maturation stages proposed had no visible morphological change. To characterize microscopic, cellular development in the three maturation stages, it also showed the same for all three species. The first stage was characterized by the presence of organ epigone that this phase is undifferentiated testis, thus presenting the same histological composition. The second stage there is a decrease in body epigone and differentiation of the testis with the emergence of the first germ cells (spermatogonia). The third stage the national epigone only present as a thin layer lining the testis, this is well developed and large seminiferous and the tubules with large amounts of sperm. In the classification of morphological testis there was a difference, once the species Isurus there was and Radial, for Carcharhinus was named as diametric. / Este trabalho teve por objetivo avaliar a morfologia dos ovários e testículos de tubarões oceânicos capturados no Atlântico sul e Equatorial. Para tanto as amostras foram coletadas, entre janeiro de 2008 e março de 2010, através das embarcações da frota atuneira, capturadas ao longo do Atlântico Sul e Equatorial, onde foram coletadas 17 fêmeas e 164 machos. Nas embarcações foi retirado o trato visceral dos animais. Após a triagem, os ovários e testículos foram pesados e medidos (comprimento e largura), sendo identificados macroscopicamente o seu estado maturacional. Para a realização da análise histológica do material, os ovários foram fixados em formol a 10% com água do mar, por 48 horas e os testículos em fixador de Bouin também por 48 horas. Em seguida passaram pelo protocolo histológico. Na análise macroscópica dos ovários foram encontrados três estágios maturacionais distintos: estágio I (Imaturo), estágio II (em maturação) e estágio III (Maduro). No estágio I foram classificados 3 ovários imaturos, no estágio II 5 ovários em maturação e no estágio III 9 ovários maduros. Nas fêmeas imaturas foram encontrados ovários pequenos com largura entre 1,0 e 3,1 cm, com estrutura interna gelatinosa ou granular, nas fêmeas em maturação, os ovários se encontravam um pouco maiores apresentando largura variando de 5,2 e 6,0 cm e nos ovários maduros possuía largura variando entre 6,5 e 7,8 cm, apresentando um formato arredondado, com ovócitos grandes e bem desenvolvidos. Na análise microscópica foi observado que os ovários são revestidos por tecido epitelial simples plano, nos primeiros estágios de desenvolvimento, variando para simples cúbico nos estágios finais da maturação. Logo abaixo do epitélio se encontra a albugínea composta por tecido conjuntivo denso e regiões de fibras musculares. No estágio inicial de maturação os ovários apresentam o órgão epigonal, não diferenciando-se histologicamente do ovário. Já nos ovários maduros foi evidenciado o epitélio simples cúbico, logo abaixo do epitélio encontra-se uma camada de tecido conjuntivo denso e uma camada muscular com presença de ovócitos vitelogênicos e células adiposas. Evidenciou-se também uma fina membrana vitelínica delimitando os ovócitos. Foi observada a zona pelúcida separando os ovócitos da parede do folículo e uma lâmina basal entre as camadas granulosas e a camada da teca. Para os testículos, dos 164 indivíduos coletados, 52 foram Isurus oxyrinchus, 17 Carcharhinus falciformis e 95 Carcharhinus longimanus. Para a três espécies estudadas foi observada que a variação nos três estágios maturacionais proposto não tiveram alteração morfológica visível. Para a caracterização microscópica, o desenvolvimento celular nos três estágios maturacionais, também se apresentou o mesmo para as três espécies estudadas. No estágio I caracterizou-se pela presença do órgão epigonal que nessa fase é indiferenciado do testículo, apresentando assim a mesma constituição histológica. No estágio II há uma diminuição do órgão epigonal e a diferenciação do testículo com o surgimento das primeiras células germinativas (espermatogônias). No estágio III o órgão epigonal se apresenta apenas como uma fina camada revestindo o testículo,este encontra-se bastante desenvolvido com presença de túbulos seminíferos grandes e com grande quantidade de espermatozóides. Já na classificação da disposição morfológica dos testículos ocorreu diferença, uma vez que, na espécie Isurus, evidenciou-se Radial e para os Carcharhinus foi denominada como diamétrica.

Submitted by (edna.saturno@ufrpe.br) on 2016-10-05T14:27:32Z No. of bitstreams: 1 Gian Carlo DAngelo de Queiroz1.pdf: 5453543 bytes, checksum: 9dcdbbae128642bdc513a5304225e2f4 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-10-05T14:27:32Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Gian Carlo DAngelo de Queiroz1.pdf: 5453543 bytes, checksum: 9dcdbbae128642bdc513a5304225e2f4 (MD5) Previous issue date: 2010-07-30 / The directly heat applied on the testis has given new information about the mechanisms triggers of spermatogenesis damages. Pentoxifylline (PTX) is a methylxanthine with antioxidants, anti-inflammatory and anti-apoptotic properties and beside this with a lot of utilities in clinical area. The present work had an objective to evaluate the inhibitory capacity of pentoxifylline on deleterious actions, produced by heat in the testicular parenchyma and its capacity to accelerate the spermatogenesis recovery process. Seventy two male Wistar rats (Rattus norvegicus, var. albinus) were used and divided in control group, heat shock (HS), HS treated with 50mg/Kg of PTX and HS treated with 100mg/Kg of PTX. All animal were submitted to testicular heat shock, excepted the control group and evaluated on 1, 3, 7, 15, 30 and 60 days according to histopathological and histometrical alterations as well as serum levels of testosterone. In this experiment, the different protocols did not produced alteration in the epididymis, prostate and seminal gland weight. However, it was observed a reduction tendency of testicular weight, seminiferous tubule volume, tubular diameter and epithelium height in the animals that suffered heat shock. The Leydig cell volume was reduced in animals submitted to stress thermic, but this fact did not influence the testosterone levels. Utilizing Nile's blue to stain apoptotic cells was noted a reduction in this kind of cell's death in group HS+100mg/Kg of PTX in relation with HS group on 30th days. In the same way was observed reduction on apoptotic cells in the HS+50mg/Kg group, when compared with HS on 60th days. The histopathological found on 3rd, 7th and 15th day post-heat shock are compatible with testis degeneration picture. On these periods, in the animals treated with pentoxifylline, the lesions were minor scale and some stages of seminiferous epithelium cycle were well characterized. In the period between 30 e 60 days after heat shock, we can observe that animals not treated with PTX showed seminiferous tubule with desquamated cells in the lumen, germ epithelium loosening and vacuoles of Sertoli cell. Although, it had been observed partial recovery of spermatogenesis. The animals treated with pentoxifylline with 50 or 100mg/Kg during this period, the spermatogenesis had all stages of seminiferous epithelium cycle. Thus, according to results, PTX seems to have exercised inhibitor role on pro-inflammatory and apoptotic mechanisms, triggered by directly heat shock applied on testis, and for accelerating the of spermatogenic process recovery. / O calor aplicado diretamente sobre o testículo tem fornecido novas informações sobre os mecanismos desencadeadores dos danos à espermatogênese. A pentoxifilina é uma metilxantina com propriedades antioxidante, antiinflamatória e antiapoptótica com diversas utilidades na área clínica. O presente trabalho teve como objetivo avaliar a capacidade inibidora da pentoxifilina sobre as ações deletérias produzidas pelo calor no parênquima testicular e capacidade em acelerar a recuperação do processo espermatogênico. Foram utilizados 72 ratos Wistar machos (Rattus norvegicus, var. albinus) divididos em grupo controle, choque térmico, choque térmico tratado com 50mg/Kg e 100mg/Kg de pentoxifilina, submetidos ao estresse térmico testicular e avaliados nos dias 1, 3, 7, 15, 30 e 60 quanto as alterações histopatológicas e histomorfométricas dos testículos bem como, aos níveis séricos de testosterona. Neste trabalho, os diferentes protocolos experimentais não produziram alterações no peso do epidídimo, da próstata e glândula seminal. Contudo, foi constatada tendência à redução de peso testicular, do volume total de túbulos seminíferos, diâmetro tubular e altura de epitélio seminífero nos animais que sofreram choque térmico. O volume de células de Leydig reduziu nos animais submetidos ao estresse térmico, porém isto não influenciou os níveis de testosterona. Utilizando-se azul do Nilo para marcação de células apoptóticas foi constatada redução deste tipo de morte celular no grupo HS+100mg/Kg de PTX em relação ao grupo HS aos 30 dias e, 60 dias no grupo choque térmico + 50mg/Kg comparado com o grupo choque térmico. Os achados histopatológicos nos tempos 3, 7 e 15 pós-choque térmico são compatíveis com o quadro de degeneração testicular. Neste período os animais tratados com pentoxifilina as lesões ocorreram em menor escala e alguns estágios do ciclo do epitélio seminíferos foram bem caracterizados. No período compreendido entre 30 e 60 dias após o choque térmico, podemos constatar que os animais não tratados com pentoxifilina possuíam túbulos seminíferos com células que perderam sua coesão em seu lume, afrouxamento do epitélio germinativo e vacúolos nas células de Sertoli, apesar de ter sido observada recuperação parcial do processo espermatogênico. Os animais tratados com pentoxifilina na dose de 50 ou 100mg/Kg, neste período, o processo espermatogênico possuía todos os estágios do ciclo do epitélio seminífero. Portanto, de acordo com os resultados a pentoxifilina exerceu papel inibidor dos mecanismos pró-inflamatórios ou pró-apoptóticos desencadeados pelo choque térmico aplicado diretamente nos testículos, além de acelerar o processo de recuperação da espermatogênese.

Made available in DSpace on 2014-06-12T15:52:01Z (GMT). No. of bitstreams: 2 arquivo4996_1.pdf: 368944 bytes, checksum: 8bd95b0fde9736f57f5f1b1e06fe2b78 (MD5) license.txt: 1748 bytes, checksum: 8a4605be74aa9ea9d79846c1fba20a33 (MD5) Previous issue date: 2002 / O propranolol, utilizado frequentemente na patologia cardíaca por seu efeito bloqueador β-adrenérgico, está freqüentemente associado com efeitos sexuais colaterais. Esses efeitos não parecem estar relacionados ao bloqueio β-adrenérgico. O efeito do propranolol sobre o metabolismo dos fosfolipídios e do diacilglicerol tem sido referido na literatura. No presente trabalho foi estudado o envolvimento da via de tradução do sinal do diacilglicerol/proteína quinase C (DAG/PK-C) na ação do propranolol sobre a secreção de testosterona em células intersticiais testiculares de rato. O tratamento agudo com propranolol estimulou a secreção de testosterona in vitro com concentrações da droga variando de 1μM a 100 μM. O H-7 (20 μM), inibidor da PK-C, reduziu esse efeito em aproximadamente 50%. Na concentração de 75 μM o S-propranolol reduziu 50% da ligação do [3H]12,13-dibutirato de forbol ([3H]PDBu) às células enquanto que no homogeneizado dessas células a redução da ligação foi de apenas 5%. Esses resultados sugerem que o efeito do S-propranolol sobre a ligação do [3H]PDBu poderia ser indireto, possivelmente por aumentar a concentração de um mediador químico que interage com o domínio regulatório da PK-C. Em concentrações ainda mais baixas (1 nM a 100 nM), o S- ou R-propranolol adicionado diretamente à mistura de reação com PK-C parcialmente purificada das células intersticiais aumentou a fosforilação da histona. Essa fosforilação foi comparável àquela obtida com (25 μM) fosfatidilserina, não ocorreu em ausência de Ca2+ e foi revertida com 20 μM H-7. O tratamento crônico com propranolol por via intraperitoneal (30 mg/Kg/8 dias) bloqueou o efeitoestimulatório do S-propranolol e dos ativadores da PK-C (PDBu e LHRH) sobre a secreção de testosterona em células intersticiais testiculares in vitro, sugerindo a dessensibilização da via do DAG/PK-C nessas células. Contudo, a atividade da PK-C não foi modificada. O tratamento mais prolongado, por via oral, com propranolol (500 mg/L/5 semanas) produziu uma dessensibilização mais suave na resposta secretória das células, não modificou a ligação do [3H]PDBu e não modificou a atividade, em valores absolutos, da PK-C. Esses resultados sugerem que a PK-C não está envolvida na dessensibilização da resposta secretória. A especificidade dessa dessensibilização é sugerida pela não modificação (redução) do efeito inibitório do propranolol sobre a secreção de testosterona estimulada pelo hCG e dbAMPc, ativadores indireto e direto da PK-A. Concluindo, os resultados sugerem que a PK-C pode ser a quinase putativa envolvida no efeito agudo estimulatório do propranolol sobre a secreção de testosterona pelas células intersticiais testiculares e que a dessensibilização dessas células após tratamento crônico com propranolol não envolve diminuição da atividade ou de concentração dessa enzima

Submitted by Natalia de Souza Gonçalves (natalia.goncalves@ufpe.br) on 2016-09-15T14:49:54Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) NIVALDO BERNARDO DE LIMA JUNIOR_PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM SAÚDE HUMANA E MEIO AMBIENTE_CENTRO ACADÊMICO DE VITÓRIA_2016.pdf: 3049237 bytes, checksum: 3c055666b0821330db98ccf2d17c644b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-09-15T14:49:54Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 1232 bytes, checksum: 66e71c371cc565284e70f40736c94386 (MD5) NIVALDO BERNARDO DE LIMA JUNIOR_PROGRAMA DE PÓS-GRADUAÇÃO EM SAÚDE HUMANA E MEIO AMBIENTE_CENTRO ACADÊMICO DE VITÓRIA_2016.pdf: 3049237 bytes, checksum: 3c055666b0821330db98ccf2d17c644b (MD5) Previous issue date: 2016-02-24 / CAPES / Dermanura cinerea é um morcego frugívoro, cujas informações acerca da sua biologia reprodutiva ainda permanecem pouco conhecidas em diferentes biomas do Brasil, sobretudo quando se considera as análises morfométricas e histológicas de suas gônadas. O objetivo desse trabalho foi analisar por meio do estágio reprodutivo, histologia e morfometria o testículo, epidídimo e ovário de D. cinerea, ao longo do ciclo reprodutivo anual, em um fragmento preservado de Mata Atlântica (Reserva Biológica de Saltinho) situado no estado de Pernambuco, Nordeste do Brasil. Fêmeas e machos adultos foram capturados por meio de redes de neblina e as coletas ocorreram mensalmente, durante duas noites consecutivas, ao longo de dezoito meses. Os dados meteorológicos foram agrupados em seis períodos de três meses cada: período I (junho – agosto/2014); período II (setembro – novembro/2014); período III (dezembro/2014 – fevereiro/2015); período IV (março – maio/2015); período V (junho – agosto/2015) e período VI (setembro – novembro/2015). Esse agrupamento foi realizado com base no que se tem descrito para o período seco (setembro - fevereiro) e período chuvoso (março - agosto) nessa área de estudo. Entretanto, alguns meses apresentaram médias de precipitação atípicas entre os períodos, enquanto a temperatura teve pouca variação (24,0 a 27,4). Foram capturados um total de 23 machos e 25 fêmeas. Os testículos dos machos foram classificados de acordo com a morfologia externa em: machos com testículos descendentes e não descendentes. Já as fêmeas foram classificadas em: inativas, grávidas, lactantes e pós-lactantes. Os espécimes utilizados nas análises histomofométricas dos órgãos foram eutanasiados. Nos machos foram selecionados 18 espécimes, ao passo que nas fêmeas foram selecionadas 10 inativas. Os órgãos foram coletados, fixados e processados seguindo a técnica histológica de rotina. As lâminas histológicas produzidas foram coradas por Hematoxilina – Eosina e analisadas em microscópio óptico. Morfometricamente, nos testículos, foram realizadas mensurações da área de ocupação do compartimento tubular e intertubular, número de células de Leydig, de Sertoli, de espermatócitos e de espermátides alongadas. No epidídimo foi mensurada a altura do epitélio, o diâmetro tubular, diâmetro do lúmen e diâmetro do epitélio das regiões do segmento inicial, cabeça, corpo e cauda. No ovário foi mensurada as áreas total e de ocupação dos folículos em diferentes estágios de maturação, incluindo a quantificação destes folículos e corpo lúteo. Esses dados foram submetidos ao teste t de Student. De acordo com os resultados, a atividade testicular de D. cinerea não apresenta um padrão reprodutivo definido; o epidídimo possui maior sensibilidade às variações sazonais na região caudal e as fêmeas apresentam dois picos reprodutivos de acordo com os períodos considerados em área de Mata Atlântica do estado de Pernambuco. / Dermanura cinerea is a fruit bat, whose information about their reproductive biology are still little known in different biomes of Brazil, especially when considering the morphological and histological analyzes of their gonads. The aim of this study was to analyze through the reproductive stage, histology and morphometry the testis, epididymis and ovary of D. cinerea, during the annual reproductive cycle in a fragment preserved Atlantic Forest (Biological Reserve Saltinho) located in the state of Pernambuco, northeastern Brazil. Adult females and males were captured through nets and the collections were monthly during two consecutive nights along eighteen months. Meteorological data were grouped into six periods of three months each: period I (June - August / 2014); period II (September - November / 2014); period III (December / 2014 - February / 2015); period IV (March - May / 2015); period V (June - August / 2015) and period VI (September - November / 2015). This grouping was based on what has been described for the dry season (September - February) and rainy season (March - August) in this study area. However, a few months have mean atypical precipitation between the periods while the temperature had little variation (24.0 to 27.4). A total of 23 males and 25 females were captured. The testes of males were classified according to the external morphology: males with descendant testes and not descendant. The females were classified as inactive, pregnant, lactating and post-lactating. Specimens used in histomorphometric analysis of the organs were euthanized. In males were selected 18 specimens, while females were selected in 10 inactive. The bodies were collected, fixed and processed according to routine histological technique. The produced histological slides were stained with hematoxylin - eosin and analyzed by light microscopy. Morphometrically in the testes were performed measurement of the occupation area tubular compartment and Intertubular, number of Leydig cells, Sertoli cells, spermatocytes and spermatids elongated. In the epididymis was measured the height of the epithelium, the tubular diameter, lumen diameter and diameter epithelial of the regions of the initial segment, caput,corpus and cauda. Ovary was measured and the total areas of occupation of follicles at different stages of maturation, including quantification of these follicles and corpus luteum. These data were submitted to Student's t test. According to the results, testicular activity D. cinerea does not present a defined reproduction pattern; the epididymis is more sensitive to seasonal variations in the flow region and the females have two reproductive peaks according to the periods considered in Atlantic Forest area of the state of Pernambuco.