Submitted by FERNANDA DA SILVA VON PORSTER (fdsvporster@univates.br) on 2017-06-22T17:37:18Z No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2016AugustoWeber.pdf: 1387922 bytes, checksum: 6cd454af4638e06ae2cd4fb1edcea690 (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Paula Lisboa Monteiro (monteiro@univates.br) on 2017-06-26T18:33:30Z (GMT) No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2016AugustoWeber.pdf: 1387922 bytes, checksum: 6cd454af4638e06ae2cd4fb1edcea690 (MD5) / Made available in DSpace on 2017-06-26T18:33:30Z (GMT). No. of bitstreams: 2 license_rdf: 0 bytes, checksum: d41d8cd98f00b204e9800998ecf8427e (MD5) 2016AugustoWeber.pdf: 1387922 bytes, checksum: 6cd454af4638e06ae2cd4fb1edcea690 (MD5) Previous issue date: 2017-06 / A maturação espermática, que ocorre no epidídimo, é etapa essencial para a aquisição de características necessárias a fertilização in vivo. Durante o transito epididimário o espermatozoide sofre uma série de alterações que transformam uma célula imatura, com pouca capacidade fertilizante, em uma célula matura, apto a fertilizar. O conhecimento das proteínas presentes no espermatozoide de suínos obtidos da cauda do epidídimo e a relação de β-defensinas, proteínas relacionadas com imunidade e reprodução, em testículo e epidídimo de suínos imunizados contra o GnRH, pode esclarecer os mecanismos envolvidos na maturação epididimária. O presente trabalho foi subdivido em dois experimentos, sendo o primeiro relacionado com a proteômica do espermatozoide suíno retirado da cauda do epidídimo, com objetivo de identificar e descrever as proteínas, bem como a relação destas proteínas em vias metabólicas. Foram identificadas 1681 proteínas, através da ferramenta MudPIT, sendo realizadas análises de bioinformática para a descrição dos processos biológicos, componentes celulares e função molecular, bem como foram agrupadas as proteínas em mapas metabólicos. A identificação destas 1681 proteínas permite a formação de um banco de dados para posteriores pesquisas aplicadas. O segundo experimento, que trata da expressão das β-defensinas em epidídimo de suínos imunizados contra o GnRH, objetiva compreender a expressão gênica de β-defensinas em modelo animal de depleção androgênica. Os dados obtidos indicam que a expressão das β-defensinas é maior nos animais imunizados contra o GnRH, sugerindo assim que as β-defensinas sejam andrógeno dependentes. Estes resultados podem ser utilizados no desenvolvimento de biotecnologias aplicadas a reprodução animal, auxiliando assim na melhoria dos índices produtivos e reprodutivos. / Sperm maturation, which occurs on epididymis, is essential to the acquisition of needed characteristics for in vivo fertilization. During the epididymal transit, spermatozoa undergo a series of alterations that transform an immature cell with few fertilizing ability, in a mature cell, with fertilization capacity. The knowledge of proteins presents on boar spermatozoa taken from epididymis cauda and the relationship of β-defensins, proteins related to immunity and reproduction, on testis and epididymis of boars immunized against GnRH, can explain the mechanisms involved on epididymal maturation. The present work was subdivided in two experiments, being the first related with proteomics of boar spermatozoa taken from epididymis cauda, which aim to identify and describe the proteins, besides your relationship with metabolic routes. Were identified 1681 proteins, through MudPIT technology, carried out analyzes of biological process, cellular component and molecular function, grouping this proteins in metabolic routes. The identification of 1681 proteins allow a formation of databank for applied future researches. The second experiment, expression of β-defensins in testis and epididymis of boars immunized against GnRH, aim to understand the genic expression of β-defensins in animal model of androgen depletion. This data indicate that expression of β-defensins is higher on immunized boars, suggesting that porcine β-defensins are dependent of androgens. This results can be utilized to development animal reproductive applied biotechnologies, helping to improve productive and reproductive indices.

Orientador: José Antonio Dell'Áqua Junior / Banca: Fabiana Ferreira de Souza / Banca: André Maciel Crespilho / Resumo: Muitas biotecnologias estão sendo desenvolvidas visando a conservação do material genético de garanhões de alto valor zootécnico. Dentre estas pode-se destacar a colheita de espermatozoides do epidídimo de animais que sofreram algum trauma ou enfermidade que impossibilitem a colheita do sêmen, óbito ou eutanásia. Porém essas células espermáticas não entram em contato com o plasma seminal, importante por conter proteínas que participam de processos relacionados à proteção e ligação dos espermatozoides aos reservatórios espermáticos na tuba uterina. Neste sentido, sugere-se que haja importantes alterações bioquímicas nas células espermáticas do epidídimo, objetivando-se assim com esta revisão, estudar as principais diferenças morfofuncionais entre os espermatozoides provenientes do epidídimo e do ejaculado / Abstract: Several biotechnologies are being developed aiming genetic material conservation of stallions with high zootechnical value, as we can highlight the harvest epididymis's sperm of animals who suffered trauma or illness that makes impossible the semen collection, death or euthanasia. However these sperm cells do not get in touch with seminal plasma, important whereas it has proteins that participate in processes related to the protection and binding of sperm to the sperm reservoir in the oviduct. In this sense, it suggests that there is significant biochemical changes in epididymal sperm, aiming with this review to study the main morphological and functional differences between the sperm from the epididymis and ejaculated / Mestre

Orientador: Wilma De Grava Kempinas / Banca: Flávia Karina Delella / Banca: Suzana de Fátima Paccola Mesquita / Banca: Raquel Fantin Domeniconi / Banca: Luis Alberto Domingo Francia Farje / Banca: Daniela Cristina Caeccatto Gerardin / Banca: Arielle Cristina Arena / Banca: Rafael Henrique Nóbrega / Banca: Caral Dal Bianco Fernandez / Banca: André Sampaio Pupo / Resumo: A bupropiona é um antidepressivo amplamente utilizado no tratamento da cessação tabágica que atua inibindo a recaptura neuronal de dopamina (DA) e noradrenalina (NE) com pouco efeito na recaptação da serotonina. Estudos prévios demonstraram que o tratamento com sibutramina, um bloqueador da recaptura de NE que age aumentado disponibilidade desta monoamina na fenda sináptica, influenciou a qualidade espermática diminuindo a fertilidade de ratos machos submetidos ao tratamento com este fármaco. A bupropiona possui ação sobre algumas funções sexuais como a ejaculação e a excitação, no entanto, não são encontradas na literatura informações sobre a influência desta droga na qualidade espermática de humanos ou de modelos animais. Nesse contexto, o presente trabalho tem como objetivo investigar os efeitos da administração de bupropiona sobre o comportamento sexual, parâmetros espermáticos e fertilidade de ratos machos e sobre a reatividade farmacológica do ducto epididimário isolado. Para tanto, 27 ratos machos (90 dias) foram aleatoriamente alocados em três grupos experimentais que receberam 15 mg/kg de bupropiona (BPP15, n=9), 30 mg/kg de bupropion (BPP30, n=9) e água destilada (veiculo, VEH, n=9) via oral durante 30 dias consecutivos. Ao final do tratamento os animais foram eutanaziados e tiveram seus órgãos reprodutores (testículos, epidídimos, próstata, vesícula seminal cheia e vazia) pesados. Os níveis séricos de testosterona, hormônio luteinizante e hormônio folículo estimulante foram determinados por radioimunoensaio e os testículos e epidídimos direitos foram coletados e processados para contagem espermática, determinação da produção diária de espermatozoides e determinação do tempo de transito espermático pela cabeça/corpo e cauda epididimária. Além disso, os espermatozoides da cauda do epidídimo direito foram utilizados para análise da motilidade e morfologia espermática. Em uma ... / Abstract: Bupropion is a dopamine and norepinephrine reuptake inhibitor with lower effect on the serotonine reuptake widely used as smoking cessation and antidepressant drug. Previously studies showed that the treatment with the norepinephrine uptake blocker sibutramine, that acts increasing the level of this monoamine at the synaptic cleft impaired the sperm quality and fertility of the animals treated with this drug. Bupropion influences some sexual functions as ejaculation and arousal however, to our knowledge, there is no study investigating the effects of bupropion on human or animals model sperm quality. In this context, the present study investigated the effects of bupropion on sexual behavior, sperm parameters and fertility of male rats as well as its influence on epididymal duct contraction in vitro. For this, 27 male rats (90 days) were randomly allocated into three experimental groups that received 15 mg/kg of bupropion (BPP15, n=9), 30 mg/kg of bupropion (BPP30) and distillate water (vehicle, VEH, n=9) orally during 30 days. At the end of the treatment the animals were killed and his reproductive organs (testis, epididymis, prostate, full and empty seminal vesicle) were weighted. The levels of testosterone, luteinizing hormone and follicle stimulating hormone serum were determinate by radioimmunoassay and the right testis and epididymis were collected and processed to sperm count, daily sperm production and determination of sperm transit time trough epididymis. Furthermore, spermatozoa collected by the right epididymal cauda were used to analysis of sperm motility and morphology. In a second stage of this study 30 animals (n=10/experimental group), allocated and treated as describe previously, were used to analysis of male sexual behavior and fertility after natural matting. At the least stage of the study 18 animals (n=6/experimental group) were used to evaluating the effects of the treatment with ... / Mestre

Orientador: Erick José Ramo da Silva / Resumo: O epidídimo é responsável por transformar os espermatozoides imaturos em células funcionalmente competentes, capazes de adquirir motilidade progressiva e de reconhecer e fertilizar o oócito. Além disso, o epidídimo é primordial para proteger e armazenar o gameta masculino antes da ejaculação. Alterações da fisiologia epididimária podem afetar a sua função, causando infertilidade masculina. A inflamação do epidídimo, conhecida como epididimite, é uma das doenças mais prevalentes do trato urogenital masculino, sendo um fator relevante de infertilidade masculina. Sua principal etiologia envolve a invasão de bactérias, como Escherichia coli, via ascensão retrógrada pela uretra. O epidídimo expressa constitutivamente diversos componentes do sistema imunológico inato, incluindo os receptores do tipo Toll (TLRs), como o TLR4, que é ativado pelo lipopolissacarídeo (LPS) de bactérias Gram-negativas, além de proteínas com atividade antimicrobiana, como os inibidores da protease do tipo WFDC (Whey-acidic protein four disufide core), indicando que este órgão está em constante estado de alerta para combater infecções bacterianas. Além da ação antimicrobiana e inibidora de protease, as proteínas WFDC apresentam ação anti-inflamatória, imunomoduladora e sobre a função espermática, sendo proteínas multifuncionais no trato reprodutor masculino. Neste estudo, testamos a hipótese de que a expressão de genes Wfdc no epidídimo é modificada por estímulos inflamatórios, como parte da resposta tecid... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The epididymis is responsible for transforming immature sperm into functionally competent cells capable of acquiring progressive motility and recognizing and fertilizing the oocyte. In addition, the epididymis is paramount for protecting and storing the male gamete before ejaculation. Changes in epididymal physiology may affect sperm maturation, transport or storage, causing male infertility. Epididymal inflammation, known as epididymitis, is one of the most prevalent diseases of the male urogenital tract, being a relevant factor of male infertility. Its main etiology involves the invasion of bacteria, such as E. coli, through retrograde ascension through the urethra. The epididymis constitutively expresses several elements of the innate immune system, including Toll-like receptors (TLRs), like the TLR4, which is activated by the lipopolysaccharide (LPS) of Gram-negative bacteria, as well as proteins with antimicrobial activity, like the WFDC (Whey-acidic difulfide core)-type protease inhibitors, indicating that this organ is constantly alert to fight bacterial infections. In addition to antimicrobial and protease inhibitory activities, WFDC proteins show anti-inflammatory, immunomodulatory and reproductive functions, being multifunctional proteins in the male reproductive tract. In this study, we tested the hypothesis that Wfdc gene expression in the epididymis is modified by inflammatory stimuli as part of tissue defense mechanisms to microbial aggression. For that, we char... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Made available in DSpace on 2014-08-13T14:50:44Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2013Bitstream added on 2014-08-13T18:00:48Z : No. of bitstreams: 1 000753355_20151216.pdf: 1415600 bytes, checksum: 54b033a2fd58f46d8099989bc9d184a2 (MD5) Bitstreams deleted on 2015-12-18T13:57:54Z: 000753355_20151216.pdf,. Added 1 bitstream(s) on 2015-12-18T13:58:34Z : No. of bitstreams: 1 000753355.pdf: 2526582 bytes, checksum: bdcccbcc43d606f2f47250af771db012 (MD5) / A bupropiona é um antidepressivo amplamente utilizado no tratamento da cessação tabágica que atua inibindo a recaptura neuronal de dopamina (DA) e noradrenalina (NE) com pouco efeito na recaptação da serotonina. Estudos prévios demonstraram que o tratamento com sibutramina, um bloqueador da recaptura de NE que age aumentado disponibilidade desta monoamina na fenda sináptica, influenciou a qualidade espermática diminuindo a fertilidade de ratos machos submetidos ao tratamento com este fármaco. A bupropiona possui ação sobre algumas funções sexuais como a ejaculação e a excitação, no entanto, não são encontradas na literatura informações sobre a influência desta droga na qualidade espermática de humanos ou de modelos animais. Nesse contexto, o presente trabalho tem como objetivo investigar os efeitos da administração de bupropiona sobre o comportamento sexual, parâmetros espermáticos e fertilidade de ratos machos e sobre a reatividade farmacológica do ducto epididimário isolado. Para tanto, 27 ratos machos (90 dias) foram aleatoriamente alocados em três grupos experimentais que receberam 15 mg/kg de bupropiona (BPP15, n=9), 30 mg/kg de bupropion (BPP30, n=9) e água destilada (veiculo, VEH, n=9) via oral durante 30 dias consecutivos. Ao final do tratamento os animais foram eutanaziados e tiveram seus órgãos reprodutores (testículos, epidídimos, próstata, vesícula seminal cheia e vazia) pesados. Os níveis séricos de testosterona, hormônio luteinizante e hormônio folículo estimulante foram determinados por radioimunoensaio e os testículos e epidídimos direitos foram coletados e processados para contagem espermática, determinação da produção diária de espermatozoides e determinação do tempo de transito espermático pela cabeça/corpo e cauda epididimária. Além disso, os espermatozoides da cauda do epidídimo direito foram utilizados para análise da motilidade e morfologia espermática. Em uma ... / Bupropion is a dopamine and norepinephrine reuptake inhibitor with lower effect on the serotonine reuptake widely used as smoking cessation and antidepressant drug. Previously studies showed that the treatment with the norepinephrine uptake blocker sibutramine, that acts increasing the level of this monoamine at the synaptic cleft impaired the sperm quality and fertility of the animals treated with this drug. Bupropion influences some sexual functions as ejaculation and arousal however, to our knowledge, there is no study investigating the effects of bupropion on human or animals model sperm quality. In this context, the present study investigated the effects of bupropion on sexual behavior, sperm parameters and fertility of male rats as well as its influence on epididymal duct contraction in vitro. For this, 27 male rats (90 days) were randomly allocated into three experimental groups that received 15 mg/kg of bupropion (BPP15, n=9), 30 mg/kg of bupropion (BPP30) and distillate water (vehicle, VEH, n=9) orally during 30 days. At the end of the treatment the animals were killed and his reproductive organs (testis, epididymis, prostate, full and empty seminal vesicle) were weighted. The levels of testosterone, luteinizing hormone and follicle stimulating hormone serum were determinate by radioimmunoassay and the right testis and epididymis were collected and processed to sperm count, daily sperm production and determination of sperm transit time trough epididymis. Furthermore, spermatozoa collected by the right epididymal cauda were used to analysis of sperm motility and morphology. In a second stage of this study 30 animals (n=10/experimental group), allocated and treated as describe previously, were used to analysis of male sexual behavior and fertility after natural matting. At the least stage of the study 18 animals (n=6/experimental group) were used to evaluating the effects of the treatment with ...

Made available in DSpace on 2015-01-26T13:21:22Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-06-18Bitstream added on 2015-01-26T13:30:36Z : No. of bitstreams: 1 000792285.pdf: 363368 bytes, checksum: bfcb9b7c5a5d2b307fa8df344ff91ccf (MD5) / Muitas biotecnologias estão sendo desenvolvidas visando a conservação do material genético de garanhões de alto valor zootécnico. Dentre estas pode-se destacar a colheita de espermatozoides do epidídimo de animais que sofreram algum trauma ou enfermidade que impossibilitem a colheita do sêmen, óbito ou eutanásia. Porém essas células espermáticas não entram em contato com o plasma seminal, importante por conter proteínas que participam de processos relacionados à proteção e ligação dos espermatozoides aos reservatórios espermáticos na tuba uterina. Neste sentido, sugere-se que haja importantes alterações bioquímicas nas células espermáticas do epidídimo, objetivando-se assim com esta revisão, estudar as principais diferenças morfofuncionais entre os espermatozoides provenientes do epidídimo e do ejaculado / Several biotechnologies are being developed aiming genetic material conservation of stallions with high zootechnical value, as we can highlight the harvest epididymis’s sperm of animals who suffered trauma or illness that makes impossible the semen collection, death or euthanasia. However these sperm cells do not get in touch with seminal plasma, important whereas it has proteins that participate in processes related to the protection and binding of sperm to the sperm reservoir in the oviduct. In this sense, it suggests that there is significant biochemical changes in epididymal sperm, aiming with this review to study the main morphological and functional differences between the sperm from the epididymis and ejaculated

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:23:41Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2012-02-08Bitstream added on 2014-06-13T20:11:22Z : No. of bitstreams: 1 savi_pap_me_jabo_parcial.pdf: 46134 bytes, checksum: 2026be99fcb799a65df1538a850eb2a6 (MD5) Bitstreams deleted on 2014-08-22T14:57:05Z: savi_pap_me_jabo_parcial.pdf,Bitstream added on 2014-08-22T15:02:07Z : No. of bitstreams: 1 000691061.pdf: 424703 bytes, checksum: f2bdf5d4d9a4f875b027cb1377a07893 (MD5) / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Fundação de Amparo à Pesquisa do Estado de São Paulo (FAPESP) / O objetivo foi testar se a suplementação do meio diluente com dois antioxidantes (N-acetilcisteína e/ou vitamina E), em diferentes concentrações, melhorou a qualidade da preservação das células espermáticas provenientes de epidídimo de cães, nos processos de refrigeração e congelação. Utilizaram-se 15 unidades experimentais (UE), cada uma, constituída pelo recuperado espermático de cinco cães hígidos, submetidos à orquiectomia eletiva; as quais foram divididas em três grupos experimentais (GI, GII, GIII), constituídos por cinco UE cada. Adicionou-se antioxidantes nas concentrações de 5,0; 2,5 e 0,5mMol, respectivamente. Cada grupo foi dividido em três alíquotas, uma avaliada a fresco, outra refrigerada por 48 horas e a terceira congelada. Ato continuo, cada UE foi dividida em quatro alíquotas de igual volume e estas centrifugadas; o concentrado de espermatozoides foi ressuspendido em meio diluente TRIS, acrescido de vitamina E e/ou N-acetil-cisteína. Realizou-se a avaliação dos espermatozoides, quanto à motilidade, vigor, teste vital e morfologia espermática. A integridade de membrana foi avaliada por meio do teste hiposmótico e coloração por sondas fluorescentes, e a atividade mitocondrial pela atividade citoquímica (DAB). Os dados obtidos foram submetidos à análise não paramétrica pelo teste de Kruskal-Wallis e Friedman, e os paramétricos pelo Tukey (p<0,05). Observou-se significância entre os grupos GI, GII e GIII, sendo que o GIII apresentou melhores resultados (p<0,05). Não foi observada diferença entre os tratamentos do GII (p>0,05), em relação aos do GI, ressaltou-se a suplementação da NAC isolada ou associada à vitamina E possuindo efeito deletério na preservação das células espermáticas (p<0,05), e aos do GIII, a suplementação do meio diluente com antioxidantes... / The aim of the present study was to evaluate whether the supplementation of the extender media with two different antioxidants, using them separately or associated and in different concentrations, improved or not the quality of sperm cells after cooling and freezing. Fifteen experimental units (EU), each one consisted by epidydimal sperm recovered from five healthy dogs (total of 75 animals) that underwent to elective orchiectomy were assessed. The EU were equally divided into three experimental groups. Group I (GI) and II (GII), III (GIII) had the addition of 5; 2.5; or 0.5 of antioxidants. Each group was divided into three aliquots, the first one was evaluated at the moment of the collection, the second aliquot was chilled for 48 h and the third was frozen. Subsequently, each EU was divided into four aliquots of equal volume and immediately centrifuged, the supernatant was discarded and the concentrated sperm resuspended in TRIS extender supplemented with Vitamin E and/or N-acetyl-cysteine. Sperm total and progressive motility, and vital test were performed.. Additionally, membrane integrity was assessed using the hyposmotic swelling test and fluorescent staining. Nevertheless, mitochondrial activity was performed by cytochemical activity test (DAB). The data were statistically analyzed using nonparametric Kruskal-Wallis and Friedman and parametric Tukey (p <0.05). Except for 5 mMol of NAC or NAC + Vitamin E that were harmful for the sperm cells, there was no significance among the experimental groups. However, when comparing the different antioxidant concentrations of the same chemical significance variation was noticed and 0.5 mMol of NAC and/or Vit E promoted more benefits to the spermatic cells when compared to the other concentrations, and when added to the extender, 0,5 mMol... (Complete abstract click electronic access below)

Orientador: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Coorientador: Maria Isabel Mello Martins / Coorientador: Juliana Corrêa Borges Silva / Banca: Paulo Henrique Franceschini / Banca: Erika da Silva Carvalho Morani / Resumo: O objetivo foi testar se a suplementação do meio diluente com dois antioxidantes (N-acetilcisteína e/ou vitamina E), em diferentes concentrações, melhorou a qualidade da preservação das células espermáticas provenientes de epidídimo de cães, nos processos de refrigeração e congelação. Utilizaram-se 15 unidades experimentais (UE), cada uma, constituída pelo recuperado espermático de cinco cães hígidos, submetidos à orquiectomia eletiva; as quais foram divididas em três grupos experimentais (GI, GII, GIII), constituídos por cinco UE cada. Adicionou-se antioxidantes nas concentrações de 5,0; 2,5 e 0,5mMol, respectivamente. Cada grupo foi dividido em três alíquotas, uma avaliada a fresco, outra refrigerada por 48 horas e a terceira congelada. Ato continuo, cada UE foi dividida em quatro alíquotas de igual volume e estas centrifugadas; o concentrado de espermatozoides foi ressuspendido em meio diluente TRIS, acrescido de vitamina E e/ou N-acetil-cisteína. Realizou-se a avaliação dos espermatozoides, quanto à motilidade, vigor, teste vital e morfologia espermática. A integridade de membrana foi avaliada por meio do teste hiposmótico e coloração por sondas fluorescentes, e a atividade mitocondrial pela atividade citoquímica (DAB). Os dados obtidos foram submetidos à análise não paramétrica pelo teste de Kruskal-Wallis e Friedman, e os paramétricos pelo Tukey (p<0,05). Observou-se significância entre os grupos GI, GII e GIII, sendo que o GIII apresentou melhores resultados (p<0,05). Não foi observada diferença entre os tratamentos do GII (p>0,05), em relação aos do GI, ressaltou-se a suplementação da NAC isolada ou associada à vitamina E possuindo efeito deletério na preservação das células espermáticas (p<0,05), e aos do GIII, a suplementação do meio diluente com antioxidantes... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The aim of the present study was to evaluate whether the supplementation of the extender media with two different antioxidants, using them separately or associated and in different concentrations, improved or not the quality of sperm cells after cooling and freezing. Fifteen experimental units (EU), each one consisted by epidydimal sperm recovered from five healthy dogs (total of 75 animals) that underwent to elective orchiectomy were assessed. The EU were equally divided into three experimental groups. Group I (GI) and II (GII), III (GIII) had the addition of 5; 2.5; or 0.5 of antioxidants. Each group was divided into three aliquots, the first one was evaluated at the moment of the collection, the second aliquot was chilled for 48 h and the third was frozen. Subsequently, each EU was divided into four aliquots of equal volume and immediately centrifuged, the supernatant was discarded and the concentrated sperm resuspended in TRIS extender supplemented with Vitamin E and/or N-acetyl-cysteine. Sperm total and progressive motility, and vital test were performed.. Additionally, membrane integrity was assessed using the hyposmotic swelling test and fluorescent staining. Nevertheless, mitochondrial activity was performed by cytochemical activity test (DAB). The data were statistically analyzed using nonparametric Kruskal-Wallis and Friedman and parametric Tukey (p <0.05). Except for 5 mMol of NAC or NAC + Vitamin E that were harmful for the sperm cells, there was no significance among the experimental groups. However, when comparing the different antioxidant concentrations of the same chemical significance variation was noticed and 0.5 mMol of NAC and/or Vit E promoted more benefits to the spermatic cells when compared to the other concentrations, and when added to the extender, 0,5 mMol... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador: Antonio Marcos Orsi / Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-04T13:41:51Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Beu_CeliaCristinaLeme_D.pdf: 7559585 bytes, checksum: 9cce3f7470d95982681f246437d4f90a (MD5) Previous issue date: 2005 / Resumo: O epitélio de revestimento do epidídimo do hamster dourado Mesocricetus auratus foi estudado nas regiões de segmento inicial, cabeça, corpo e cauda distal. As análises histológicas permitiram identificar células principais, basais, claras, halo e delgadas formando o epitélio de revestimento epididimário. As células principais predominaram na constituição do epitélio epididimário, apresentando contribuição relativa de 67,8% a 74,9% em sua formação. Células claras estavam presentes apenas na cauda distal, enquanto que as células delgadas não ocorreram apenas na cauda epididimária. As análises morfométricas mostraram que a altura epitelial variou ao longo do dueto epididimário, sendo que a maior altura ocorreu no segmento inicial (46,4mm) e a menor, na cauda distal (12,6 mm). As análises bioquímicas mostraram que as enzimas lactato desidrogenase e fosfatase alcalina apresentaram maior atividade na cauda epididimária. A maior concentração de proteínas totais ocorreu no segmento inicial com redução progressiva ao longo dos segmentos tubulares mais distais. Entre as células principais, claras e basais da cauda distal foram observados grandes espaços intercelulares, preenchidos com restos de membrana, estruturas semelhantes a figuras de mielina, vesículas, corpos multivesiculares ou material floculento. A observação destes espaços entre as células epiteliais da cauda distal sugere que há ocorrência de transcitose na cauda epididimária do hamster dourado, com possível passagem de água, entre outras substâncias, a partir do lúmen. A transcitose, possivelmente, influencia a formação do microambiente luminal epididimário. Os achados permitiram inferir que as regiões de cabeça e corpo do epidídimo estão envolvidas com as atividades iniciais de maturação dos espermatozóides e a cauda, além de armazenar os espermatozóides, deve ser o principal sítio para aquisição do potencial de fertilização / Abstract: The epididymis epithelium of the Golden hamster Mesocricetus auratus was studied at the initial segment, caput, corpus and distal cauda regions. The histological analyses identified principal, basal, clear, halo and narrow cells forming the epithelial lining of the epididymis. The principal cells predominated in the epididymis epithelium, contributing from 67.8% to 74.9% in its constitution. Clear cells were present only in the distal cauda, while the narrow cells did not appear only in the epididymal cauda. The morphometric analyses showed that the height of epithelial cells varied along the epididymal duct; the highest were observed at the initial segment (46.4 mm) and the lowest in the distal cauda (12.6 mm). The biochemical analyses showed that the lactate dehydrogenase and alkaline phosphatase were more activite in the epididymis cauda. The highest concentration of total proteins was verified in the initial segment with progressive reduction along the more distal segments. Among the principal, clear and basal cells of the distal cauda large intercellular spaces were observed, being filled with membrane remains, structures like myelin figures, vesicles, multivesicular bodies or flocculent material. The observation of these spaces among the epithelial cells of the distal cauda suggested that transcytosis occurred in the epididymal cauda of the Golden hamster, with possible transit of water and other substances from the lumen. Transcytosis possibly influenced the formation of the epididymis luminal microenvironment. From these observations it can be deduced that the caput and corpus regions of the epididymis were related to specific activities of spermatozoa maturation and the cauda, besides storing of spermatozoa, could be the main site to acquise of the fertilization ability / Doutorado / Anatomia / Doutor em Biologia Celular e Estrutural

Made available in DSpace on 2015-04-09T12:28:21Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2014-02-27Bitstream added on 2015-04-09T12:48:20Z : No. of bitstreams: 1 000815802.pdf: 379971 bytes, checksum: 5c1eebb69ace1989d5a3aab6dcace168 (MD5) / Este estudo foi conduzido com o objetivo de o uso do meio diluente Botu-crio associado a vitamina E, em diferentes concentrações, que se demonstrem efetivas para a criopreservação de sêmen obtido de recuperado epididimário em felinos domésticos. Cinquenta e quatro gatos domésticos foram utilizados no experimento após serem submetidos à orquiectomia eletiva e os espermatozóides obtidos diretamente da cauda e ducto deferente do epidídimo. Foram constituídos 18 “pools”, com o material de três animais cada e estes, divididos em quatro grupos experimentais. No grupo controle (G0) o sêmen foi congelado com o diluente Botu-Crio®. Nos grupos G 0,3, G 0,6 e G 0,9, ao diluente Botu-Crio® foi acrescido vitamina E em três concentrações, 0,3, 0,6 e 0,9mM, respectivamente. Para cada grupo, as amostras de sêmen fresco foram inicialmente avaliadas quanto à motilidade, vigor, morfologia supravital e teste hiposmótico, para verificar a qualidade mínima exigida para a congelação (motilidade ≥70% e vigor ≥3). Os mesmos parâmetros foram reavaliados após a descongelação também para o TBARS. Na avaliação da motilidade e vigor, não foi observado diferença estatística entre o grupo controle e as concentrações de vitamina E. Nos testes supravital, hiposmótico, morfológico e teste TBARS, também não houve significância entre as três diferentes concentrações de vitamina E e o grupo controle. Pode-se concluir que as três concentrações de vitamina E, não ofereceram proteção antioxidante ao recuperado de epidídimo de felinos domésticos / This study was conducted with the objective of using the medium Botu-crio®, associated vitamin E, at different concentrations, which demonstrate effective for cryopreservation of epididymal semen obtained recovered from domestic cats. Fifty-four domestic cats were used in the experiment after undergoing elective orchiectomy and sperm obtained directly from the tail of the epididymis and vas deferens. 18 pools were made with the material of three animals each and these were divided into four experimental groups. In the control group (G0) semen was frozen with Botu-crio®. In the groups G 0.3, G 0.6 to G 0.9, the diluent was added at three concentrations of vitamina E, 0.3, 0.6 and 0.9 mM, respectively. For each group, the fresh semen samples were initially evaluated for motility, viability, morphology and supravital and hypoosmotic test to verify minimum quality required for freezing (≥ 70 % motility and vigor ≥ 3). The same parameters were reassessed after thawing also for TBARS. In the evaluation of motility and vigor, no statistical difference was observed between the control group and the concentrations of vitamin E. In supravital tests, hyposmotic, morphological and TBARS assay, there was no significance between the different concentrations of vitamin E and the control group. It can be concluded that the three concentrations of vitamin E, antioxidant protection not offered recovered from epididymis of domestic cats