Orientador: Silvana Andrea Molina Lima / Resumo: HENRIQUES, V. S. Uso do ipilimumabe em pacientes com melanoma metastático. 2018. 24 f. Dissertação (Mestrado em Pesquisa Clínica) – Faculdade de Medicina de Botucatu, Universidade Estadual Paulista, Botucatu, 1999. O objetivo do estudo foi elaborar um parecer técnico-científico (PTC) sobre o medicamento ipilimumabe para pacientes com melanoma metastático (MM). Foi realizada busca em 3 de agosto de 2016 e atualizada em 13 de dezembro de 2017 nas bases de dados: Cochrane, Lilacs, Embase, PubMed e outras de avaliação de tecnologias em saúde (ATS). Os resultados das bases de dados foram agrupados e descartados os estudos em duplicatas. Posteriormente, foram aplicados os critérios de elegibilidade para títulos e resumos, sendo que 59 estudos foram selecionados. Após leitura dos artigos na íntegra, foram selecionados 3 ensaios clínicos randomizados. Não foram encontrados estudos avaliando isoladamente o ipilimumabe versus dacarbazina. Desta maneira, optou-se pela inclusão de três ensaios clínicos randomizados, sendo que um deles (Hersh, 2011) analisou a tecnologia ipilimumabe associada ao dacarbazina e ipilimumabe sozinho, e dois outros estudos (Robert, 2011 e Maio, 2015) analisaram a tecnologia ipilimumabe associada ao dacarbazina e dacarbazina associada ao placebo para até 3 anos de acompanhamento, e 5 anos para os desfechos de sobrevida, mortalidade e eventos adversos. Os autores não encontraram evidências científicas sobre o medicamento ipilimumabe isolado para tratamento do me... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: HENRIQUES, V. S. The use of ipilimumab in patients with metastatic melanoma. 2018. 24 f. Thesis (Master’s Program in Clinical Research) – Faculty of Medicine of Botucatu, Universidade Estadual Paulista, Botucatu, 1999. The objective of the study was to elaborate a technical-scientific opinion (PTC) on the drug ipilimumab for patients with metastatic melanoma (MM). A search was performed on August 3, 2016 and updated on December 13, 2017 in the databases: Cochrane, Lilacs, Embase, PubMed and other health technology assessment (ATS). The results of the databases were grouped and the duplicate studies were eliminated. Then the eligibility criteria for titles and abstracts were applied, remaining 59 studies for complete reading. After reading the articles in full, 3 randomized clinical trials were selected. No studies evaluating ipilimumab versus dacarbazine alone were found. Thus, we opted for the inclusion of three randomized clinical trials, one of which (Hersh, 2011) analyzed the ipilimumab technology associated with dacarbazine and ipilimumab alone, and two other studies (Robert, 2011 and May, 2015) analyzed the technology ipilimumab associated with dacarbazine and dacarbazine associated with placebo for up to 3 years of follow-up, and 5 years for survival, mortality and adverse event outcomes. The authors did not find scientific evidence on the drug ipilimumab alone for treatment of metastatic melanoma, which indicates the need for systematic review studies, randomized clin... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Submitted by Vivian Saccomano Henriques (viviansh@uol.com.br) on 2018-08-09T13:56:18Z No. of bitstreams: 1 Dissertação sobre uso de ipilimumabe em pacientes com melanoma metastático.pdf: 732832 bytes, checksum: f2d61193bb7dcdfe0c9037b271819225 (MD5) / Approved for entry into archive by Sulamita Selma C Colnago null (sulamita@btu.unesp.br) on 2018-08-09T14:15:56Z (GMT) No. of bitstreams: 1 henriques_vs_me_bot.pdf: 732832 bytes, checksum: f2d61193bb7dcdfe0c9037b271819225 (MD5) / Made available in DSpace on 2018-08-09T14:15:56Z (GMT). No. of bitstreams: 1 henriques_vs_me_bot.pdf: 732832 bytes, checksum: f2d61193bb7dcdfe0c9037b271819225 (MD5) Previous issue date: 2018-07-12 / HENRIQUES, V. S. Uso do ipilimumabe em pacientes com melanoma metastático. 2018. 24 f. Dissertação (Mestrado em Pesquisa Clínica) – Faculdade de Medicina de Botucatu, Universidade Estadual Paulista, Botucatu, 1999. O objetivo do estudo foi elaborar um parecer técnico-científico (PTC) sobre o medicamento ipilimumabe para pacientes com melanoma metastático (MM). Foi realizada busca em 3 de agosto de 2016 e atualizada em 13 de dezembro de 2017 nas bases de dados: Cochrane, Lilacs, Embase, PubMed e outras de avaliação de tecnologias em saúde (ATS). Os resultados das bases de dados foram agrupados e descartados os estudos em duplicatas. Posteriormente, foram aplicados os critérios de elegibilidade para títulos e resumos, sendo que 59 estudos foram selecionados. Após leitura dos artigos na íntegra, foram selecionados 3 ensaios clínicos randomizados. Não foram encontrados estudos avaliando isoladamente o ipilimumabe versus dacarbazina. Desta maneira, optou-se pela inclusão de três ensaios clínicos randomizados, sendo que um deles (Hersh, 2011) analisou a tecnologia ipilimumabe associada ao dacarbazina e ipilimumabe sozinho, e dois outros estudos (Robert, 2011 e Maio, 2015) analisaram a tecnologia ipilimumabe associada ao dacarbazina e dacarbazina associada ao placebo para até 3 anos de acompanhamento, e 5 anos para os desfechos de sobrevida, mortalidade e eventos adversos. Os autores não encontraram evidências científicas sobre o medicamento ipilimumabe isolado para tratamento do melanoma metastático, o que indica a necessidade de realização de estudos de revisão sistemática, ensaios clínicos randomizados e avaliação econômica sobre o assunto. / HENRIQUES, V. S. The use of ipilimumab in patients with metastatic melanoma. 2018. 24 f. Thesis (Master’s Program in Clinical Research) – Faculty of Medicine of Botucatu, Universidade Estadual Paulista, Botucatu, 1999. The objective of the study was to elaborate a technical-scientific opinion (PTC) on the drug ipilimumab for patients with metastatic melanoma (MM). A search was performed on August 3, 2016 and updated on December 13, 2017 in the databases: Cochrane, Lilacs, Embase, PubMed and other health technology assessment (ATS). The results of the databases were grouped and the duplicate studies were eliminated. Then the eligibility criteria for titles and abstracts were applied, remaining 59 studies for complete reading. After reading the articles in full, 3 randomized clinical trials were selected. No studies evaluating ipilimumab versus dacarbazine alone were found. Thus, we opted for the inclusion of three randomized clinical trials, one of which (Hersh, 2011) analyzed the ipilimumab technology associated with dacarbazine and ipilimumab alone, and two other studies (Robert, 2011 and May, 2015) analyzed the technology ipilimumab associated with dacarbazine and dacarbazine associated with placebo for up to 3 years of follow-up, and 5 years for survival, mortality and adverse event outcomes. The authors did not find scientific evidence on the drug ipilimumab alone for treatment of metastatic melanoma, which indicates the need for systematic review studies, randomized clinical trials and economic evaluation on the subject.

O melanoma maligno é a forma mais agressiva dos tumores cutâneos. Sendo o responsável por mais de 75% das mortes relativas á este tipo de câncer. O principal quimioterápico utilizado no tratamento do melanoma é a dacarbazina (DTIC), entretanto, as taxas de resposta são insatisfatórias. O composto DM-1 é um análogo estrutural da curcumina, e por esta razão possui propriedades biológicas semelhantes, como agente antiproliferativo e próapoptótico. A terapia de captura de nêutrons por boro (BNCT) atua por meio da deposição do isótopo 10Boro nas células tumorais e após a irradiação de nêutrons térmicos há produção de partículas alfa e lítio que destroem a célula. Neste trabalho estudou-se o mecanismo de ação destas três terapias, DTIC, DM-1 e BNCT no tratamento do melanoma e seus efeitos em células normais in vitro com a finalidade de obtenção de modalidades terapêuticas diferentes para o tratamento desta neoplasia. A IC50 foi obtida pela metodologia de MTT, além da análise da progressão do ciclo celular e marcadores de morte celular por citometria de fluxo. O composto DM-1 e a BNCT apresentaram efeito citotóxico seletivo para as linhagens de melanoma, com alta produção de radicais livres peroxidados. Nas mesmas condições, estes efeitos foram mínimos em células normais, diferente do tratamento com DTIC. Houve diminuição da proporção de matriz extracelular e colágeno solúvel sintetizado em células de melanoma tratadas com DM-1, BNCT e DTIC, entretanto, o quimioterápico ocasionou isoladamente diminuição também em células normais. O potencial elétrico mitocondrial das células de melanoma foi diminuído nos três protocolos de tratamento, assim como houve aumento na quantidade de DNA fragmentado. Este efeito não foi encontrado em células normais tratadas com DM-1 e BNCT. O composto DM-1 foi capaz de induzir apoptose via intrínseca e extrínseca, avaliado pela Anexina V e por marcadores de cinética e de morte celular. A terapia de BNCT induziu apoptose e necrose, indicando que esta terapia atua por diferentes vias em cada linhagem celular. BNCT e DM-1 induziram aumento na expressão dos marcados próapoptóticos, como Bax, citocromo c, caspase 3 e 8 clivadas, além de diminuir os valores na expressão de ciclina D1 e Ki-67, relacionados com a progressão do ciclo celular e proliferação. O quimioterápico DTIC apresentou alguns indícios de apoptose em células de melanoma, mas seus efeitos em células normais foram extensivos, ocasionando morte e parada do ciclo celular em melanócitos, células endoteliais e fibroblastos. O composto DM-1 apresentou formação de corpos apoptóticos, modificações no citoesqueleto e clivagem de caspase 9 e Parp em linhagens de melanoma humano. Desta forma, o composto DM-1 e a BNCT mostraram-se ferramentas terapêuticas mais eficazes no controle da progressão e no aumento da morte celular em células de melanoma. O poder efetivo da terapia de BNCT e do composto DM-1 faz com que a possibilidade de terapias combinatórias tenha resultados extremamente favoráveis na modulação da resposta proliferativa desses tumores. / Malignant melanoma is the most aggressive skin cancer. It is responsible for more than 75% of deaths. The main and most active chemotherapy in the melanoma treatment is represented by dacarbazine (DTIC), however, response rates are disappointing. The DM-1 compound is a curcumin structural analogue and it has similar biological properties, such as an antiproliferative and pro-apoptotic agent. Boron Neutron Capture Therapy (BNCT) works through the deposition of the isotope 10Boron in tumor cells, with subsequent irradiation of thermal neutrons, which produce alpha particles and lithium that destroy the cell. In this study, the action mechanism of these three therapies, DTIC, DM-1 and BNCT in the melanoma treatment and its effects in vitro on normal cells were studied in order to obtain different therapeutic modalities for cancer treatment. The IC50 was obtained by MTT method, besides the analysis of cell cycle progression and cell death markers by flow cytometry. The DM-1 and BNCT showed selective cytotoxic in melanoma cell lines, with high of free radicals production. In the same conditions, these effects were minimal in normal cells, unlike the treatment with DTIC. There was a decrease in the proportion of extracellular matrix and soluble collagen synthesized in melanoma cells treated with DM-1, BNCT and DTIC, however, only DTIC also resulted in decreased in normal cells. The mitochondrial electrical potential of melanoma cells was decreased in the three treatment protocols, as there was an increase in the amount of fragmented DNA. This effect was not found in normal cells treated with DM-1 and BNCT. The compound DM-1 was able to induce apoptosis by the intrinsic and extrinsic pathways, as assessed by Annexin V, cell death and kinetic markers. BNCT induced apoptosis and necrosis, indicating that this therapy acts through different pathways in each cell line. DM-1 and BNCT induced an increase of pro-apoptotic markers, such as Bax, cytochrome c, cleaved caspase 3 and 8 expression, and they reduced cyclin D1 and Ki-67, expression related to the progression of the cell cycle and proliferation. The DTIC has shown some signs of apoptosis in melanoma cells, but its effect on normal cells were extensive, causing death and cell cycle arrest in melanocytes, fibroblasts and endothelial cells. The DM-1 showed apoptotic bodies formation, cytoskeleton changes and caspase 9 and Parp cleavage in human melanoma cell lines. Thus, the DM-1 and BNCT showed as therapeutic tools more with high effectiveness in controlling the cell cycle progression and cell death increase in melanoma cells. The effectiveness of BNCT and DM-1 makes the possibility of combinatorial therapies, with extremely favorable results in the modulation of the proliferative response of these tumors.

O melanoma maligno é a forma mais agressiva dos tumores cutâneos. Sendo o responsável por mais de 75% das mortes relativas á este tipo de câncer. O principal quimioterápico utilizado no tratamento do melanoma é a dacarbazina (DTIC), entretanto, as taxas de resposta são insatisfatórias. O composto DM-1 é um análogo estrutural da curcumina, e por esta razão possui propriedades biológicas semelhantes, como agente antiproliferativo e próapoptótico. A terapia de captura de nêutrons por boro (BNCT) atua por meio da deposição do isótopo 10Boro nas células tumorais e após a irradiação de nêutrons térmicos há produção de partículas alfa e lítio que destroem a célula. Neste trabalho estudou-se o mecanismo de ação destas três terapias, DTIC, DM-1 e BNCT no tratamento do melanoma e seus efeitos em células normais in vitro com a finalidade de obtenção de modalidades terapêuticas diferentes para o tratamento desta neoplasia. A IC50 foi obtida pela metodologia de MTT, além da análise da progressão do ciclo celular e marcadores de morte celular por citometria de fluxo. O composto DM-1 e a BNCT apresentaram efeito citotóxico seletivo para as linhagens de melanoma, com alta produção de radicais livres peroxidados. Nas mesmas condições, estes efeitos foram mínimos em células normais, diferente do tratamento com DTIC. Houve diminuição da proporção de matriz extracelular e colágeno solúvel sintetizado em células de melanoma tratadas com DM-1, BNCT e DTIC, entretanto, o quimioterápico ocasionou isoladamente diminuição também em células normais. O potencial elétrico mitocondrial das células de melanoma foi diminuído nos três protocolos de tratamento, assim como houve aumento na quantidade de DNA fragmentado. Este efeito não foi encontrado em células normais tratadas com DM-1 e BNCT. O composto DM-1 foi capaz de induzir apoptose via intrínseca e extrínseca, avaliado pela Anexina V e por marcadores de cinética e de morte celular. A terapia de BNCT induziu apoptose e necrose, indicando que esta terapia atua por diferentes vias em cada linhagem celular. BNCT e DM-1 induziram aumento na expressão dos marcados próapoptóticos, como Bax, citocromo c, caspase 3 e 8 clivadas, além de diminuir os valores na expressão de ciclina D1 e Ki-67, relacionados com a progressão do ciclo celular e proliferação. O quimioterápico DTIC apresentou alguns indícios de apoptose em células de melanoma, mas seus efeitos em células normais foram extensivos, ocasionando morte e parada do ciclo celular em melanócitos, células endoteliais e fibroblastos. O composto DM-1 apresentou formação de corpos apoptóticos, modificações no citoesqueleto e clivagem de caspase 9 e Parp em linhagens de melanoma humano. Desta forma, o composto DM-1 e a BNCT mostraram-se ferramentas terapêuticas mais eficazes no controle da progressão e no aumento da morte celular em células de melanoma. O poder efetivo da terapia de BNCT e do composto DM-1 faz com que a possibilidade de terapias combinatórias tenha resultados extremamente favoráveis na modulação da resposta proliferativa desses tumores. / Malignant melanoma is the most aggressive skin cancer. It is responsible for more than 75% of deaths. The main and most active chemotherapy in the melanoma treatment is represented by dacarbazine (DTIC), however, response rates are disappointing. The DM-1 compound is a curcumin structural analogue and it has similar biological properties, such as an antiproliferative and pro-apoptotic agent. Boron Neutron Capture Therapy (BNCT) works through the deposition of the isotope 10Boron in tumor cells, with subsequent irradiation of thermal neutrons, which produce alpha particles and lithium that destroy the cell. In this study, the action mechanism of these three therapies, DTIC, DM-1 and BNCT in the melanoma treatment and its effects in vitro on normal cells were studied in order to obtain different therapeutic modalities for cancer treatment. The IC50 was obtained by MTT method, besides the analysis of cell cycle progression and cell death markers by flow cytometry. The DM-1 and BNCT showed selective cytotoxic in melanoma cell lines, with high of free radicals production. In the same conditions, these effects were minimal in normal cells, unlike the treatment with DTIC. There was a decrease in the proportion of extracellular matrix and soluble collagen synthesized in melanoma cells treated with DM-1, BNCT and DTIC, however, only DTIC also resulted in decreased in normal cells. The mitochondrial electrical potential of melanoma cells was decreased in the three treatment protocols, as there was an increase in the amount of fragmented DNA. This effect was not found in normal cells treated with DM-1 and BNCT. The compound DM-1 was able to induce apoptosis by the intrinsic and extrinsic pathways, as assessed by Annexin V, cell death and kinetic markers. BNCT induced apoptosis and necrosis, indicating that this therapy acts through different pathways in each cell line. DM-1 and BNCT induced an increase of pro-apoptotic markers, such as Bax, cytochrome c, cleaved caspase 3 and 8 expression, and they reduced cyclin D1 and Ki-67, expression related to the progression of the cell cycle and proliferation. The DTIC has shown some signs of apoptosis in melanoma cells, but its effect on normal cells were extensive, causing death and cell cycle arrest in melanocytes, fibroblasts and endothelial cells. The DM-1 showed apoptotic bodies formation, cytoskeleton changes and caspase 9 and Parp cleavage in human melanoma cell lines. Thus, the DM-1 and BNCT showed as therapeutic tools more with high effectiveness in controlling the cell cycle progression and cell death increase in melanoma cells. The effectiveness of BNCT and DM-1 makes the possibility of combinatorial therapies, with extremely favorable results in the modulation of the proliferative response of these tumors.