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Estudo de alcaloides harmânicos em sementes de Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Degener (maracujá azedo) por SBSE/CLAE-Flu dual / Study of harman alkaloids in seeds of Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Degener (sour passion fruit) by dual SBSE/HPLC-Flu

Rodrigues, Thyago Roberto 12 November 2013 (has links)
Há muitos estudos sobre plantas medicinais brasileiras, porém a carência de pesquisas relacionadas à segurança alimentar de plantas brasileiras usadas como alimento ainda é consideravelmente grande. A maioria dos alcaloides são substâncias tóxicas que podem ser encontrados em uma grande variedade de plantas medicinais e alimentícias, inclusive em espécies de Passiflora chamadas popularmente no Brasil de \"maracujá\". As pesquisas sobre as diversas espécies de Passiflora, em grande parte estão relacionadas com as folhas e frutos e na maioria das vezes as sementes são consideradas como resíduo. As metodologias analíticas modernas para análises na área de alimentos, utilizando SBSE com fase extratora de PDMS, tem o objetivo de facilitar o preparo de amostras complexas e diminuir os resíduos orgânicos gerados na etapa de preparo da amostra. Para isso, este estudo teve como objetivo a análise de alcaloides harmânicos pelo método SBSE/CLAE-Flu dual, adaptado para a quantificação de harmana e de harmina em sementes de maracujá azedo. O método foi especifico e linear para os alcaloides estudados (r2 = 0,996 para harmana e r2 = 0,999 para harmina). Os ensaios de repetibilidade e de precisão intermediária confirmam a precisão do método. Os testes de recuperação (entre 92,34% a 105,90% para a harmana e 83,61% a 117,76% para a harmina) indicam a exatidão do método. A amostra analisada continha (3,094x10-2 ± 5,874x10-5) µg de harmana por grama de sementes secas de maracujá azedo e (8,108x10-3±7,599x10-4) µg de harmina por grama de sementes secas de maracujá azedo. A detecção por fluorescência foi um método sensível e seletivo para a detecção da harmana (LOD = 30 ng L-1 e LOQ = 200 ng L-1) e para a harmina (LOD = 100 ng L-1 e LOQ = 400 ng L-1). Conclui-se que o método SBSE/CLAE-Flu dual pode ser usado para a análise dos alcaloides harmânicos nas sementes de maracujá azedo. / There are many studies of Brazilian medicinal plants, but the lack of research related to food safety of Brazilian plants used as food is still high. Most of the alkaloids are toxic chemicals found in a wide variety of medicinal plants and edible plants, including Passiflora species popularly known in Brazil as \"maracujá\". Researches about most of the Passiflora species are largely related about the leaves and the fruits and in most of the cases, the seeds are considered as waste. Modern analytical methodologies for food analysis, using SBSE with PDMS as the extraction phase, have the purpose of make easier the preparation of complex samples and to reduce the organic waste generated in the sample preparation step. For that, this study had the aim to analyze harman alkaloids by a dual SBSE/HPLC-Flu method, adapted to the quantification of harmane and harmine in sour passion fruit seeds. The method was specific and linear for the studied of the alkaloids (r2 = 0.996 for harmane and r2 = 0.999 for harmine). The repeatability and accuracy intermediate assays confirm the precision of the method. The recovery assay (between 92.34% and 105.90% to harmane and between 83.61% and 117.76% to harmine) indicate the accuracy of the method. The sample analyzed contained (3.094x10-2 ± 5.874x10-5) µg of the harmane in 1.0 g of dried seeds of sour passion fruit and (8.108x10-3 ± 7.599x10-4) µg of the harmine in 1.0 g of dried seeds of sour passion fruit. The fluorescence detection was a sensitive and selective method for detection of harmane (LOD = 30 ng L-1 and LOQ = 200 ng L-1) and harmine (LOD = 100 ng L-1 and LOQ = 400 ng -1). It was concluded that the dual SBSE/HPLC-Flu method can be used for the analysis of the harman alkaloids in dried seeds of sour passion fruit.
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Estudo de alcaloides harmânicos em sementes de Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Degener (maracujá azedo) por SBSE/CLAE-Flu dual / Study of harman alkaloids in seeds of Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Degener (sour passion fruit) by dual SBSE/HPLC-Flu

Thyago Roberto Rodrigues 12 November 2013 (has links)
Há muitos estudos sobre plantas medicinais brasileiras, porém a carência de pesquisas relacionadas à segurança alimentar de plantas brasileiras usadas como alimento ainda é consideravelmente grande. A maioria dos alcaloides são substâncias tóxicas que podem ser encontrados em uma grande variedade de plantas medicinais e alimentícias, inclusive em espécies de Passiflora chamadas popularmente no Brasil de \"maracujá\". As pesquisas sobre as diversas espécies de Passiflora, em grande parte estão relacionadas com as folhas e frutos e na maioria das vezes as sementes são consideradas como resíduo. As metodologias analíticas modernas para análises na área de alimentos, utilizando SBSE com fase extratora de PDMS, tem o objetivo de facilitar o preparo de amostras complexas e diminuir os resíduos orgânicos gerados na etapa de preparo da amostra. Para isso, este estudo teve como objetivo a análise de alcaloides harmânicos pelo método SBSE/CLAE-Flu dual, adaptado para a quantificação de harmana e de harmina em sementes de maracujá azedo. O método foi especifico e linear para os alcaloides estudados (r2 = 0,996 para harmana e r2 = 0,999 para harmina). Os ensaios de repetibilidade e de precisão intermediária confirmam a precisão do método. Os testes de recuperação (entre 92,34% a 105,90% para a harmana e 83,61% a 117,76% para a harmina) indicam a exatidão do método. A amostra analisada continha (3,094x10-2 ± 5,874x10-5) µg de harmana por grama de sementes secas de maracujá azedo e (8,108x10-3±7,599x10-4) µg de harmina por grama de sementes secas de maracujá azedo. A detecção por fluorescência foi um método sensível e seletivo para a detecção da harmana (LOD = 30 ng L-1 e LOQ = 200 ng L-1) e para a harmina (LOD = 100 ng L-1 e LOQ = 400 ng L-1). Conclui-se que o método SBSE/CLAE-Flu dual pode ser usado para a análise dos alcaloides harmânicos nas sementes de maracujá azedo. / There are many studies of Brazilian medicinal plants, but the lack of research related to food safety of Brazilian plants used as food is still high. Most of the alkaloids are toxic chemicals found in a wide variety of medicinal plants and edible plants, including Passiflora species popularly known in Brazil as \"maracujá\". Researches about most of the Passiflora species are largely related about the leaves and the fruits and in most of the cases, the seeds are considered as waste. Modern analytical methodologies for food analysis, using SBSE with PDMS as the extraction phase, have the purpose of make easier the preparation of complex samples and to reduce the organic waste generated in the sample preparation step. For that, this study had the aim to analyze harman alkaloids by a dual SBSE/HPLC-Flu method, adapted to the quantification of harmane and harmine in sour passion fruit seeds. The method was specific and linear for the studied of the alkaloids (r2 = 0.996 for harmane and r2 = 0.999 for harmine). The repeatability and accuracy intermediate assays confirm the precision of the method. The recovery assay (between 92.34% and 105.90% to harmane and between 83.61% and 117.76% to harmine) indicate the accuracy of the method. The sample analyzed contained (3.094x10-2 ± 5.874x10-5) µg of the harmane in 1.0 g of dried seeds of sour passion fruit and (8.108x10-3 ± 7.599x10-4) µg of the harmine in 1.0 g of dried seeds of sour passion fruit. The fluorescence detection was a sensitive and selective method for detection of harmane (LOD = 30 ng L-1 and LOQ = 200 ng L-1) and harmine (LOD = 100 ng L-1 and LOQ = 400 ng -1). It was concluded that the dual SBSE/HPLC-Flu method can be used for the analysis of the harman alkaloids in dried seeds of sour passion fruit.
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Adubação nitrogenada na produção e na qualidade de frutos de maracujazeiro amarelo

Tosta, Mauro da Silva 13 February 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-12T19:15:38Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MauroST_DISSERT.pdf: 1583076 bytes, checksum: 21ea20c37f445bdcb3542826ae383cfd (MD5) Previous issue date: 2009-02-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The culture of the passion fruit plant-yellow it is explored commercially of north to south of Brazil, involving tropical and subtropical areas. Your cultivation is in expansion phase in reason of the great commercialization perspectives. In this context the objective of the work was to evaluate the effect of the manuring nitrogenada in the production of the yellow passion fruit plant irrigated in the conditions of Cassilandia (MS). The experimental design used was of randomized complete blocks whit 5 doses of nitrogen (0, 80, 160, 240 and 320 kg ha-1), with 4 repetitions, spaced in 3m between lines and 4m among plants; each experimental unit was constituted by 6 plants and 4 plants in the useful area. The conduction in the culture was accomplished in a wire thread to 1,8m of height of the soil. The application of the treatments was parceled out in 6 times (from 11/2006 to 05/2007), beginning 5 months after transplant of the seedlings. The crop was it accomplishes from 29/11/2006 to 17/08/2007. The increase of the manuring with nitrogen promoted an answer of behavior quadratic polinomial for the total of fruits you didn't trade; total of fruits; production commercial, no-commercial and total; commercial and no-commercial productivity; thickness of the peel; and SST. The increase of the doses of N promoted a decreasing answer for medium weight of marketable fruits; pulp revenue; number of seeds; and pH of the soil. Not being verified effect of the treatments for total of marketable fruits, weigh medium, diameter and fruit length; and pH of the pulp. The manuring with nitrogen influences in the production and the quality of the passion fruit plant-yellow, in the conditions of Cassilandia (State of Mato Grosso do Sul - Brazil), it can be applied from 116 to 173 kg ha-1 of nitrogen in covering. / A cultura do maracujazeiro amarelo é explorada comercialmente de norte a sul do Brasil, envolvendo regiões tropicais e subtropicais. Seu cultivo encontra-se em fase de expansão em razão das ótimas perspectivas de comercialização. Neste contexto o objetivo do trabalho foi avaliar o efeito da adubação nitrogenada na produção do maracujazeiro amarelo irrigado nas condições de Cassilândia (MS). Foi utilizado um experimento com delineamento em blocos casualizados ao acaso, sendo testadas 5 doses de nitrogênio (0, 80, 160, 240 e 320 kg ha-1), com 4 repetições, espaçadas em 3 m entre linhas e 4 metros entre plantas; cada unidade experimental foi constituída por 6 plantas, sendo 4 plantas a área útil. A condução da cutura foi realizada em forma de espaldeira, conduzido por um fio de arame a 1,8m de altura. A aplicação dos tratamentos foram parcelada em 6 vezes (11/2006 a 05/2007), iniciando 5 meses após o transplantio. A colheita foi realizada de 29/11/2006 a 17/08/2007. O aumento da adubação nitrogenada promoveu uma resposta de comportamento polinomial quadrática para o total de frutos; produção comercial e total; produtividade comercial; espessura da casca; o SST e pH do solo. O aumento das doses de N promoveu uma resposta decrescente para peso médio de frutos comerciáveis; rendimento de polpa e o número de sementes. Não sendo verificado efeito dos tratamentos para total de frutos comerciáveis, peso médio, diâmetro equatorial e comprimento de frutos; pH da polpa. A adubação nitrogenada influencia na produção e a qualidade do maracujazeiro amarelo , nas condições de Cassilândia (MS), pode ser aplicado de 116 a 173 kg ha-1 de nitrogênio em cobertura.
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Adubação nitrogenada na produção e na qualidade de frutos de maracujazeiro amarelo

Tosta, Mauro da Silva 13 February 2009 (has links)
Made available in DSpace on 2016-08-12T19:18:54Z (GMT). No. of bitstreams: 1 MauroST_DISSERT.pdf: 1583076 bytes, checksum: 21ea20c37f445bdcb3542826ae383cfd (MD5) Previous issue date: 2009-02-13 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico / The culture of the passion fruit plant-yellow it is explored commercially of north to south of Brazil, involving tropical and subtropical areas. Your cultivation is in expansion phase in reason of the great commercialization perspectives. In this context the objective of the work was to evaluate the effect of the manuring nitrogenada in the production of the yellow passion fruit plant irrigated in the conditions of Cassilandia (MS). The experimental design used was of randomized complete blocks whit 5 doses of nitrogen (0, 80, 160, 240 and 320 kg ha-1), with 4 repetitions, spaced in 3m between lines and 4m among plants; each experimental unit was constituted by 6 plants and 4 plants in the useful area. The conduction in the culture was accomplished in a wire thread to 1,8m of height of the soil. The application of the treatments was parceled out in 6 times (from 11/2006 to 05/2007), beginning 5 months after transplant of the seedlings. The crop was it accomplishes from 29/11/2006 to 17/08/2007. The increase of the manuring with nitrogen promoted an answer of behavior quadratic polinomial for the total of fruits you didn't trade; total of fruits; production commercial, no-commercial and total; commercial and no-commercial productivity; thickness of the peel; and SST. The increase of the doses of N promoted a decreasing answer for medium weight of marketable fruits; pulp revenue; number of seeds; and pH of the soil. Not being verified effect of the treatments for total of marketable fruits, weigh medium, diameter and fruit length; and pH of the pulp. The manuring with nitrogen influences in the production and the quality of the passion fruit plant-yellow, in the conditions of Cassilandia (State of Mato Grosso do Sul - Brazil), it can be applied from 116 to 173 kg ha-1 of nitrogen in covering. / A cultura do maracujazeiro amarelo é explorada comercialmente de norte a sul do Brasil, envolvendo regiões tropicais e subtropicais. Seu cultivo encontra-se em fase de expansão em razão das ótimas perspectivas de comercialização. Neste contexto o objetivo do trabalho foi avaliar o efeito da adubação nitrogenada na produção do maracujazeiro amarelo irrigado nas condições de Cassilândia (MS). Foi utilizado um experimento com delineamento em blocos casualizados ao acaso, sendo testadas 5 doses de nitrogênio (0, 80, 160, 240 e 320 kg ha-1), com 4 repetições, espaçadas em 3 m entre linhas e 4 metros entre plantas; cada unidade experimental foi constituída por 6 plantas, sendo 4 plantas a área útil. A condução da cutura foi realizada em forma de espaldeira, conduzido por um fio de arame a 1,8m de altura. A aplicação dos tratamentos foram parcelada em 6 vezes (11/2006 a 05/2007), iniciando 5 meses após o transplantio. A colheita foi realizada de 29/11/2006 a 17/08/2007. O aumento da adubação nitrogenada promoveu uma resposta de comportamento polinomial quadrática para o total de frutos; produção comercial e total; produtividade comercial; espessura da casca; o SST e pH do solo. O aumento das doses de N promoveu uma resposta decrescente para peso médio de frutos comerciáveis; rendimento de polpa e o número de sementes. Não sendo verificado efeito dos tratamentos para total de frutos comerciáveis, peso médio, diâmetro equatorial e comprimento de frutos; pH da polpa. A adubação nitrogenada influencia na produção e a qualidade do maracujazeiro amarelo , nas condições de Cassilândia (MS), pode ser aplicado de 116 a 173 kg ha-1 de nitrogênio em cobertura.
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Estudo analítico dos flavonoides dos frutos do maracujá (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Degener) / Analytical studies of the flavonoids in passion fruit (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Degener)

Zeraik, Maria Luiza 16 April 2010 (has links)
Atualmente tem-se dado grande ênfase aos alimentos funcionais, pois atuam na prevenção e auxiliam na recuperação de várias doenças, como doenças inflamatórias crônicas, cardiovasculares e câncer, por apresentarem principalmente flavonoides, que previnem lesões oxidativas, propiciando benefícios à saúde. O Brasil é o maior produtor mundial do maracujá, e em vista disto é de suma importância o desenvolvimento de métodos analíticos e estudos de atividade antioxidante e anti-inflamatória do fruto de maracujá, visando sua possível utilização como alimento funcional e produção de possíveis fármacos. Passiflora edulis Sims. f. flavicarpa Degener, conhecida como maracujá azedo ou amarelo é a espécie mais cultivada e comercializada no Brasil. Desta forma, os objetivos deste trabalho foram: desenvolver e validar um método analítico por CLAE-UV/DAD (cromatografia líquida de alta eficiência acoplada detector de arranjo de fotodiodos) para quantificação da flavona isoorientina, presente na polpa de P. edulis; quantificação dos flavonoides totais desta espécie, usando um padrão de baixo custo (rutina); comparar as técnicas CLAE e CCDAE (cromatografia em camada delgada de alta eficiência) e analisar a isoorientina nas cascas dos frutos de P. edulis infectada com o vírus PWV e cascas sadias por CCDAE; quantificar as proteínas totais e avaliar as atividades antioxidantes e anti-inflamatória dos extratos de cascas de P. edulis e da polpa dos frutos de P. edulis e P. alata, empregando-se o método do DPPH•, e os ensaios de QLluc (quimioluminescencia dependente de lucigenina), ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), e SIEFED (Specific Immunologic Extraction Followed by Enzymatic Detection). Os resultados mostraram que o método desenvolvido por CLAE-UV/DAD foi adequado e eficiente para quantificação de isoorientina e de flavonoides totais na polpa de P. edulis, apresentando especificidade, linearidade, exatidão, precisão, dentro das faixas internacionalmente aceitas. Além disso, este método foi aplicado com sucesso nas análises de flavonoides em cascas de P. edulis e polpa de P. alata. O trabalho mostrou as vantagens da utilização da técnica CCDAE, como a realização de análises mais rápida e econômica, com baixo consumo de solvente e resíduos gerados frente à CLAE-UV/DAD. Por meio da técnica CL-EM/EM (cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em tandem) foi possível identificar as flavonas isoorientina e isovitexina na polpa de P. edulis. Os extratos de cascas de P. edulis apresentaram maior capacidade redutora de radicais (método do DPPH•), seguido das polpas de P. edulis e P. alata, respectivamente. Os extratos de cascas também mostraram maior inibição da produção de EROs (espécies reativas de oxigênio) pelos neutrófilos ativados e da atividade da MPO (mieloperoxidase) isolada, porém verificou-se que todos os extratos testados não modificaram a desgranulação dos neutrófilos, não influenciando a liberação de MPO no plasma. Assim, concluiu-se que a atividade antioxidante pode estar diretamente relacionada com a concentração de isoorientina presente nos extratos. A grande quantidade de proteínas e isoorientina encontrada nas cascas de P. edulis, se comparada à polpa de P. edulis, aliada à elevada atividade antioxidante e anti-inflamatória, sugere o potencial das cascas de P. edulis como um alimento funcional, ou como possível fonte de flavonoides naturais para a produção de fármacos, sugerindo assim o aproveitamento deste grande resíduo industrial. / Functional foods have been the focus of many studies nowadays, because they act preventing and assisting in the recovery of several diseases, such as chronic inflammatory, cardiovascular and cancer, due to they have mainly flavonoids, which prevent oxidative damage, providing health benefits. Brazil is the largest producer of passion fruit; therefore, it is very important to develop analytical methods and studies of antioxidant and anti-inflammatory activities of passion fruit, intending to its use as a functional food and in the development of drugs. Passiflora edulis Sims. f. flavicarpa Degener, known as yellow passion fruit, is the most cultivated and marketed species in Brazil. Therefore, the objectives were: to develop and validate an analytical method by HPLC-UV/DAD (high-performance liquid chromatography with photo-diode array detection) for quantification of isoorientin present in the pulp of P. edulis and quantification of total flavonoids of this specie, using a low-cost standard (rutin); to compare HPLC and HPTLC (high-performance thin layer chromatographic) techniques and to analyze isoorientin in the peels of P. edulis fruits infected by PWV virus and healthy peels by HPTLC; to quantify the proteins and to evaluate the antioxidant and anti-inflammatory activities of the extracts of P. edulis peels and P. edulis and P. alata pulp, using the method of DPPH•, QLluc (chemiluminescence dependent of lucigenin), ELISA (enzyme linked immunosorbent assay), and SIEFED (specific immunologic extraction followed by enzymatic detection). The results showed that the HPLC-UV/DAD method was suitable and efficient for isoorientin quantification and total flavonoids in the P. edulis pulp, with specificity, linearity, accuracy, precision, within internationally acceptable limits. Moreover, this method was successfully applied to the analysis of flavonoids in the P. edulis peels and P. alata pulp. The study presented the advantages of using the HPTLC technique such as to perform faster and cheaper analysis, with low solvent consumption and waste generated compared to HPLC-UV/DAD. Using LC-MS/MS technique (liquid chromatography with tandem mass spectrometry detection) the flavones isoorientin and isovitexin were identified in the pulp of P. edulis. The extracts of peels of P. edulis showed the higher radical scavenging ability (DPPH• method), followed by P. edulis and P. alata pulps, respectively. The peels extracts also showed greater inhibition of ROS (reactive oxygen species) production by neutrophils activated and isolated MPO activity, but it was found that the extracts did not alter the neutrophils degranulation and does not influence the MPO release in the plasma. Therefore, it was concluded that the antioxidant activity might be directly related to the concentration of isoorientin present in the extracts. The high amount of protein and isoorientin found in the P. edulis fruit peels, compared with P. edulis pulp, and the high antioxidant and anti-inflammatory activities, suggests the potential of the P. edulis fruit peels as functional food or a possible source of natural flavonoids for drugs production, suggesting the use of this substantial industrial waste.
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Estudo analítico dos flavonoides dos frutos do maracujá (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Degener) / Analytical studies of the flavonoids in passion fruit (Passiflora edulis Sims f. flavicarpa Degener)

Maria Luiza Zeraik 16 April 2010 (has links)
Atualmente tem-se dado grande ênfase aos alimentos funcionais, pois atuam na prevenção e auxiliam na recuperação de várias doenças, como doenças inflamatórias crônicas, cardiovasculares e câncer, por apresentarem principalmente flavonoides, que previnem lesões oxidativas, propiciando benefícios à saúde. O Brasil é o maior produtor mundial do maracujá, e em vista disto é de suma importância o desenvolvimento de métodos analíticos e estudos de atividade antioxidante e anti-inflamatória do fruto de maracujá, visando sua possível utilização como alimento funcional e produção de possíveis fármacos. Passiflora edulis Sims. f. flavicarpa Degener, conhecida como maracujá azedo ou amarelo é a espécie mais cultivada e comercializada no Brasil. Desta forma, os objetivos deste trabalho foram: desenvolver e validar um método analítico por CLAE-UV/DAD (cromatografia líquida de alta eficiência acoplada detector de arranjo de fotodiodos) para quantificação da flavona isoorientina, presente na polpa de P. edulis; quantificação dos flavonoides totais desta espécie, usando um padrão de baixo custo (rutina); comparar as técnicas CLAE e CCDAE (cromatografia em camada delgada de alta eficiência) e analisar a isoorientina nas cascas dos frutos de P. edulis infectada com o vírus PWV e cascas sadias por CCDAE; quantificar as proteínas totais e avaliar as atividades antioxidantes e anti-inflamatória dos extratos de cascas de P. edulis e da polpa dos frutos de P. edulis e P. alata, empregando-se o método do DPPH•, e os ensaios de QLluc (quimioluminescencia dependente de lucigenina), ELISA (Enzyme Linked Immunosorbent Assay), e SIEFED (Specific Immunologic Extraction Followed by Enzymatic Detection). Os resultados mostraram que o método desenvolvido por CLAE-UV/DAD foi adequado e eficiente para quantificação de isoorientina e de flavonoides totais na polpa de P. edulis, apresentando especificidade, linearidade, exatidão, precisão, dentro das faixas internacionalmente aceitas. Além disso, este método foi aplicado com sucesso nas análises de flavonoides em cascas de P. edulis e polpa de P. alata. O trabalho mostrou as vantagens da utilização da técnica CCDAE, como a realização de análises mais rápida e econômica, com baixo consumo de solvente e resíduos gerados frente à CLAE-UV/DAD. Por meio da técnica CL-EM/EM (cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em tandem) foi possível identificar as flavonas isoorientina e isovitexina na polpa de P. edulis. Os extratos de cascas de P. edulis apresentaram maior capacidade redutora de radicais (método do DPPH•), seguido das polpas de P. edulis e P. alata, respectivamente. Os extratos de cascas também mostraram maior inibição da produção de EROs (espécies reativas de oxigênio) pelos neutrófilos ativados e da atividade da MPO (mieloperoxidase) isolada, porém verificou-se que todos os extratos testados não modificaram a desgranulação dos neutrófilos, não influenciando a liberação de MPO no plasma. Assim, concluiu-se que a atividade antioxidante pode estar diretamente relacionada com a concentração de isoorientina presente nos extratos. A grande quantidade de proteínas e isoorientina encontrada nas cascas de P. edulis, se comparada à polpa de P. edulis, aliada à elevada atividade antioxidante e anti-inflamatória, sugere o potencial das cascas de P. edulis como um alimento funcional, ou como possível fonte de flavonoides naturais para a produção de fármacos, sugerindo assim o aproveitamento deste grande resíduo industrial. / Functional foods have been the focus of many studies nowadays, because they act preventing and assisting in the recovery of several diseases, such as chronic inflammatory, cardiovascular and cancer, due to they have mainly flavonoids, which prevent oxidative damage, providing health benefits. Brazil is the largest producer of passion fruit; therefore, it is very important to develop analytical methods and studies of antioxidant and anti-inflammatory activities of passion fruit, intending to its use as a functional food and in the development of drugs. Passiflora edulis Sims. f. flavicarpa Degener, known as yellow passion fruit, is the most cultivated and marketed species in Brazil. Therefore, the objectives were: to develop and validate an analytical method by HPLC-UV/DAD (high-performance liquid chromatography with photo-diode array detection) for quantification of isoorientin present in the pulp of P. edulis and quantification of total flavonoids of this specie, using a low-cost standard (rutin); to compare HPLC and HPTLC (high-performance thin layer chromatographic) techniques and to analyze isoorientin in the peels of P. edulis fruits infected by PWV virus and healthy peels by HPTLC; to quantify the proteins and to evaluate the antioxidant and anti-inflammatory activities of the extracts of P. edulis peels and P. edulis and P. alata pulp, using the method of DPPH•, QLluc (chemiluminescence dependent of lucigenin), ELISA (enzyme linked immunosorbent assay), and SIEFED (specific immunologic extraction followed by enzymatic detection). The results showed that the HPLC-UV/DAD method was suitable and efficient for isoorientin quantification and total flavonoids in the P. edulis pulp, with specificity, linearity, accuracy, precision, within internationally acceptable limits. Moreover, this method was successfully applied to the analysis of flavonoids in the P. edulis peels and P. alata pulp. The study presented the advantages of using the HPTLC technique such as to perform faster and cheaper analysis, with low solvent consumption and waste generated compared to HPLC-UV/DAD. Using LC-MS/MS technique (liquid chromatography with tandem mass spectrometry detection) the flavones isoorientin and isovitexin were identified in the pulp of P. edulis. The extracts of peels of P. edulis showed the higher radical scavenging ability (DPPH• method), followed by P. edulis and P. alata pulps, respectively. The peels extracts also showed greater inhibition of ROS (reactive oxygen species) production by neutrophils activated and isolated MPO activity, but it was found that the extracts did not alter the neutrophils degranulation and does not influence the MPO release in the plasma. Therefore, it was concluded that the antioxidant activity might be directly related to the concentration of isoorientin present in the extracts. The high amount of protein and isoorientin found in the P. edulis fruit peels, compared with P. edulis pulp, and the high antioxidant and anti-inflammatory activities, suggests the potential of the P. edulis fruit peels as functional food or a possible source of natural flavonoids for drugs production, suggesting the use of this substantial industrial waste.
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Avalia??o da toxicidade subcr?nica e reprodutiva do extrato seco de pericarpo de passiflora edulis variedade flavicarpa degener em ratos

Arruda, Andr?a Caroline Costa de 20 July 2015 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-04-25T22:57:37Z No. of bitstreams: 1 AndreaCarolineCostaDeArruda_DISSERT.pdf: 2892778 bytes, checksum: ab6349b021e0a01fec34dc8730e5aa85 (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-04-27T22:19:59Z (GMT) No. of bitstreams: 1 AndreaCarolineCostaDeArruda_DISSERT.pdf: 2892778 bytes, checksum: ab6349b021e0a01fec34dc8730e5aa85 (MD5) / Made available in DSpace on 2016-04-27T22:19:59Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AndreaCarolineCostaDeArruda_DISSERT.pdf: 2892778 bytes, checksum: ab6349b021e0a01fec34dc8730e5aa85 (MD5) Previous issue date: 2015-07-20 / O pericarpo de Passiflora edulis var. flavicarpa Degener atualmente est? sendo investigado para fins medicinais. N?o h? relatos na literatura sobre sua toxicidade. O objetivo do presente estudo foi investigar a toxicidade sub-cr?nica em ratos machos e toxicidade em ratas f?meas prenhes e fetos expostos durante a gesta??o a um extrato obtido por infus?o do pericarpo em ?gua (1:3 m/v; 100o C, 10 min). A composi??o do extrato foi avaliada por meio de rea??es qu?micas e tamb?m por cromatografia de camada delgada. Ratos machos adultos (n=8) foram tratados com 300 mg/kg de extrato, por gavagem, durante 30 dias e ratas prenhes (n=7) do dia 0 ao dia 20 de gesta??o. Os grupos controle de ratos machos (n=8) e ratas f?meas (n=7) receberam ?gua pot?vel (1 ml). Durante o tratamento foram registrados o consumo de ?gua e de ra??o e o peso corporal. No dia 29 o comportamento sexual dos machos foi analisado e, em seguida, metade dos machos de cada grupo receberam ciclofosfamida (50 mg/kg, i.p.) para avalia??o (anti) genot?xica na medula ?ssea e a outra metade recebeu apenas solu??o salina 0,9% (1 mL, i.p.). No dia 30, os machos foram anestesiados para coleta de sangue, medula ?ssea e ?rg?os. No dia 20 de gesta??o, as ratas prenhes foram anestesiadas para avalia??o do desempenho reprodutivo. A an?lise dos fetos foi realizada por exame visceral e esquel?tico. A an?lise fitoqu?mica revelou a presen?a de flavon?ides, alcal?ides inespec?ficos, compostos fen?licos e triterp?nicos. A an?lise estat?stica revelou aus?ncia de diferen?as em todos os par?metros analisados para machos, para f?meas e para fetos experimentais em rela??o aos animais controle. A citotoxicidade foi avaliada pela rela??o entre eritr?citos policrom?ticos e normocrom?ticos (EPC/ENC). A an?lise estat?stica (m?dia ? erro do desvio padr?o) revelou aus?ncia de altera??es na frequ?ncia de EPCMN (controle negativo: 3,26?0,42; controle positivo: 11,72?1,02; experimental negativo: 4,02?0,13; experimental positivo: 10,47?0,87) ou citotoxicidade (controle negativo: 0,37?0,08; controle positivo: 0,23?0,05; experimental negativo: 0,37?0,07; experimental positivo: 0,23?0,02). Este estudo sugere que o extrato aquoso obtido de pericarpo de P. edulis var. flavicarpa Degener n?o foi capaz de promover efeitos t?xicos em ratos nas condi??es utilizadas. / The pericarp of Passiflora edulis var. flavicarpa Degener is now being investigated for medicine purposes. There are no reports about it toxicity. The aim of the present study was investigate the sub chronic toxicity in male rats and reproductive toxicity in pregnant rats and exposed fetuses of an extract obtained by infusion of the pericarp in water (1:3 m/v;100o C, 10 min). The extract composition was evaluated by tube reactions and thin lawyer chromatography (TLC). Adult male rats (n=8) were treated with 300 mg/kg of the extract, by gavage, during 30 days and pregnant rats (n=7) from gestation day 0 to day 20. Control received tap water (1 mL). Water and food intakes and body weight gain were recorded. At day 29 of treatment the sexual behavior of the males was analyzed and then half of males from each group received cyclophosphamide (50 mg/kg, i.p.) to (anti)genotoxic assessment in bone marrow. At day 30, males were anesthesized for parameters collection. At day 20 of gestation, the dams were anesthesized for reproductive performance evaluation. The fetal analysis was conducted by visceral and skeletal. Phytochemical analysis revealed the presence of flavonoids, unspecific alkaloids, phenols and triterpenic compounds. Statistical analysis revealed absence of significant differences between experimental and control. This study suggest that the aqueous extract obtained from pericarp of P. edulis var. flavicarpa Degener was not able to promote toxic effects in rats. Cytotoxicity was evaluated with the PCE/NCE ratio (NCE=normochromatic erythrocytes). Statistical analysis (mean ? SEM) revealed absence of changes in the frequency of MNPCE (negative control: 3.26?0.42; positive control: 11.72?1.02; negative experimental: 4.02?0.13; positive experimental: 10.47?0.87) or cytotoxicity (negative control: 0.37?0.08; positive control: 0.23?0.05; negative experimental: 0.37?0.07; positive experimental: 0.23?0.02). This study suggests that the extracts showed no (anti)genotoxic and no cytotoxic activities under the experimental conditions.
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Avalia??o de duas variedades de Passiflora edulis sobre as respostas comportamentais de camundongos e um poss?vel mecanismo de a??o

Ayres, Adriana Soeiro de Farias Silva Junqueira 11 December 2015 (has links)
Submitted by Automa??o e Estat?stica (sst@bczm.ufrn.br) on 2016-08-09T23:58:08Z No. of bitstreams: 1 AdrianaSoeiroDeFariasSilvaJunqueiraAyres_TESE.pdf: 4492005 bytes, checksum: 363e585cddc1b3b004eb5170356b575b (MD5) / Approved for entry into archive by Arlan Eloi Leite Silva (eloihistoriador@yahoo.com.br) on 2016-08-15T23:16:31Z (GMT) No. of bitstreams: 1 AdrianaSoeiroDeFariasSilvaJunqueiraAyres_TESE.pdf: 4492005 bytes, checksum: 363e585cddc1b3b004eb5170356b575b (MD5) / Made available in DSpace on 2016-08-15T23:16:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 AdrianaSoeiroDeFariasSilvaJunqueiraAyres_TESE.pdf: 4492005 bytes, checksum: 363e585cddc1b3b004eb5170356b575b (MD5) Previous issue date: 2015-12-11 / Coordena??o de Aperfei?oamento de Pessoal de N?vel Superior (CAPES) / As plantas medicinais constituem uma rica fonte de compostos biologicamente ativos com seu potencial terap?utico para o tratamento de diversos transtornos psiqui?tricos, como os transtornos de ansiedade e depress?o. O transtorno de ansiedade generalizada tem aumentado de forma significativa, sendo o segundo transtorno mais prevalente em locais de assist?ncia ? sa?de p?blica. A depress?o ? considerada um transtorno psiqui?trico cr?nico e comum que afeta 350 milh?es de indiv?duos de todas as idades ao redor do mundo. Neste contexto as condutas de interven??o farmacol?gica que v?m sendo empregadas, embora eficazes, deixam a desejar, quando observados seus efeitos adversos. A Passiflora ? uma variedade comumente conhecida comercialmente, mas tamb?m ? usada na medicina tradicional brasileira. A Passiflora edulis exibe consider?vel variabilidade morfol?gica. Esta planta produz dois tipos de fruto: o roxo (P. edulis var. edulis) e o amarelo (P. edulis var. flavicarpa). O presente estudo investigou os efeitos centrais do extrato aquoso das folhas de duas variedades da esp?cie Passiflora edulis em testes comportamentais utilizados para avaliar comportamentos relacionados ? ansiedade e depress?o, bem como investigou o potencial efeito do tipo antidepressivo das subfra??es da Passiflora edulis var. edulis e os mecanismos neurofarmacol?gicos respons?veis por essa a??o. Para a realiza??o desse estudo foram utilizados camundongos Swiss machos (2 meses de idade, pesando 30-35 g). Os animais receberam o extrato aquoso das folhas das duas esp?cies de Passiflora: Passiflora edulis Sims var. edulis (PEE - 100, 300, 1000 mg/Kg) e subfra??es AcOet, BuOH e residual (25, 50, 75, 100 mg/Kg), e a P. edulis var. flavicarpa (PEF - 30, 100, 300, 1000 mg/Kg) ou solu??o salina, por gavagem, 60 minutos antes dos testes do labirinto em cruz elevado (LCE), teste de campo aberto (TCA), teste de nata??o for?ada (TNF) e teste de seda??o induzido por tiopental. Para investigar o mecanismo de a??o da atividade do tipo antidepressiva das subfra??es foram utilizadas as seguintes drogas: PCPA (inibidor da s?ntese de 5-HT), AMPT (inibidor da s?ntese de catecolaminas), DSP-4 (neurotoxina noradren?rgica) e Sulpiride (antagonista seletivo de receptor dopamin?rgico D2). Foram utilizados como controle positivo padr?o, a fluoxetina e a nortriptilina. Os resultados do perfil fitoqu?mico demonstram caracter?sticas bem distintas para o extrato aquoso das variedades de P. edulis ?flavicarpa? e ?edulis?. Os extratos aquosos de ambas as variedades de P. edulis compartilham atividade do tipo ansiol?tica (PEE 300 mg/Kg; PEF 300 e 1000 mg/Kg) e antidepressiva (PEE 300 mg/Kg; PEF 1000 mg/Kg), enquanto o efeito hipolocomotor/sedativo s? foi visto para a PEE (1000 mg/Kg). Ambas subfra??es AcOet e BuOH do extrato aquoso da PEE apresentaram atividade do tipo antidepressiva na dose de 50 mg/Kg no TNF. Os dados sugerem que o efeito do tipo antidepressivo das subfra??es da P. edulis envolve a neurotransmiss?o serotonin?rgica e catecolamin?rgica, principalmente dopamin?rgica, haja visto que o pr?-tratamento com DSP-4 n?o afetou a a??o antidepressiva das subfra??es, enquanto que mostrou ser dependente da ativa??o de receptores dopamin?rgicos D2. / The medicinal plants constitute a rich source of biologically active compounds used for the treatment of many psychiatric disorders, such as anxiety disorders and depression. Generalized anxiety disorder has increased significantly, being the second most prevalent disorder in care facilities to public health. Depression is considered a chronic and common psychiatric disorder that affects 350 million people of all ages around the world. In this context, the pharmacological intervention conduits have been employed, effective, although leave to be desired when observed adverse effects. The genus Passiflora is commonly commercially known by its fruit, but is also widely used in traditional Brazilian medicine. Passiflora edulis displays considerable morphological variability. This plant produces two types of fruit: Purple (Passiflora edulis Sims fo. edulis) and yellow (Passiflora edulis fo. flavicarpa Degener). This study investigated the central effects of aqueous extract of the leaves of the two varieties of the species Passiflora edulis in tests used to assess behavior related to anxiety and depression, as well as investigating the potential effect of the antidepressant-like fractions of edulis fo. edulis and neuropharmacological mechanisms responsible for this action. To conduct this study used male Swiss mice (2 months old, weighing 30-35 g). The animals received the aqueous extract of the leaves of the two species of Passiflora: edulis fo. edulis (100, 300, 1000 mg / kg) and fractions ethyl acetate, butanol and aqueous waste (25, 50, 75, 100 mg / kg) and edulis fo. flavicarpa (30, 100, 300, 1000 mg / kg) or saline by gavage 60 minutes prior to the maze tests at high cross the open field test, test forced swim test and sedation induced by thiopental. To investigate the mechanism of action of the activity of antidepressant type of fractions the following drugs were used: PCPA (inhibitor of 5-HT synthesis) AMPT (inhibitor of catecholamine synthesis), DSP-4 (noradrenergic neurotoxin) and Sulpiride (antagonist selective dopamine D2 receptor). They were used as a standard positive control, fluoxetine and nortriptyline. The results of the phytochemical profile show very different characteristics to the aqueous extract of the varieties of Passiflora edulis "flavicarpa" and "edulis". The aqueous extracts of both varieties of Passiflora edulis share anxiolytic activity type (edulis fo. edulis 300 mg/kg; edulis fo. flavicarpa 300 and 1000 mg/kg) and antidepressant (edulis fo. edulis 300 mg/kg; edulis fo flavicarpa 1000 mg/kg), while the effect hipolocomotor/sedative was only seen for edulis fo. edulis (1000 mg/kg). Both fractions ethyl acetate, butanol aqueous extract edulis fo. edulis showed activity type antidepressant at a dose of 50 mg/kg in the forced swim test. The data suggest that the effect of antidepressant-like fractions edulis fo. edulis involves catecholaminergic and serotonergic neurotransmission, particularly dopaminergic, there is seen that pre-treatment DSP-4 is not affected antidepressant action of fractions as was dependent activation of dopamine D2 receptors.

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