The purpose of this study was to compare the antimicrobial effect of MTAD, two of its components, doxycycline and citric acid, and NaOCl on E. faecalis in two in vitro models: the bovine tooth model and the agar diffusion model. In the tooth model, the lumens of thirty bovine dentin discs were standardized, autoclaved and infected with E. faecalis for 14 days. The infected dentin discs were treated with either MTAD, doxycycline 100mg/ml, 10% citric acid, 5.25% NaOCl or saline for 10 minutes. Dentinal shavings were collected using sterile 037 and 040 round burs. The number of bacteria in the shavings was enumerated by overnight CO2 culturing on TSA agar plates. For the agar diffusion model, E. faecalis was plated before placing paper discs wetted with three dilutions of each irrigant. The zone of inhibition was recorded after overnight culture. The data were analyzed with a two-way ANOVA and Tukey-Kramer post-hoc test. In the bovine tooth model, NaOCl and doxycycline were more effective than control in killing E. faecalis at the shallow bur depth but at the deeper bur depth, only NaOCl was significantly more effective (psE. faecalis.

O objetivo do presente estudo foi avaliar a remoção da smear layer e a penetração intratubular do cimento obturador AH Plus utilizando diferentes protocolos de irrigação. Após aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto - FORP/USP, noventa incisivos centrais superiores foram selecionados e fornecidos pelo banco de dentes da mesma instituição. Estes foram radiografados no sentido mésio - distal e vestíbulo - lingual para comprovar a presença de canais únicos, sem curvaturas abruptas, reabsorções ou tratamentos endodônticos prévios. Após a remoção da porção coronal para a obtenção de raízes com comprimentos padronizados de 15 milímetros, os diâmetros anatômicos foram determinados e as instrumentações realizadas por meio da técnica coroa ápice estabelecendo os diâmetros cirúrgicos utilizando 3 instrumentos acima dos anatômicos. Durante este processo, os espécimes foram divididos em seis grupos de acordo com os protocolos de irrigação: Grupo 1 (controle - n. 15) - 2,5ml de água destilada a cada troca de instrumentos e 2,5ml de água destilada por 3 minutos ao final da instrumentação; Grupo 2 (n. 15) - 2,5ml de hipoclorito de sódio a 2,5% a cada troca de instrumentos e 2,5ml de hipoclorito de sódio a 2,5% por 3 minutos ao final da instrumentação; Grupo 3 (n. 15) - 2,5ml de hipoclorito de sódio a 2,5% a cada troca de instrumentos e 2,5ml de EDTA a 17% por 3 minutos ao final da instrumentação; Grupo 4 (n. 15) - 2,5ml de hipoclorito de sódio a 2,5% e 2,5ml de EDTA a 17% a cada troca de instrumentos + 2,5ml de EDTA a 17% por 3 minutos ao final da instrumentação; Grupo 5 (n. 15) - 2,5ml de hipoclorito de sódio a 2,5% a cada troca de instrumentos e 2,5ml de ácido cítrico a 10% por 3 minutos ao final da instrumentação; Grupo 6 (n. 15) - 2,5ml de hipoclorito de sódio a 2,5% e 2,5ml de ácido cítrico a 10% a cada troca de instrumentos + 2,5ml de ácido cítrico a 10% por 3 minutos ao final da instrumentação. Após esta fase, cinco espécimes de cada grupo foram clivados no sentido mésio - distal para avaliação da remoção da smear layer em microscopia eletrônica de varredura por meio da análise de 3 imagens de cada terço em aumentos de 300, 1000 e 2000 vezes. Esta variável foi determinada por um score qualitativo estabelecido pelo consenso de 3 avaliadores calibrados. Os demais espécimes foram obturados pela técnica de condensação lateral com cones principais correspondentes ao último instrumento associados ao cimento AH Plus corado com Rodamina B, cones acessórios B8 e mantidos em ambiente com 100% de umidade por 7 dias. Em seguida, os espécimes foram seccionados transversalmente para obtenção de slices de aproximadamente 2mm de espessura em cada terço (cervical, médio e apical) e as faces cervicais submetidas a um tratamento metalográfico para análise da penetração intratubular do cimento obturador em microscopia confocal a laser. Os melhores índices de remoção de smear layer e as maiores porcentagens de penetração intratubular do cimento foram obtidos pelos grupos onde as soluções quelantes foram utilizadas (G3, G4, G5 e G6) com diferenças estatisticamente significantes (p<0,05) em relação aos grupos onde utilizou - se somente a água destilada (G1) e o hipoclorito de sódio a 2,5% (G2) durante o processo de instrumentação. Não foram observadas vantagens em relação ao uso associado do EDTA a 17% e do ácido cítrico a 10% ao hipoclorito de sódio pela ausência de diferenças estatísticas significantes entre os grupos 3 e 4 e 5 e 6, respectivamente. / The aim of this study was to evaluate the smear layer removal and tubular dentine sealer penetration of AH Plus after different irrigation protocols. After approval of the study by the Ethics Committee of the Ribeirão Preto Dental School - FORP/USP, ninety maxillary central incisors were selected and supplied by the tooth bank of the same institution. The teeth were radiographed in the mesiodistal and buccolingual directions to verify the presence of single canals, without abrupt curvatures, resorption or previous endodontic treatment. The coronal portion was removed and roots lengths were standardized at 15 mm. The anatomic diameters were then determined and instrumentations were carried out by the crown-down technique, using 3 higher-diameter instruments to establish the surgical diameters. During this process, the specimens were divided into six groups, according to the following irrigation protocols: Group 1 (control - n. 15) - 2.5ml of distilled water at each change of instruments + 2.5ml of distilled water for 3 minutes at the end of the instrumentation; Group 2 (n. 15) - 2.5ml of 2.5% sodium hypochlorite at each change of instruments + 2.5 ml of 2.5% sodium hypochlorite for 3 minutes at the end of the instrumentation; Group 3 (n. 15) - 2.5ml of 2.5% sodium hypochlorite at each change of instruments + 2.5ml of 17% EDTA for 3 minutes at the end of the instrumentation; Group 4 (n. 15) - 2.5ml of 2.5% sodium hypochlorite and 2.5ml of 17% EDTA at each change of instruments + 2.5ml of 17% EDTA for 3 minutes at the end of the instrumentation; Group 5 (n. 15) - 2.5ml of 2.5% sodium hypochlorite at each change of instruments + 2.5ml of 10% citric acid for 3 minutes at the end of the instrumentation; Group 6 (n. 15) - 2.5ml of 2.5% sodium hypochlorite and 2.5 ml of 10% citric acid at each change of instruments + 2.5 ml of 10% citric acid for 3 minutes at the end of the instrumentation. Following this phase, five specimens from each group were cleaved in the mesiodistal direction to evaluate the smear layer removal by scanning electron microscopy. Evaluation was performed by analyzing 3 images of each third at 300, 1000 and 2000X. This variable was determined by a qualitative score established by the consensus of 3 calibrated examiners. The remaining specimens were filled using lateral condensation with AH Plus sealer labeled with Rhodamine B and kept in an environment with 100% humidity for 7 days. Then, the specimens were sectioned to obtain approximately 2 mm thick slices of each third (cervical, middle and apical). The cervical surfaces were subjected to metallographic treatment for analysis of the tubular dentine sealer penetration by confocal laser microscopy. The highest smear layer removal rates and tubular dentine sealer penetration percentages were obtained by the groups that used chelating solutions (G3, G4, G5 and G6). These showed statistically significant differences (p<0.05) compared with the groups that used just distilled water (G1) and 2.5% sodium hypochlorite (G2) during instrumentation. No benefits were observed for the combined use of 17% EDTA or 10% citric acid with 2.5% sodium hypochlorite, considering that there were no statistically significant differences between groups 3 and 4, and between 5 and 6, respectively.

The present research had the objective to analyze qualitatively though histobacteriology, the remaining dentine of upper human premolars after removal of clinically decayed tissue, according to presence, location and distribution of microorganisms in dental tubules in different degrees of depth of carious lesion. It was selected representative histological blades of histological cut in series, obtained during the research of Biffi et al (1982), extracted from patients of both genera and age from 20 to 40 years old. The teeth should present proximal caries and/ or occlusal caries and the removal of decayed tissue would be done in vitro. The three faces (dental, mesial and occusal) were clinically classified according to the depth of the caries in degrees 0, 1, 2, 3, 4 or 5 and microscopically assessed. The blades were tinged using the technique of Hematoxylin and Eosine, Trichrome of Masson and histobacteriological of Gram, modified by Brown and Brenn. The interpretation of histological cuts was realized with the use of a trinocular and photomicroscope. In the descriptive analysis it was possible to check the bacterial penetration in a superficial way and/ or in a deep way in the dentinal tubules both in the pulpal floor or in the amelodentinal junction, as well as the presence of bacterial niches in the cavity preparation. The contaminated tubules showed morphologically inaltered, and in pulp exposure during the removal of deep caries it was verified the introduction of a contaminated dentinal fragment in the pulp tissue. In order to have a statistical analysis of the number of microorganisms, it was applied the Pearson s correlation coefficient, respectively among the different degrees of caries and localization in the amelodentinal junction and pulp floor. It was brought to a conclusion that, in 56,7% of the decayed faces the microorganisms were placed in dentine considered clinically healthy, in which they lodged in dentinal tubules morphologically inaltered; the localization and the distribution of microorganisms in the tubules were variable and independent of the depth of the caries. / A presente pesquisa teve como objetivo realizar analise histobacteriológica da dentina remanescente de pré-molares humanos após a remoção do tecido cariado, quanto à presença, localização e distribuição dos microrganismos nos túbulos dentinários em diferentes graus de profundidade da lesão cariosa. Foram selecionadas lâminas histológicas representativas de cortes histológicos seriados de 20 dentes, obtidos durante a pesquisa de Biffi et al. (1982), extraídos de pacientes de ambos os gêneros e faixa etária entre 20 a 40 anos. Estes dentes apresentaram cárie proximal e/ou oclusal e a remoção do tecido cariado foi realizada in vitro. As três faces do dente (mesial, distal e oclusal) foram clinicamente classificadas quanto à profundidade de cárie em graus 0, 1, 2, 3, 4 ou 5 e microscopicamente avaliadas. As lâminas foram coradas pela técnica Hematoxilina e Eosina, Tricrômico de Masson e histobacteriológico de Gram, modificado por Brown e Brenn. A analise dos cortes histológicos foi realizada utilizando o microscópio de luz. Na análise histológica foi observada a presença bacteriana superficial e/ou profunda nos túbulos dentinários tanto no assoalho pulpar quanto na junção amelo-dentinária, bem como a presença de nichos bacterianos no preparo cavitário. Os túbulos contaminados apresentavam-se morfologicamente inalterados e na exposição pulpar, durante a remoção profunda da cárie, constatou-se a introdução de fragmento dentinário contaminado no tecido pulpar. Para análise estatística do número de microrganismos, foi aplicado o coeficiente de correlação de Pearson, respectivamente entre os diferentes graus de cárie e localização na junção amelo-dentinária e assoalho pulpar. Conclui-se que, em 56,7% das faces cariadas os microrganismos encontravam-se situados na dentina considerada clinicamente como sadia, os quais alojavam-se em túbulos dentinários morfologicamente inalterados; a localização e a distribuição dos microrganismos nos túbulos foi variável e independente da profundidade da cárie. / Mestre em Odontologia

O objetivo do presente estudo foi avaliar a remoção da smear layer e a penetração intratubular do cimento obturador AH Plus utilizando diferentes protocolos de irrigação. Após aprovação do Comitê de Ética em Pesquisa da Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto - FORP/USP, noventa incisivos centrais superiores foram selecionados e fornecidos pelo banco de dentes da mesma instituição. Estes foram radiografados no sentido mésio - distal e vestíbulo - lingual para comprovar a presença de canais únicos, sem curvaturas abruptas, reabsorções ou tratamentos endodônticos prévios. Após a remoção da porção coronal para a obtenção de raízes com comprimentos padronizados de 15 milímetros, os diâmetros anatômicos foram determinados e as instrumentações realizadas por meio da técnica coroa ápice estabelecendo os diâmetros cirúrgicos utilizando 3 instrumentos acima dos anatômicos. Durante este processo, os espécimes foram divididos em seis grupos de acordo com os protocolos de irrigação: Grupo 1 (controle - n. 15) - 2,5ml de água destilada a cada troca de instrumentos e 2,5ml de água destilada por 3 minutos ao final da instrumentação; Grupo 2 (n. 15) - 2,5ml de hipoclorito de sódio a 2,5% a cada troca de instrumentos e 2,5ml de hipoclorito de sódio a 2,5% por 3 minutos ao final da instrumentação; Grupo 3 (n. 15) - 2,5ml de hipoclorito de sódio a 2,5% a cada troca de instrumentos e 2,5ml de EDTA a 17% por 3 minutos ao final da instrumentação; Grupo 4 (n. 15) - 2,5ml de hipoclorito de sódio a 2,5% e 2,5ml de EDTA a 17% a cada troca de instrumentos + 2,5ml de EDTA a 17% por 3 minutos ao final da instrumentação; Grupo 5 (n. 15) - 2,5ml de hipoclorito de sódio a 2,5% a cada troca de instrumentos e 2,5ml de ácido cítrico a 10% por 3 minutos ao final da instrumentação; Grupo 6 (n. 15) - 2,5ml de hipoclorito de sódio a 2,5% e 2,5ml de ácido cítrico a 10% a cada troca de instrumentos + 2,5ml de ácido cítrico a 10% por 3 minutos ao final da instrumentação. Após esta fase, cinco espécimes de cada grupo foram clivados no sentido mésio - distal para avaliação da remoção da smear layer em microscopia eletrônica de varredura por meio da análise de 3 imagens de cada terço em aumentos de 300, 1000 e 2000 vezes. Esta variável foi determinada por um score qualitativo estabelecido pelo consenso de 3 avaliadores calibrados. Os demais espécimes foram obturados pela técnica de condensação lateral com cones principais correspondentes ao último instrumento associados ao cimento AH Plus corado com Rodamina B, cones acessórios B8 e mantidos em ambiente com 100% de umidade por 7 dias. Em seguida, os espécimes foram seccionados transversalmente para obtenção de slices de aproximadamente 2mm de espessura em cada terço (cervical, médio e apical) e as faces cervicais submetidas a um tratamento metalográfico para análise da penetração intratubular do cimento obturador em microscopia confocal a laser. Os melhores índices de remoção de smear layer e as maiores porcentagens de penetração intratubular do cimento foram obtidos pelos grupos onde as soluções quelantes foram utilizadas (G3, G4, G5 e G6) com diferenças estatisticamente significantes (p<0,05) em relação aos grupos onde utilizou - se somente a água destilada (G1) e o hipoclorito de sódio a 2,5% (G2) durante o processo de instrumentação. Não foram observadas vantagens em relação ao uso associado do EDTA a 17% e do ácido cítrico a 10% ao hipoclorito de sódio pela ausência de diferenças estatísticas significantes entre os grupos 3 e 4 e 5 e 6, respectivamente. / The aim of this study was to evaluate the smear layer removal and tubular dentine sealer penetration of AH Plus after different irrigation protocols. After approval of the study by the Ethics Committee of the Ribeirão Preto Dental School - FORP/USP, ninety maxillary central incisors were selected and supplied by the tooth bank of the same institution. The teeth were radiographed in the mesiodistal and buccolingual directions to verify the presence of single canals, without abrupt curvatures, resorption or previous endodontic treatment. The coronal portion was removed and roots lengths were standardized at 15 mm. The anatomic diameters were then determined and instrumentations were carried out by the crown-down technique, using 3 higher-diameter instruments to establish the surgical diameters. During this process, the specimens were divided into six groups, according to the following irrigation protocols: Group 1 (control - n. 15) - 2.5ml of distilled water at each change of instruments + 2.5ml of distilled water for 3 minutes at the end of the instrumentation; Group 2 (n. 15) - 2.5ml of 2.5% sodium hypochlorite at each change of instruments + 2.5 ml of 2.5% sodium hypochlorite for 3 minutes at the end of the instrumentation; Group 3 (n. 15) - 2.5ml of 2.5% sodium hypochlorite at each change of instruments + 2.5ml of 17% EDTA for 3 minutes at the end of the instrumentation; Group 4 (n. 15) - 2.5ml of 2.5% sodium hypochlorite and 2.5ml of 17% EDTA at each change of instruments + 2.5ml of 17% EDTA for 3 minutes at the end of the instrumentation; Group 5 (n. 15) - 2.5ml of 2.5% sodium hypochlorite at each change of instruments + 2.5ml of 10% citric acid for 3 minutes at the end of the instrumentation; Group 6 (n. 15) - 2.5ml of 2.5% sodium hypochlorite and 2.5 ml of 10% citric acid at each change of instruments + 2.5 ml of 10% citric acid for 3 minutes at the end of the instrumentation. Following this phase, five specimens from each group were cleaved in the mesiodistal direction to evaluate the smear layer removal by scanning electron microscopy. Evaluation was performed by analyzing 3 images of each third at 300, 1000 and 2000X. This variable was determined by a qualitative score established by the consensus of 3 calibrated examiners. The remaining specimens were filled using lateral condensation with AH Plus sealer labeled with Rhodamine B and kept in an environment with 100% humidity for 7 days. Then, the specimens were sectioned to obtain approximately 2 mm thick slices of each third (cervical, middle and apical). The cervical surfaces were subjected to metallographic treatment for analysis of the tubular dentine sealer penetration by confocal laser microscopy. The highest smear layer removal rates and tubular dentine sealer penetration percentages were obtained by the groups that used chelating solutions (G3, G4, G5 and G6). These showed statistically significant differences (p<0.05) compared with the groups that used just distilled water (G1) and 2.5% sodium hypochlorite (G2) during instrumentation. No benefits were observed for the combined use of 17% EDTA or 10% citric acid with 2.5% sodium hypochlorite, considering that there were no statistically significant differences between groups 3 and 4, and between 5 and 6, respectively.

RESUMO Desinfecção da dentina radicular pela irradiação dos lasers de ND:YAG, HO:YAG e ER:YAG: um modelo in vitro A provável causa do insucesso da terapia endodôntica é a persistência de microrganismos colonizando os túbulos dentinários. Para reduzir o risco de insucesso e, se possível, o tempo despendido no tratamento endodôntico, novos equipamentos e materiais são constantemente desenvolvidos. O objetivo desta investigação foi estudar o efeito da irradiação laser intracanal na desinfecção dos túbulos dentinários de dentes bovinos recém-extraídos, utilizando-se um modelo in vitro. Os grupos irradiados pelos vários lasers foram comparados ao tratamento com hidróxido de cálcio, freqüentemente utilizado como medicação intracanal. O cemento radicular foi removido, o canal preparado e os dentes, cortados, resultando em 180 corpos de prova padronizados. Para promover a colonização bacteriana, os corpos de prova foram incubados, a 37 o C, em frascos contendo caldo de tripticase de soja e Enterococcus faecalis, o qual continha um plasmídeo que permitiu o seu crescimento em um meio seletivo com cloranfenicol. Os corpos de prova foram divididos em cinco grupos experimentais e três grupos-controle. Para irradiação foram utilizados os lasers pulsados de: Ho:YAG a 2,1 µm; Nd:YAG (1,06 µm); e Er:YAG (2,94 µm) com e sem refrigeração ar/água. Os grupos tratados receberam três parâmetros diferentes de irradiação com cada tipo de laser: energia abaixo do limiar de modificação física (physical modification threshold - ½ do PMT) por 60s; no limiar (PMT) por 60s; e, acima do limiar (120s). O Grupo 5 recebeu sete dias de tratamento com hidróxido de cálcio. Como controles, três espécimes para cada grupo receberam água estéril (controle negativo), três receberam KI3, após exposição à bactéria (controle negativo) e três não receberam tratamento após exposição à bactéria (controle positivo). A quantidade de bactérias foi estimada mediante a contagem de unidades formadoras de colônias (u.f.c.). De modo a avaliar, paralelamente, se os comprimentos de onda laser utilizados no experimento poderiam ser absorvidos pelo E. faecalis, foram obtidos espectros de absorção no UV, VIS e IR, por meio de espectroscopia. A análise estatística mostrou uma redução bacteriana como segue: Ho:YAG > hidróxido de cálcio > Nd:YAG > Er:YAG com refrigeração ar/água > Er:YAG sem refrigeração ar/água. Houve uma significativa redução bacteriana no grupo irradiado pelo Ho:YAG no limiar de modificação – PMT (50 mJ, 10 Hz, 66 J/cm 2 , por 120s), seguida pelo Ho:YAG a 50 mJ, 10 Hz, 33J/cm 2 , por 60s e pelo grupo que recebeu hidróxido de cálcio. Os dois últimos grupos não apresentaram diferenças estatísticas significativas. O espectro de absorção pelas bactérias (E. faecalis) nas faixas dos comprimentos de onda do UV e VIS apresentou picos de absorção em 361 nm e em 377 nm (UV). Já o infravermelho próximo revelou uma baixa absorção pelo microrganismo testado. / SUMMARY Disinfection of intracanal dentin by Nd:YAG, Ho:YAG and Er:YAG laser irradiation: an in vitro model A possible cause for root canal failure is the persistence of bacteria that have colonized dentinal tubules. To reduce this risk and, if possible, to also shorten the time-consuming endodontic therapy, new equipment and materials are constantly being introduced. The aim of the present investigation was to study the effect of disinfection of dentinal tubules by intracanal laser irradiation using an in vitro model. The groups irradiated by various lasers were compared with calcium hydroxide, a material frequently used as intracanal medication between appointments. Freshly extracted, intact bovine incisors were used. The root cementum was removed and the teeth cut to produce 180 standardized specimens. For bacterial colonization, specimens were incubated at 37 o C in test tubes with Tryptic Soy Broth and Enterococcus faecalis, which carried a plasmid that allowed the growth in a selective medium containing chloramphenicol. The specimens were divided in five treatment groups and three control groups. For irradiation, pulsed delivered Ho:YAG laser at 2.1 µm, Nd:YAG laser (1.06 µm), and Er:YAG and Er:YAG laser (2.94µm) with and without air/water coolant, were used. Lasers groups received three different laser settings for treatment: output energy below the physical modification threshold (½ of PMT) for 60 sec, at the PMT for 60 sec and above the PMT (120 sec). Group 5 received a seven-day treatment with calcium hydroxide. As controls, three specimens for each treatment group received sterile water instead of bacteria (negative control), three received iodine potassium-iodide after bacterial exposure (negative control), and three did not receive treatment after bacterial exposure (positive control). The number of bacteria was estimated by counting CFU. In order to evaluate whether the lasers used in the experiment could be absorbed by the bacteria E. faecalis, an UV, VIS and NIR spectra were obtained using a spectrophotometer. Statistical analysis showed the bacterial reduction as follow: Ho:YAG laser > hidróxido de cálcio> Nd:YAG laser > Er:YAG laser with air/water coolant > Er:YAG laser without air/water coolant. There was a significantly higher bacterial reduction in the group irradiated by the Ho:YAG at the PMT (50mJ, 10 Hz, 66 J/cm 2 for 120 sec), followed by Ho:YAG irradiated at 50mJ, 10 Hz, 33 J/cm 2 for 60 sec, and the group that received calcium hydroxide. The latter two groups were not significantly different. The UV and VIS absorbance spectrum presented two absorbance peaks at 361nm and 337nm (UV). The NIR spectrum revealed a very low absorbance by the E. faecalis.

RESUMO Desinfecção da dentina radicular pela irradiação dos lasers de ND:YAG, HO:YAG e ER:YAG: um modelo in vitro A provável causa do insucesso da terapia endodôntica é a persistência de microrganismos colonizando os túbulos dentinários. Para reduzir o risco de insucesso e, se possível, o tempo despendido no tratamento endodôntico, novos equipamentos e materiais são constantemente desenvolvidos. O objetivo desta investigação foi estudar o efeito da irradiação laser intracanal na desinfecção dos túbulos dentinários de dentes bovinos recém-extraídos, utilizando-se um modelo in vitro. Os grupos irradiados pelos vários lasers foram comparados ao tratamento com hidróxido de cálcio, freqüentemente utilizado como medicação intracanal. O cemento radicular foi removido, o canal preparado e os dentes, cortados, resultando em 180 corpos de prova padronizados. Para promover a colonização bacteriana, os corpos de prova foram incubados, a 37 o C, em frascos contendo caldo de tripticase de soja e Enterococcus faecalis, o qual continha um plasmídeo que permitiu o seu crescimento em um meio seletivo com cloranfenicol. Os corpos de prova foram divididos em cinco grupos experimentais e três grupos-controle. Para irradiação foram utilizados os lasers pulsados de: Ho:YAG a 2,1 µm; Nd:YAG (1,06 µm); e Er:YAG (2,94 µm) com e sem refrigeração ar/água. Os grupos tratados receberam três parâmetros diferentes de irradiação com cada tipo de laser: energia abaixo do limiar de modificação física (physical modification threshold - ½ do PMT) por 60s; no limiar (PMT) por 60s; e, acima do limiar (120s). O Grupo 5 recebeu sete dias de tratamento com hidróxido de cálcio. Como controles, três espécimes para cada grupo receberam água estéril (controle negativo), três receberam KI3, após exposição à bactéria (controle negativo) e três não receberam tratamento após exposição à bactéria (controle positivo). A quantidade de bactérias foi estimada mediante a contagem de unidades formadoras de colônias (u.f.c.). De modo a avaliar, paralelamente, se os comprimentos de onda laser utilizados no experimento poderiam ser absorvidos pelo E. faecalis, foram obtidos espectros de absorção no UV, VIS e IR, por meio de espectroscopia. A análise estatística mostrou uma redução bacteriana como segue: Ho:YAG > hidróxido de cálcio > Nd:YAG > Er:YAG com refrigeração ar/água > Er:YAG sem refrigeração ar/água. Houve uma significativa redução bacteriana no grupo irradiado pelo Ho:YAG no limiar de modificação – PMT (50 mJ, 10 Hz, 66 J/cm 2 , por 120s), seguida pelo Ho:YAG a 50 mJ, 10 Hz, 33J/cm 2 , por 60s e pelo grupo que recebeu hidróxido de cálcio. Os dois últimos grupos não apresentaram diferenças estatísticas significativas. O espectro de absorção pelas bactérias (E. faecalis) nas faixas dos comprimentos de onda do UV e VIS apresentou picos de absorção em 361 nm e em 377 nm (UV). Já o infravermelho próximo revelou uma baixa absorção pelo microrganismo testado. / SUMMARY Disinfection of intracanal dentin by Nd:YAG, Ho:YAG and Er:YAG laser irradiation: an in vitro model A possible cause for root canal failure is the persistence of bacteria that have colonized dentinal tubules. To reduce this risk and, if possible, to also shorten the time-consuming endodontic therapy, new equipment and materials are constantly being introduced. The aim of the present investigation was to study the effect of disinfection of dentinal tubules by intracanal laser irradiation using an in vitro model. The groups irradiated by various lasers were compared with calcium hydroxide, a material frequently used as intracanal medication between appointments. Freshly extracted, intact bovine incisors were used. The root cementum was removed and the teeth cut to produce 180 standardized specimens. For bacterial colonization, specimens were incubated at 37 o C in test tubes with Tryptic Soy Broth and Enterococcus faecalis, which carried a plasmid that allowed the growth in a selective medium containing chloramphenicol. The specimens were divided in five treatment groups and three control groups. For irradiation, pulsed delivered Ho:YAG laser at 2.1 µm, Nd:YAG laser (1.06 µm), and Er:YAG and Er:YAG laser (2.94µm) with and without air/water coolant, were used. Lasers groups received three different laser settings for treatment: output energy below the physical modification threshold (½ of PMT) for 60 sec, at the PMT for 60 sec and above the PMT (120 sec). Group 5 received a seven-day treatment with calcium hydroxide. As controls, three specimens for each treatment group received sterile water instead of bacteria (negative control), three received iodine potassium-iodide after bacterial exposure (negative control), and three did not receive treatment after bacterial exposure (positive control). The number of bacteria was estimated by counting CFU. In order to evaluate whether the lasers used in the experiment could be absorbed by the bacteria E. faecalis, an UV, VIS and NIR spectra were obtained using a spectrophotometer. Statistical analysis showed the bacterial reduction as follow: Ho:YAG laser > hidróxido de cálcio> Nd:YAG laser > Er:YAG laser with air/water coolant > Er:YAG laser without air/water coolant. There was a significantly higher bacterial reduction in the group irradiated by the Ho:YAG at the PMT (50mJ, 10 Hz, 66 J/cm 2 for 120 sec), followed by Ho:YAG irradiated at 50mJ, 10 Hz, 33 J/cm 2 for 60 sec, and the group that received calcium hydroxide. The latter two groups were not significantly different. The UV and VIS absorbance spectrum presented two absorbance peaks at 361nm and 337nm (UV). The NIR spectrum revealed a very low absorbance by the E. faecalis.

O objetivo deste estudo foi o de avaliar os efeitos da irradiação laser de Er,Cr:YSGG em superfícies dentinárias no tratamento da hipersensibilidade dentinária cervical, em busca de um protocolo para ser aplicado clinicamente. Para o teste de permeabilidade, foram preparados 144 pré-molares, as coroas seccionadas e as raízes impermeabilizadas. Duas áreas de irradiação antagônicas foram delimitadas e livres da impermeabilização (controle e experimental). A seguir, os dentes foram subdivididos em dois sub-grupos, diferindo o condicionamento da superfície irradiada (EDTA 24% e ácido fosfórico 35%) e em grupos diferindo o protocolo:G1)Er:YAG, 60mJ/2Hz; G2)0,25W; G3)0,5W; G4)0,75W; G5)1W, G6)1,25W; G7)1,50W; G8)1,75W G9)2W. Após as irradiações, os espécimes foram imersos em azul de metileno 2% por 4 horas, e incluídos em resina epóxica para a realização dos cortes longitudinais. Estes tiveram suas imagens trabalhadas em computador para mensuração do nível de infiltração. Os dados foram submetidos à análise estatística. O Sub-grupo 1, condicionado com EDTA, apresentou diferenças entre os grupos sendo que as amostras irradiadas com Er:YAG demonstraram menor infiltração, diferindo estatisticamente dos grupos 3, 6 e 9. Os resultados do sub-grupo 2 mostraram que as médias das amostras irradiadas com Er:YAG tenderam a zero entretanto, não houve diferença entre os grupos. Na Fase B, fragmentos de dentina foram obtidos da região cervical de dentes humanos, preparados para análise em microscopia eletrônica de varredura. Morfologicamente, observou-se oclusão parcial dos túbulos dentinários após irradiação com Er:YAG e Er,Cr:YSGG nas condições de 0,25W e 0,50W. A partir de 0.75W, foi observado abertura dos túbulos e à medida que as energias aumentaram, foram observadas carbonização e fendas. De posse dos resultados dos trabalhos in vitro, foram selecionados os parâmetros para a aplicação e o acompanhamento clínico de 1 mês: G1)controle (placebo); G2)Er:YAG; G3)Er,Cr:YSGG 0,25W e G4)Er,Cr:YSGG 0,75W. Após a triagem, foram selecionados voluntários de acordo com critérios de exclusão e inclusão. O nível de sensibilidade de cada voluntário foi avaliado através da escala visual analógica de dor (VAS) com auxílio do ar da seringa tríplice 1 semana antes (Pré-1), 5 minutos anterior ao tratamento (Pré-2), após 5 minutos (Pós-1), 1 semana (Pós-2) e 1 mês após o tratamento (Pós-3). Os dados foram coletados e submetidos à análise estatística separadamente para os dois estímulos realizados: spray de ar e sonda exploradora. Tanto para o estímulo ar quanto para o estímulo sonda, não foram observadas diferenças estatisticamente significantes nas escalas Pré-1 e Pré-2, concluindo que os pacientes estavam padronizados e não houve efeito da profilaxia nos níveis de dor. Ao estímulo do spray de ar, nota-se uma redução nos níveis de dor na escala Pós-1, porém há uma estabilidade dos valores das escalas seguintes. O grupo 2 (Er:YAG) apresentou o menor nível de dor quando comparado aos outros grupos. Ao estímulo mecânico foi observado que o grupo 4 (Er,Cr:YSGG 0,50W) demonstrou o decréscimo de dor mais acentuado imediatamente após o tratamento, porém ao final do estudo, apresentou os maiores níveis de dor. Os grupos 1, 2 e 3 apresentam redução de dor, porém estatisticamente diferentes do grupo 4. Com base nos resultados apresentados e dentro dos limites e parâmetros estudados, pode-se concluir que nenhuma condição foi capaz de eliminar completamente a microinfiltração e diminuir a permeabilidade dentinária; porém o laser de Er:YAG e o laser de Er,Cr:YSGG 0,25W apresentaram resultados satisfatórios nos três estudos realizados. / The aim of the present study was to determine the correct parameters of the Er,Cr:YSGG laser in the treatment of cervical dentin hypersensitivity. This work was presented in 3 different stages. In the first one, it was evaluated the decrease in dentin permeability of dentinal tubules after Er,Cr:YSGG laser irradiation in radicular surfaces. Ninety premolars were prepared with its crows sectioned, and the roots completely impermeabilized. Two antagonist areas of irradiation were determined as control and experimental. Each surface was conditioned with EDTA 24% (sub-group1) and phosphoric acid 35% (sub-group2) and the selected parameters were: 1)Er:YAG, 60mJ, 2Hz, 4 irradiations of 20sec each, defocused mode; and groups 2 to 9 received irradiation with Er,Cr:YSGG laser, 20Hz, Z6 tip, 600µm diameter, defocus mode, 0% of air and water: 2)Er,Cr:YSGG 0,25W; 3) 0,5W; 4) 0,75W; 5) 1,0W; 6) 1,25W, 7) 1,50W, 8) 2W; 9) 2 W. After irradiation, samples were immersed in a solution of methylene blue for 4 hours, washed for 5 min and included in epoxy resin to allow longitudinal cuts. The images were digitalized and computed worked. Data was statistically analyzed. Although the samples irradiated with Er:YAG showed less microleakage, the sub-group 1 showed differences between the groups, statistically different from groups 3, 6 e 9. The results of the sub-group 2 showed that the mean values of the Er:YAG samples had a tendency to be negative, however, no differences were detected between the groups. In the second stage, cuts from the cervical area were obtained and prepared for scanning electron microscopy to evaluate the superficial morphology. It was observed the partial closure of dentinal tubules after the irradiation with Er:YAG and Er,Cr:YSGG laser in the 0.25 and 0.50W protocols. From the 0.75W until 2W, it was observed the dentinal tubules opened as the energy densities raised. With the results of the in vitro studies, the parameters were selected: G1)control; G2)Er:YAG; G3)Er,Cr:YSGG 0,25W e G4)Er,Cr:YSGG 0,75W. Thirty subjects, who met the entry criteria, were admitted into the study. The assessment method used to quantify sensitivity was the cold air syringe, recorded by the visual analogue scale (VAS), prior to treatment as baseline (Pre-1), immediately before (Pre-2) and immediately after (Post-1) the topical treatment, after 1 week (Post-2) and after 1 month (Post-3). Teeth were assigned to the 4 groups. After the follow-up, data was collected and submitted to statistical analysis for both kinds of stimulus: evaporative (air) and mechanical (probe). For both air and probe it was not observed differences among the Pre-1 and Pre-2 moments, for what it can be concluded that patients were standardized. Analyzing the evaporative stimulus, it can be observed the reduction in the pain level immediately after the treatment; however there was stability in the next values. Group 2 (Er:YAG) showed the least level of pain. Throughout the mechanical stimulus, it was observed that group 4 (Er,Cr:YSGG 0,50W) showed the most pronounced decrease of pain immediately after treatment, however, at the end of the study, the levels of pain increased. Groups 1, 2 e 3 showed reduction of pain, statistically different from the group 4. Based on the results and within the limits of this study, it can be concluded that none of the parameters and lasers studied were capable of eliminate the microleakage and decrease the dentin permeability, however, the Er:YAG and Er,Cr:YSGG 0,25W lasers showed satisfactory results in the three studies performed.

O presente estudo objetivou testar experimentalmente a existência da possível correlação entre a penetração de cimento nos túbulos dentinários e a qualidade do selamento. Foram utilizados 60 incisivos centrais superiores humanos que formaram um único grupo experimental. Após a eliminação das porções coronárias, as raízes foram padronizadas em 13 mm de comprimento. A instrumentação dos canais foi realizada no sentido coroa-ápice, e o comprimento de trabalho estabelecido a 1 mm aquém do forame apical. Como solução irrigadora foi empregado o NaOCl a 5,25% e ao final, EDTA a 17%. Em seguida, todos os canais foram obturados com guta-percha e cimento AH Plus marcado com um corante fluorescente. Para determinar a qualidade do selamento das obturações endodônticas, as amostras foram submetidas ao modelo de infiltração de glicose sob pressão. As raízes foram montadas em um dispositivo de dupla-câmara selada para permitir a infiltração da glicose. Como controle negativo foram utilizados 4 dentes hígidos, e como controle positivo, 2 dentes instrumentados porém, não obturados. Foram utilizados 0,75 mL de solução de glicose a 1 mol/L na câmara superior e 0,75 mL de água deionizada na câmara inferior. Os dispositivos foram conectados a um sistema de distribuição de pressão desenvolvido com o objetivo de permitir a infiltração de 32 amostras em uma mesma etapa. A solução de glicose foi forçada apicalmente sob uma pressão de 15 psi durante 1 hora. Uma alíquota de 50 L foi coletada da câmara inferior para quantificar a glicose infiltrada. A concentração de glicose foi determinada através de um método enzimático com o auxílio do Kit Glucose HK e de um espectrofotômetro em um comprimento de onda de 340 nm. Na sequência, as amostras foram desacopladas dos corpos de prova, embutidas em resina epóxi e cortadas em 3 secções transversais. Uma sequência de preparação metalográfica padrão foi realizada para permitir a observação da penetração de cimento nos túbulos dentinários por meio de microscopia confocal e óptica. Os dados obtidos nos 2 experimentos foram cruzados pelo teste de correlação de Spearman, o qual revelou a inexistência de qualquer possibilidade de correlação (r = 0,12). Com base nesses resultados, o presente trabalho concluiu que, dentro das condições experimentais usadas, a quantidade de cimento presente dentro dos túbulos dentinários não teve relação com a qualidade do selamento produzido. / The purpose of the present study was to experimentally test the potential correlation between tubular dentin sealer penetration and sealability. Sixty human maxillary central incisors were selected in order to compose a single experimental group. After removing of crowns, the roots were standardized at 13 mm in length. A crown-down root canal instrumentation was performed 1mm short of the apical foramen (working length). How irrigating solution was used 5.25% NaOCl and final, 17% EDTA. Then, all root canals were filled with gutta percha and AH Plus sealer labeled with a fluorescent dye. To determine the sealability pattern, samples were submitted to glucose leakage model under pressure. Four intact teeth were used as negative control while further 2 instrumented but nonfilled teeth was used as positive control. The roots were mounted in a double-chamber apparatus where 0,75 mL of 1 mol/L glucose solution was placed into the superior chamber and 0,75 mL of deionized water was placed into the inferior chamber. The devices were connected to a pressure distribution system that was developed in order to allow testing 32 specimens at the same experimental stage. The glucose solution was forced apically under a pressure of 15 psi during 1 hour. A sample of 50 L was taken from the inferior chamber and the glucose concentration was measured following an enzymatic reaction using a Glucose HK Kit readed under spectrophotometry (wave-length of 340 nm). After that, the samples were removed from the apparatus, embedded in epoxy resin and cut into 3 sections. Standard metallographic preparation was performed prior the observation of the sealer penetration into dentinal tubules by confocal and optical microscopy. Data provided by the evaluations were submitted to Spearman correlation test which revealed a lack of correlation between the two variables (r = 0.12). Therefore, the present study concluded that there was no correlation between tubular sealer penetration and sealability in non-bonding conventional root-fillings.

O presente estudo objetivou testar experimentalmente a existência da possível correlação entre a penetração de cimento nos túbulos dentinários e a qualidade do selamento. Foram utilizados 60 incisivos centrais superiores humanos que formaram um único grupo experimental. Após a eliminação das porções coronárias, as raízes foram padronizadas em 13 mm de comprimento. A instrumentação dos canais foi realizada no sentido coroa-ápice, e o comprimento de trabalho estabelecido a 1 mm aquém do forame apical. Como solução irrigadora foi empregado o NaOCl a 5,25% e ao final, EDTA a 17%. Em seguida, todos os canais foram obturados com guta-percha e cimento AH Plus marcado com um corante fluorescente. Para determinar a qualidade do selamento das obturações endodônticas, as amostras foram submetidas ao modelo de infiltração de glicose sob pressão. As raízes foram montadas em um dispositivo de dupla-câmara selada para permitir a infiltração da glicose. Como controle negativo foram utilizados 4 dentes hígidos, e como controle positivo, 2 dentes instrumentados porém, não obturados. Foram utilizados 0,75 mL de solução de glicose a 1 mol/L na câmara superior e 0,75 mL de água deionizada na câmara inferior. Os dispositivos foram conectados a um sistema de distribuição de pressão desenvolvido com o objetivo de permitir a infiltração de 32 amostras em uma mesma etapa. A solução de glicose foi forçada apicalmente sob uma pressão de 15 psi durante 1 hora. Uma alíquota de 50 L foi coletada da câmara inferior para quantificar a glicose infiltrada. A concentração de glicose foi determinada através de um método enzimático com o auxílio do Kit Glucose HK e de um espectrofotômetro em um comprimento de onda de 340 nm. Na sequência, as amostras foram desacopladas dos corpos de prova, embutidas em resina epóxi e cortadas em 3 secções transversais. Uma sequência de preparação metalográfica padrão foi realizada para permitir a observação da penetração de cimento nos túbulos dentinários por meio de microscopia confocal e óptica. Os dados obtidos nos 2 experimentos foram cruzados pelo teste de correlação de Spearman, o qual revelou a inexistência de qualquer possibilidade de correlação (r = 0,12). Com base nesses resultados, o presente trabalho concluiu que, dentro das condições experimentais usadas, a quantidade de cimento presente dentro dos túbulos dentinários não teve relação com a qualidade do selamento produzido. / The purpose of the present study was to experimentally test the potential correlation between tubular dentin sealer penetration and sealability. Sixty human maxillary central incisors were selected in order to compose a single experimental group. After removing of crowns, the roots were standardized at 13 mm in length. A crown-down root canal instrumentation was performed 1mm short of the apical foramen (working length). How irrigating solution was used 5.25% NaOCl and final, 17% EDTA. Then, all root canals were filled with gutta percha and AH Plus sealer labeled with a fluorescent dye. To determine the sealability pattern, samples were submitted to glucose leakage model under pressure. Four intact teeth were used as negative control while further 2 instrumented but nonfilled teeth was used as positive control. The roots were mounted in a double-chamber apparatus where 0,75 mL of 1 mol/L glucose solution was placed into the superior chamber and 0,75 mL of deionized water was placed into the inferior chamber. The devices were connected to a pressure distribution system that was developed in order to allow testing 32 specimens at the same experimental stage. The glucose solution was forced apically under a pressure of 15 psi during 1 hour. A sample of 50 L was taken from the inferior chamber and the glucose concentration was measured following an enzymatic reaction using a Glucose HK Kit readed under spectrophotometry (wave-length of 340 nm). After that, the samples were removed from the apparatus, embedded in epoxy resin and cut into 3 sections. Standard metallographic preparation was performed prior the observation of the sealer penetration into dentinal tubules by confocal and optical microscopy. Data provided by the evaluations were submitted to Spearman correlation test which revealed a lack of correlation between the two variables (r = 0.12). Therefore, the present study concluded that there was no correlation between tubular sealer penetration and sealability in non-bonding conventional root-fillings.

O objetivo deste estudo foi o de avaliar os efeitos da irradiação laser de Er,Cr:YSGG em superfícies dentinárias no tratamento da hipersensibilidade dentinária cervical, em busca de um protocolo para ser aplicado clinicamente. Para o teste de permeabilidade, foram preparados 144 pré-molares, as coroas seccionadas e as raízes impermeabilizadas. Duas áreas de irradiação antagônicas foram delimitadas e livres da impermeabilização (controle e experimental). A seguir, os dentes foram subdivididos em dois sub-grupos, diferindo o condicionamento da superfície irradiada (EDTA 24% e ácido fosfórico 35%) e em grupos diferindo o protocolo:G1)Er:YAG, 60mJ/2Hz; G2)0,25W; G3)0,5W; G4)0,75W; G5)1W, G6)1,25W; G7)1,50W; G8)1,75W G9)2W. Após as irradiações, os espécimes foram imersos em azul de metileno 2% por 4 horas, e incluídos em resina epóxica para a realização dos cortes longitudinais. Estes tiveram suas imagens trabalhadas em computador para mensuração do nível de infiltração. Os dados foram submetidos à análise estatística. O Sub-grupo 1, condicionado com EDTA, apresentou diferenças entre os grupos sendo que as amostras irradiadas com Er:YAG demonstraram menor infiltração, diferindo estatisticamente dos grupos 3, 6 e 9. Os resultados do sub-grupo 2 mostraram que as médias das amostras irradiadas com Er:YAG tenderam a zero entretanto, não houve diferença entre os grupos. Na Fase B, fragmentos de dentina foram obtidos da região cervical de dentes humanos, preparados para análise em microscopia eletrônica de varredura. Morfologicamente, observou-se oclusão parcial dos túbulos dentinários após irradiação com Er:YAG e Er,Cr:YSGG nas condições de 0,25W e 0,50W. A partir de 0.75W, foi observado abertura dos túbulos e à medida que as energias aumentaram, foram observadas carbonização e fendas. De posse dos resultados dos trabalhos in vitro, foram selecionados os parâmetros para a aplicação e o acompanhamento clínico de 1 mês: G1)controle (placebo); G2)Er:YAG; G3)Er,Cr:YSGG 0,25W e G4)Er,Cr:YSGG 0,75W. Após a triagem, foram selecionados voluntários de acordo com critérios de exclusão e inclusão. O nível de sensibilidade de cada voluntário foi avaliado através da escala visual analógica de dor (VAS) com auxílio do ar da seringa tríplice 1 semana antes (Pré-1), 5 minutos anterior ao tratamento (Pré-2), após 5 minutos (Pós-1), 1 semana (Pós-2) e 1 mês após o tratamento (Pós-3). Os dados foram coletados e submetidos à análise estatística separadamente para os dois estímulos realizados: spray de ar e sonda exploradora. Tanto para o estímulo ar quanto para o estímulo sonda, não foram observadas diferenças estatisticamente significantes nas escalas Pré-1 e Pré-2, concluindo que os pacientes estavam padronizados e não houve efeito da profilaxia nos níveis de dor. Ao estímulo do spray de ar, nota-se uma redução nos níveis de dor na escala Pós-1, porém há uma estabilidade dos valores das escalas seguintes. O grupo 2 (Er:YAG) apresentou o menor nível de dor quando comparado aos outros grupos. Ao estímulo mecânico foi observado que o grupo 4 (Er,Cr:YSGG 0,50W) demonstrou o decréscimo de dor mais acentuado imediatamente após o tratamento, porém ao final do estudo, apresentou os maiores níveis de dor. Os grupos 1, 2 e 3 apresentam redução de dor, porém estatisticamente diferentes do grupo 4. Com base nos resultados apresentados e dentro dos limites e parâmetros estudados, pode-se concluir que nenhuma condição foi capaz de eliminar completamente a microinfiltração e diminuir a permeabilidade dentinária; porém o laser de Er:YAG e o laser de Er,Cr:YSGG 0,25W apresentaram resultados satisfatórios nos três estudos realizados. / The aim of the present study was to determine the correct parameters of the Er,Cr:YSGG laser in the treatment of cervical dentin hypersensitivity. This work was presented in 3 different stages. In the first one, it was evaluated the decrease in dentin permeability of dentinal tubules after Er,Cr:YSGG laser irradiation in radicular surfaces. Ninety premolars were prepared with its crows sectioned, and the roots completely impermeabilized. Two antagonist areas of irradiation were determined as control and experimental. Each surface was conditioned with EDTA 24% (sub-group1) and phosphoric acid 35% (sub-group2) and the selected parameters were: 1)Er:YAG, 60mJ, 2Hz, 4 irradiations of 20sec each, defocused mode; and groups 2 to 9 received irradiation with Er,Cr:YSGG laser, 20Hz, Z6 tip, 600µm diameter, defocus mode, 0% of air and water: 2)Er,Cr:YSGG 0,25W; 3) 0,5W; 4) 0,75W; 5) 1,0W; 6) 1,25W, 7) 1,50W, 8) 2W; 9) 2 W. After irradiation, samples were immersed in a solution of methylene blue for 4 hours, washed for 5 min and included in epoxy resin to allow longitudinal cuts. The images were digitalized and computed worked. Data was statistically analyzed. Although the samples irradiated with Er:YAG showed less microleakage, the sub-group 1 showed differences between the groups, statistically different from groups 3, 6 e 9. The results of the sub-group 2 showed that the mean values of the Er:YAG samples had a tendency to be negative, however, no differences were detected between the groups. In the second stage, cuts from the cervical area were obtained and prepared for scanning electron microscopy to evaluate the superficial morphology. It was observed the partial closure of dentinal tubules after the irradiation with Er:YAG and Er,Cr:YSGG laser in the 0.25 and 0.50W protocols. From the 0.75W until 2W, it was observed the dentinal tubules opened as the energy densities raised. With the results of the in vitro studies, the parameters were selected: G1)control; G2)Er:YAG; G3)Er,Cr:YSGG 0,25W e G4)Er,Cr:YSGG 0,75W. Thirty subjects, who met the entry criteria, were admitted into the study. The assessment method used to quantify sensitivity was the cold air syringe, recorded by the visual analogue scale (VAS), prior to treatment as baseline (Pre-1), immediately before (Pre-2) and immediately after (Post-1) the topical treatment, after 1 week (Post-2) and after 1 month (Post-3). Teeth were assigned to the 4 groups. After the follow-up, data was collected and submitted to statistical analysis for both kinds of stimulus: evaporative (air) and mechanical (probe). For both air and probe it was not observed differences among the Pre-1 and Pre-2 moments, for what it can be concluded that patients were standardized. Analyzing the evaporative stimulus, it can be observed the reduction in the pain level immediately after the treatment; however there was stability in the next values. Group 2 (Er:YAG) showed the least level of pain. Throughout the mechanical stimulus, it was observed that group 4 (Er,Cr:YSGG 0,50W) showed the most pronounced decrease of pain immediately after treatment, however, at the end of the study, the levels of pain increased. Groups 1, 2 e 3 showed reduction of pain, statistically different from the group 4. Based on the results and within the limits of this study, it can be concluded that none of the parameters and lasers studied were capable of eliminate the microleakage and decrease the dentin permeability, however, the Er:YAG and Er,Cr:YSGG 0,25W lasers showed satisfactory results in the three studies performed.