Made available in DSpace on 2014-07-29T15:30:39Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Fernando de Souza Vaz.pdf: 1337764 bytes, checksum: 6fbb9ab14228f63bc61dd63cc2055bb4 (MD5) Previous issue date: 2010-03-14 / Fuels derived from oil have been responsible for the largest portion of total water pollution, soil and air around the world. Based on this fact, some proposals have been made for the replacement of diesel obtained from petroleum. An alternative is biodiesel, fuel made from esters, methyl or ethyl, natural oils from oilseeds (soybeans, corn, rapeseed, palm, sunflower, animal fats etc). Biodiesel is more susceptible than diesel to attack by bacteria that occur naturally in the environment due to its chemical composition is much simpler than that of diesel oil. The objective of this research was the isolation, identification and characterization of bacteria capable of degrading diesel, and biodiesel blends (B5). The bacterial isolates were obtained from samples collected from fuel storage tanks: (1) gas station in the transportation sector, Federal University of Goias Goiania campus, (2) vehicles that were in a workshop with a diagnosis of obstruction of fuel pump, and (3) tank of pure biodiesel (B100) obtained directly from production. The fuel samples were filtered through a membrane filter with pores of 0.45 μM. These membranes were incubated at 30 ºC for 7 days in BHI Agar and Nutrient Agar to obtain pure colonies. The verification of the biodegradation was performed in micro plates 96 holes ELISA. The isolates were inoculated in a solution containing the culture Low, oxy-dye reducer DCPIP (2, 6-dichlorophenol indophenol) and fuel (pure biodiesel blend biodiesel / diesel fuel and pure diesel) as carbon source. All 41 isolates tested showed degradation potential for fuel analysis. Twenty-nine isolates were identified by sequencing of 16S rDNA, and identified as Bacillus valismortis (2), B. licheniformis (3), B. thuringiensis (1), B. amyloliquefaciens (2), B. subtilis (2), Lysinibacillus sphaericus (11), L. fusiformis (2), Staphylococcus sp. (2), S. capitis (1), Kocuria palustris (1), Citrobacter amalonaticus (1), Stenotrophomonas maltophilia (1). It was confirmed the potential degradation of B100 biodiesel, a blend of biodiesel / diesel (B5) and pure diesel by bacteria isolated by testing using the redox dye DCPIP. / Os combustíveis derivados de petróleo tem sido os responsáveis pela maior porção do total de poluição das águas, dos solos e do ar de todo o mundo. Baseado neste fato, algumas propostas têm sido feitas para a substituição do diesel derivado de petróleo. Uma alternativa é o biodiesel, combustível feito de ésteres, metilados ou etilados, de óleos naturais provenientes de oleaginosas (soja, milho, mamona, palma, girassol, gorduras animais etc.). O biodiesel é mais suscetível que o diesel ao ataque de bactérias, que ocorrem naturalmente no ambiente, devido à sua composição química ser muito mais simples que a do óleo diesel. O objetivo desta pesquisa foi o isolamento, a identificação e a caracterização de bactérias capazes de degradar diesel, biodiesel e mistura (B5). Os isolados bacterianos foram obtidos partir de amostras de combustível coletadas de tanques de armazenamento: (1) do posto de combustível do setor de transportes da Universidade Federal de Goiás campus Goiânia; (2) de veículos que estavam em uma oficina com diagnóstico de entupimento da bomba de combustível, e (3) de tanques de biodiesel puro (B100) obtidos direto da produção. As amostras de combustível foram filtradas em membrana filtrante com poros de 0,45μM. Estas membranas foram incubadas a 30ºC por sete dias em Ágar BHI e Ágar Nutriente até a obtenção de colônias puras. A verificação da capacidade de biodegradação foi realizada em micro placas de 96 orifícios tipo ELISA. Os isolados foram inoculados em uma solução contendo meio de cultura Mínimo, solução corante oxi-redutor DCPIP (2,6 diclorofenol-indofenol) e combustível (biodiesel puro, mistura biodiesel/diesel e diesel puro) como fonte de carbono. Todos os 41 isolados testados apresentaram potencial de degradação para os combustíveis analisados. Vinte e nove isolados foram identificados pelo sequenciamento da região 16S rDNA, e identificados como Bacillus valismortis (2), B. licheniformis (3), B. thuringiensis (1), B. amyloliquefaciens (2), B. subtilis (2), Lysinibacillus sphaericus (11), L. fusiformis (2), Staphylococcus sp. (2), S. capitis (1), Kocuria palustris (1), Citrobacter amalonaticus (1), Stenotrophomonas maltophilia (1). Foi confirmado o potencial de degradação do biodiesel B100, mistura de biodiesel/diesel (B5) e diesel puro por parte das bactérias isoladas através do teste de oxi-redução utilizando o corante DCPIP.

Made available in DSpace on 2017-06-01T18:20:26Z (GMT). No. of bitstreams: 1 dissertacao_fabiana_america.pdf: 1099131 bytes, checksum: 9135e1cca2e3ecf79ae358085f3e7e31 (MD5) Previous issue date: 2009-04-15 / The biodegradation of hydrocarbons by natural population of microorganism represents one of the primary mechanisms by which diesel oil and others hydrocarbons pollutants are eliminated or transformed in the environment. It is generally accepted today that petroleum hydrocarbon, can be degraded by microorganisms as long as a few factors, such as nutrients, organic compound bioavailability, pH and temperture are controlled and optimized. In this study biodegradationof diesel oil by Candida lipolytica in sea water supplemented with nitrogen and phosphorus sources was investigated in skake flask fermentation scale. A set of three full factorial designs was carried out to investigate the effects and interactions of pH and the seawater, diesel oil, urea, ammonium sulfate and potassium dihydrogen orthophosphate concentrations on the C.lipolytica growth, the emulsification activity and the surface tension of the free cell broth. The biodegradation of diesel oil was confirmed through four laboratory experiments using: (1) seawater + diesel oil; (2) distilled water + diesel oil; (3) seawater + corn oil and (4) distilled water + corn oil. The best result for 5% (v/v) diesel degradation was obtained at condition 1, using seawater supplemented with 1,0% (p/v) of ammonium sulfate and 1,0 % (p/v) of potassium dihydrogen orthophosphate. In this condition, after 96 h, the pH, the salinity, the surface tension and the emulsification activities to emulsions with corn oil and with motor oil were equal to 9.47, 44 , 46.63 mN/m, 5.49 e 6.00 UAE, respectively. Whereas C.lipolytica has potential application in biotechnological process, the production medium conditions and bioemulsifiers and biosurfactants produced are candidates to be optimized and used in bioremediation of marine environments contaminated by diesel and other oil products. / A biodegradação de hidrocarbonetos por população natural de microrganismos representa um dos mecanismos primários pelos quais óleo diesel e outros hidrocarbonetos poluentes são eliminados ou transformados no ambiente. Atualmente aceita-se que hidrocarbonetos de petróleo possam ser degradados por microrganismos, desde que alguns fatores, tais como nutrientes, disponibilidade de compostos orgânicos, pH e temperatura sejam controlados e otimizados. Neste estudo, biodegradação de óleo diesel por Candida lipolytica em água do mar suplementada com fontes de nitrogênio e fósforo foi investigada em escala de frascos de fermentação agitados. Um conjunto de três planejamentos fatoriais completos foi realizado para investigar os efeitos e as interações do pH e das concentrações de água do mar, óleo diesel, uréia, sulfato de amônio e fosfato monobásico de potássio sobre o crescimento de C. lipolytica, a atividade emulsificação e a tensão superficial do cultivo livre de células. A biodegradação de óleo diesel foi confirmada através de quatro experimentos na presença de: (1) água do mar + óleo diesel (2); água destilada + óleo diesel; (3) + água do mar + óleo de milho (4) água destilada + óleo de milho. O melhor resultado para degradação de óleo diesel 5% (v/v) foi obtido, utilizando água do mar suplementada com 1,0% (p/v) de sulfato de amônio e 1,0% (p/v) de fosfato monobásico de potássio. Nesta condição, após 96 h, o pH, a salinidade, a tensão superficial e as atividades de emulsificação para emulsões com óleo de milho e com óleo de motor foram iguais a 9,47, 44 , 46,63 mN/m, 5,49 e 6,00 UAE, respectivamente. Considerando que a C. lipolytica tem potencial de aplicação em processos biotecnológicos, as condições dos meios de produção e os bioemulsificantes e biossurfactantes produzidos são candidatos a serem otimizados e utilizados na biorremediação de ambientes marinhos contaminados por óleo diesel e outros derivados de petróleo.