Th.--Méd.--Montpellier, 1910-1911. / Montpellier, 1910-1911. N ° 14.

Proefschrift Universiteit van Amsterdam. / Auteursnaam op omslag: John A.A. Spijkers. Met lit. opg. - Met samenvatting in het Nederlands.

Thèse de doctorat--Sciences naturelles--Faculté des sciences de Paris, 1905. N°: 1223. / Notes bibliogr.

Diss. Hels. Phil. / Annales zoologici Societatis zoologicae botanicae fennicae "Vanamo". 14 : 4. -IVc2-

Thèse--Sc. nat.--Paris 6, 1971. / Bibliogr. f. 78-82.

Thèses (M.A.)--Université de Sherbrooke (Canada), 2005. / Titre de l'écran-titre (visionné le 18 juillet 2006). Publié aussi en version papier.

Proefschrift Universiteit van Amsterdam. / Met bibliogr., lit. opg. - Met samenvatting in het Nederlands.

Thesis Erasmus University Rotterdam. / Auteursnaam op omslag: Jeltje van Baren. ook verschenen in gedrukte versie. With bibliogr., with a summary in Dutch.

Chez les vertébrés, le système excréteur se développe de manière séquentielle sous la forme de trois types de reins différents : le pro-, le méso- et le métanéphros. Le pronéphros des embryons de xénope et de poisson zèbre se développe rapidement et présente une structure simple formée d’un unique néphron, ce qui en fait un excellent modèle d’étude de la néphrogenèse. Au cours du développement, le mésoderme pronéphrique est régionalisé en plusieurs domaines à l’origine des différents composants du néphron partagés par tous les reins des vertébrés : le glomus, les tubules proximaux, le tubule distal et le canal. Cette régionalisation fait appel à des mécanismes moléculaires encore peu connus. Parmi ceux-ci, le facteur de transcription WT1 inhiberait, dans les cellules à l’origine du glomus, l’expression des gènes caractéristiques des tubules proximaux. De plus, la voie de signalisation Notch est requise séquentiellement d’abord pour la formation du glomus et ensuite lors de la différenciation des tubules proximaux. Le gène Evi1 code pour un facteur de transcription à doigts à zinc notamment exprimé dans le métanéphros des vertébrés supérieurs et jouant un rôle majeur mais mal compris dans le développement. Chez l’embryon de xénope, le gène Evi1 est exprimé dès la fin de la neurulation dans la région ventro-postérieure de l’ébauche pronéphrique à l’origine du tubule distal et du canal. Son expression est inhibée par le facteur de transcription xWT1 et l’activation de la voie de signalisation Notch. Via des expériences de surproduction de la protéine Evi1 sauvage ou d’une fusion Evi1-VP16, fonctionnant de manière antagoniste à la protéine sauvage, nous avons montré que la protéine Evi1 joue un rôle important dans la néphrogenèse précoce en inhibant la formation du glomus et des tubules proximaux dans les cellules à l’origine du segment distal du néphron. Afin de déterminer l’importance du facteur de transcription xWT1 dans la régulation de l’expression du gène Evi1 ainsi que dans la formation du glomus, des expériences de sous-expression ont été réalisées. Ces expériences montrent que la sous-expression de xWT1 inhibe la formation du glomus mais n’induit cependant pas d’expansion de l’expression du gène Evi1 ni celle d’autres marqueurs du pronéphros, suggérant l’existence d’au moins un autre facteur répresseur exprimé au niveau de la couche médiane du mésoderme pronéphrique. Ensuite, nous avons comparé les profils de gènes codant notamment pour des protéines spécialisées dans le transport de solutés dans les reins embryonnaires de xénope et de poisson zèbre. Nos résultats montrent que le pronéphros du poisson zèbre, bien que présentant une structure uniforme, peut être subdivisé en quatre différents segments. Ces observations suggèrent que les reins embryonnaires du xénope et du poisson zèbre présentent des organisations similaires. Dans la dernière partie de ce travail, nous avons entamé l’étude du promoteur du gène CLC-K, codant pour un canal chlore exprimé dans du segment distal du néphron, par la réalisation d’embryons transgéniques de xénope. Les résultats préliminaires obtenus indiquent qu’un fragment de 11kb du promoteur du gène CLC-KB humain est suffisant pour diriger une expression correcte du transgène chez le xénope.

Au cours de ce travail de thèse, nous avons abordé l’étude des gènes BTBD6 et Dmrt5 au cours du développement embryonnaire en utilisant les avantages complémentaires de plusieurs organismes modèles. Le gène BTBD6 de xénope code pour une protéine cytoplasmique à domaine BTB-POZ, fortement conservée évolutivement au cours de l’embryogenèse, qui interagit avec l’ubiquitine ligase E3, Cullin-3. BTBD6 fait partie des protéines BBP (BTB-BACK-PHR) qui constituent une sous-classe de protéines interagissant avec Cullin-3 mais ne possédant pas d’autres domaines d’interaction connus en plus de leur domaine BTB-POZ. Le gène BTBD6 appartient à une famille de gènes comportant 4 membres chez le xénope désignés BTBD1, 2, 3 et 6, répartis en deux sous-groupes, BTBD6/3 et BTBD1/2. Chez la drosophile, il existe un seul gène BTBD codant pour une protéine appartenant au groupe des protéines BTBD6 et BTBD3. Le gène BTBD6 est fortement exprimé au niveau du système nerveux dans les neurones primaires et dans une moindre mesure dans le mésoderme somitique. Les résultats que nous avons obtenus par des expériences de perte de fonction dans l’embryon de xénope et de drosophile indiquent que BTBD6 joue un rôle important dans les étapes tardives du développement neuronal ainsi que dans la somitogenèse. Les gènes à domaine DM codent pour un nouveau groupe de protéines apparentées aux facteurs de transcription doublesex (Dsx) de drosophile et mab-3 de Caenorhabditis elegans. Il existe 8 gènes murins et humains codant pour des protéines à domaine DM appelées Dmrt1 à 8 pour « doublesex and mab3 related transcription factor ». Un criblage à l’aide de biopuces à ADN de type Affimetrix visant à identifier de nouvelles cibles de p53 exprimées dans le cerveau de souris nous a permis d’identifier Dmrt5, un gène codant pour un facteur de transcription de fonction inconnue conservé évolutivement. Les résultats que nous avons obtenus indiquent que ce gène est fortement exprimé dans le cerveau antérieur et les placodes olfactives dans toutes les espèces de vertébrés testées ainsi que chez les protochordés. Chez le xénope, par des expériences de gain de fonction, nous avons pu montrer que ce gène est activé dans l’ectoderme de l’embryon suite à l’action combinée des facteurs de transcription Otx2 et Su(H). Via des expériences de perte de fonction à l’aide de morpholinos antisens, nous avons pu montrer que ce gène joue un rôle important dans la neurogenèse au niveau de l’épithélium olfactif. Enfin, le knock-out du gène Dmrt5 chez la souris induit la mort à la naissance des souriceaux.