Orientador: Marco Eustáquio de Sá / Banca: Orivaldo Arf / Banca: Roberval Daiton Vieira / Resumo: Plantas de cobertura são de grande importância para conservação e proteção do solo, além de serem grandes fontes de nutrientes minerais para as culturas seguintes. Assim, o trabalho teve o objetivo de verificar os efeitos de diferentes plantas de cobertura do solo, utilizando leguminosas e uma gramínea isoladas em consórcio leguminosa/gramínea e uma área de pousio, sobre o desenvolvimento, produção, qualidade fisiológica e sanitária de sementes de feijão do cultivar Pérola. O experimento foi conduzido em duas etapas, sendo a primeira com a implantação das plantas de cobertura que foram: guandu, crotalária, feijão-de-porco, mucuna preta e o milheto isoladas e o consórcio leguminosas/milheto com linhas alternadas e parcelas de 10 linhas/10 metros no verão. Na segunda etapa a área com as plantas de cobertura foi manejada para a semeadura do feijoeiro no outono/inverno e subdivididas em cinco linhas de cinco metros para as épocas de aplicação de nitrogênio em cobertura que aconteceu aos 25, 30 e 35 dias após a semeadura. Foi utilizado o delineamento experimental em blocos casualizados, com quatro repetições. Avaliou-se produção de massa verde e seca, teores de nutrientes para as plantas de cobertura, população final de plantas, componentes produtivos (número de vagens e de sementes por planta, número de sementes por vagem, massa de 100 sementes), produtividade de sementes, qualidade fisiológica e sanitária de sementes. Os resultados obtidos mostraram que as plantas de cobertura apresentaram bons teores e bom potencial de retorno de nutrientes, sendo que o consórcio leguminosa/gramínea na maioria dos casos apresentou melhores resultados em relação à planta cultivada em sistema solteiro, com destaque para o consórcio mucuna+milheto. As diferentes plantas de cobertura e épocas de aplicação de nitrogênio em cobertura não afetaram os componentes... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: Covering plants have a great importance to soil conservation and protection, besides to be great mineral nutrients sources. This way, the study was carried out in order to verify the different effects of soil covering plants, applying legumes and a grass, separately or in a consortium legumes/grass, and fallow land area, on the development, production, sanitary and physiological seeds quality of common beans Perola cultivar. The experiments were conducted in two phases on the first one, was implanted the following covering plants: pigeonpea, sunn hemp, jack bean, velvet bean and the millet isolated and the consortium legumes/grass with alternated lines and parcels of 10 lines/10 meters on the summer. On the second stage the area with covering plans was handled to sow the common bean on the autumn/winter period and subdivided in five lines of five meters for the nitrogen application period in covering that occurs for 25, 30 and 35 days after the sow. The experimental design was used in randomized blocks, with four repetitions. The green and dry mass production, as well as the content and nutrient return to the covering plants, final stand, yield components (number of pods and seeds per plant, number of seeds per pod and 100-seed mass), beans productivity, sanitary and physiological seeds quality. The results showed that the covering plants showed good return potential and nutrient content, but the legume/grass consortium showed better results as compared to single one, notability the velvet bean+millet consortium. The different covering plants so as the nitrogen application period in covering didn't affect significantly the productive components neither the Perola cultivar common bean. Conclude that the consortium legumes (pigeonpea, sunn hemp, jack bean, velvet bean)/grass (millet) are a viable way to Perola cultivar common bean with high level of sanitary and physiological seeds quality. / Mestre

Estresses abióticos como seca, alta salinidade e baixas temperaturas, afetam o crescimento e a produtividade em culturas de interesse comercial como o feijoeiro comum. Proteínas DREB (Dehydration Responsive Element Binding) são fatores de transcrição que regulam genes específicos envolvidos na tolerância ao estresse abiótico. Para determinar como as plantas toleram condições ambientais adversas, variedades tolerantes, biologia molecular e bioinformática podem ser aplicadas para identificar e caracterizar genes que controlam mecanismos de adaptação a estresses. Baseado nas informações disponíveis nos bancos de dados públicos, a sequência da Orf completa do gene Phvul.009G029600.1| PACid:27146455 contendo 1062 pb foi encontrada e usada para o desenho dos primers e para o sequenciamento. A nova sequência é muito similar ao AtRAP2.4 e foi nomeada como PvDREB6A, segundo a análise filogenética. Ferramentas de predição mostraram que a sequência apresenta 354 aminoácidos e possui uma cópia do domínio AP2, que se dobra em uma estrutura com três ?-folhas e uma ?-hélice apresentando resíduos importantes e motivos específicos de reconhecimento e de ligação ao DNA. Além disso, um peptídeo trânsito foi detectado na porção N-terminal com um sítio de clivagem no resíduo 52. A interação deste fator de transcrição com seu domínio de ligação ao DNA foi validada por Electro Mobility Shift Assay (EMSA). A localização subcelular da proteína foi realizada e expressão da Green Fluorescent Proteín (GFP) foi detectada no núcleo. A transformação genética para a superexpressão do gene PvDREB6A em plantas de Arabidopsis thaliana Columbia-0 e mutantes nocaute para o gene AtRAP2.4 (Salk_020767C) foi realizada. Quatro eventos com cópia única e melhor expressão do gene PvDREB6A denominados Col-0/pFEC2.1 #1, Salk_020767C/pFEC2.1 #13.1, Salk_020767C/ pFEC2.1 #19.7 e Salk_020767C/ pFEC2.1 #23.7, foram selecionados. O evento Salk_020767C/pFEC2.1 #23.7 mostrou melhor expressão do gene PvDREB6A e foi visualizado sob luz UV. A análise funcional revelou que as plantas transgênicas submetidas ao déficit hídrico, à alta salinidade e ao frio, apresentaram maior taxa de sobrevivência. Plantas transgênicas superexpressando o gene PvDREB6A apresentaram menor taxa de desidratação e de vazamento de eletrólitos quando submetidas a estresses abióticos. Uma análise da expressão de genes relacionados à tolerância foi conduzida. A quantificação revelou que a expressão de 18 genes: AtDC1.2, AtUSP, AtKIN1, AtERF69, AtGolS3, AtMT2A, AtCAP160, AtNTR1.7, AtGPR7, AtPDC2, AtLTI78, AtCOR15a, AtCOR15b, AtCOR47, AtCOR413, AtLEA6, AtLEA9 e AtLEA14, relacionados a tolerância a seca, sal e frio foram up-regulated devido à superexpressão do gene PvDREB6A de feijoeiro nas plantas transgênicas / Abiotic stresses like drought, high salinity and low temperatures affect growth and productivity in crops of economic interest such as common bean. DREB (Dehydration Responsive Element Binding) proteins are transcription factors that activate specific genes involved in tolerance to abiotic stress. To generate new information on the research for drought and other abiotic stresses, tolerant varieties, molecular biology and bioinformatics can be applied to identify and characterize genes that control plant defense and adaptation mechanisms to water deprivation, to excessive salt and to high/low temperature. Based on public databases, a common bean DREB sequence was found and an in silico study was carried out. A complete Orf sequence Phvul.009G029600.1 |PACid:27146455 containing 1062 bp was found and used for primer design and sequencing. The new sequence was very similar to AtRAP2.4 and named as PvDREB6A, according to phylogenetic analysis. Prediction tools showed that the deduced 354 aa sequence has one copy of the AP2 domain, folding in a three ?-sheets and one ?-helix structure, and presenting important residues and motifs for DNA contacting and binding specificity. In addition, a chloroplast transit peptide was detected at the N-terminal region with cleavage site in the 52 residue. Binding activity of this transcription factor was validated by Electro Mobility Shift Assay (EMSA). Subcellular localization was verified by transient expression of PvDREB6A::GFP in Nicotiana benthamiana and the expression of GFP was detected at the nucleus. Genetic transformation for overexpression of PvDREB6A gene in Arabidopsis thaliana wild type and knockout mutant for AtRAP2.4 gene was conducted. Four single copy events with better expression of the PvDREB6A named Col-0/pFEC2.1 #1, Salk_020767C/pFEC2.1 #13.1, Salk_020767C/pFEC2.1 #19.7 and Salk_020767C/pFEC2.1 #23.7 were selected. The event Salk_020767C/pFEC2.1 #23.7 showed the best expression of PvDREB6A and was visualized under UV light. Functional analysis, revealed that transgenic plants under water deficit, high salt, and cold showed higher survival rate. Transgenic plants overexpressing the PvDREB6A exhibited lower water loss rate and electrolyte leakage rate under abiotic stress. A gene expression analysis with tolerant-related genes was conduted. The quantification revealed that 18 genes, AtDC1.2, AtUSP, AtKIN1, AtERF69, AtGolS3, AtMT2A, AtCAP160, AtNTR1.7, AtGPR7, AtPDC2, AtLTI78, AtCOR15a, AtCOR15b, AtCOR47, AtCOR413, AtLEA6, AtLEA9 e AtLEA14, related to drought, salt and cold tolerance, were up-regulated due to the overexpression of PvDREB6A from common bean in the transgenic plants

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:35:16Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2011-04-25Bitstream added on 2014-06-13T20:46:28Z : No. of bitstreams: 1 abrantes_fl_dr_ilha.pdf: 753180 bytes, checksum: 909aa2e6c49234e34d2b836ea8485de4 (MD5) / Universidade Estadual Paulista (UNESP) / A maioria dos trabalhos com diferentes sistemas de manejo do solo e com uso de regulador vegetal (citocinina, giberelina e auxina) busca obter resultados quanto a aumentos na produtividade. Já, quanto ao seu efeito nos teores de nutrientes nas folhas e sementes e na qualidade fisiológica das sementes produzidas nessas condições há carência de informações. Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o desenvolvimento, produtividade, nutrientes nas folhas e sementes e qualidade fisiológica das sementes de feijão, cultivares Carioca Precoce, IAC Apuã e IAC Alvorada, em função do uso de regulador vegetal, via foliar, em sistema convencional e plantio direto em implantação, no inverno com uso de irrigação. A pesquisa foi conduzida em 2009 e 2010, no Município de Selvíria/MS. Realizaram-se três experimentos com os cultivares Carioca Precoce, IAC Apuã e IAC Alvorada, em blocos casualizados, em faixas, com quatro repetições. Os fatores foram: sistemas de semeadura convencional com incorporação da palhada do milheto ao solo e direta sobre a palhada do milheto e cinco doses do regulador vegetal (0; 1,0; 2,0; 3,0 e 4,0 L p.c ha-1) composto por três hormônios vegetais: cinetina, ácido giberélico e ácido indolbutírico, aplicadas em R5. Avaliou-se: clorofila e nutrientes foliares, características agronômicas e produtivas, teor de proteína e nutrientes nas sementes e a qualidade fisiológica das sementes através dos testes de: germinação, primeira contagem, emergência de plântulas em campo, índice de velocidade de emergência, altura de plântula, massa da matéria seca de plântula, envelhecimento acelerado, teste de frio sem solo e condutividade elétrica. O plantio direto mesmo em fase de implantação propiciou: aumento na clorofila e nos teores foliar de N, P e Mg variando em função do cultivar e do ano; e de maneira geral, considerando os três cultivares... / The most studies with different systems of soil management and use of plant growth regulator (cytokinin, auxin and gibberellin) search results as increases in productivity. Already, in its effect on nutrient concentrations in leaves and seeds and physiological quality of seed produced under these conditions there is a lack of information. Thus, the objective was to evaluate the development, productivity, nutrients in the leaf and seeds and physiological seed quality of common bean cultivars, Carioca Precoce, IAC Apuã and IAC Alvorada, depending on the use of growth regulators on leaf, in the conventional or no-tillage system in the implantation, in the winter with irrigation use. The research was conducted in 2009 and 2010, in Selvíria - MS State. They were conducted three experiments with varieties Carioca Precoce, IAC Apuã and IAC Alvorada, in a randomized blocks design in strips with four replicates. The treatments were: conventional tillage system with millet straw incorporation to the soil or directly over the millet straw, and five doses of the plant growth regulators (0, 1.0, 2.0, 3.0 and 4.0 L cp ha -1) which consists of three plant hormones, kinetin, gibberellic acid and IBA, applied at R5. It was evaluated: chlorophyll and foliar nutrients, agronomic and productive characteristics, protein and nutrients in the seeds and physiological quality of seeds through the tests of germination, first count, seedling emergence in the field, speed of emergence index, seedling height, mass of dry matter of seedlings, accelerated aging, cold test without soil and electric conductivity. The no-tillage even in implantation phase resulted in: increased leaf chlorophyll and on N, P and Mg, depending on the cultivar and year, and in general, considering the three cultivars used, it was the better development of plants and seed yield. The growth regulator did not affect the levels... (Complete abstract click electronic access below)

Submitted by THAIS LOHAINE BRAGA DOS SANTOS (thais_lohaine@hotmail.com) on 2018-07-06T16:45:21Z No. of bitstreams: 1 SANTOS, TLB 2018.pdf: 3611620 bytes, checksum: 7a88d959d68f69391e2f3c1e5564fc2f (MD5) / Approved for entry into archive by Ana Lucia de Grava Kempinas (algkempinas@fca.unesp.br) on 2018-07-10T12:27:20Z (GMT) No. of bitstreams: 1 santos_tlb_me_bot.pdf: 3611620 bytes, checksum: 7a88d959d68f69391e2f3c1e5564fc2f (MD5) / Made available in DSpace on 2018-07-10T12:27:21Z (GMT). No. of bitstreams: 1 santos_tlb_me_bot.pdf: 3611620 bytes, checksum: 7a88d959d68f69391e2f3c1e5564fc2f (MD5) Previous issue date: 2018-04-25 / Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES) / O feijão-comum (Phaseolus vulgaris L., Fabaceae) apresenta elevado potencial prodtivo e é um dos alimentos mais consumidos em todo o mundo. Dentre os fatores que ocasionam queda de produtividade na cultura do feijoeiro, destaca-se o ataque de insetos-praga como a mosca-branca, Bemisia tabaci (Gennadius) biótipo B (Hemiptera: Aleyrodidae), em função dos intensos danos diretos e indiretos que podem ocasionar as plantas dessa leguminosa. Seu controle é realizado principalmente por meio de aplicações de inseticidas sintéticos, muitas vezes utilizadas em doses acima das recomendadas, favorecendo a seleção de insetos resistentes. O uso de genótipos resistentes pode ser uma estratégia eficiente para o manejo integrado da mosca-branca nas lavouras. Assim, este trabalho avaliou a possível expressão de antixenose e antibiose a partir de 78 genótipos de feijoeiro. Análises físicas e morfológicas das folhas também foram realizadas, a fim de identificar possíveis fatores de resistência dos genótipos a B. tabaci biótipo B. Inicialmente, realizaram-se ensaios com e sem chance de escolha (antixenose), onde avaliou-se o número de adultos, ovos e a colonização por ninfas nos genótipos de feijão. Análises colorimétricas e a caracterização (tipificação e densidade) dos tricomas existentes foram realizadas a fim de se estabelecer possíveis correlações com a colonização do inseto nesta etapa. Posteriormente, avaliou-se o desempenho biológico do inseto confinado a 17 genótipos previamente selecionados (Capítulo 1), a fim de caracterizar a expressão de antibiose. Para tanto, foram avaliados os seguintes parâmetros biológicos: período de incubação, período de duração dos instares, período ninfal total, período de desenvolvimento de ovo a adulto, mortalidade por ínstar ninfal e viabilidade ninfal. No teste de anixenose com chance de escolha, os genótipos BRS Ametista, BRS Estilo, BRS Esplendor, SCS 204 Predileto, BRS Notável, IPR Eldorado, CHIB 06, IPR Quero-Quero, Iapar 81, CHIP 338, IPR Garça, Arcelina 4, SCS 202 Guará, IAC Esperança, H96102-1-1-1-52, CHIP 348, Carioca Comum, CHIP 300, IAC Carioca Eté, IAC Ybaté e Tybatã apresentaram menor oviposição e colonização por ninfas da mosca-branca. Em teste sem chance de escolha, a maioria dos genótipos revelou baixa colonização por adultos da mosca-branca, com destaque para CHIB 06, IPR Garça, CHIP 300 e IAC Esperança. Verificou-se que os genótipos em que se constatou o maior número de adultos no ensaio sem chance de escolha apresentaram alta intensidade de luminosidade (L*), verde (a*) e amarelo (b*), indicando correlação positiva desses fatores com a atratividade e oviposição da mosca-branca. Nos genótipos BRS Ametista, SCS 204 Predileto, BRS-Estilo, IPR Eldorado, SCS-202 Guará, Carioca Comum, Arcelina 4, CHIP 348 e IAC Esperança a resistência se mostrou mais estável, manifestando-se também, em elevados níveis (≤ 20 adultos por folíolo e ≤ 1 ovo/cm2) no ensaio sem chance de escolha. No ensaio de antibiose, o genótipo CHIP 300 ocasionou um prolongamento acentuado no período de ovo a adulto (~ 10 dias), enquanto que os genótipos BRS Estilo, Arcelina 4, IPR Garça, Tybatã, CHIP 300, IPR Eldorado, H96A102-1-1-1-52 e CHIB 06 afetaram negativamente a viabilidade e mortalidade das ninfas da mosca-branca, sugerindo elevados níveis de resistência por antibiose e/ou antixenose. Esses genótipos constituem potenciais fontes de resistência a B. tabaci biótipo B e podem ser explorados em programas de melhoramento genético que visam a obtenção de linhagens resistentes a insetos. / The common bean, Phaseolus vulgaris L., (Fabaceae) has a high yield potential and is one of the most consumed food in the world. Among the factors that negative affects the common bean yield, the occurence of silverleaf whitefly Bemisia tabaci Gennadius, 1889 biotype B (Hemiptera: Aleyrodidae) has been highilghted due its direct and indirect damage. B. tabaci are almost exclusively managed by insecticide sprays where the over-application and indiscriminate use of pesticides has had several adverse consequences like insecticide resistance development. Host-plant resistance may be a valuable strategy for the integrated management of B. tabaci. Therefore, this work aimed to evaluate the effect of 80 bean genotypes to this insect to verify the occurence of antixenosis and antibiosis. Initially, multiple-choice trials were carried out, in order to evaluate the oviposition and the nymphs colonization preference. Morphological caracteristics of leaf trichomes (size and density) and colorimetric analyses were performad to establish possible correlations between genotypes and insect colonization. Subsequently, 17 bean genotypes were selected and a no-choice test was conducted to verify the occurrence of antibiosis (Charpter 1). Therefore, we evaluated the incubation period of eggs, nymphal period, complete development period (egg-adult) and viability of the silverleaf whitefly nymphs. From the results of the multiple-choice trial, genotypes BRS Ametista, BRS Estilo, BRS Esplendor, SCS 204 Predileto, BRS Notável, IPR Eldorado, CHIB 06, IPR QueroQuero, IAPAR 81, CHIP 338, IPR Garça, Arcelina 4, SCS 202 Guará, IAC Esperança, H96102-1-1-1-52, CHIP 348, Carioca Comum, CHIP 300, IAC Carioca Eté, IAC Ybaté e Tybatã were the least used for oviposition and nymphs colonization. In the no-choice test, most genotypes were less attractive to B. tabaci and genotypes CHIB 06, IPR Garça, CHIP 300 e IAC Esperança had less oviposition. The most attractive genotypes presented high luminosity (L*) and more intense green (a *) and yellow (b*) colors indicating positive. Besides that, genotypes BRS Ametista, SCS 204 Predileto, BRS Estilo, IPR Eldorado, SCS-202 Guará, Carioca Comum, Arcelina 4, CHIP 348 and IAC Esperança showed the highest resistance stability and hight resistance level was observed in the no-choice test (≤ 20 adults/leaflet and ≤ 20 eggs/cm2 ). The genotype CHIP 300 prolonged the developmental period from egg to adult (~ 10 d) and BRS Estilo, Arcelina 4, IPR Garça, Tybatã, CHIP 300, IPR Eldorado, H96A102-1-1-1-52 and CHIB 06 caused nymphal mortality suggesting high levels of antibiosis and antixenosis. Thus, this genotypes are promising for use in breeding programs to develop resistance to whitefly aimed its implementation on integrated management of B. tabaci in common bean crops.

Orientador: Rogério Peres Soratto / Banca: Dirceu Maximino Fernandes / Banca: Orivaldo Arf / Resumo: O feijão comum (Phaseolus vulgaris L.) é uma cultura bastante exigente em nitrogênio (N), podendo suprir parte das suas necessidades mediante associação com bactérias do gênero Rhizobium, capazes de fixar simbioticamente o N2 atmosférico. Contudo, vários fatores, especialmente os relacionados à condições do solo, podem limitar o processo de formação de nódulos e fixação biológica. Neste sentido, o cultivo anterior de espécies como as do gênero Brachiaria, em consórcio com o milho, poderia aumentar a eficiência da inoculação no feijoeiro cultivado em sucessão. Assim, o objetivou-se neste trabalho avaliar o efeito da adubação nitrogenada no feijoeiro cultivado no sistema plantio direto, em sucessão ao milho safrinha consorciado com Brachiaria brizantha ou Brachiaria ruziziensis, e se a inoculação das sementes com Rhizobium tropici pode contribuir para o fornecimento de N para o feijoeiro nessas condições. Para tanto, foram conduzidos dois experimentos, um em sucessão ao milho consorciado com B. brizantha e outro em sucessão ao milho consorciado com B. ruziziensis, durante dois anos agrícolas. Os experimentos foram conduzidos em condições de campo, em um Latossolo Vermelho distroférrico, no município de Botucatu, SP. Em ambos os experimentos, o delineamento foi de blocos casualizados, em esquema fatorial 2 x 4, com quatro repetições. Os tratamentos foram constituídos pela inoculação ou não das sementes com R. tropici (400 g por 100 kg de sementes) e quatro doses de N (0, 35, 70 e 140 kg ha-1), utilizando como fonte o nitrato de amônio. Adubação nitrogenada foi parcelada, metade dois dias após a semeadura e metade no estádio V4-4 (quatro folhas trifoliadas totalmente expandidas). A inoculação das sementes do feijoeiro cv. IAC Alvorada com R. tropici não interferiu na nodulação, nutrição nitrogenada e produtividade do feijoeiro, cultivado... (Resumo completo, clicar acesso eletrônico abaixo) / Abstract: The common bean (Phaseolus vulgaris L.) is a crop that requires high amount of nitrogen (N) and part of its need can be supplied by association with bacteria Rhizobium that is able to fix symbiotically atmospheric N2. However, several factors, especially related to soil conditions, may limit nodulation and N2 fixation. Thus, previous cropping of species such as Brachiaria intercropped with corn could increase the efficiency of inoculation on common bean in succession. Therefore, the objectives of this work were to evaluate the effect of N fertilization on common bean crop under no-tillage system, in succession to out-of-season corn intercropped with Brachiaria brizantha or Brachiaria ruziziensis, and the contribution of the seeds inoculation with Rhizobium tropici on N supply for common bean. Two experiments were conducted, one sowing the common bean in succession to corn intercropped with B. brizantha and another in succession to corn intercropped with B. ruziziensis, during two crop years. The experiments were conducted under field conditions on a Haplorthox, in Botucatu, São Paulo State, Brazil. The experimental design of both experiments was a randomized block design in a 2 x 4 factorial scheme, with four replications. The treatments consisted of presence or absence of seeds inoculation with R. tropici (400 g per 100 kg of seeds) and four N rates (0, 35, 70, and 140 kg ha-1), using ammonium nitrate as source. Nitrogen application was split, half two days after sowing and half when plants presented four expanded trifoliolate leaves. Inoculation of common bean seeds with R. tropici cultivated in succession to winter corn intercropped with Brachiaria under no-tillage system did not affect the nodulation, the N nutrition and the grain yield. Common bean nodulation was not affected by N application until 35 kg N ha-1, although higher rates provided decrease in number and dry weight... (Complete abstract click electronic access below) / Mestre

Orientador : Leandro Borges Lemos / Resumo: Dada a importância da cultura do feijoeiro (Phaseolus vulgaris L.) na constituição da alimentação básica da população nacional desenvolveu-se um trabalho de pesquisa na Fazenda Experimental Lageado, pertencente FCA/UNESP, campus de Botucatu - SP, com o objetivo de avaliar a resposta à adubação nitrogenada em cobertura no período da "seca" em dois sistemas de manejo de solo. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados em esquema de parcelas subdivididas, com quatro repetições. As parcelas foram representadas por sistemas de manejo de solo: preparo convencional do solo e plantio direto. Já as subparcelas foram formadas por doses de adubação nitrogenada em cobertura: (0, 40, 80, 120 e 160 kg ha-1 de N), utilizando-se como fonte a uréia. Utilizou-se a cultivar Pérola, semeada no espaçamento de 0,45 metros em sucessão a aveia preta (semeadura de outono) e ao milheto (semeadura de primavera), durante o ano agrícola 2002/2003. Conclui-se que o sistema de plantio direto promoveu elevada cobertura do solo para a aveia preta e milheto, e proporcionou maior teor de nitrogênio na parte aérea para a cultura do milheto. Os sistemas de manejo de solo não influenciaram na produtividade de grãos do feijoeiro. As doses de nitrogênio em cobertura interferiram em diversas características produtivas do feijoeiro, sendo que a produtividade máxima de 1.870 kg ha-1 foi obtida com a dose de 78 kg ha-1 de N em cobertura. A qualidade fisiológica das sementes foi influenciada positivamente pelas doses de nitrogênio, como também o teor de proteína bruta, sendo encontrada interação manejo de solo x doses de N no tempo para cozimento. / Abstract: Because of the importance of common bean crop (Phaseolus vulgaris L.) on Brazilian basic feeding, a research was carried out on the Experimental Lageado farm, which belongs to FCA/UNESP, campus of Botucatu - SP. It had the objective of evaluating the response to nitrogen topdressing in dry season period in two soil tillage systems. The experimental design used was the randomized blocks in split-plot design, with four replications. The parcels were represented by systems of soil tillage: conventional soil tillage and no-tillage. The subdivision of the parcels was constituted by doses of nitrogen topdressing: (0, 40, 80, 120 and 160 kg ha-1 of N). Urea was the source of nitrogen used. The cultivar used was "Pérola" and it was sowed in the spacing of 0,45 meters in succession to black oat (fall sowing) and to pearl millet (spring sowing), during the years of 2002/2003. It can be concluded that no-tillage promoted a higher percentage of covering of the soil for black oat and pearl millet and promoted a higher nitrogen content in shoot for pearl millet crop. The soil tillage systems didn't influence at the grain productivity of the common bean. The doses of nitrogen topdressing interfered in several productivity characteristics of the common bean, and presented the maximum productivity of 1.870 kg ha-1 was obtained with the N dose of 78 kg ha-1. The physiologic quality of the seeds has been influenced positive by the doses of nitrogen, as well as the protein content, being found interaction soil tillage x doses at the cooking time. / Mestre

Made available in DSpace on 2014-06-11T19:29:43Z (GMT). No. of bitstreams: 0 Previous issue date: 2010-11-19Bitstream added on 2014-06-13T18:59:24Z : No. of bitstreams: 1 costa_nr_me_ilha.pdf: 544495 bytes, checksum: 7ae3da9bdbfc3bc0bb27779b4e726453 (MD5) / Como alternativa para aumento da produtividade dos sistemas de produção, surgiu o Sistema de Integração Lavoura-Pecuária. Desta maneira, objetivou-se avaliar em um LATOSSOLO VERMELHO Distroférrico: 1) os teores nutricionais e leituras ICF em folhas de milho, assim como os componentes da produção e produtividade de grãos da cultura em consórcio com duas espécies de braquiárias (B. brizantha cv. MG-5 e B. ruziziensis) submetidos a doses de N em cobertura; 2) avaliar a produtividade de fitomassa das espécies forrageiras após a colheita do milho, também submetidas à doses de N, assim como os teores nutricionais, composição bromatológica e a taxa de decomposição da palhada das braquiárias; 3) avaliar os teores nutricionais e leituras ICF em folhas de feijoeiro de inverno cultivado em sucessão, assim como os componentes da produção e produtividade de grãos; e 4) avaliar o desempenho econômico do sistema de ILP, considerando o milho consorciado, a pastagem e o feijão em sucessão. Para tanto, foram conduzidos três experimentos seqüenciais, durante o ano agrícola de 2008/2009 na Fazenda de Ensino, Pesquisa e Extensão, da Faculdade de Engenharia - Unesp, Campus de Ilha Solteira, em condições irrigadas no Cerrado, com histórico de oito anos sob SPD. O delineamento experimental utilizado foi o de blocos casualizados, com quatro repetições, em esquema fatorial 2 x 5. Constatou-se que a B. ruziziensis proporcionou maior competição com o milho em consórcio quando comparada à B. brizantha, causando redução dos teores de N e S foliares e no comprimento da espiga e massa de 100 grãos do milho. Porém, esta competição não interferiu na produtividade de grãos da cultura do milho o que também ocorreu com relação às doses de N aplicadas em cobertura. A B. brizantha produziu maior quantidade de massa seca comparada à B. ruziziensis, o que ocorreu também de modo... / As an alternative to increasing the productivity of production systems, the use of Crop- Livestock Integration (CLI) is increasing. Thus, it was evaluated in an Oxisol: 1) the nutritional content and readings of ICF in corn leaves, and yield components and grain yield of the crop in a consortium with two species of Brachiaria (B. brizantha . MG-5 and B. ruziziensis) submitted to sidedress N rates, 2) to evaluate the productivity of forage biomass after harvest of corn, also submitted to N, as well as the nutritional content, chemical composition and the rate decomposition of the straw of Brachiaria, 3) to assess the nutritional content and readings of ICF of common bean leaves of winter crop in rotation, as well as yield components and grain yield, and 4) to evaluate the economic performance of the CLI system, considering intercropped corn/grassland and common bean in succession. For this, three experiments were conducted in sequence, during the 2008/2009 agricultural year at the Experimental Station of Engineering Faculty - UNESP, Ilha Solteira Campus, in irrigated conditions in the Cerrado, with a history of eight years under no till. The experimental design was a randomized complete block with four replications in a 2 x 5 scheme. It was found that B. ruziziensis provided greater competition with corn intercropping compared to B. brizantha, causing reduction in N and S leaf, ear length and weight of 100 grains of corn. However, this competition did not affect the grain yield of corn, which also occurred with respect to N rates applied in bands. B. brizantha produced a greater amount of dry mass compared to B. ruziziensis, which also occurred in order linear with increasing doses of N topdressing for both species. Moreover, B. ruziziensis showed better chemical composition and nutritional status, being more suitable for animal nutrition or nutrient supply to crops in succession. With ... (Complete abstract click electronic access below)

Estresses abióticos como seca, alta salinidade e baixas temperaturas, afetam o crescimento e a produtividade em culturas de interesse comercial como o feijoeiro comum. Proteínas DREB (Dehydration Responsive Element Binding) são fatores de transcrição que regulam genes específicos envolvidos na tolerância ao estresse abiótico. Para determinar como as plantas toleram condições ambientais adversas, variedades tolerantes, biologia molecular e bioinformática podem ser aplicadas para identificar e caracterizar genes que controlam mecanismos de adaptação a estresses. Baseado nas informações disponíveis nos bancos de dados públicos, a sequência da Orf completa do gene Phvul.009G029600.1| PACid:27146455 contendo 1062 pb foi encontrada e usada para o desenho dos primers e para o sequenciamento. A nova sequência é muito similar ao AtRAP2.4 e foi nomeada como PvDREB6A, segundo a análise filogenética. Ferramentas de predição mostraram que a sequência apresenta 354 aminoácidos e possui uma cópia do domínio AP2, que se dobra em uma estrutura com três ?-folhas e uma ?-hélice apresentando resíduos importantes e motivos específicos de reconhecimento e de ligação ao DNA. Além disso, um peptídeo trânsito foi detectado na porção N-terminal com um sítio de clivagem no resíduo 52. A interação deste fator de transcrição com seu domínio de ligação ao DNA foi validada por Electro Mobility Shift Assay (EMSA). A localização subcelular da proteína foi realizada e expressão da Green Fluorescent Proteín (GFP) foi detectada no núcleo. A transformação genética para a superexpressão do gene PvDREB6A em plantas de Arabidopsis thaliana Columbia-0 e mutantes nocaute para o gene AtRAP2.4 (Salk_020767C) foi realizada. Quatro eventos com cópia única e melhor expressão do gene PvDREB6A denominados Col-0/pFEC2.1 #1, Salk_020767C/pFEC2.1 #13.1, Salk_020767C/ pFEC2.1 #19.7 e Salk_020767C/ pFEC2.1 #23.7, foram selecionados. O evento Salk_020767C/pFEC2.1 #23.7 mostrou melhor expressão do gene PvDREB6A e foi visualizado sob luz UV. A análise funcional revelou que as plantas transgênicas submetidas ao déficit hídrico, à alta salinidade e ao frio, apresentaram maior taxa de sobrevivência. Plantas transgênicas superexpressando o gene PvDREB6A apresentaram menor taxa de desidratação e de vazamento de eletrólitos quando submetidas a estresses abióticos. Uma análise da expressão de genes relacionados à tolerância foi conduzida. A quantificação revelou que a expressão de 18 genes: AtDC1.2, AtUSP, AtKIN1, AtERF69, AtGolS3, AtMT2A, AtCAP160, AtNTR1.7, AtGPR7, AtPDC2, AtLTI78, AtCOR15a, AtCOR15b, AtCOR47, AtCOR413, AtLEA6, AtLEA9 e AtLEA14, relacionados a tolerância a seca, sal e frio foram up-regulated devido à superexpressão do gene PvDREB6A de feijoeiro nas plantas transgênicas / Abiotic stresses like drought, high salinity and low temperatures affect growth and productivity in crops of economic interest such as common bean. DREB (Dehydration Responsive Element Binding) proteins are transcription factors that activate specific genes involved in tolerance to abiotic stress. To generate new information on the research for drought and other abiotic stresses, tolerant varieties, molecular biology and bioinformatics can be applied to identify and characterize genes that control plant defense and adaptation mechanisms to water deprivation, to excessive salt and to high/low temperature. Based on public databases, a common bean DREB sequence was found and an in silico study was carried out. A complete Orf sequence Phvul.009G029600.1 |PACid:27146455 containing 1062 bp was found and used for primer design and sequencing. The new sequence was very similar to AtRAP2.4 and named as PvDREB6A, according to phylogenetic analysis. Prediction tools showed that the deduced 354 aa sequence has one copy of the AP2 domain, folding in a three ?-sheets and one ?-helix structure, and presenting important residues and motifs for DNA contacting and binding specificity. In addition, a chloroplast transit peptide was detected at the N-terminal region with cleavage site in the 52 residue. Binding activity of this transcription factor was validated by Electro Mobility Shift Assay (EMSA). Subcellular localization was verified by transient expression of PvDREB6A::GFP in Nicotiana benthamiana and the expression of GFP was detected at the nucleus. Genetic transformation for overexpression of PvDREB6A gene in Arabidopsis thaliana wild type and knockout mutant for AtRAP2.4 gene was conducted. Four single copy events with better expression of the PvDREB6A named Col-0/pFEC2.1 #1, Salk_020767C/pFEC2.1 #13.1, Salk_020767C/pFEC2.1 #19.7 and Salk_020767C/pFEC2.1 #23.7 were selected. The event Salk_020767C/pFEC2.1 #23.7 showed the best expression of PvDREB6A and was visualized under UV light. Functional analysis, revealed that transgenic plants under water deficit, high salt, and cold showed higher survival rate. Transgenic plants overexpressing the PvDREB6A exhibited lower water loss rate and electrolyte leakage rate under abiotic stress. A gene expression analysis with tolerant-related genes was conduted. The quantification revealed that 18 genes, AtDC1.2, AtUSP, AtKIN1, AtERF69, AtGolS3, AtMT2A, AtCAP160, AtNTR1.7, AtGPR7, AtPDC2, AtLTI78, AtCOR15a, AtCOR15b, AtCOR47, AtCOR413, AtLEA6, AtLEA9 e AtLEA14, related to drought, salt and cold tolerance, were up-regulated due to the overexpression of PvDREB6A from common bean in the transgenic plants

Orientadores: Luciana Lasry Benchimol, Anete Pereira de Souza / Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia / Made available in DSpace on 2018-08-13T09:26:45Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Oblessuc_PaulaRodrigues_M.pdf: 2069238 bytes, checksum: 9bb655ec20a8c552a66d533e2467aa51 (MD5) Previous issue date: 2009 / Resumo: O feijão comum (Phaseolus vulgaris L.) é o legume mais consumido em todo o mundo. O melhoramento do feijoeiro busca ferramentas robustas de transferência de genes de resistência à doenças para cultivares de interesse. A doença da mancha angular, causada pelo fungo Pseudocercospora griseola (Sacc.) Crous & U. Braun, é responsável por grandes prejuízos aos produtores de feijão. Novo mapa genético para feijão utilizando marcadores microssatélites foi desenvolvido a partir de uma população segregante de 380 linhagens endogâmicas. A população foi gerada pelo cruzamento entre a variedade 'IAC-UNA' (Mesoamericana/suscetível) e a linhagem 'CAL 143' (Andina/resistente). O mapa UC foi gerado com 198 microssatélites ligados, distribuídos nos onze grupos de ligação, usando LOD mínimo de 3,0 e fração de recombinação máxima de 0,40. O comprimento total de mapa encontrado foi de 1.864,2 cM. Os dados fenotípicos das linhagens da população UC quanto à resistência à mancha angular foram obtidos em condições naturais de infecção por P. griseola, em campo, e em condições controladas de casa de vegetação (raça 60.54). Onze QTLs (Quantitative Trait Loci) associados à resistência a mancha angular foram mapeados por mapeamento por intervalo composto. Sete QTLs foram identificados a partir dos dados fenotípicos de campo e outros quatro QTLs, obtidos dos dados de casa de vegetação. Os efeitos dos QTLs foram quantificados. O total da variação fenotípica explicada foi de 34% no experimento de campo, no qual foi identificado o QTL de maior efeito sobre o fenótipo (9,1%). No experimento de casa de vegetação, foi possível explicar 18% do total da variação fenotípica, sendo obtido o segundo QTL de maior efeito, sendo de 7,2%. Os resultados obtidos neste trabalho indicam um padrão de herança poligênico de resistência à mancha angular, sendo necessária a realização de experimentos fenotípicos com repetições para reduzir os efeitos ambientais e com isso, isolar melhor os efeitos genéticos. / Abstract: Common bean (Phaseolus vulgaris L.) is the most consuming legume worldwide. Common bean breeding is seeking alternatives to transfer resistance genes to cultivars of interest. The angular leaf spot disease caused by the fungus Pseudocercospora griseola (Sacc.) Crous & U. Braun is responsible for great losses for common bean producers. A new genetic map for common bean using microsatellites was obtained from a segregating population of 380 endogamic lines. This population was generated from the 'IAC-UNA' (Mesoamerican/ susceptible) x 'CAL 143' (Andean/resistant) cross. The UC map was generated with 198 microsatellites assigned to eleven linkage groups, using a minimum LOD of 3.0 and a maximum recombinant ratio of 0.40. Total map length found was 1864.2 cM. The angular leaf spot resistance phenotypic data from UC lines was obtained under natural infection condition with P. griseola, on the field, and with controlling greenhouse conditions (race 60.54). Eleven QTLs (Quantitative Trait Loci) were mapped for angular leaf spot resistance using compositive interval mapping. Seven QTLs were identified from field condition and other four QTLs, obtained from greenhouse data. The QTL effects were quantified. Total phenotypic variance explained was 34% on field experiment, in which the major QTL involved on phenotype was identified (9.1%). On the greenhouse experiment it was possible to explain 18% of total phenotypic variance, with the second major QTL, being of 7.2%. The results obtained in this work indicate a polygenic inheritance for angular leaf spot resistance, and it is necessary to carry out new phenotypic experiments with repetitions in order to reduce the environmental effects and, thus, better isolate the genetic effects. / Mestrado / Genetica Vegetal e Melhoramento / Mestre em Genética e Biologia Molecular

Made available in DSpace on 2014-07-29T15:16:31Z (GMT). No. of bitstreams: 1 Dissertacao de Mestrado Marilia.pdf: 852367 bytes, checksum: 8be87e653d87766bc06bb6d29f5cb94e (MD5) Previous issue date: 2011-11-26 / Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary is a necrotrophic fungal pathogen that causes the disease known as white mold in many plants. During infection, it secretes several endopolygalacturonases (PGs) to degrade cell wall pectin. To counteract the action of PGs, plants express polygalacturonases-inhibiting proteins (PGIPs) that reduce the hydrolytic activity of endo-PGs and favor the accumulation of oligogalacturonides (OGs) with are elicitors of a variety of defense responses. PGIPs belong to the superfamily of leucine rich repeat (LRR) proteins and play important roles in resistance to infection of pathogens. In this study, real time RT-PCR was used to evaluate the expression of Pvpgip genes in dry bean plants (Phaseolus vulgaris L) submitted to different stress conditions. Transcriptional analysis showed that these genes are differentially expressed and activated by biotic (S. sclerotiorum infection) and abiotic (wound or methyl jasmonate treatment) stresses. Pvpgip1 was induced at early stages of the infection especially for plants treated with methyl jasmonate (MeJA) in which the transcript accumulation was higher. High levels of Pvpgip2 and Pvpgip3 expression were observed in infect plants treated or not with MeJA. All treatments showed induction of gene Pvpgip4. These results show that the/ four genes Pvpgip respond differently to treatment with the resistance inducer, fungal infection and wound. / Sclerotinia sclerotiorum (Lib.) de Bary é um fungo necrotrófico patogênico causador da doença conhecida como mofo branco em muitas plantas. Durante a infecção, secreta várias endopoligalacturonases (endo-PGs) que degradam a pectina da parede celular da planta hospedeira. Para contrapor à ação das PGs, as plantas produzem proteínas inibidoras de poligalacturonases (PGIPs) que reduzem a atividade hidrolítica das endo-PGs e favorecem o acúmulo de oligogalacturonídeos (OGs) que são indutores de uma variedade de respostas de defesa. As PGIPs pertencem à superfamília de proteínas ricas em repetições de leucina (LRR), e desempenham um papel importante na resistência à infecção de patógenos. Neste estudo, RT-PCR em tempo real foi usada para avaliar a expressão de genes Pvpgip em plantas de feijão comum (Phaseolus vulgaris L.) submetidas a diferentes condições de estresse. A análise transcricional mostrou que estes genes são ativados por fatores bióticos (infecção por S. sclerotiorum) e abióticos (injúria ou tratamento com metil jasmonato) e que existe uma variação em termos de expressão. Pvpgip1 foi induzido nos estágios iniciais da infecção, principalmente para as plantas tratadas com metil jasmonato (MeJA) em que o acúmulo deste transcritos foi maior. Altos níveis de expressão dos genes Pvpgip2 e Pvpgip3 foram observados nas plantas tratadas ou não com MeJA. Todos os tratamentos mostraram indução do gene Pvpgip4. Estes resultados mostraram que os quatro genes Pvpgip respondem diferentemente ao tratamento com indutor de resistência, infecção por fungo e injúria.