Resumo: Este trabalho teve por objetivo avaliar o efeito da congelação e do meio sobre as características físicas e químicas do sêmen de 10 reprodutores suínos durante o inverno e o verão. No protocolo utilizado para a congelação seminal, 2 diluentes de congelação foram testados em combinação com 2 diluentes de transporte e refrigeração. Os resultados encontrados demonstraram que os parâmetros de integridade de membranas, morfologia e cinética espermática nos momentos que antecederam a congelação não foram influenciados, de forma geral, pela estação do ano. Apesar do número de células espermáticas totais e o volume do ejaculado terem sido superiores no inverno em relação ao verão, a motilidade progressiva pós-descongelação foi melhor no verão do que no inverno na maior parte dos meios de congelação avaliados. A metodologia de congelação aplicada e os diluentes utilizados mostraram índices de viabilidade espermática do sêmen descongelado sem precedentes e superiores aos encontrados na literatura, independentemente do diluente ou da estação do ano avaliada. Em relação ao perfil químico seminal, apenas os níveis de sódio no sêmen e de cálcio no plasma seminal foram mais elevados durante o verão, devido ao menor volume seminal produzido neste período. As temperaturas e umidades foram evidentemente superiores durante o verão e as concentrações de metabólitos fecais de corticosterona mais elevadas nesta mesma estação, porém estes índices não ocasionaram alterações consistentes na viabilidade do sêmen descongelado dos cachaços. Desta forma, os resultados do presente trabalho indicam que os animais encontram-se adaptados ao ambiente, não apresentando alterações marcantes de suas características seminais de acordo com as condições climáticas / Abstract: This study aimed to evaluate the effect of freezing and environment on physical and chemical characteristics of the semen of 10 breeding pigs during the winter and summer. In the protocol used for the freezing of semen, 2 freezing extenders were tested in combination with 2 diluents for transport and refrigeration. The results show that the parameters of membrane integrity, sperm morphology and kinetics in the moments preceding the freezing were not affected, in general, by the season. Although the number of sperm cells and the total volume of the ejaculate were higher in winter compared to summer, the post-thaw motility was better in summer than in winter in most media tested for freezing. The freezing methodology and the extenders applied showed indices of viability of the thawed sperm unprecedented and higher than those found in the literature, regardless of the diluents or the season assessed. Regarding the chemical seminal profile, only the levels of sodium and calcium in semen in the seminal plasma were higher during the summer due to lower volume seminal produced in this period. Temperatures and humidities were clearly higher during the summer and the concentrations of fecal corticosterone metabolites higher in the same season, but these rates did not cause consistent changes in the viability of frozen-thawed semen of boars. Thus, the present results indicate that the animals are adapted to the environment, showing no marked changes in their semen characteristics according to the season / Orientador: Eunice Oba / Coorientador: Daniella Jorge de Moura / Banca: Frederico Ozanam Papa / Banca: Sony Dimas Bicudo / Banca: Aníbal Sant'Anna Moretti / Banca: Rubens Stahlberg / Mestre

Orientador: Vera Fernanda Martins Hossepian de Lima / Banca: Wilter Ricardo Russiano Vicente / Banca: Elmo Gomes Diniz / Resumo: O presente trabalho teve como objetivos separar os espermatozóides portadores do cromossomo X viáveis, dos portadores do Y, através de gradiente descontínuo de densidade de PercollTM. Utilizar esse sêmen na produção in vitro de embriões bovinos, substituindo o SFB pela BSA no cultivo. Congelar estes embriões pelo método da congelação lenta. Avaliar a criotolerância dos embriões do sexo feminino pela taxa de eclosão e a eficiência do gradiente pela técnica da PCR, que identificou o sexo dos embriões produzidos. Foram produzidos 133 embriões do tratamento sexado (embriões produzidos a partir de sêmen submetido ao gradiente de densidade de PercollTM) e 100 do tratamento controle (embriões produzidos de acordo com o protocolo utilizado no departamento de Reprodução Animal). Após congelação, descongelação e cultivo destes embriões apenas 8 eclodiram do tratamento sexado e também 8 do tratamento controle, a análise estatística deste resultado demonstrou que o sexo não influenciou na taxa de eclosão pós descongelação. Porém a análise estatística dos embriões produzidos com sêmen sexado e submetidos a PCR demonstrou que o gradiente de densidade de PercollTM foi eficaz na separação dos espermatozóides X viáveis em 62%. / Abstract: The present study had as purposes to separe X and Y sperm by PercollTM descontinuous density gradient. Use the semen on in vitro production bovine embryos, replacing the BFS for BSA on the culture. To freezing the embryos by the slow curve method. Evaluate the female embryos cryotolerance by eclosion rate and the gradient eficience by PCR technique that identify the embryos sex. 133 embryos were produced by the sexed treatment and 100 by control treatment. After freezing, unfreezing and culture of the embryos, only 8 ecloded of each treatment, the result statistics analyses showed that the sex had no influence on the eclosion rate after unfreeze. However the statistics analyses of the sexed semen produced embryos and submitted to PCR showed that the PercollTM density gradient was efficient on the viable X separation sperm in 62%. / Mestre

Orientador: Maria Denise Lopes / Banca: Frederico Ozanan Papa / Banca: Jussara Tebet / Resumo: A análise dos efeitos da refrigeração sobre a congelabilidade da célula espermática da cauda do epidídimo de gatos domésticos foram avaliados nesse experimento. Após prévia refrigeração a 5O C por 24 horas alíquotas de sêmen foram submetidas a criopreservação e posteriormente descongeladas para análise morfofuncional. 15 animais foram submetidos a orquiectomia de conveniência e seus epidídimos foram manipulados para obtenção de amostras que foram suspensas em meio TE (TRIS/Equex/Gema de Ovo), analisadas, refrigeradas e congeladas. Amostras referentes ao grupo controle foram congeladas imediatamente após a colheita. A analise morfofuncional consistiu em motilidade, vigor, morfologia espermática e Integridade de membrana. Após a descongelação os resultados dos grupos controle e trabalho foram analisados estatisticamente e observou-se que não existe diferença estatística para nenhuma das variáveis analisadas. Embora tenha sido observada diferença estatística entre os momentos pós-colheita e pós-refrigeração por 24 horas para as variáveis motilidade, vigor, integridade de membrana e defeitos primários, nenhuma variável diferiu entre as amostras congeladas pós-colheita e as amostras congeladas pós-refrigeração prolongada. Tais resultados demonstram que um transporte refrigerado a 5O C por 24 horas não interfere sobre a congelabilidade de sêmen do epidídimo de gatos domésticos. Do ponto de vista da conservação tais resultados abrem portas para um melhor fluxo de gametas de espécies selvagens para centrais de biotecnologia permitindo um melhor aproveitamento e conservação deste material. / Abstract: The present study analyzed the effect of cooling on sperm cells obtained from the epididymis tail from domestic cats in respect to their capability for freezing. The treatment group had their samples submitted to freezing after being cooled at 5° C during 24 hours, and th~ control group samples were frozen immediately after collection, Samples from both groups were then thawed and submitted to mo rphofunctiona I analysis. Fifteen animais were submitted to a convenient routine orchiectomy and their epididymis were processed to obtain a semen samples which were suspended in TE medium (TRIS/Equexl egg yolk). The samples were then analyzed, coo,led and frozen. The morphofunctional analysis consisted of sperm motility, vigor, morphology and membrane integrity. After thawing, the semen samples from treatment and control groups were analyzed and no statistic difference was found among ali variables described above. / Mestre