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Estudo da variabilidade dos genes b-lß do mhc da galinha (Gallus gallus domesticus) em aves caipiras brasileiras / Study of the variability of mhc genes b-l ß chicken (Gallus gallus domesticus) birds in brazilian caipira

Paludo, Ediane 12 August 2011 (has links)
Made available in DSpace on 2016-12-08T16:24:09Z (GMT). No. of bitstreams: 1 PGCA11MA074.pdf: 600385 bytes, checksum: a494ebf1016e78409c7b3c6a97f69783 (MD5) Previous issue date: 2011-08-12 / The Brazilian caipira chickens egg blue are the result of random mating between different chicken breeds found in Brazil with chickens Araucania, giving rise to Brazilian caipira chicken with characteristic blue eggs. It stands out for its hardiness, disease resistance. And d adverse weather conditions and diet. The disease resistance is related to genetic variability of immune system genes. The immune response of chickens to pathogens is triggered from the presentation of antigens of the effect or cells of the immune system. This action is made by antigen-present cells (B cells, macrophages and a small percentage of T cells) animals that have surface molecules (glycoprotein) in wich these antigens are complexes. These glycoproteins presenting antigens, molecules called Major Histocompatibility Comples (MHC or B complex) can be class I or II. The class II, which present exogenous antigens, are composed of two polypeptide chains, an α chain and a ß chain. The chain is monomorphic α chain and ß is very polymorphic and is considered responsible for encoding different MHC class II molecules inn chickens. This study aimed to investigate the genetic variability of two gene loci of the MHC class II, B-LßI and B-LßII in caipiras chickens Brazilian blue eggs by obtaining sequences of these two genes and thus detect B-Lß existing alleles for these genes in these birds. This work was initially developed with DNA samples from 100 caipiras chickens blue eggs that were amplified from the region of interest and analyzed. From this analysis, the animals were grouped according to the sequence of exon2. Then, 16 animals were (with at least one representative from each group) for the reaction of DNA amplification, cloning and sequencing. The sample were submitted to the initiators of the genes B-LßII. Of these 16 birds were obtained 15 different sequences that were aligned to the standard sequence the B-LB12major (AJ248676) for BLßII and B-LB12c (AJ248578) to B-LßI, being eleven sequences B-LßII and B-LßI four sequences. Of these eleven sequences of the gene B-LßII seven were already described in the literature and four sequences of the gene B-LßII seven were already described in the literature and four sequences are new is not described, the other four sequences of the gene B-LßI three had already been described in the literature and a new . The 15 nucleotide sequences were transformed into sequences of amino acids. In the amino acid sequences of the gene was observed that B-LßI remains much more conserved than gene B-LßII. Thus this paper presents the genetic variability at both the DNA and polypeptide chain, genes B-LßII caipira chickens in Brazil s blue eggs / As galinhas caipiras brasileiras de ovos azuis são o resultado de cruzamentos aleatórios entre diversas raças de galinhas encontradas no Brasil com galinhas Araucanas, dando origem a uma galinha caipira brasileira com característica de ovos azuis. Destaca-se pela sua rusticidade, resistência a doenças e as condições adversas de clima e alimentação. A resistência a doenças esta relacionada à variabilidade genética dos genes do sistema imune. A resposta imune das galinhas a patógenos é desencadeada a partir da apresentação de antígenos as células efetoras do sistema imune. Esta ação é feita pelas células apresentadoras de antígenos (células B, macrófagos e uma pequena porcentagem de células T) dos animais que possuem moléculas de superfície (glicoproteínas) na qual são complexados estes antígenos. Estas glicoproteínas apresentadoras de antígenos, chamadas de moléculas do Complexo Maior de Histocompatibilidade (MHC ou Complexo B), podem ser de classe I ou de classe II. As de classe II, que apresentam antígenos exógenos, são formadas por duas cadeias polipeptídicas, uma cadeia α e uma cadeia β. A cadeia α é monomorfica e a cadeia β é bem polimórfica, e é considerada a responsável por codificar diferentes moléculas MHC classe II em galinhas. Este estudo teve como objetivo investigar a variabilidade genética em dois loci gênicos do MHC de classe II, B-LI e B-LII, em galinhas caipiras brasileiras de ovos azuis através da obtenção das sequências destes dois genes B-L e assim detectar os alelos existentes para estes genes nestas aves. Este trabalho foi desenvolvido inicialmente com amostras de DNA de 100 galinhas caipiras de ovos azuis que foram amplificadas para a região de interesse e analisadas. A partir desta análise, os animais foram agrupados de acordo com a sequência do exon 2. Depois, 16 animais foram selecionados (com pelo menos um representante de cada grupo) para a reação de amplificação do DNA, clonagem e sequenciamento. As amostras foram submetidas aos iniciadores dos genes B-LβI e B-LβII. Destas 16 aves obteve-se 15 diferentes sequências que foram alinhadas a sequência padrão B-LB12major (AJ248576) para o B-LβII e B-LB12c (AJ248578) para o B-LβI, sendo onze sequências B-LβII e quatro sequências B-LβI. Destas onze sequências do gene B-LβII sete já estavam descritas na literatura e quatro são sequências novas ainda não descritas, das outras quatro sequências do gene B-LβI três já haviam sido descritas na literatura e uma nova . As 15 sequências nucleotídicas encontradas foram deduzidas em sequências de aminoácidos. Nas sequências de aminoácidos foi observado que o gene B-LβI se mantém bem mais conservado do que o gene B-LβII. Assim, este trabalho apresenta a variabilidade genética dos genes B-LβI e BLβII tanto em nível de DNA quanto de cadeia polipeptídica, em galinhas caipiras brasileiras de ovos azuis

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