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Estabelecimento de métodos moleculares para aplicação no diagnóstico rápido de virus neurotrópicos. / The integration of molecular methods into the rapid laboratorial diagnostic of neurotropic viruses.Santos, Daniela Carvalho dos 04 September 2009 (has links)
Diversos agentes virais são causadores de meningites e meningoencefalites. Neste estudo, técnicas moleculares foram utilizadas para detecção de HEV, HHV e HAdV em amostras de líquor colhidas de janeiro de 2005 a março de 2007. Dos três métodos de extração de DNA e RNA testados, o kit DNA Qiablood Qiagen® se mostrou o mais sensível e específico. A nested PCR detectou HEV em 28% das amostras, HSV em 4%, HHV-3 em 1%; HHV-4 em 0,3%, HHV-5 em 0,3%, HHV-6 em 0,7% e HAdV em 13%. Através da PCR em tempo real os HEV foram detectados em 23,3% e HSV em 5,1%. Por neutralização, somente duas amostras foram sorotipadas (Echovirus 6 e Coxsackievirus B). Os HEV detectados foram então seqüenciados para a determinação do sorotipo. Os sorotipos Echovirus 18 (53%) e Coxsackievirus B5 (26%) foram os mais freqüentes. As técnicas de biologia molecular aplicadas na detecção de HEV, HHV e HAdV no líquor trazem grandes vantagens ao diagnóstico de doenças do SNC graças à rapidez no diagnóstico, alta sensibilidade e especificidade. / Several viruses are etiological agents of meningitis and meningoencephalitis. In this study, molecular techniques were used for the detection of HEV, HHV and HAdV in liquor samples, collected from January 2005 to March 2007. Among the three methods tested for the extraction of DNA and RNA, the DNA Qiablood kit - Qiagen® was the most sensible and specific. HEV (28%), HSV (4%), HHV-3 (1%), HHV-4 (0.3%), HHV-5 (0.3%), HHV-6 (0.7%) and HAdV (13%) were detected by Nested PCR in the samples. By real time PCR, HEV were detected in 23.3% and HSV in 5.1%. Only two HEV could be serotyped by neutralization (Echovirus 6 and Coxsackievirus B). All detected HEV were then sequenced to determine the serotype. The serotypes echovirus 18 (53%) and Coxsackievirus B5 (26%) were the most frequent. Molecular biology techniques applied in the detection of HEV, HAdV and HHV in CSF bring major benefits to the diagnosis of meningitis thanks to the rapid diagnosis, high sensibility and specificity.
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Estabelecimento de métodos moleculares para aplicação no diagnóstico rápido de virus neurotrópicos. / The integration of molecular methods into the rapid laboratorial diagnostic of neurotropic viruses.Daniela Carvalho dos Santos 04 September 2009 (has links)
Diversos agentes virais são causadores de meningites e meningoencefalites. Neste estudo, técnicas moleculares foram utilizadas para detecção de HEV, HHV e HAdV em amostras de líquor colhidas de janeiro de 2005 a março de 2007. Dos três métodos de extração de DNA e RNA testados, o kit DNA Qiablood Qiagen® se mostrou o mais sensível e específico. A nested PCR detectou HEV em 28% das amostras, HSV em 4%, HHV-3 em 1%; HHV-4 em 0,3%, HHV-5 em 0,3%, HHV-6 em 0,7% e HAdV em 13%. Através da PCR em tempo real os HEV foram detectados em 23,3% e HSV em 5,1%. Por neutralização, somente duas amostras foram sorotipadas (Echovirus 6 e Coxsackievirus B). Os HEV detectados foram então seqüenciados para a determinação do sorotipo. Os sorotipos Echovirus 18 (53%) e Coxsackievirus B5 (26%) foram os mais freqüentes. As técnicas de biologia molecular aplicadas na detecção de HEV, HHV e HAdV no líquor trazem grandes vantagens ao diagnóstico de doenças do SNC graças à rapidez no diagnóstico, alta sensibilidade e especificidade. / Several viruses are etiological agents of meningitis and meningoencephalitis. In this study, molecular techniques were used for the detection of HEV, HHV and HAdV in liquor samples, collected from January 2005 to March 2007. Among the three methods tested for the extraction of DNA and RNA, the DNA Qiablood kit - Qiagen® was the most sensible and specific. HEV (28%), HSV (4%), HHV-3 (1%), HHV-4 (0.3%), HHV-5 (0.3%), HHV-6 (0.7%) and HAdV (13%) were detected by Nested PCR in the samples. By real time PCR, HEV were detected in 23.3% and HSV in 5.1%. Only two HEV could be serotyped by neutralization (Echovirus 6 and Coxsackievirus B). All detected HEV were then sequenced to determine the serotype. The serotypes echovirus 18 (53%) and Coxsackievirus B5 (26%) were the most frequent. Molecular biology techniques applied in the detection of HEV, HAdV and HHV in CSF bring major benefits to the diagnosis of meningitis thanks to the rapid diagnosis, high sensibility and specificity.
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"Varicela -Zóster em crianças de creches municipais de Taubaté" / Varicella-Zoster in children attended in day cares of TaubatéMarcitelli, Ricardo 21 July 2005 (has links)
Objetivos: Descrever a morbidade associada à varicela em crianças usuárias de creches Municipais de Taubaté e o conhecimento de seus familiares sobre a doença. Casuística e Métodos: Estudo de corte transversal, realizado através de inquérito com responsáveis por 664 crianças que contraíram varicela após admissão às creches. Os responsáveis pelas crianças foram entrevistados por um único examinador, que utilizou um formulário previamente testado. Os dados foram compilados em banco de dados e analisados utilizando o programa Epi-info versão 6.01. Resultados: A varicela acometeu crianças de seis meses a sete anos de idade (mediana = 36 meses) e 8,4% tiveram a doença antes de um ano. Os principais sintomas foram: exantema (100,0%), febre (85,4%), anorexia (39,6%) e cefaléia (15,3%) / Objective: To evaluate the morbidity associated to varicella in day cares centers of Taubaté and the parent's knowledge about the disease. Subjects and Methods: Cross-sectional study, including 664 children that had varicella after admission to the day care centers. Parents of children were interviewed by one of the participant of the study that filled in previously tested form. Data were compiled in database and analyzed in program Epi-info version 6.01. Results: Children had varicella at six months to seven years of age, (median = 36 months) and 8.4% of cases occurred in children under 12 months of age. The most frequent symptoms were: exantema (100.0%), fever (85.4%), anorexia (39.6%) and headache (15.3%). Five hundred and seventeen children (77.9%) were taken for medical visits, 80.6% were medicated, and 73 children (11.0%) were medicated with anti-inflammatory drugs and 52 children (7.8%) with antibiotics
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"Varicela -Zóster em crianças de creches municipais de Taubaté" / Varicella-Zoster in children attended in day cares of TaubatéRicardo Marcitelli 21 July 2005 (has links)
Objetivos: Descrever a morbidade associada à varicela em crianças usuárias de creches Municipais de Taubaté e o conhecimento de seus familiares sobre a doença. Casuística e Métodos: Estudo de corte transversal, realizado através de inquérito com responsáveis por 664 crianças que contraíram varicela após admissão às creches. Os responsáveis pelas crianças foram entrevistados por um único examinador, que utilizou um formulário previamente testado. Os dados foram compilados em banco de dados e analisados utilizando o programa Epi-info versão 6.01. Resultados: A varicela acometeu crianças de seis meses a sete anos de idade (mediana = 36 meses) e 8,4% tiveram a doença antes de um ano. Os principais sintomas foram: exantema (100,0%), febre (85,4%), anorexia (39,6%) e cefaléia (15,3%) / Objective: To evaluate the morbidity associated to varicella in day cares centers of Taubaté and the parent's knowledge about the disease. Subjects and Methods: Cross-sectional study, including 664 children that had varicella after admission to the day care centers. Parents of children were interviewed by one of the participant of the study that filled in previously tested form. Data were compiled in database and analyzed in program Epi-info version 6.01. Results: Children had varicella at six months to seven years of age, (median = 36 months) and 8.4% of cases occurred in children under 12 months of age. The most frequent symptoms were: exantema (100.0%), fever (85.4%), anorexia (39.6%) and headache (15.3%). Five hundred and seventeen children (77.9%) were taken for medical visits, 80.6% were medicated, and 73 children (11.0%) were medicated with anti-inflammatory drugs and 52 children (7.8%) with antibiotics
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