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Efeito da exposição à dexametasona sobre a expressão de miRNA no pâncreas endócrino e a homeostasia glicêmica de ratas prenhes. / Effect of exposure to dexamethasone on miRNA expression in the endocrine pancreas and glucose homeostasis of pregnant rats.Gomes, Patricia Rodrigues Lourenço 06 February 2015 (has links)
Este estudo investigou se o tratamento com glicocorticoide durante a gestação altera o metabolismo energético, hormonal e molecular materno, a função das ilhotas pancreáticas e mudanças correlativas sobre miRNAs. Foram utilizadas 80 ratas dividas em dois grupos de 40 animais, sendo um grupo destinado para envelhecimento até um ano após o desmame da prole, e o seguinte grupo destinado para experimentação no 20º dia de gestação, ambos dispostos em: CTL - controle, CTL-Dex - controle tratadas com dexametasona por 6 dias, P - prenhes e P-Dex - prenhes tratadas com dexametasona do 14º-19º dia de gestação. A expressão de miRNA das ilhotas foram analisadas em larga escala. Os genes alvos foram rastreados em banco de dados e confirmados. Por fim, investigou-se o mecanismo de modulação da homeostasia glicêmica. Inúmeras modificações resultaram da terapia com DEXA na gestação concluindo que a associação do tratamento ao período gravídico modula positivamente membros da família miRNA-29 ocasionando um desequilíbrio na homeostasia glicêmica por meio de falha na maquinaria exocitótica em longo prazo, desencadeado pela modulação negativa de progesterona e seu receptor promovendo prejuízo no processo de remodelação da ilhota pancreática na fase final da gestação. / This study investigated whether treatment with glucocorticoids during pregnancy alters the energetic, hormonal and molecular maternal metabolism, function of pancreatic islets and correlative changes of miRNAs. Were used 80 rats divided into two groups of 40 animals, one group designed to aging up one year after weaning, and the next group destined to experimentation at 20th day of gestation, both arranged: CTL - control, CTL-Dex - control treated with dexamethasone for 6 days, P - pregnant rats and P-Dex - pregnant rats treated with dexamethasone from 14th to 19th day of pregnancy. Pancreatic islets were collected for large-scale analysis of miRNA expression. The target genes were screened and confirmed by qPCR. Finally it was investigated the mechanism of modulation of glucose homeostasis through qPCR and Western Blot. We can be observed numerous changes resulting from therapy with DEXA in pregnancy concluded that the association of treatment to the pregnancy period modulates members of the miRNA-29 family causing an imbalance in glucose homeostasis through long-term failure in exocytotic machinery, triggered by the downregulation of the progesterone and its receptor promoting injury in the pancreatic islet remodeling process in late pregnancy.
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Efeito da exposição à dexametasona sobre a expressão de miRNA no pâncreas endócrino e a homeostasia glicêmica de ratas prenhes. / Effect of exposure to dexamethasone on miRNA expression in the endocrine pancreas and glucose homeostasis of pregnant rats.Patricia Rodrigues Lourenço Gomes 06 February 2015 (has links)
Este estudo investigou se o tratamento com glicocorticoide durante a gestação altera o metabolismo energético, hormonal e molecular materno, a função das ilhotas pancreáticas e mudanças correlativas sobre miRNAs. Foram utilizadas 80 ratas dividas em dois grupos de 40 animais, sendo um grupo destinado para envelhecimento até um ano após o desmame da prole, e o seguinte grupo destinado para experimentação no 20º dia de gestação, ambos dispostos em: CTL - controle, CTL-Dex - controle tratadas com dexametasona por 6 dias, P - prenhes e P-Dex - prenhes tratadas com dexametasona do 14º-19º dia de gestação. A expressão de miRNA das ilhotas foram analisadas em larga escala. Os genes alvos foram rastreados em banco de dados e confirmados. Por fim, investigou-se o mecanismo de modulação da homeostasia glicêmica. Inúmeras modificações resultaram da terapia com DEXA na gestação concluindo que a associação do tratamento ao período gravídico modula positivamente membros da família miRNA-29 ocasionando um desequilíbrio na homeostasia glicêmica por meio de falha na maquinaria exocitótica em longo prazo, desencadeado pela modulação negativa de progesterona e seu receptor promovendo prejuízo no processo de remodelação da ilhota pancreática na fase final da gestação. / This study investigated whether treatment with glucocorticoids during pregnancy alters the energetic, hormonal and molecular maternal metabolism, function of pancreatic islets and correlative changes of miRNAs. Were used 80 rats divided into two groups of 40 animals, one group designed to aging up one year after weaning, and the next group destined to experimentation at 20th day of gestation, both arranged: CTL - control, CTL-Dex - control treated with dexamethasone for 6 days, P - pregnant rats and P-Dex - pregnant rats treated with dexamethasone from 14th to 19th day of pregnancy. Pancreatic islets were collected for large-scale analysis of miRNA expression. The target genes were screened and confirmed by qPCR. Finally it was investigated the mechanism of modulation of glucose homeostasis through qPCR and Western Blot. We can be observed numerous changes resulting from therapy with DEXA in pregnancy concluded that the association of treatment to the pregnancy period modulates members of the miRNA-29 family causing an imbalance in glucose homeostasis through long-term failure in exocytotic machinery, triggered by the downregulation of the progesterone and its receptor promoting injury in the pancreatic islet remodeling process in late pregnancy.
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Peixe-zebra (Danio rerio) Transgênico para o gene bmal1a: efeitos no relógio molecular do músculo esqueléticoSousa, Jucilene Pereira de 28 November 2016 (has links)
Submitted by Maike Costa (maiksebas@gmail.com) on 2017-02-17T12:43:01Z
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Previous issue date: 2016-11-28 / Most organisms have circadian rhythms with a periodicity of 24-hour that are generated by an endogenous mechanism, the molecular clock, which has the ability to synchronize biological functions with environmental signals. This mechanism has fundamental importance in the homeostasis of the tissues that are under its influence. Among the genes of the molecular clock machinery, the clock and bmal are positive regulators of clock mechanism and they present sigmoid expression profile in the skeletal muscle in zebrafish (Danio rerio). CLOCK and BMAL participate on the activation of the myogenic regulatory factors (MRFs - myoD, myog, myf5 and myf6), which are important in the development and differentiation of muscle cells. Despite this knowledge, the physiological importance of circadian rhythm in skeletal muscle of fish is not known. Therefore, the objective of the present study was to produce a zebrafish transgenic lineage that expresses bmal1a constitutively in the skeletal muscle to investigate the role of the molecular clock in the muscle. The transfer rate of the transgene to offspring, effect of transgenesis in the survival and fish growth, and expression of the bmal1a, clock1a and MRFs were investigated. The founding transgenic population (F0) was obtained after microinjection, and positive larvae were observed as specimens which presented green fluorescent heart. F1 was obtained from natural crossings between F0 and NT fish. Likewise, F2 was obtained from F1. F2 transgenic and NT were used in this study. The transgenic lineage was successfully generated with 50% transmission from the transgene to the offspring following a Mendelian model. The analysis of gene expression was made by qPCR. The survival (41,4±0% F2 and 44,3±6% NT) and growth (3.7±0.1 cm F2 and 3.8±0.2 cm NT) of F2 were not statistically different from NT fish. Among the genes, clock1a and myog presented statistically significant differences between the lineages with circadian profile in NT fish, suggesting that myog may be a clock controlled genes. The other genes (bmal1a, myf5, myf6, and myoD) presented constitutive expression. In general, it can be verified that the constitutive expression of bmal1a did not present change in the expression of the molecular clock, not affecting the homeostasis of the skeletal muscle, survival and growth. / A maioria dos organismos apresentam ritmos circadianos em torno de um período de 24 horas que são gerados por um mecanismo endógeno, o relógio molecular, que tem a capacidade de sincronizar-se com sinais ambientais. Este mecanismo tem fundamental importância na homeostase dos tecidos que estão sob sua influência. Dentre os genes que compõem a maquinaria do relógio molecular os genes clock e bmal são os reguladores positivos do mecanismo desse relógio e apresentam expressão com perfil sigmoide em tecido como o músculo do peixe-zebra (Danio rerio), participando da ativação de alguns fatores regulatórios miogênicos (MRFs – myoD, myog, myf5 e myf6), os quais possuem importância para o desenvolvimento e diferenciação do músculo. Apesar deste conhecimento, não se sabe a importância fisiológica do ritmo de expressão circadiana no músculo esquelético de peixes. Neste sentido, o objetivo desse estudo foi investigar a taxa de transferência do transgene para a prole; se a transgenia para o gene bmal1a no músculo esquelético interferiu na sobrevivência e crescimento dos peixes; e avaliar se a expressão dos genes bmal1a, clock1a e MRFs apresentaram diferenças na linhagem transgênica comparada à linhagem não-transgênica (NT). Os fundadores (F0) foram obtidos após a microinjeção do plasmídeo e as larvas positivas foram observadas com coração verde fluorescente. A F1 foi obtida a partir de cruzamentos entre peixes F0 e NT. Da mesma forma, F2 foi obtida a partir da F1, os quais foram utilizados no presente estudo. A análise da expressão gênica das linhagens aos 11 meses de idade foi realizada utilizando a técnica qPCR. A linhagem transgênica foi gerada com sucesso, transmitindo o transgene para a prole seguindo a herança mendeliana. A sobrevivência e crescimento da prole F2 não apresentaram diferenças entre as linhagens, sendo 41,4±0% para a linhagem transgênica e 44,3±6% NT até 30 dpf e 3.7±0.1 cm transgênicos e 3.8±0.2 cm para NT aos 11 meses de idade, respectivamente. Dentre os genes, o clock1a e o myog apresentaram diferenças estatisticamente significativas entre as linhagens com perfil circadiano em peixes NT, sugerindo que myog seja um gene controlado pelo relógio. Os demais genes apresentaram expressão constitutiva. De um modo geral, pode-se verificar que a expressão constitutiva do bmal1a não apresentou alteração na expressão do relógio molecular, desta forma, não afetou a homeostasia do organismo, a sobrevivência das larvas, bem como não afetou o crescimento.
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Investigação sobre o efeito da temperatura na produção de calor em cabras da raça Saanen e Anglo-Nubiana / Investigation on the effect of temperature on heat production in Saanen and Anglo-Nubian goatsLima, Ana Rebeca Castro [UNESP] 07 August 2017 (has links)
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Tese_rebeca_com_certificado.pdf: 1529070 bytes, checksum: c56d5fa5c704e63a65dc06b2c95fb45d (MD5) / Rejected by Monique Sasaki (sayumi_sasaki@hotmail.com), reason: Solicitamos que realize uma nova submissão seguindo as orientações abaixo:
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Caso opte pela disponibilização do texto completo apenas 6 meses após a defesa selecione no campo “Versão a ser disponibilizada online imediatamente” a opção “Texto parcial”. Esta opção é utilizada caso você tenha planos de publicar seu trabalho em periódicos científicos ou em formato de livro, por exemplo e fará com que apenas as páginas pré-textuais, introdução, considerações e referências sejam disponibilizadas.
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Por favor, corrija esta informação realizando uma nova submissão.
Agradecemos a compreensão. on 2017-09-28T12:44:18Z (GMT) / Submitted by ANA REBECA CASTRO LIMA null (anarebecalima@hotmail.com) on 2017-09-30T14:34:04Z
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Previous issue date: 2017-08-07 / Conselho Nacional de Desenvolvimento Científico e Tecnológico (CNPq) / Objetivou-se com o presente estudo determinar a influência da temperatura ambiente sobre o metabolismo basal e a partição de energia em cabras Saanen e Anglo-Nubiana. Dois experimentos foram conduzidos utilizando-se seis cabras da raça Saanen e seis cabras da raça Anglo-Nubiana, em mantença, a partir da técnica da calorimetria indireta de circuito aberto, com máscaras faciais. No experimento 1, após um período de alimentação de 3 dias, os animais foram submetidos a jejum e a medição das trocas gasosas foi realizada durante 30 min a 0, 12, 20, 36, 44, 60 e 68 horas após jejum. A produção de metano foi igual a zero após 31 horas de jejum para cabras Saanen e 40 horas para as Anglo-Nubiana. Os resultados sugerem que o período ideal para medir a produção de calor em jejum (PCJ) deve ser entre 40 horas e 60 horas de jejum para cabras em mantença. No experimento 2, as cabras foram submetidas a três diferentes temperaturas: 10 ºC ± 0,23; 20 ºC ±0,41 e 35 ºC ±1,05. Após um período de alimentação de 4 dias, os animais foram submetidos a jejum por 60 horas e a medição da troca gasosa foi realizada a partir da metodologia da calorimetria indireta utilizando as máscaras faciais durante 30 min em cada animal aleatoriamente. Para ambas as raças, houve uma diminuição linear na ingestão de matéria seca (MS) e matéria orgânica (MO; P<0,10) a medida que a temperatura aumentou de 10 para 35ºC. A digestibilidade aparente da MS, da MO, da proteína bruta e da fibra em detergente neutro apresentaram comportamento quadrático (P < 0,10), com menores valores na temperatura de 20ºC. Aos 35ºC, a digestibilidade da proteína bruta das cabras Anglo-Nubiana foi maior que a das cabras Saanen. A frequência respiratória (FR) e volume respiratório aumentaram em taxas crescentes com o aumento da temperatura ambiente. Aos 35ºC, tanto a FR quanto o volume respiratório das cabras Saanen foram maiores que o das cabras Anglo-Nubiana. A metabolizabilidade e a energia metabolizável da dieta das cabras Saanen, aos 35ºC, foram menores que as das cabras Anglo-Nubiana. Em ambas as raças, para cada 1ºC de variação abaixo de 20ºC houve um aumento na produção de calor (PC) na ordem de 6,7 kJ/ kg0,75 PV, enquanto que para cada 1ºC de variação acima de 20ºC houve um aumento na PC na ordem de 7,9 kJ/ kg0,75 PV. Por outro lado, para PCJ indicou que para cada 1ºC de variação abaixo de 20ºC houve um decréscimo na PCJ na ordem de 5,4 kJ/ kg0,75 PV, enquanto que para cada 1ºC de variação acima de 20ºC houve um decréscimo na ordem de 8,7 kJ/ kg075 PV, em temperatura ambiente entre 10 e 35ºC. As cabras da raça Saanen e Anglo-Nubiana são capazes de manter a homeostasia em ambientes entre 10 e 35ºC. Por outro lado, o aumento da temperatura ambiental induz a um menor consumo, tendendo a balanços energéticos negativos. Acima de 20ºC, as cabras tendem a diminuir a produção de calor em jejum, como uma tentativa de conservação de energia em ambientes quentes. / The aim of this study was to determine the influence of the ambient temperature on the basal metabolism and the energy partition in Saanen and Anglo-Nubian goats. Two experiments were carried out using six Saanen goats and six Anglo-Nubian goats, in maintenance, using the indirect calorimetry technique with open-circuit facemask respirometry. In experiment 1, after a three-day feed period, the animals were fasted and gas exchange measurements were performed for 30 min at 0, 12, 20, 36, 44, 60 and 68 hours after fasting. Methane production approached zero after 31 hours of fasting for Saanen goats and 40 hours for Anglo-Nubian goats. The results suggest that the period for measuring fasting heat production (FHP) should be between 40 hours and 60 hours of fasting for maintenance goats. In experiment 2, goats were submitted to three different temperatures: 10 ºC ± 0.23, 20 ºC ± 0.41 and at 35 ºC ± 1.05. After a feeding period of four days, goats were fasted for 60 hours and gas exchange measurement was performed for 30 min in each animal randomly. For both breeds, dry matter (DM) and organic matter intake (MO; P <0.10) decrease linearly as the temperature increased from 10 to 35ºC. The apparent digestibility of DM, OM, crude protein and neutral detergent fiber presented quadratic behavior (P <0.10), with the lowest values at 20ºC. At 35ºC, the crude protein digestibility of Anglo-Nubian goats was higher than that of Saanen goats. Respiratory rate (RR) and respiratory volume increased with increasing ambient temperature. At 35ºC, both RR and respiratory volume of Saanen goats were higher than that of Anglo-Nubian goats. The diet metabolizability and metabolizable energy of Saanen goats, at 35ºC, were lower than those of the Anglo-Nubian goats. In both breeds, for each 1ºC of variation below 20ºC there was an increase in HP of 6.7 kJ/kg0.75 BW, whereas for each 1ºC of variation above 20ºC there was an increase in HP of 7.9 kJ/kg0.75 BW. On the other hand, FHP indicated that for each 1ºC of variation below 20ºC there was a decrease in FHP of 5.4 kJ/kg0.75 BW, while for each 1ºC of variation above 20ºC there was a decrease of 8.7 kJ/kg0.75 BW, between 10 and 35 °C. Saanen and Anglo-Nubian goats are able to maintain homeostasis in environments between 10 and 35ºC. On the other hand, the increase in ambient temperature leads to lower consumption, tending to negative energy balances. Above 20°C, goats tend to decrease fasting heat production, as an attempt to conserve energy in hot environments. / CNPq: 157525/2014-7
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Efeito da suplementação com leucina sobre a resposta atrófica da musculatura esquelética induzida pelo uso de dexametasona / Effects of leucine supplementation on skeletal muscle atrophy dexamethasone-inducedZanchi, Nelo Eidy 06 April 2011 (has links)
A dexametasona (DEXA) é um potente agente imunossupressor e antiinflamatório, mas apresenta importantes efeitos colaterais, tais como a atrofia muscular e a resistência à ação da insulina nos músculos esqueléticos. Neste contexto, a suplementação com leucina poderia representar uma estratégia nutricional terapêutica capaz de limitar os efeitos colaterais do tratamento com DEXA. Neste estudo, foram investigados os efeitos da suplementação com leucina em baixas e altas doses sobre a massa muscular, força muscular, assim como vários marcadores metabólicos que estão sob controle da insulina em ratos com restrição calórica e em ratos tratados com DEXA. Como a resposta da suplementação com leucina pode também estar ligada à forma de administração desse aminoácido, realizamos experimentos com leucina administradas via gavagem (bolus) versus leucina diluída no bebedouro dos animais. A suplementação com leucina demonstrou preservar a massa muscular, a força muscular voluntária média e a homeostasia da glicose em animais sob restrição calórica, mas este efeito foi observado apenas com a leucina suplementada em baixas concentrações/doses. Este efeito da leucina sobre a massa muscular esteve associado com a expressão de genes envolvidos no remodelamento da musculatura esquelética. Quanto ao efeito da leucina sobre a homeostasia da glicose, um efeito benéfico do aminoácido foi observado com a suplementação em baixas doses, o qual foi evidenciado pelos dados metabólicos avaliados. No entanto, sob tratamento com DEXA, a suplementação com leucina agravou o estado \"diabetogênico\" dos animais. Por último, a via de administração da leucina influenciou significativamente a resposta a este aminoácido, onde a suplementação via gavagem mostrou-se menos prejudicial do que a suplementação com leucina diluída nos bebedouros, ao menos em relação ao aspecto diabetogênico causado pelo tratamento concomitante com DEXA / Dexamethasone (DEXA) is a potent immunosupressor and anti-inflammatory agent but presents side effects such as muscle atrophy and insulin resistance in skeletal muscles. In this context, leucine supplementation may represent a way to limit the DEXA side effects. In this study, we investigated the effects of a low and a high dose of leucine on muscle mass, on muscle strength as well as on several metabolic markers that are under insulin control in energy-restricted and DEXA-treated rats. Since leucine response may also be linked to the way of administration of this amino acid, we performed experiments with leucine given in a gavage versus leucine given in drinking water way. Leucine supplementation was found to spare muscle mass, voluntary medium strength and glucose homeostasis in energy restricted animals but the effect was observed only with the low dose/concentration of leucine. The leucine effect on muscle mass was associated with expression of genes involved in muscle remodeling. However, under DEXA treatment, leucine supplementation was found to aggravate the diabetogenic state. Lastly, the route of leucine administration was found to significantly influence this variable to this amino acid, where leucine supplemented via gavage demonstrated to be less deleterious than supplemented diluted in the water drink, concomitantly with DEXA treatment
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Efeito da suplementação com leucina sobre a resposta atrófica da musculatura esquelética induzida pelo uso de dexametasona / Effects of leucine supplementation on skeletal muscle atrophy dexamethasone-inducedNelo Eidy Zanchi 06 April 2011 (has links)
A dexametasona (DEXA) é um potente agente imunossupressor e antiinflamatório, mas apresenta importantes efeitos colaterais, tais como a atrofia muscular e a resistência à ação da insulina nos músculos esqueléticos. Neste contexto, a suplementação com leucina poderia representar uma estratégia nutricional terapêutica capaz de limitar os efeitos colaterais do tratamento com DEXA. Neste estudo, foram investigados os efeitos da suplementação com leucina em baixas e altas doses sobre a massa muscular, força muscular, assim como vários marcadores metabólicos que estão sob controle da insulina em ratos com restrição calórica e em ratos tratados com DEXA. Como a resposta da suplementação com leucina pode também estar ligada à forma de administração desse aminoácido, realizamos experimentos com leucina administradas via gavagem (bolus) versus leucina diluída no bebedouro dos animais. A suplementação com leucina demonstrou preservar a massa muscular, a força muscular voluntária média e a homeostasia da glicose em animais sob restrição calórica, mas este efeito foi observado apenas com a leucina suplementada em baixas concentrações/doses. Este efeito da leucina sobre a massa muscular esteve associado com a expressão de genes envolvidos no remodelamento da musculatura esquelética. Quanto ao efeito da leucina sobre a homeostasia da glicose, um efeito benéfico do aminoácido foi observado com a suplementação em baixas doses, o qual foi evidenciado pelos dados metabólicos avaliados. No entanto, sob tratamento com DEXA, a suplementação com leucina agravou o estado \"diabetogênico\" dos animais. Por último, a via de administração da leucina influenciou significativamente a resposta a este aminoácido, onde a suplementação via gavagem mostrou-se menos prejudicial do que a suplementação com leucina diluída nos bebedouros, ao menos em relação ao aspecto diabetogênico causado pelo tratamento concomitante com DEXA / Dexamethasone (DEXA) is a potent immunosupressor and anti-inflammatory agent but presents side effects such as muscle atrophy and insulin resistance in skeletal muscles. In this context, leucine supplementation may represent a way to limit the DEXA side effects. In this study, we investigated the effects of a low and a high dose of leucine on muscle mass, on muscle strength as well as on several metabolic markers that are under insulin control in energy-restricted and DEXA-treated rats. Since leucine response may also be linked to the way of administration of this amino acid, we performed experiments with leucine given in a gavage versus leucine given in drinking water way. Leucine supplementation was found to spare muscle mass, voluntary medium strength and glucose homeostasis in energy restricted animals but the effect was observed only with the low dose/concentration of leucine. The leucine effect on muscle mass was associated with expression of genes involved in muscle remodeling. However, under DEXA treatment, leucine supplementation was found to aggravate the diabetogenic state. Lastly, the route of leucine administration was found to significantly influence this variable to this amino acid, where leucine supplemented via gavage demonstrated to be less deleterious than supplemented diluted in the water drink, concomitantly with DEXA treatment
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